RP-HPLC法测定地黄及其复方制剂中尿苷和腺苷的含量

目的分别建立HPLC外标法测定地黄药材及其制剂中尿苷和腺苷含量的方法。方法采用Thermo C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),尿苷以5 mmol·L-1醋酸铵(乙酸调节pH为6.0)为流动相,腺苷以20 mmol·L-1磷酸二氢钾∶甲醇(90∶10)为流动相,流速均为1 mL·min-1,检测波长均为254 nm。结果尿苷浓度在4.17～20.85 mg·L-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好,腺苷浓度在1.01～20.23 mg·L-1(r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率(n=9)分别为100.8%和100.1%。测得6批地黄药材中尿苷的平均含量为(0.027 8±0.003 5)%,腺苷的平均含量为(0.008 4±0.003 1)%。制剂中尿苷含量为0.032 1%,腺苷含量为0.006 9%。结论建立的方法准确可靠,专属性好,可作为地黄及其制剂中核苷含量测定方法。地黄药材中尿苷是主要的核苷成分,其它核苷成分含量甚微。     

RP—HPLC法同时测定半夏中5种核苷含量的研究

目的:采用反相高效液相色谱法检测半夏药材中的核苷类成分,同时对检测确定的5种核苷进行含量测定。方法:核苷检测采用3种色谱条件,通过与对照品的对照,确定在半夏中5种核苷分别为尿嘧啶、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷。含量测定采用 Ace C_(18)柱(150mm×4.6mm,5μm),以水为流动相,流速:0.8mL·min~(-1),测定波长254nm。结果:尿嘧啶、黄嘌呤为首次在半夏中检测到。尿嘧啶、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷的线性范围依次为0.82～8.16,1.52～15.24,3.30～33.04,0.50～5.02,2.98～29.84μg·mL(-1)。r=0.9995～0.9999;回收率:96.4%～102.3%。结论:以 RP-HPLC 法同时测定半夏药材中的5种核苷快速、简便,结果可靠,为测定半夏中核苷类成分提供了有效的方法。     

皖产古尼虫草中核苷和碱基成分的HPLC分析

目的:建立高效液相色谱法测定皖产古尼虫草中核苷和碱基成分(尿嘧啶、虫草素、腺苷、腺嘌呤、尿苷、次黄嘌呤、肌苷和鸟苷)的含量,并比较其与天然冬虫夏草核苷和碱基成分的异同。方法:采用Zorbax SB-Aq(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL.min-1,检测波长260 nm,柱温20℃。结果:尿嘧啶、虫草素、腺苷、腺嘌呤、尿苷、次黄嘌呤、肌苷和鸟苷进样浓度分别在0.38～191.08,0.37～188.48,0.37～189.72,0.37～190.92,0.37～188.55,0.50～168.55,0.37～190.36,0.24～125.00μg.mL-1范围内线性关系良好,R2为0.9998～0.9999;加样回收率分别为102.1%,102.1%,95.3%,96.2%,96.9%,94.1%,108.7%,101.8%,RSD未超过2.8%。皖产古尼虫草和冬虫夏草均含有核苷和碱基成分,其中:皖产古尼虫草含有较高的尿嘧啶、尿苷、腺苷,而冬虫夏草中肌苷含量较高;二者的次黄嘌呤、鸟苷、腺嘌呤的含量相近;在该检测限下,两者均未测得虫草素。结论:初步认...     

藏药麻花秦艽花和线叶龙胆花中10种核苷类成分的含量分析

目的 建立藏药麻花秦艽花和线叶龙胆花中同时测定胞嘧啶、胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤、鸟嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、鸟苷、胸苷和腺苷等10种核苷类成分含量的HPLC-DAD方法,并对产自青海的6批次麻花秦艽花和6批次线叶龙胆花的该10种核苷成分进行含量测定和比较分析。方法 Bonus RP色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),甲醇-0.04%乙酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温35 ℃,检测波长260 nm,进样量20 μL。结果 10种核苷类成分线性关系、精密度、稳定性、重复性均符合含量测定方法学的要求,加样回收率为93.1%～97.3%。不同产地线叶龙胆花中10种核苷类成分总含量849.38-1014.37 μg.g-1,麻花秦艽花为256.27-822.52 μg.g-1。腺苷、鸟苷、尿苷和胞苷含量在麻花秦艽花和线叶龙胆花中均较高,是其主要核苷成分,而尿嘧啶、鸟嘌呤和胸苷在两种样品中含量均较低。结论 所建立的方法简便实用、重复性好,适用于藏药麻花秦艽花和线叶龙胆花中10种核苷类成分的测定。青海不同产地两种藏药中10种核苷类成分的分析数据可为其质量控制和品质评价提供参考。     

