TGFβ1及其受体在大鼠整胚及胎肾发育过程中的表达

目的观察TGFβ1及TβRI、TβRII在大鼠整胚及胎肾发育中的表达,探讨它们与大鼠整胚及胎肾发育间的相互关系和作用机制。方法半定量RT-PCR分析三种因子在13~17 d全胚中的变化情况;免疫组化法观察三种因子在15~17d胎肾中的表达及该组织发育结构特点。结果半定量RT-PCR示,3种因子在发育13~15 d表达呈递增趋势,16~17 d出现下降。免疫组化示,TGFβ1主要位于肾深部内管状结构的上皮细胞,TβRI、TβRII位于肾内管状结构及其周围的间充质组织细胞。结论TGFβ1及TβRI、TβRII在大鼠整胚及胎肾发育过程中起着重要的调控作用,尤其是对组织器官形态的发生。     

转化生长因子β1及其受体在横纹肌肉瘤中的表达

目的 :探讨横纹肌肉瘤 (RMS)中转化生长因子 β1(TGFβ1)及其Ⅰ、Ⅱ型受体 (TGFβRⅠ ,TGFβRⅡ )表达及其意义。 方法 :应用免疫组化技术 (S P法 )检测 4 9例经电镜或 (和 )免疫组化证实的横纹肌肉瘤及 2 0例正常横纹肌组织中的TGFβ1、TGFβRⅠ和TGFβRⅡ表达水平 ,并结合临床病理资料进行分析。 结果 :TGFβ1在RMS中的高表达率高于正常横纹肌组织 (P<0 0 1) ;TGFβRⅠ、TGFβRⅡ在 98% (48/ 4 9)的RMS及所有正常横纹肌组织中均有表达 ,两组无差异。TGFβ1表达与肌球蛋白重链呈负相关 (r=- 0 6 6 1,P <0 0 1)。TGFβ1在低分化组高表达率为 79% ,高分化组为 38%。 结论 :横纹肌肉瘤中存在TGFβ1自分泌和旁分泌现象 ,且肿瘤细胞表达相关受体。TGFβ1的表达与肌源性分化程度有关。TGFβ1信号传导途径可能参与了横纹肌肉瘤的发展与演进     

石蜡包埋人胰腺癌组织中Smad4蛋白和转化生长因子β_1及其Ⅱ型受体的表达

目的　探讨转化生长因子 (TGF) β通路中Smad4蛋白、TGFβ1和转化生长因子 βⅡ型受体 (TβRⅡ )的关系及它们在胰腺癌中的可能作用机制。 方法　用EnVision免疫组织化学技术检测5 6份石蜡包埋人胰腺癌标本Smad4蛋白、TGFβ1和TβRⅡ蛋白表达的情况。 结果　 5 6份胰腺癌组织Smad4、TGFβ1和TβRⅡ阳性率分别为 5 8 93%(33)、6 6 0 7%(37)和 6 0 71%(34 ) ,对应正常胰腺组织阳性率分别为 89 2 9%(5 0 )、2 5 0 0 %(14)和 2 5 0 0 %(14)。TGFβ1的表达与临床分期、肿瘤的有无转移相关 (P <0 0 5 )。TGFβ1与TβRⅡ之间也有相关关系 (P <0 0 5 )。 结论　胰腺癌组织中Smad4表达降低 ,TGFβ1与TβRⅡ则呈过表达。TGFβ1与TβRⅡ对胰腺癌的发生可能有协同作用。Smad4在TGF β诱导基因表达调控和随后的生长抑制中是关键的转录因子 ,但TGFβ有时也可能以与Smad4无关的形式起作用。     

转化生长因子β1及其2型受体在实验性大鼠升主动脉瘤中的表达

目的 研究转化生长因子β1(TGFβ1)及其2型受体(TGFβRⅡ)在实验性大鼠升主动脉瘤中的表达及其意义. 方法 缩窄幼年Wistar大鼠升主动脉制作升主动脉瘤模型,4个月后处死动物,用免疫组织化学和Western blotting方法 检测动脉瘤壁TGFβ1和TGFβRⅡ的表达. 结果 免疫组织化学显示,TGFβ1表达于动脉瘤和对照组动脉全层;TGFβRⅡ大量表达于动脉瘤增生的内膜和中膜平滑肌层,而对照组表达很弱.Western blotting显示,动脉瘤组织中TGFβ1和TGFβRⅡ表达均强于对照组. 结论 TGFβ1和TGFβRⅡ在动脉瘤中表达强于对照组,TGFβ信号通路可能在动脉瘤形成过程中起重要作用.     

