乳鼠预损伤周围神经雪旺细胞的培养及增殖能力研究

目的：从乳鼠预损伤的坐骨神经中分离培养雪旺细胞。方法：预损伤SD乳鼠坐骨神经，3d后取损伤的坐骨神经，手术显微镜下分离神经外膜，用胰酶、胶原酶消化，差速贴壁除去成纤维细胞，接种培养后对细胞进行计数、MTT活性检测，并用S-100蛋白标记观察。结果：该方法所培养的雪旺细胞形态正常，数量及纯度高，增殖旺盛。结论：此实验为神经组织工程研究中雪旺细胞的来源提供了一个有效的方法。     

预损伤与改良传代体外培养许旺细胞的比较(英文)

背景:通过组织工程方法构建神经桥接体修复神经损伤,需要大量纯化体外培养的许旺细胞。目的:对比观察预损伤法和改良传代法获取许旺细胞的纯度与质量。方法:①预损伤法:预损伤SD乳鼠坐骨神经,3d后取出坐骨神经,分离神经外膜,用胰酶、胶原酶消化,差速贴壁除去成纤维细胞,接种培养。②改良传代法:直接获取SD乳鼠坐骨神经,分离神经外膜,运用双酶消化法结合单酶消化法进行许旺细胞原代培养,5～7d后采用单酶快速消化离心法行传代培养,同时纯化许旺细胞。结果与结论:预损伤法和改良传代法体外培养的许旺细胞纯度均达95%以上,两种方法获得的许旺细胞纯度差异无显著性意义(P>0.05)。两种方法获取的许旺细胞形态正常,数量及纯度高,增殖旺盛,说明预损伤法和改良传代法都是体外获取高质量与高纯度许旺细胞的理想方法。     

预损伤与改良传代体外培养许旺细胞的比较

背景：通过组织工程方法构建神经桥接体修复神经损伤,需要大量纯化体外培养的许旺细胞。目的：对比观察预损伤法和改良传代法获取许旺细胞的纯度与质量。方法：①预损伤法：预损伤SD乳鼠坐骨神经,3d后取出坐骨神经,分离神经外膜,用胰酶、胶原酶消化,差速贴壁除去成纤维细胞,接种培养。②改良传代法：直接获取SD乳鼠坐骨神经,分离神经外膜,运用双酶消化法结合单酶消化法进行许旺细胞原代培养,5～7d后采用单酶快速消化离心法行传代培养,同时纯化许旺细胞。结果与结论：预损伤法和改良传代法体外培养的许旺细胞纯度均达95%以上,两种方法获得的许旺细胞纯度差异无显著性意义（P〉0.05）。两种方法获取的许旺细胞形态正常,数量及纯度高,增殖旺盛,说明预损伤法和改良传代法都是体外获取高质量与高纯度许旺细胞的理想方法。     

不同消化酶对体外培养的原代乳鼠雪旺细胞的影响

目的　比较不同消化酶对体外培养的原代乳鼠雪旺细胞的影响。方法　取1周龄SD乳鼠坐骨神经,分别用胰蛋白酶、胶原酶Ⅱ型、混合酶消化,相同方法及实验条件下进行雪旺细胞培养,观察细胞形态、计算2 4h贴壁活细胞百分比及MTT微量比色法比较细胞的生长增殖状况。结果　胰蛋白酶消化组细胞收获量相对最小,细胞损伤程度较大;胶原酶组细胞有一定程度损伤;混合酶组细胞收获量最大,细胞生长状态较好。结论　单纯使用胰蛋白酶或胶原酶消化对原代雪旺细胞的活性及增殖有一定影响,采用胰蛋白酶与胶原酶联合消化效果较好。     

兔坐骨神经实验性电损伤后雪旺细胞延迟整流钾离子通道的活动变化

目的:观察成年兔坐骨神经受到75V电压损伤后雪旺细胞延迟整流钾离子通道的变化情况。方法:建立兔坐骨神经电损伤及切割伤实验模型,应用双酶消化法分离受损区域神经雪旺细胞,分别选择未受损伤时、损伤后第3、7、10天作为观察点,应用膜片钳全细胞记录雪旺细胞延迟整流钾离子通道的变化情况并相互比较。结果:雪旺细胞延迟整流钾离子通道在神经受到电损伤及切割伤后活动均较未受损伤时逐渐增强,并在第7天左右达到高峰,随后下降,和相应的雪旺细胞的增殖能力呈正相关。两种损伤之间比较,离子通道活动差异无显著性。结论:在神经受到75V电压损伤后,尽管雪旺细胞延迟整流钾离子通道自身受到75V电压损伤,但未造成功能的破坏和活动的改变,离子通道活动表现出与切割伤同样的变化趋势。     