高效液相色谱法同时测定三七中5种核苷和碱基的含量（英文）

目的测定三七不同部位中5种核苷类成分胞苷、尿苷、鸟苷、腺苷和尿嘧啶含量。方法采用Zorbax SB-Aq色谱柱;以8mmol·L-1醋酸铵水溶液（A）和甲醇（B）为流动相梯度洗脱,在25℃条件下流速为1mL·min-1;检测波长为260nm。结果胞苷、尿苷、鸟苷、腺苷和尿嘧啶线性范围分别为1.79-57.40μgm·L^-1（r^2=1.0000）,3.30-105.60μgm·L^-1（r^2=1.0000）,3.09-98.80μgm·L^-1（r^2=0.9999）,2.77-88.60μgm·L^-1（r^2=1.0000）和0.38-12.30μgm·L^-1（r^2=1.0000）;加样回收率分别为93.9%,96.5%,92.7%,93.2%和98.8%。三七不同部位中5种核苷类成分的含量差异显著。结论本文首次报道了三七中核苷类成分的含量,其对完善三七药材的质量控制具有一定的指导意义。     

液相色谱-质谱联用分析银线莲中六种核苷类物质

目的: 分析银线莲水提物中的胞苷、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、腺苷6种核苷类物质。方法: 高效液相色谱法－电喷雾电离/离子阱质谱法(HPLC-ESI/MS)对银线莲中超声波辅助萃取法水提物中6种核苷类物质进行测定和鉴别。结果: 银线莲药材中检测到胞苷、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鸟苷和腺苷6种核苷成分。6种核苷类物质质量浓度在1.25~80.0 μg·ml^-1范围内呈良好线性关系(r≥0.999 4),回收率在92.7%~96.8%之间,RSD≤1.6%。测得银线莲药材提取物中胞苷、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鸟苷和腺苷含量分别为0.106 2,0.339 1,0.069 9,0.082 0,0.030 8,0.107 4 mg·g^-1。结论: 此法简便、灵敏快速,首次报道银线莲中含有重要药理活性的6种核苷类物质,为银线莲的药理和临床试验研究提供理论基础。     

HPLC法同时测定不同产地半夏中7种核苷类成分的含量

目的 建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定不同产地半夏中鸟苷、胸腺嘧啶核苷、肌苷、尿苷、腺嘌呤、腺苷、尿嘧啶7种核苷类成分含量的方法。方法 采用C₁₈色谱柱(赛默飞,5μm, 4.6 mm×250 mm);流动相为乙腈(A)-0.05%磷酸溶液(B),梯度洗脱;流速1.0 ml/min;检测波长250 nm;柱温30℃;进样量10μl。结果 半夏中7种核苷类成分的分离度较好,鸟苷、胸腺嘧啶核苷、肌苷、尿苷、腺嘌呤、腺苷、尿嘧啶的线性方程分别为Y_鸟苷=11.851X+3.562 1、Y_{胸腺嘧啶核苷}=9.422X+0.191 5、Y_肌苷=11.619X+2.816 0、Y_尿苷=11.818X-1.405 1、Y_腺嘌呤=14.849X+0.510 9、Y_腺苷=16.471X+1.906 3、Y_尿嘧啶=14.758X+5.562 5;平均加样回收率分别为99.41%、98.70%、98.84%、98.37%、97.83...     

HPLC-DAD同时测定金蝉花中8种核苷类成分的含量

目的建立同时测定金蝉花中腺嘌呤、胞嘧啶、肌苷、尿嘧啶、尿苷、β-胸苷、腺苷和2-脱氧腺苷8种核苷类成分的HPLC测定方法。方法采用Inertsil ODS-SP Extend C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱,流动相:甲醇-水梯度洗脱,流速1 m L/min,检测波长260 nm,柱温25℃,进样量10μL。结果腺嘌呤、胞嘧啶、肌苷、尿嘧啶、尿苷、β-胸苷、腺苷和2-脱氧腺苷8种核苷类成分分别在0.081~1.62、0.074~1.48、0.098~1.85、0.068~1.36、0.071~1.42、0.051~1.01、0.058~1.16、0.068~1.34μg内呈良好的线性关系(R~2≥0.999 0),平均加样回收率分别为97.8%、98.3%、101.5%、98.9%、99.1%、97.3%、100.6%、98.9%,RSD<3.00%。结论该方法简单、重现性良好,准确可靠,可用于金蝉花药材的快速质量评价。     

RP-HPLC法同时测定熟地黄中5个核苷类成分的含量

目的:建立同时测定熟地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷5个核苷类成分的RP-HPLC法。方法:采用Dia-monsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.04 mol·L-1磷酸二氢钾溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm;柱温30℃。结果:次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷浓度分别在1.0～16.0μg·mL-1(r=0.9999)、5.0～80.0μg·mL-1(r=0.9999)、1.0～16.0μg·mL-1(r=0.9997)、1.25～20.0μg·mL-1(r=0.9999)、1.0～16.0μg·mL-1(r=0.9999)范围内线性良好。加样回收率为98.1%～101.0%。结论:该方法可以用于熟地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷的含量测定。     