转化生长因子βⅡ型受体在小鼠肾发育中的表达

目的:观察转化生长因子βⅡ型受体(TβRⅡ)在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨转化生长因子β(TGF-β)与肾发育的关系。方法:采用免疫组织化学法、体视学和免疫印迹法测定不同胚龄(E)12、14、16和18d及生后日龄(P)1、3、7、14、21、28和42d小鼠肾内TβRⅡ的表达及其含量变化。结果:免疫组织化学结果显示TβRⅡ在各期肾小体、肾小管及集合管内均有表达,但在各期近端小管强烈表达,各期集合管表达较强,而各期肾小体、远端小管内表达较弱。体视学测量结果显示TβRⅡ在各期肾小体、肾小管及集合管的表达量均逐渐增加。免疫印迹结果显示TGF-βRⅡ随着肾的发育其表达量逐渐增加。结论:TGF-β可能对肾各结构的发育以及成熟肾各结构的维持起重要作用,尤其在近端小管的发育方面作用更为显著。     

TGF-β1及TGF βR Ⅱ mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的检测胎盘组织中TGF-β1(transform ing growth factor-beta1,TGF-β1)及其受体TGFβRⅡ(TGF-beta receptorⅡ)的表达,探求TGF-β1在子痫前期发病中的作用。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对10例正常妊娠组和26例子痫前期组(包括12例轻度和14例重度)胎盘组织中TGF-β1、TGFβRⅡmRNA的表达水平进行检测,并通过紫外凝胶图像分析进行定量分析。结果重度子痫前期组TGF-β1和TGFβRⅡmRNA的表达量均升高,与轻度子痫前期组及正常妊娠组相比有明显意义(P<0.05)。结论TGF-β1、TGFβRⅡ在转录水平就已经上调,它们的异常表达它们可能与子痫前期的发病有着重大的关系。     

子痫前期患者胎盘组织TGF-β1、TGFβRⅠ和TGFβRⅡ的表达及其意义

目的检测胎盘组织中TGF-β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)及其受体(TGF-beta receptor,typeⅠandtypeⅡ,TGFβRⅠ,TGFβRⅡ)的表达,评估TGF-β1及其受体在子痫前期发病中的作用。方法采用SP免疫组化法检测正常妊娠组和轻、重度子痫前期组胎盘组织中TGF-β1、TGFβRⅠ和TGFβRⅡ的分布与定位,并通过高清晰度彩色病理图像分析系统对其进行定量分析。结果重度子痫前期组TGF-β1和TGFβRII的平均光密度较正常妊娠组显著增加(P<0·01),TGFβRI的平均光密度也较正常妊娠组增加(P<0·05)。结论TGF-β1、TGFβRI和TGFβRII在滋养细胞的浸润过程中发挥重要作用,它们可能与子痫前期的发病有着重大的关系。     

小鼠胚胎心脏发育过程中转化生长因子的表达特点

目的：探讨不同转化生长因子(TGF)β异构体在小鼠胚胎心脏的时空表达规律和心脏发育关系。方法：小鼠胚胎连续切片,免疫组化PAP法染色。结果：TGFβ1和TGFβ3的表达开始于胚胎发育第9d,第12d达高峰,第13d后,表达下降,尤以室间隔和左心室致密心肌下降明显。直到第10～11d,各部才出现较强的TGFβ2染色,第12d后,TGFβ2染色明显下降。心肌TGFβ2和TGFβ3表达增强的同时,流出道嵴表面和半月瓣原基表面内皮细胞变为立方形,显较强的TGFβ2和TGFβ3染色。结论：TGF／3类生长因子集中表达于小鼠胚胎心脏发育的9～13d,3种TGFβ异构体可能以旁分泌和内分泌的形式在心肌分化、外形演变和内部分隔过程中发挥重要调节作用。     

肝纤维化大鼠转化生长因子β1／Smad蛋白的动态表达及意义

目的探讨转化生长因子TGF—β1／Smad信号通路在实验性肝纤维化发生中的作用。方法50只健康雄性SD大鼠分为2组：正常组和模型组,模型组大鼠利用40％CCl4油剂诱导形成肝纤维化模型,于6周及9周观测肝标本的病理,免疫组化法检测肝组织TGF—β1／Smad蛋白表达。结果①肝组织病理：与正常组比较,模型组大鼠肝组织都有不同程度的炎症和纤维化产生。模型组纤维化程度较正常对照组明显,差异有统计学意义（P〈0．05）;②TGF—β1／Smad基因蛋白：免疫组织化学检测显示,与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏中TGF—β1、转化生长因子βI型受体（TβR—I）、Smad2、3、Smad,蛋白表达均显著增强（P〈0．01）,模型组大鼠肝脏TGF—β1、TβR-I、Smad。和Smad,之间存在正相关关系（P〈0．05或0．01）;模型组大鼠肝脏纤维化分级与TGF—β1、TβR—I、Smad2/3和Smad,之间存在正相关关系（P〈0．05或0．01）。结论肝组织TGF—β1／Smad蛋白表达水平与肝纤维化程度相关,TGF-β1／Smad信号的增强可能促进了肝纤维化的进展。     

