cyclin D1基因异常表达、多态性与乳腺癌关系

对细胞周期调控机制的研究表明,细胞周期蛋白(cyclin)是细胞周期中短暂出现的基因表达产物,具有严格的顺序性,与特定的细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)结合构成复合体,使CDK活化,完成各个时相的转换,然后降解。目前认为在细胞周期的     

体外Fas介导肿瘤细胞凋亡过程中cyclins/CDKs的变化规律及调节机制

目的:探讨Fas介导的细胞周期特异性细胞凋亡发生过程中,细胞周期蛋白(cyclins)和细胞周期依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinases,CDKs)的变化规律,及其可能的调节机制.方法:以急性淋巴细胞白血病Molt-4细胞株为靶细胞,建立Fas介导的细胞周期特异性凋亡模型;采用cyclin/DNA双参数流式细胞术和Western印迹法检测cyclins的表达规律;应用Western印迹法检测CDK1的Thr-161、Tyr-15位点和CDK2的Thr-160位点磷酸化水平的变化.结果:重组人Fas配体(recombinant human Fas ligand,rhFasL)诱导Molt-4细胞的凋亡定位在G1期.在发生细胞凋亡效应前,cyclin D3水平明显升高,而cyclin E水平和CDK2的Thr-160位点磷酸化水平均明显下降;发生凋亡效应后,cyclin D3水平明显下降,而cyclin E水平升高,CDK2 的Thr-160位点磷酸化水平则明显下降,CDK1的Thr-161、Tyr-15位点磷酸化水平稍有下降.Cyclin A和Cyclin B1水平在诱导细胞凋亡过程中无明显变化.Roscovitine在特定浓度(5 μmol/L)下可下调CDK2 Thr-160位点和CDK1 Thr-161位点的磷酸化水平,与rhFasL共同作用后细胞凋亡的发生率明显升高.结论:Fas介导的细胞凋亡具有细胞周期特异性,并始动于晚G1期,是G1期cyclin E/CDK2活性下降以及晚G1期检测点监督的结果;cyclin D3/CDK复合体可能是决定细胞凋亡能否发生的关键.     

抑癌基因p16与细胞周期调控

细胞周期是细胞生命活动的基本过程,细胞在周期时相的变迁中进入增殖、分化、衰老和死亡等生理状态。若细胞周期调控异常,细胞将进入病理状态,且与肿瘤的发生也密切相关。参与细胞周期调控的分子主要包括:细胞周期蛋白(cyclin),细胞周期蛋白依赖性激酶(cy-clin-dependentkinase,CDK),磷酸化酶以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白(CDKinhibitorCKI),这些调节成分组成多条调节途径,通过使Rb磷酸化或去磷酸化构成以Rb为中心的一个复杂网络[1]。CKI通过竞争性结合cyclin或CDK/cyclin复合物,导致cyclin生物活性丧失,最终表现为负调控细胞…     

周期素D、E、A在乳腺癌中的表达及其意义

细胞周期失控是细胞增殖失控而导致癌变的重要原因。细胞周期的不同时相由不同的细胞周期蛋白（cyclin）控制,周期素与周期素蛋白依赖激酶（cylin—dependent kinase,CDK）结合,并通过激活CDK活性发挥作用。其中周期素D1（cyclin D1）基因是近年提出的重要的原癌基因,在细胞周期的调控中起关键作用。我们用免疫组织化学检测cyclin D1、E、A基因在31例乳腺癌中的表达,旨在探讨细胞周期素表达对乳癌发生发展及预后的影响。     

细胞周期调控因子与癌发生的关系

近年来 ,有关细胞周期调控机制及其与恶性肿瘤发生的关系研究进展较快。细胞周期调控可分为G1期调控和非G1期调控。在G1期调控中 ,细胞周期蛋白依赖性激酶复合体cyclin CDK激活后 ,通过Rb蛋白和转录因子启动基因转录。p16、p2 1、p15等蛋白通过抑制cyclin CDK的活性而发挥作用。p5 3蛋白和mdm2蛋白协同调节细胞周期活动。其中任何一个环节的变化都可引起细胞周期失控而促使癌发生     