UPLC法测定西洋参不同部位中8个核苷类成分

目的:建立超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA)法同时测定西洋参中鸟嘌呤、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、2’-脱氧鸟苷、β-胸苷、腺苷8个核苷类成分，并对山东省威海市7个地区11批西洋参不同部位的核苷含量进行测定，以期为西洋参质量控制与评价提供科学依据。方法:采用Acquity UPLC HSS T₃(100 mm×2.1 mm, 1.8μm)色谱柱，流动相为水-乙腈，梯度洗脱，流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长为260 nm,进样量2μL。结果:8个核苷的质量浓度在1.00～200.00μg·mL^-1范围内线性良好，相关系数均>0.999 6,平均加标回收率为98.1%～99.9%,RSD范围为1.2%～2.6%,灵敏度、准确度及精密度均符合要求。山东省威海地区西洋参芦头、须根和主侧根部位样品核苷含量分别为2 556.18、1 829.93和1 100.67 mg·kg^-1,结果具有显著性差异(P<0.05)。结论:该方法可用于西洋参中核苷含量测定及不同部位的...     

Simultaneous determination of 10 nucleosides and nucleobases from different cultivation years of Fritillaria unibracteata var. wabuensis by HPLC-DAD

Determination of nucleosides and nucleobases is important for the quality control of Fritillaria unibracteata Hsiao et K.C. Hsia var. wabuensis (FUW) due to their physiological and pharmacologicalactions. In the present study, we developed a sensitive and reliable HPLC-diode-array detection method to simultaneously determine ten nucleosides and nucleobases, including cytosine, uracil, cytidine, uridine, thymine, adenine, inosine, guanosine, thymidine and adenosine. Complete separation of all the analytes was achieved on a Zorbax 300 Å 300 Extend C₁₈ column with a gradient of methanol-ultrapure water at a flow rate of 1 mL/min in less than 30 min. The diode-array detector wavelength was set at 260 nm for the UV detection of nucleosides and nucleobases. The optimized method provided good linearity (R²≥0.9993 for all the analytes), satisfactory precision (RSD≤3.715%), good repeatability (RSD≤3.748%) and good recovery (RSD from 97.688% to 102.923%). In addition, the developed method was successfully applied to simultaneous determination of ten nucleosides and nucleobases from FUW, and their content changes of various cultivation time (1-7 years) were further analyzed for the first time. Our findings were useful for ensuring the cultivation time choice of artificial cultivation, quality control, pharmaceutical studies and clinical efficacy of FUW.     

HPLC法同时测定地黄中的5种核苷和碱基的含量(英文)

建立HPLC法同时测定来自中国不同地区的地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷、腺苷等5种核苷类成分的含量。采用的色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.04 mol.L-1磷酸二氢钾溶液梯度洗脱,流速1 mL.min-1,柱温30℃,检测波长254 nm。次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷的质量浓度分别在1.0～16.0μg.mL-1(r2=0.999 8),5.0～80.0μg.mL-1(r2=0.999 8),1.0～16.0μg.mL-1(r2=0.999 5),1.25～20.0μg.mL-1(r2=0.999 8)和1.0～16.0μg.mL-1(r2=0.999 8)内线性关系良好,平均回收率为98.8%～100.7%。结果表明,不同地区的地黄中次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷的含量有显著性差异。该方法准确,重复性好,适用于地黄药材中5种核苷类成分的含量测定。     

HPLC法测定冬虫夏草中核苷类成分的含量

目的建立用HPLC法测定不同方法(熏干、新鲜和阴干)处理冬虫夏草样品中核苷类成分(腺苷、尿苷、肌苷、鸟苷和胸苷)含量的方法。方法样品用纯化水超声提取,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,柱温:30℃,流速:1.0mL·min-1。结果虫草中含有的5种核苷标准曲线的相关系数均在0.999 0以上,精密度检测RSD值为0.31%~1.95%(n=5),重复性检测RSD值为0.50%~2.56%(n=5),回收率在99.46%~100.11%之间。结论该方法灵敏、简便、快速、准确、重复性好,能有效测定虫草中核苷类成分的含量,可为评价虫草的质量提供依据。     