毛囊干细胞对坐骨神经损伤修复的影响

背景:毛囊干细胞具有多分化潜能,可分化成神经细胞,极有希望成为治疗周围神经损伤的种子细胞。目的:观察毛囊干细胞对坐骨神经损伤修复的影响。方法:体外分离培养SD大鼠乳鼠胡须处的毛囊干细胞,经鉴定备用。36只SD大鼠随机分为实验组和对照组,建立坐骨神经损伤模型后,实验组于坐骨神经损伤处的上方注入浓度约106L-1的毛囊干细胞50μL,对照组注射等量的磷酸盐缓冲液。结果与结论:各组坐骨神经功能指数均随观察时间进行性增加,其中实验组大鼠神经功能恢复早于对照组;免疫组织化学检测移植后的毛囊干细胞大量存活并分化成神经细胞。结果提示毛囊干细胞能够有效的促进损伤的坐骨神经修复。     

鼠肢芽提取液及运动对坐骨神经损伤修复的比较

目的:观察鼠肢芽提取液及运动对坐骨神经损伤修复的作用。方法:实验于2005-09/2006-09在湛江师范学院重点学科实验室完成。①实验分组:用成年Wistar怀孕大鼠肢芽制备提取液。出生3d Wistar乳鼠40只,行右侧坐骨神经切断术,按随机数字表法分为肢芽提取液非运动组、肢芽提取液运动组、生理盐水非运动组、生理盐水运动组,每组10只。肢芽提取液非运动组、肢芽提取液运动组损伤局部用鼠肢芽提取液每隔2d注射1次。肢芽提取液运动组乳鼠每天进行零坡度跑台运动训练,每周递增速度,25,30,35,40m/min。生理盐水非运动组、生理盐水运动组损伤局部注射等量的生理盐水。生理盐水运动组乳鼠运动时间和程度同上。②实验评估:术后30d肉眼观察坐骨神经失神经后有无水肿、充血、坏死,新生轴突长度、粗细等情况;光镜检查脊髓前角神经元胞体状况,尼氏染色Nissl小体状况(包括核、核仁)神经元有无浓缩、破碎、胶质细胞数量;运动神经元计数检查尼氏染色切片上双侧前角运动神经元数目,标准为能辨认出细胞核的神经元轮廓。结果:①肉眼观察坐骨神经失神经后状况:失神经后,局部有轻微水肿、充血、坏死,有新生轴突,肢芽提取液运动组新生轴突较粗较长,生理盐水非运动组局部严重水肿、充血、坏死,新生轴突,较细较短。②光镜下观察神经元情况:生理盐水非运动组神经元无浓缩、破碎不明显、胶质细胞数量稍有改变。肢芽提取液非运动组有些神经元浓缩、破碎、胶质细胞数量增多。肢芽提取液运动组神经元无浓缩、轻微破碎、胶质细胞数量增加。③运动神经元数目:术后30d肢芽提取液非运动组损伤侧神经元数目高于生理盐水非运动组,差异有显著性意义(t=2.85,P<0.005)。肢芽提取液运动组损伤侧神经元数目高于肢芽提取液非运动组,生理盐水运动组损伤侧神经元数目高于生理盐水非运动组,差异均有显著性意义(t=2.38,2.48,P<0.005)。④运动神经元存活率:乳鼠坐骨神经切断术后局部注射肢芽提取液,术后30d,运动乳鼠可维持损伤侧脊髓前角运动神经元存活率77.96%,非运动乳鼠存活率59.75%;局部注射生理盐水,运动乳鼠可维持损伤侧脊髓前角运动神经元存活率33.45%,非运动乳鼠存活率28.62%。结论:鼠肢芽提取液对坐骨神经损伤的修复作用显著,加入运动干预后恢复效果更佳。     