石蜡包埋人胰腺癌组织中Smad4蛋白和转化生长因子β1及其Ⅱ型受体的表达

目的：探讨转化生长因子（TGF）－β通路中Smad4蛋白,TGFβ1和转化生长因子βⅡ型受体（TβRⅡ）的关系及它们在胰腺癌中的可能作用机制。方法：用EnVision免疫组织化学技术检测56份石蜡包埋人胰腺癌标本Smad4蛋白,TGFβ1和TβRⅡ蛋白表达的情况。结果：56份胰腺癌组织Smad4,TGFβ1和TβRII阳性率分别为58．93％（33）,66．07％（37）和60．71（34）,对应正常胰腺组织阳性率分别为89．29％（50）,25．00％（14）和25．00％（14）,TGFβ1的表达与临床分期,肿瘤的有无转移相关（P＜0．05）,TGFβ1和TβRII之间也有相关关系（P＜0．05）,结论：胰腺癌组织中Smad4表达降低,TGFβ1与TβRII则呈过表达,TGFβ1和TβRII对胰腺癌的发生可能有协同作用。Smad在TGF－β诱导基因表达调控和随后的生长抑制中是关键的转录因子,但TGFβ有时也可能以与Smad4无关的形式起作用。     

转化生长因子β1及其受体与大肠癌

转化生长因子 β1(TGF β1)是人体多种组织细胞的生长调控因子 ,其对大多数正常细胞及上皮性肿瘤细胞具有生长抑制作用。转化生长因子 β1Ⅱ 型受体 (TβRⅡ)的表达减少是机体细胞逃逸TGF β1负调控作用从而发生癌变的一个重要改变。TGF β1及其受体的改变与大肠癌关系密切。     

结缔组织生长因子在大鼠肺纤维化模型中的蛋白表达

目的 :了解结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor ,CT GF)在大鼠肺纤维化模型中的表达状况及其与肺纤维化之间的关系。方法 :42只Wistar大鼠随机分为二组。模型组 (M组 ) :气管内灌注博莱霉素 ,对照组 (C组 ) :气管内灌注生理盐水。于灌注后第 7、14、2 8天每组分别处死大鼠 7只。制备大鼠肺组织切片。用免疫组化SABC法分别检测二组大鼠肺组织中CTGF及转化生长因子 β1 (TGF β1 )、纤维连接蛋白 (FN )在肺内的表达水平。结果 :M组CTGF及TGF β1 、FN在肺内的表达水平在各时间点均显著高于C组 (P <0 .0 5 )。结论 :CTGF作为TGFβ1 的下游因子 ,可能通过促进细胞外基质(ECM)如FN和胶原蛋白等合成而在博莱霉素诱导的肺纤维化形成过程中起重要作用     

卵泡刺激素调节大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3蛋白的表达及磷酸化

目的:研究卵泡刺激素(FSH)对大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3蛋白的调节。方法:21dSD雌鼠,腹腔注射孕马血清20IU,对颗粒细胞进行原代培养,用转化生长因子β受体Ⅱ(TβRⅡ)抗体中和卵巢颗粒细胞表面TβRⅡ,以阻断TGFβ/Smads信号通路,再以不同浓度的FSH对细胞进行不同时间的处理,免疫印迹法检测TGFβ信号通路中TβRⅡ、Smad2/Smad3及P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达。结果:TβRⅡ、Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量与FSH的作用呈时间依赖性显著增强;TGFβ/Smads信号通路被阻断后再用FSH处理,Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量没有明显变化;细胞表面TβRⅡ恢复后,Smad2/Smad3、P-Smad2/P-Smad3蛋白的表达量有少量增加。结论:FSH刺激大鼠卵巢颗粒细胞中Smad2/Smad3的表达和磷酸化;FSH对Smad2/Smad3的激活作用在相当程度上依赖于TβRⅡ。     

