慢性乙型肝炎患者肝功能及血清HBeAg和HBV DNA载量与肝组织病理相关性的研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者肝功能、HBeAg及HBV DNA水平与肝组织病理炎症分级和纤维化分期的关系.方法 选择233例慢性乙型肝炎患者进行肝穿病理学检查,同时所有患者检测HBV DNA、HBeAg及肝功能,比较患者的肝功能、HBeAg及HBV DNA水平在不同病理炎症分级及纤维化分期中的差异情况.结果 不同的炎症分级患者中,ALT以C3组最高,G0～1组最低,各组间比较差异有统计学意义(P =0.016);TBil以G4组最高,G0～1组最低,各组间比较差异有统计学意义(P=0.000);HBV DNA载量各组间差异无统计学意义.不同的纤维化分期患者中,ALT各组间比较差异无统计学意义;TBil以S4组最高,S2组最低,各组间比较差异有统计学意义(P=0.039);HBV DNA载量各组间差异无统计学意义.炎症分级为G3～4的患者比例在HBeAg阳性组与阴性组差异无统计学意义.纤维化分期S3～4的患者比例在HBeAS阳性组(38%)比HBeAg阴性组(53%)低,两组差异有统计学意义(P=0.025).结论 慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平的高低不能反映其肝脏炎症及纤维化程度,HBeAg阴性慢乙肝患者肝组织纤维化程度较高,TBil水平与肝组织炎症分级及纤维化分期均有良好的相关性,ALT水平与炎症分级有一定的关联性,但与纤维化分期无关.     

血清HBsAg与HBV DNA水平与乙肝患者肝纤维化程度的相关性分析

目的 探讨血清HBsAg与HBV DNA对乙肝患者肝纤维化的相关性分析.方法 选取2010年5月至2014年9月在我院进行治疗的100例肝脏穿刺活组织学检查的患者,根据肝脏炎症程度将患者分为G0-G1、G2、G3-G4三组,根据不同纤维化分期将患者分为S0-S1、S2、S3、S4四组,根据丙氨酸转氨酶(ALT)水平,将患者分为A1 (ALT≤40U/L)组、A2(40＜ALT≤80U/L)组,对不同分组患者进行血清HBsAg测定、HBV DNA测定及ALT测定,分析其含量与肝脏炎症程度及纤维化程度的相关性.结果 G0-G1组、G2组、G3-G4组HBsAg定量分别为(3.85±0.87)U/ml、(3.54±0.79) U/ml、(2.79 ±0.58) U/ml,三组间具有统计学差异(P＜0.05).G0-G1组、G2组、G3-G4组HBV DNA定量分别为(6.27±1.67) U/ml、(5.68±1.49) U/ml、(5.84±1.59) U/ml,三组间差异无统计学差异(P＞0.05).S0-S1组、S2组、S3组、S4组患者HBsAg定量分别为(3.95±0.93) U/ml、(3.62±0.86) U/ml、(3.55±0.62) U/ml、(3.35 ±0.54) U/ml,四组差异有统计学差异(P＜0.05).S0-S1组、S2组、S3组、S4组患者HBV DNA定量分别为(6.23±1.72) U/ml、(5.79±1.62U/ml)、(5.50±1.48) U/ml、(5.48±1.35U/ml),四组差异有统计学意义(P＜0.05).ALT水平与炎症程度及纤维化程度没有相关性(P＞0.05).结论 HBsAg、乙肝病毒随着肝纤维化程度的加重逐渐减低,血清HBsAg结合HBV DNA载量作为检测乙肝病毒感染者肝纤维化指标更为可靠.     

慢性HBV感染肝脏病理变化和生化ALT及病毒学关系

目的 探讨慢性HBV感染ALT、HBV DNA与肝脏病理的关系.方法 对81例慢性HBV感染患者检测血清ALT、HBV DNA.并进行肝活检病理检查.结果 肝脏炎症分级和纤维化分期与ALT明显相关(r值分别为0.683和0.419),与HBV DNA无相关性.随着肝脏炎症活动度和纤维化程度的加重,ALT有升高趋势(χ2趋势值分别为25.81和12.012),HBV DNA无升高趋势,而随着HBVDNA的升高,肝脏炎症活动度和纤维化程度并无加重趋势.肝组织HBsAg、HBcAg阳性组与阴性组的ALT、HBV DNA差异无统计学意义.结论 ALT与肝脏炎症活动度有明显相关性,仍是观察炎症变化的敏感指标,HBV DNA与肝组织炎症分级及纤维化分期无相关性.     

HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性HBV携带者肝组织病理结果分析

目的探讨HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性HBV携带者肝组织病理学特征及临床意义。方法采用回顾性分析方法,收集2002年1月-2009年12月住院的198例HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性HBV携带者,所有患者均进行肝穿刺组织活检,分析病理特征。结果 198例慢性HBV携带者HBeAg阳性134例（占67.68%）,HBeAg阴性64例（占32.32%）,除21例（占10.61%）无肝脏病理改变外,其余肝脏组织学显示不同程度炎症（G）及纤维化（S）改变者占89.39%（177/198）,其中G1占65.66%（130/198）,G2占19.19%（38/198）,G3占4.55%（9/198）,≥G2共占23.74%（47/198）;S1占39.90%（79/198）,S2占36.87%（73/198）,S3占5.05%（10/198）,S4占0.51%（1/198）,≥S2共占42.42%（84/198）。男性组与女性组G、S比较差异均无统计学意义（P均〉0.05）;年龄≥30岁组G及S重于〈30岁组（P〈0.05）。病程〈10年组与≥10年组G比较差异无统计学意义（P〉0.05）,病程≥10年组S重于〈10年组（P〈0.05）。按HBeAg分阳性组与阴性组,HBeAg阳性组以G1（占70.89%）、S1（占47.01%）为多,而HBeAg阴性组以≥G2（占34.38%）、≥S2（占56.25%）为多,差异有统计学意义（P〈0.05）。HBeAg阳性组肝组织G各级之间及S各期之间血清HBVDNA水平比较差异均无统计学意义（分别为χ^=23.117,df=3,P=0.366;χ^2=5.579,df=3,P=0.134）;HBeAg阴性组肝组织G各级之间及S各期之间血清HBVDNA水平比较差异亦无统计学意义（分别为χ^=20.921,df=3,P=0.823;χ^=23.408,df=3,P=0.492）。结论无论HBeAg阳性或HBeAg阴性慢性HBV携带者绝大部分有一定的肝组织学改变,应引起足够重视;HBeAg阴性慢性HBV携带者的肝组织损害程度要重于HBeAg阳性者。肝组织学炎症、纤维化程度改变与乙肝病毒复制水平、性别无关。年龄≥30岁组炎症及纤维化程度重于〈30岁组,病程≥10年组纤维化程度重于〈10年组。年龄在30岁以上,病程超过10年的慢性HBV携带者应密切随访,及时进行肝活检,明确病情,并给予恰当的治疗。     

聚乙二醇干扰素α-2a联合基因重组酵母乙肝疫苗治疗HBeAg阳性CHB的疗效观察

目的 探讨聚乙二醇干扰素α-2a联合基因重组酵母乙肝疫苗治疗HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者疗效.方法 总75例HBeAg阳性慢性乙型肝炎纳入本研究,其中单用聚乙二醇干扰素α-2a治疗的45例（A组）;聚乙二醇干扰素α-2a联合基因重组酵母乙肝疫苗的HBeAg阳性慢性乙肝患者30例（B组）.对比分析两组在治疗0、24、48和72周时ALT、HBsAg水平、HBeAg血清转换率和HBV DNA阴转率的差异.结果 治疗前（0周）时两组患者的年龄、ALT、HBsAg和HBV DNA水平差异均无统计学意义（P＞0.05）,其中联合治疗组（B组）HBeAg水平明显高于对照组（A组）,差异具有统计学意义（P＜0.05）.第24周和48周时,两组患者的ALT、HBsAg水平、HBeAg血清学转换率和HBV DNA阴转率差异并无统计学意义（P＞0.05）.在治疗结束随访至72周时,A、B两组ALT、HBeAg血清转换率和HBsAg水平差异没有统计学意义（P＞0.05）,但B组HBV DNA阴转率高于A组,差异具有统计学意义（P=0.032）.结论 聚乙二醇干扰素α-2a联合基因重组乙肝疫苗治疗HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者可以提高48周治疗结束后72周时的HBV DNA阴转率,但是与HBeAg血清学转换和HBsAg水平降低无关.     

HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清病毒载量与肝组织学改变的关系

目的 探讨HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝组织损害的关系.方法 以HBeAg阳性慢性乙型肝炎病例为对照,回顾分析HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA水平与肝组织病理炎症分级、纤维化分期之间的关系.结果 HBeAg阴性与阳性组HBV DNA 平均含量分别为（5.38±1.27）log10拷贝/ml和（6.80±1.18）log10拷贝/ml,差异有统计学意义（P〈0.01）.与HBeAg阳性组比较,HBeAg阴性组肝组织炎症分级及纤维化分期较高（P〈0.01）.HBeAg 阴性患者HBV DNA水平与肝组织炎症分级及纤维化分期呈正相关（P〈0.01）.结论 HBeAg阴性慢性乙型肝炎病毒载量低,乙肝病毒载量与肝损害呈正相关.     

慢性乙型肝炎患者肝脏病理特点与血清HBeAg和HBV DNA的关系

目的 了解慢性乙型肝炎患者病理特点与血清HBeAg和HBVDNA的关系.方法对1057例慢性乙型肝炎患者进行肝脏病理检查,采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA,用化学发光法检测血清HBeAg.结果 HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者的炎症及纤维化程度(G4和S4分别为7.83%和12.17%)较HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者高(G4和S4分别为3.39%和5.44%);HBeAg阳性的患者中HBV DNA滴度低的患者炎症及纤维化程度较高(HBV DNA 104～105 G3G4和S3S4分别为45.64%和30.20%),而HBeAg阴性的患者则是HBV DNA滴度高的炎症及纤维化程度较高(HBV DNA106～107 G3G4为54.55%和HBV DNA 108～109S3S4为42.85%).结论慢性乙型肝炎患者的肝脏病理与血清HBeAg及HBV DNA水平有不同相关性,对HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者要及早进行肝脏病理检查和抗病毒治疗.     

HBV慢性感染者免疫耐受相关临床与病理探讨

目的 了解HBV慢性感染免疫耐受相关的临床与病理特征,探讨临床免疫耐受期患者的诊断.方法 对135例既往未出现过肝功异常的HBV慢性感染患者进行分析,了解他们年龄、性别、血清HBV DNA水平,肝功及肝脏病理情况.结果 本组患者平均年龄(22.61±8.95)岁,大部分肝脏损害轻微(99/135),病理损害轻微组(G≤1和S≤1)与病理损害明显组(G≥2或S≥2)在年龄、乙型肝炎家族史、性别等无明显差异,但在ALT≥30及ALT＜30两组患者中,高水平的ALT组病理损害明显的患者更多见(20/41及16/94);血清HBVDNA≥107拷贝/ml与血清HBVDNA＜107拷贝/ml两组患者比较,低水平的HBVDNA组病理损害明显的患者更多见(7/13及29/108).结论 HBV慢性感染HBVDNA、HBeAg阳性、既往肝功一直正常的患者,一般病理损害轻微,但尚有部分患者肝脏损害较明显,说明这部分人群不是都处于免疫耐受期,监测肝功及HBV DNA水平有助于免疫耐受的判断,特别是肝组织活体穿刺是指导诊治的有效办法.     

HBV pgRNA在HBV相关疾病中的表达及其临床意义

目的 探讨血清HBV 前基因组RNA(pgRNA)在HBV相关疾病中的表达及其临床意义。方法 收集90例慢性乙型肝炎、54例乙肝肝硬化和44例HBsAg阳性原发性肝癌患者血清样本,进行HBsAg、HBeAg、HBV DNA和HBV pgRNA检测。结果 血清HBV pgRNA水平在慢性乙型肝炎组、肝硬化组、肝癌组患者中的中位数分别为7.08、5.16 和4.08 log copies/mL ,差异有统计学意义(χ^2=24.743, P <0.001)。在HBeAg阳性患者中,HBV pgRNA水平在慢性乙型肝炎组、肝硬化组、肝癌组患者中逐渐降低,差异有统计学意义(χ^2=14.864, P <0.001);且血清HBV pgRNA水平与血清HBV DNA、HBsAg水平及HBeAg滴度呈正相关。而在HBeAg阴性患者中,血清HBV pgRNA水平与血清HBV DNA、HBsAg水平及HBeAg滴度无相关性。结论 血清HBV pgRNA水平在慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者中逐渐降低,且与HBV DNA、HBsAg水平及HBeAg滴度呈正相关。     