Cyclin/Cdks复合物相关调控分子与肿瘤关系的研究进展

细胞周期（cellcycle）是一个高度有序的运转过程，这种高度有序的运转是通过cyclin／Cdks复合物来实现的。Cyclin／Cdks的作用具有时相特异性，在细胞周期的不同阶段，其作用的cyclin／Cdks分子亦不同。Cyclin／Cdks复合物的活性由一个复杂的调控网络进行调控（图1），其中比较重要的调控机制是Cdk的磷酸化状态、Cdk抑制蛋白（CKI）的抑制作用以及cyclin的合成及降解等。细胞周期调控网络的异常与肿瘤的发生发展密切相关，cyclin、Cdks的异常表达、Cdk抑制蛋白的缺失，以及检测点（checkpoint）的异常等都将使细胞周期紊乱，细胞增殖失控，最终发生癌变。2001年的诺贝尔医学和生理学奖授予了发现cyclin和Cdk及其相关分子的科学家，     

p27蛋白在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及意义

真核生物的细胞周期受一系列调控因子的调节与控制，其正常与否和细胞以及个体的生长、分化、衰老和癌变密切相关。参与细胞周期调控的主要分子有：细胞周期蛋白（cyclin），细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclindependentkinases，CDKs）和CDK抑制蛋白（cyclindependentkinaseinhibitors，CDKI）。其中CDKI通过与cyclin，CDK或cyclin－CDK复合物的结合，抑制CDK的活性，导致细胞周期的停滞，阻断细胞的增殖过程。p２７蛋白是Polyak等［１］于１９９４年发现的一种分子量为２７KD的热稳定蛋白质。近年来研究表明，p２７是一种非特异细…     

流式细胞术对食管癌组织中四种细胞周期调控蛋白的定量检测及意义

目的 探讨细胞周期调控蛋白cyclin E、cyclin D1、CDK4和D27在食管癌的表达及其与食管癌的分化和淋巴结转移的关系。方法 采用流式细胞术对65例食管鳞状细胞癌组织中cyclin E、cyclin D1、CDK4和p27的表达强弱进仃定量检测,结果 用荧光指数F1表示。结果 cyclin E、cyclin D1和CDK4在低分化型鳞癌的表达量显著高于分化型鳞癌(P值分别为0．0275,0．0001和0．0174);而p27在低分化型鳞癌的表达量显著低于分化型鳞癌(P=0．0042)。cyclin D1与cyolin E,cyclin D1与CDK4之间呈显著正相关;而cyclin D1与p27呈显著负相关。4种基因蛋白的表达与淋巴结转移均无相关性。结论 cyclhi E、cyclin D1、CDK4和p27的表达与食管癌的分化密切相关;正负性细胞周期调控蚩白表达的失衡是导致癌变的重要原因之一。     

妊娠滋养细胞肿瘤中cyclin D1和CDK4的表达及意义

目的：探讨细胞周期素D1(cyclindepemlent kinas，cyclin D1)和细胞周期依赖激酶4(cyclin-depemlent kINASE 4，CDK4)在妊娠滋养细胞肿瘤发生、发展中的作用。方法：采用免疫组化SP法检测cyclin D1、CDK4在妊娠滋养细胞疾病中的表达。结果：cyclin D1在葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌组织中的阳性表达率分别为20％、72．22％和88．89％，CKD4的阳性表达率分别为16．67％、61．11％和72．22％，妊娠滋养细胞肿瘤组与葡萄胎比较，cyclin D1和CDK4的表达率明显增高，差异有统计学意义，P<O．01；在妊娠滋养细胞肿瘤中，cyclin D1和CDK4的表达成正相关，r=5．675，P=O．017；妊娠滋养细胞肿瘤Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期组织中，cyclin D1的阳性表达率分别为70％和93．75％，CDK4的阳性表达率分别为50％和87．5％，随肿瘤临床期别的增加，cyclin D1和CDK4的表达率逐渐升高。结论：cyclin D1和CDK4在妊娠滋养细胞疾病中过度表达，并与其发生和发展有关。     