RP-HPLC法测定青海不同产地冬虫夏草中核苷类成分的含量

目的:测定青海不同产地冬虫夏草中主要核苷类成分的含量并比较其差异。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定不同产地的9份样品中尿苷、鸟苷、肌苷、腺苷、虫草素的含量。色谱柱为Symmetry ShieldTMRp18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为0.2～1.2mL·min-1,检测波长为260nm,柱温为30℃。结果:5种成分的进样量分别在0.331～1.796、0.375～2.046、0.256～1.389、0.338～1.844、0.384～2.110mg范围与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.9999、0.9999、0.9998、0.9997、0.9998);平均回收率分别为98.72%、101.48%、99.74%、98.46%、98.09%,RSD分别为1.96%、1.68%、1.82%、1.57%、2.74%(n均为6)。青海不同产地间冬虫夏草主要核苷类成分含量有差异。结论:本方法能有效鉴别天然冬虫夏草中的核苷类成分,而冬虫夏草化学成分与生态因子的相关性还需要进一步研究。     

HPLC测定贝母中尿嘧啶和3种核苷的含量及其在品种鉴定中的应用

目的建立测定浙贝、川贝、平贝和新疆贝母中尿嘧啶、尿苷、乌苷、腺苷含量和鉴定该4种药材品种的高效液相色谱法。方法色谱柱为Alltima C18（4．6mm×250mm,5μm）;流动相为甲醇-水溶液;梯度洗脱,洗脱条件为0．0min→5．0min→10．0min→20．0min→30．0min→40．0min,甲醇：1％→1％→5％→12％→24％→31％;流速为0．8mL·min^-1;检测波长为260nm;柱温为25℃。进样体积为20μL。结果尿嘧啶和3种核苷均达到基线分离,线性良好,4种贝母中指标成分含量差异明显。结论该方法快速、准确、重复性好,可作为贝母类药材的核苷类成分的含量测定方法,同时亦可用于准确、可靠的鉴定该4种贝母药材。     

湖北贝母与川贝母随机扩增引物DNA的鉴别

目的 为鉴定湖北贝母，准确区分湖北贝母和暗紫贝母（正品贝母）寻找一种新的鉴别手段。方法采用随机扩增引物DNA（RAPD）法，筛选适于鉴别湖北贝母、暗紫贝母的随机引物。 结果 总共筛选了20条随机引物，得到一条引物S1能准确区分湖北贝母、暗紫贝母，并且其特异性非常高。结论 可利用随机引物S1通过RAPD进行DNA指纹图谱研究准确区分湖北贝母、暗紫贝母。     

双波长紫外分光光度法测定贝母中腺苷和胸苷的含量

将4种贝母的甲醇提取物经薄层色谱法粗分离后,直接用双波长紫外分光光度法测定其含量。结果表明,该方法线性关系好,腺苷和胸苷标准曲线的相关系数均为0.9999,同时也发现平贝、炉贝和伊贝中腺苷都占核苷总量60%以上,而浙贝中仅占约40%,提示贝母生药的抗凝血活性可能与贝母中核苷类化合物的种类和含量的差别有关。     

平贝母药材质量标准研究

目的 对中药材平贝母的水分、灰分、酸不溶性灰分和贝母乙素含量等进行研究.方法 照2010年版<中国药典(一部)>中方法使用水分测定法测定水分,灰分测定法测定总灰分和酸不溶性灰分.采用高效液相色谱法测定贝母乙素含量,色谱柱为Symmetry C18柱(150 mm×3.9 mm,5μm),流动相为CH3CN-100 mmol/L CH3COONH4(43:57),流速为1.1 mL/min,检测波长为375 nm,柱温为室温,进样10μL.结果 中药材平贝母水分不应超过13%,总灰分不高于3.5%,酸不溶性灰分不得高于0.5%;贝母乙素含量测定平均回收率为98.13%,RSD=2.57%(n=6).结论 为建立和完善平贝母的质量标准体系提供了可供参考的依据.     

薄盖灵芝发酵菌丝体中主要核苷及其碱基的反相高效液相色谱测定

本文报道用反相高效液相色谱法测定薄盖灵芝发酵菌丝体中主要核苷及其碱基的含量。菌丝体用50%乙醇超声提取,脱脂后通过十八烷基键合相柱,用磷酸盐缓冲液(pH 6.98)—四氢呋喃(100:1)为流动相,对甲基苯磺酸为内标,峰面积内标法定量。方法灵敏、快速、重现性好,与薄层紫外法比较结果一致。     

太白贝母与暗紫贝母皂苷类成分的HPLC指纹图谱研究

目的:建立不同商品规格太白贝母与暗紫贝母中皂苷类成分的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,为科学评价与有效控制川贝母药材质量提供新方法。方法:色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长为210nm,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1。结果:建立了太白贝母、暗紫贝母中皂苷类成分的HPLC指纹图谱,标定出21个共有峰;不同商品规格川贝母类药材指纹图谱的相似度在0.95以上,但相对峰面积有不同程度的变化。结论:采用HPLC法建立太白贝母、暗紫贝母皂苷类成分指纹图谱的方法简便、可靠,可为全面有效控制川贝母药材的内在质量提供依据。