泡球蚴感染对Balb/c小鼠肝脏TGF-β1及其信号蛋白表达的影响

目的观察泡球蚴(Em)感染对Balb/c小鼠肝脏转化生长因子β1(TGF-β1)及其受体TβRⅠ/Ⅱ和信号蛋白Smad2/3表达的影响。方法 Balb/c小鼠随机分为实验组和对照组,泡状棘球蚴原头蚴混悬液肉眼直视注射肝脏诱导小鼠肝泡球蚴感染模型,对照组以相同方法注射生理盐水。于感染第60天处死小鼠,取肝脏组织。用RT-PCR检测肝组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达;Western blot和免疫组织化学技术检测肝组织TGF-β1、TβRⅠ(TGFβⅠ型受体)、TβRⅡ(TGFβⅡ型受体)、Smad2/3在肝内的表达及定位;HE和Masson染色,光镜下观察肝组织病理改变和肝组织纤维化程度。结果与对照组小鼠比较,Em感染小鼠肝组织内TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达升高。Em感染后TGF-β1、Smad2/3蛋白表达增加。TGF-β1、TβRⅠ与Smad2/3阳性反应主要位于肝细胞浆,TβRⅡ主要在肝细胞膜表达,上述指标在两组间表达具有显著性差异。结论在Em感染的肝组织中TGF-β1、TβR及Smad2/3蛋白表达均增高。TGF-β1/Smads信号蛋白参与了Em感染致肝纤维化及肝损伤过程。Em感染可能通过TGF-β1/Smads通路介导宿主与寄生虫间的共生。     

转化生长因子β受体在小鼠胚胎心流出道的表达

目的 探讨转化生长因子受体TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ在小鼠胚胎心流出道的时空表达规律以及与流出道发育的关系。 方法 9～14d小鼠胚胎连续切片,免疫组织化学PAP法染色。 结果 TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ在流出道心肌的表达开始于胚胎发育10d,11d延伸至流出道和心包腔背侧壁脏壁中胚层上皮的反折处,12d达高峰,同时于流出道心内膜垫可见TGF-βRⅡ阳性间充质细胞,13d后,两者表达均迅速减弱,14d表达降至最低。 结论 TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ在流出道表达集中于胚胎发育10～14d,TGF-βs信号系统可能参与调节心肌细胞的增殖、流出道的外形重建和内部分隔,并促进第二生心区间充质细胞分化为流出道远端平滑肌细胞。     

CD147、基质金属蛋白酶和转化生长因子β1在乳腺癌中的表达与肿瘤转移和预后及其相互间的关系

目的 探讨CD147和基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9与转化生长因子(TGF)β1及其Ⅰ型受体(TGFβR I)在乳腺癌组织中的表达与肿瘤转移和预后及其相互间的关系.方法 建立组织芯片平台,应用免疫组织化学SP法检测160例乳腺癌组织CD147、MMP-2、MMP-9、TGFβ1和TGFβRI蛋白的表达情况,并进行了8～64个月随访.结果 160例乳腺癌中CD147、MMP-2、MMP-9、TGFβ1和TGFβRI阳性率分别为87.5%(140例)、96.9%(155例)、95.0%(152例)、73.7%(118例)和60.6%(97例);CD147的表达与乳腺癌腋淋巴结受累、TNM分期和HER2过表达均呈正相关(P<0.01,P<0.05和P<0.01),与孕激素受体表达呈负相关(P<0.05);CD147蛋白阳性患者(55.9个月)无复发生存期显著低于阴性患者(46.1个月,P=0.023);CD147与MMP-2、MMP-9蛋白的表达均呈显著正相关(r=0.728和r=0.399,均P<0.01);CD147蛋白表达与TGFβ1和TGFβRⅠ表达均呈显著正相关(r=0.223,P<0.01和r=0.191,P<0.05).结论 乳腺癌组织中CD147表达状况与肿瘤侵袭转移和患者预后有密切关系;CD147的表达与MMP-2、MMP-9、TGFβⅠ和TGFβR Ⅰ表达状况关系密切.     

肺纤维化大鼠中基质金属蛋白酶-2的表达

目的：研究基质金属蛋白酶－2（MMP2）在肺纤维化中的作用。方法：（1）用免疫组织化学方法（ABC法）观察博莱霉素所诱导的实验性大鼠纤维化肺组织内MMP2表达的动态变化;（2）用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）观察博莱霉素所诱导的肺纤维化不同时期间质成纤维细胞MMP2 mRNA的动态变化。（3）用Northern印迹杂交和免疫细胞化学方法观察转化生长因子β1（TGFβ1）对体外培养的大鼠肺成纤维细胞MMP2mRNA和蛋白表达的影响。结果：（1）诱导纤维化组1－7d,病灶内浸润的单核巨噬细胞及肺泡间质细胞数量增多,MMP2免疫组织化学染色阳性,14d以后,阳性单核巨噬细胞减少,用博莱霉素28d时,阳性间质细胞亦减少。（2）博莱霉素作用后1d,肺成纤维细胞MMP2基因转录即明显增强,为对照组的2．05倍,28d时下降。（3）TGFβ1作用后,大鼠肺成纤维细胞MMP2mRNA及其蛋白表达增强。结论：肺组织内MMP2的过度表达,可能是肺纤维化启动的重要原因。     