中药影响乳腺癌细胞周期的研究进展

0引言早在20世纪90年代,已有学者提出肿瘤是一种细胞周期疾病,细胞周期调节紊乱是肿瘤发生的重要环节[1].乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,乳腺癌的发生发展与细胞周期调控因子表达异常密切相关[2].细胞的生命开始于细胞周期,细胞周期的正常运行依赖于精细的调控机制,细胞周期蛋白(cycline)、细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin depengdent kinase,CDK)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin dependent kinase inhibitor,CKI)三者相互作用,共同参与细胞周期调控,在维持细胞有序的增殖、分裂活动中起重要作用[3,4].     

贝母素乙通过诱导G0/G1期阻滞抑制结肠癌细胞的增殖

目的：探讨贝母素乙对结肠癌HCT116细胞增殖的抑制作用及其分子机制。方法：利用不同浓度的贝母素乙处理人结肠癌细胞HCT116和正常结肠上皮细胞CCD841 CON,通过CCK-8法和结晶紫染色法检测贝母素乙对HCT116和CCD841CON细胞增殖活力的影响,流式细胞术和WB法检测贝母素乙对HCT116细胞周期及其细胞周期相关蛋白表达的影响。构建HCT116移植瘤裸鼠模型和AOM/DSS结肠癌小鼠模型,观察贝母素乙对小鼠模型肿瘤生长和OS的影响,免疫组化法和WB法检测对移植瘤或肿瘤组织中细胞周期相关蛋白CDK4、CDK6和cyclin D1表达的影响。结果：贝母素乙可显著抑制结肠癌HCT116细胞的增殖能力（P<0.01）,诱导HCT116细胞周期G0/G1期阻滞（P<0.01）,降低CDK4、CDK6和cyclin D1的蛋白表达水平（均P<0.01）。荷瘤小鼠实验结果显示,贝母素乙（0.75 mg/kg）显著抑制HCT116细胞移植瘤的生长并延长荷瘤裸鼠的OS(P<0.05或P<0.01),降低AOM/DSS模型小鼠的体质量、延长OS、减少癌变肠组织...     

妊娠滋养细胞肿瘤中cyclinD1和CDK4的表达及意义

目的 :探讨细胞周期素D1(cyclin dependentkinas ,cyclinD1)和细胞周期依赖激酶 4(cyclin dependentkinase 4,CDK4)在妊娠滋养细胞肿瘤发生、发展中的作用。方法 :采用免疫组化SP法检测cyclinD1、CDK4在妊娠滋养细胞疾病中的表达。结果 :cyclinD1在葡萄胎、侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌组织中的阳性表达率分别为 2 0 %、72 2 2 %和88 89% ,CKD4的阳性表达率分别为16 67%、61 11%和 72 2 2 % ,妊娠滋养细胞肿瘤组与葡萄胎比较 ,cyclinD1和CDK4的表达率明显增高 ,差异有统计学意义 ,P <0 0 1;在妊娠滋养细胞肿瘤中 ,cyclinD1和CDK4的表达成正相关 ,r =5 675 ,P =0 0 17;妊娠滋养细胞肿瘤Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期组织中 ,cy clinD1的阳性表达率分别为 70 %和 93 75 % ,CDK4的阳性表达率分别为 5 0 %和 87 5 % ,随肿瘤临床期别的增加 ,cyclinD1和CDK4的表达率逐渐升高。结论 :cyclinD1和CDK4在妊娠滋养细胞疾病中过度表达 ,并与其发生和发展有关     