新生和成年大鼠雪旺细胞培养、纯化的实验研究

目的：比较新生和成年大鼠雪旺细胞（Schwann cells，SCs）的体外培养和纯化方法。方法：分别取新生和成年SD大鼠的坐骨神经，用混合酶消化法、差速贴壁法和低浓度胰酶快速消化法进行培养和纯化，通过形态学观察和S-100免疫细胞化学鉴定，并行MTF法检测细胞增殖能力。结果：两组细胞生长状态良好，均呈S-100免疫细胞化学反应阳性，纯度均达95％以上；由生长曲线显示新生鼠SCs生长更快，第2代SCs倍增时间：新生鼠3d、成年鼠4d。结论：从新生和成年大鼠坐骨神经能成功分离培养出大量高纯度的SCs，新生鼠SCs增殖能力更强。     

成纤维细胞条件培养基对雪旺细胞生长和增殖的影响

目的:观察成纤维细胞条件培养基对雪旺细胞增殖分化的影响,探讨两者之间的协同作用,为组织工程化神经桥接体的构建奠定实践基础。方法:取20只出生四五天的SD乳鼠的臂丛和坐骨神经,运用双酶结合单酶消化法培养雪旺细胞和成纤维细胞,纯化和培养雪旺细胞并制备两种条件培养基:A组:成纤维细胞+DMEM/F12;B组:成纤维细胞+雪旺细胞+DMEM/F12;C组:DMEM/F12(对照组)。将A,B,C3组分别加入种植有纯化雪旺细胞的96孔板中,MTT检测雪旺细胞增殖情况,S-100蛋白免疫组化染色鉴定雪旺细胞。结果:B组对雪旺细胞的增殖和分化有明显的促进作用;A组次之;C组最差(P<0.001)。结论:成纤维细胞条件培养基可促进雪旺细胞的增殖和分化。     

无血清法从成年兔坐骨神经分离培养激活态雪旺细胞的实验研究

目的：探索用“M”无血清培养液培养成年兔激活态雪旺细胞的可行性。方法：取成年兔新鲜和预变性坐骨神经，酶消化法获取激活态和正常雪旺细胞。“M”无血清培养液体外培养，每天观察细胞形态及生长状况，培养第3、5、7、9、11和13天分别计数雪旺细胞．绘制生长曲线；作Lowry蛋白测定，H^3-胸腺嘧啶核甙测定，了解雪旺细胞生长情况。结果：细胞在“M”无血清培养液中生活良好，每个时间段检测激活态雪旺细胞的生长繁殖能力、Lowry蛋白含量、H^3-胸腺嘧啶核甙的含量．均数倍高于正常态的雪旺细胞，两者差异有非常显著性（P〈0．01）。结论：激活态雪旺细胞在“M”无血清培养液培养下仍具有旺盛的生长繁殖能力。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

The characteristics of interpretation of results of analysis of protein amount in urine of pregnant women

The adequacy of implementation of present proteinuria diagnostic thresholds under examination of pregnant women was examined. The analysis was applied to all urine samples of pregnant women from December 2009 to March 20010. The amount of protein in urine was concurrently evaluated by turbidimetric analysis with sulfosalicylic acid, colorimetric analysis with pyrogallol red, "dry chemistry" technology (the diagnostic strips). It is established that the mentioned techniques of analysis of protein in urine provide independent results. The results of colorimetric analysis are characterized by better precision and adequacy. However, in case of pregnant women the diagnostic threshold of protein concentration should be shifted from 0.120 to 0.150 g/l.     

超声评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响

目的 探讨超声在评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响的价值。方法 回顾性收集经病理学证实为头颈部肿瘤、放疗前后的颈动脉超声资料以及其他基线资料完整的患者93例,比较放疗前后放疗侧颈动脉和非放疗侧颈动脉粥样硬化斑块和溃疡斑块的总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积。结果 放疗前后颈动脉超声检查的平均间隔时间为（6.1±1.9）年;放疗前放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积与非放疗侧比较差异均无统计学意义（P均>0.05）;放疗后放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积均较非放疗侧加重,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 放疗可导致头颈部肿瘤患者颈动脉粥样硬化斑块的形成和进展,且斑块具有易损性特点。