转化生长因子β及其受体在小鼠精子发生过程中的表达

目的观察转化生长因子β（TGFβs）及其受体（TGFβ-R）在小鼠睾丸中的表达,证实TGFβs及其受体在小鼠精子发生过程中的定位和作用机理.方法免疫组织化学染色结合显微图像定量分析和免疫荧光双重染色.结果免疫组织化学显示：TGFβ1和TGFβ2主要表达于生精小管内Ⅵ-Ⅷ期圆形精子细胞以及长形精子细胞和变态精子细胞的胞质,位于睾丸间质中的Leydig细胞胞质呈弱表达;TGFβ3仅表达于Leydig细胞,各级生精细胞未见表达.晚期精母细胞（Ⅷ期）至第Ⅹ期长形精子细胞均表达TGFβ-RⅠ;TGFβ-RⅡ仅表达于第Ⅺ期后的变态精子细胞期;而TGFβ-RⅢ则主要表达于Ⅶ-Ⅷ期圆形精子细胞和变态精子细胞胞质.免疫荧光双重染色显示：TGFβ1和TGFβ2与TGFβ-RⅢ在生精上皮最早共表达于晚期圆形精子细胞顶体极.结论 TGFβs及其受体在小鼠精子发生过程中的表达具有细胞和周期特异性,提示其在精子发生中具有重要意义.     

转化生长因子β及其信号转导分子Smad4在肾小球硬化中的作用研究

目的：探讨转化生长因子β（TGF-β1）及其信号转导分子Smad4在肾小球肾炎中的表达及其意义。 方法： 以20例正常肾组织为对照组,对38例各种不同组织学类型肾小球肾炎的肾活检标本,分别行免疫组化方法观察TGF-β1、Smad4、胶原Ⅰ（collagen type Ⅰ）在肾小球中的染色强度,并对其检测结果作图像分析处理;以体外培养的人系膜细胞为对象，观察TGFβ1对系膜细胞表达Smad4、胶原Ⅰ的影响，Smad4、胶原Ⅰ的基因表达用RT-PCR检测，蛋白表达用Western blotting检测。 结果： 所有增生、硬化病理类型肾炎中病变肾小球TGFβ1、Smad4、胶原Ⅰ蛋白表达均高于对照组（P<0.05）,且TGFβ1、Smad4两者在肾小球中的表达与胶原Ⅰ在肾小球中的堆积呈多重相关（P<0.05）；外源性TGFβ1刺激人肾系膜细胞后，细胞的Smad4基因表达和蛋白表达增高（P<0.05）；胶原Ⅰ的基因表达和蛋白表达也相应增高（P<0.05）。 结论： TGFβ1及其信号转导分子Smad4可能参与病变肾小球ECM的过量堆积，在肾小球硬化过程中起重要作用。     

转化生长因子βⅠ型受体对组织纤维化形成及发展的影响

目的探讨转化生长因子βⅠ型受体(TGFβR-Ⅰ)对组织纤维化的形成及发展的影响。方法采用RNA干扰技术阻断人成纤维细胞系HFL-Ⅰ细胞的TGFβR-Ⅰ表达,Western blot法检测RNA干扰前后TGFβR-Ⅰ的表达水平,MTT法分析干扰前后的细胞生长状态,采用动物模型结合HE染色观察RNA干扰阻断TGFβR-Ⅰ表达前后的中毒性肝纤维化模型大鼠的肝脏病理学变化。结果特异性TGFβR-Ⅰ干扰RNA能有效抑制TGFβR-Ⅰ蛋白质合成和成纤维细胞株HFL-Ⅰ细胞的生长,正常鼠肝组织处于纤维化S0期,中毒性肝纤维化模型鼠肝组织处于纤维化S2期,特异性TGFβR-Ⅰ干扰RNA治疗组模型鼠肝组织则呈现纤维化S1期特征。结论抑制TGFβR-Ⅰ的表达可明显减轻中毒性肝纤维化模型大鼠的肝纤维化程度,对进一步优化肝纤维化的预防和治疗策略具有重要意义。