双光源流式细胞术三参数细胞周期分析

目的建立双光源流式细胞仪三参数细胞周期分析方法,同时检测两种细胞周期素和细胞DNA含量,分析非时相性的细胞周期素的表达。方法运用免疫荧光标记技术对两种cyclin标记,一种用直接法(FITC标记),另一种用间接法(RPE-Cy5标记的二抗),同时进行细胞核染色(荧光素DAPI),双光源二点激发,三波段定量检测,数据运用cellquest软件分析。mAMSA和mimosine诱导非时相性的细胞周期素表达。结果两种cyclin可同时检测,互不干扰,而且不需要荧光补偿,与单标相比无明显差别,cyclin及:DNA均可半定量分析。Cyclin A/ cyclin E/DNA分析可将对数生长期的MOLT-4细胞分为六个亚细胞群(G10、1le、G1l、S、G2、M),mimosine处理的细胞可见G1期cyclin B1表达,mAMSA处理的细胞有G2期cyclin E的异位表达。结论运用免疫荧光技术在流式细胞仪上三参数细胞周期分析可以快速定量检测两种cyclin和DNA含量,更精确地对细胞增殖进行分析。     

细胞周期调控基因与妇科恶性肿瘤

肿瘤细胞的基本特征是细胞生长失控和分化受阻.细胞生长和分化的调节与细胞周期中的诸多因素密切相关,因而出现了"癌症可能是一类细胞周期疾病"的观点[1].与细胞周期调节有关的分子有三类:细胞周期蛋白(cyclin)、细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白(cyclin-dependent kinase inhibitor,CKI),这三类分子共同构成了细胞周期的网络调控系统cyxlins-CDKs-CKIs,这一系统中的调节基因及蛋白的改变和肿瘤发生、发展、治疗以及预后的关系,是目前国内外肿瘤研究的热点.本文就细胞周期的调节基因在妇科恶性肿瘤中的研究进展做一简要阐述.     

Cyclin E、CDK2和p21WAF1在食管上皮癌变过程中的表达及意义

目的探讨食管上皮癌变过程中细胞周期调控因子cyclin E、CDK2和p21WAF1的表达状况及其意义.方法应用免疫组化SP法和原位杂交方法分别检测48例食管癌组织、31例非典型增生组织和17例正常食管粘膜中cyclin E、CDK2和p21WAF1蛋白及mRNA表达.应用半定量RT-PCR和Western blot检测22例新鲜食管癌及相应癌旁组织的mRNA和蛋白表达.结果从食管正常粘膜、非典型增生组织到癌组织,cyclin E和CDK2蛋白和mRNA阳性表达率逐渐上升,差异具有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).食管癌组织中cyclin E、CDK2和p21WAF1蛋白及mRNA高表达,与癌旁组织或切缘正常食管粘膜有显著性差异(P＜0.01).cyclin E、CDK2和p21WAF1基因表达显著正相关(P＜0.01或P＜0.05).结论食管上皮癌变过程中,细胞周期相关基因cyclin E和CDK2表达逐渐增强.cyclin E基因表达异常是食管癌变过程中的早期事件.p21WAF1基因在食管癌中高表达,可能与细胞周期调控的反馈机制有关.     

双光源流式细胞术三参数细胞周期分析(英文)

目的建立双光源流式细胞仪三参数细胞周期分析方法,同时检测两种细胞周期素和细胞 DNA 含量,分析非时相性的细胞周期素的表达。方法运用免疫荧光标记技术对两种 cyclin 标记,一种用直接法(FITC 标记),另一种用间接法(RPE-Cy5标记的二抗),同时进行细胞核染色(荧光素 DAPI),双光源二点激发,三波段定量检测,数据运用 cellquest 软件分析。mAMSA 和 mimosine 诱导非时相性的细胞周期素表达。结果两种 cyclin 可同时检测,互不干扰,而且不需要荧光补偿,与单标相比无明显差别,cyclin 及 DNA 均可半定量分析。Cyclin A/cyclin E/DNA 分析可将对数生长期的 MOLT-4细胞分为六个亚细胞群(G10、G1e、G11、S、G2、M),mimosine 处理的细胞可见 G1期cyclin B1表达,mAMSA 处理的细胞有 G2期 cyclin E 的异位表达。结论运用免疫荧光技术在流式细胞仪上三参数细胞周期分析可以快速定量检测两种 cyclin 和 DNA 含量,更精确地对细胞增殖进行分析。     

视黄酸依赖反义cyclin D1对HL-60细胞细胞周期素依赖性激酶的影响

目的探讨视黄酸(retinoic acid,RA)及其诱导的反义(anti-sense,AS)cyclin D1对HL-60细胞的细胞周期素激酶CDK4的影响.方法通过构建含有视黄酸反应元件(retinoic acid response element, RARE)的反义cyclin D1 RNA表达载体pCI-neo/RARE3-TK/Ascyclin D1,使反义cyclin D1的表达可受视黄酸诱导调控.以脂质体转染HL-60白血病细胞后,运用MTT比色法检测细胞增殖功能、NBT还原实验观测细胞分化状况,RT-PCR以及western-blot等方法观测视黄酸处理后CDK4的mRNA和蛋白表达水平的改变.结果 RA处理后,细胞生长显著减慢,分化能力明显增强,CDK4 mRNA和蛋白表达水平均有所降低,其中,以反义cyclin D1转染细胞经RA处理后变化更为显著.结论 RA及其诱导的反义cyclin D1对HL-60细胞的抑制增殖与诱导分化效应可能与CDK4表达下调有关.     

Cyclin E与恶性肿瘤

近年研究发现 ,细胞周期调控机制紊乱是细胞增生失控从而导致癌变的重要原因。哺乳动物中 ,一个典型的细胞周期由有严格顺序并循精确时相的 4个期即 G1 - S- G2 - M构成 ,并受到胞内外信号传导途径及反馈环路的调控 [1 ] 。其中 ,G1期是细胞增生周期的关键。目前已发现A- J10种细胞周期素 (cyclins) ,有些含亚型如 cyclin D1 、cyclin D2 、cyclin D3以及 cyclin E1 、cyclin E2 等共 15种 cy-clins。另据其峰值和主导作用通常又划为 G1 期和 M期 cyclins,前者包括 cy-clin C、D、E;后者包括 cyclin A、B。细胞周期素在结构上的共性…     

Cyclin D1与恶性肿瘤

Cyclin D1 (CD1 )是一种作用于 G1期的细胞周期相关蛋白 ,与多种蛋白相互作用促进细胞进入 S期。CD1基因是一种弱致癌基因 ,可与多种癌基因协同促进细胞转化。在多种肿瘤中有 CD1基因扩增和 /或表达增强 ,其临床意义与肿瘤类型有关。用CD1反义基因体外转染人类肿瘤细胞可抑制肿瘤细胞增殖、降低其致瘤性。一、CD1的生物学特性细胞周期素 (cyclin)是一与细胞周期相关的核蛋白家族 ,其中细胞周期素 D1 (cyclin D1 ,CD1 )与G1期相关 ,分子量 36k D。CD1与细胞周期素依赖激酶 4和 6(Cyclin dependent kinase4and6,cdk4和cdk6)形成复合…     

细胞周期蛋白及其与肿瘤等疾病的关系

细胞周期的内源性调控主要是通过cyclinCDKCKI进行网络调控实现的。cyclin不仅能调控细胞周期，而且有的cyclin还与基因转录有关。cyclin不仅在机体的生长发育、细胞凋亡和分化等生理过程中有重要意义，而且与肿瘤和病毒感染性疾病有密切关系。病毒编码的cyclin有癌基因特征，其表达在肿瘤相关的逆转录病毒致癌过程中有重要作用。cyclin在细胞周期和转录调控中的作用是目前细胞周期研究的热点。