乙肝病毒感染与乙肝病毒相关性肾炎间的关系分析

目的 探讨研究乙肝病毒(HBV)感染与乙肝病毒相关性肾炎之间的关系.方法 对124例资料完整的HBV相关肾炎(HBV-related glomerulonephritis,HBV-GN,)患者的血清病毒学、肾脏及肝脏病理学和常规实验室检查结果进行回顾分析研究.结果 124例血清HBsAg和/或HBeAg阳性的患者中,HBV-GN的发生率69.49％,男性发生率(45.0％)显著高于女性(24.49％),P＜0.05.血清HBeAg阳性组HBV-GN的发生率显著高于HBeAg阴性组.HBV DNA定量＞105 copies/mL组HBV-GN的发生率亦显著高于定量＜105 copies/mL组.HBV-GN患者血清HBeAg阳性与阴性组之间比较,24小时尿蛋白定量及内生肌醉清除率均无显著差异.血清HBV DNA定量＞105copies/mL组与定量＜ 105 copies/mL组之间比较24小时尿蛋白定量与内生肌酐清除率亦无显著差异.HBV-GN患者肾组织局部HBcAg沉积阳性组与阴性组相比较,24小时尿蛋白定量有显著性差异(P＜0.05),而内生肌酐清除率无显著性差异.结论 HBV感染及其复制状态与HBV-GN的发生密切相关;但HBV的复制状态可能并不明显影响HBV-GN患者肾、肝组织的病变程度.     

慢性乙型肝炎血清及肝组织病毒学标志与病理损伤的关系

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清及肝组织病毒学标志与肝组织病理损伤的关系。方法对647例CHB患者血清病毒学标志HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HBVDNA及其中418例肝细胞病毒学标志HBsAg、HBcAg的表达与肝组织病理损伤进行对比分析。结果CHB患者血清及肝组织病毒学标志与肝组织病理损伤密切相关。结论血清HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性,HBVDNA阴性的患者肝组织炎症及纤维化程度较轻;HBVDNA与肝组织炎症分级及纤维化分期无明显相关;肝细胞HBsAg、HBcAg均阴性表达的肝组织炎症及纤维化程度较重。     

慢性乙型肝炎患者肝组织中HBV抗原表达特征及其临床意义

目的探讨慢性乙型病毒性肝炎肝活检组织中检测乙肝表面抗原(HBsAg)和乙肝核心抗原(HBcAg)表达强度及表达方式的必要性。方法采用EnVision免疫组织化学法检测196例慢性乙型肝炎患者肝穿组织中HBsAg和HBcAg的表达水平,并用荧光定量PCR检测其血清中的HBV DNA的含量。对肝组织进行炎症活动度分级和纤维化分期。结果肝组织中的HBsAg表达强度和表达方式与炎症分级、纤维化分期和血清乙肝病毒载量均无相关性(P>0.05)。HBcAg表达强度与炎症分级无相关性(r=-0.02,P>0.05);与纤维化分期呈负相关(r=-0.28,P<0.01);与血清乙肝病毒载量呈正相关(r=0.53,P<0.01)。HBcAg表达方式与炎症分级为负相关(r=-0.27,P<0.01),其中浆型组炎症活动度分级高于核型组和混合型组(P<0.01),混合型组高于核型组(P<0.01)。HBcAg表达方式与纤维化分期亦呈较弱的负相关(r=-0.23,P<0.01),其中浆型组纤维化分期高于核型组和混合型组(P<0.05)。HBcAg表达方式与血清乙肝病毒载量呈正相关(r=0.22,P<0.01)。结论区分肝组织中的HBsAg表达强度和表达方式无益于了解慢性乙型肝炎患者肝损害的程度,而检测肝组织中的HBcAg则有助于临床抗病毒治疗。     

慢性乙肝患者抗病毒治疗前后特异性T细胞免疫观察

目的 了解抗病毒治疗前后慢性乙型肝炎患者特异性T淋巴细胞对HBV抗原蛋白免疫应答的变化及其特征.方法 收集17例慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前及治疗后1个月、3个月的外周血单个核细胞,以HBV特异性抗原蛋白HBsAg、HBcAg和HBeAg为刺激物,酶联免疫斑点法检测其分泌IFN-γ产生斑点的情况.同时对血清HBV DNA和HBsAg、HBeAg等病毒学指标及谷丙转氨酶(ALT)等生化学指标进行榆测并分析其相关性.结果 治疗前,所有患者ALT、总胆红素(TBiL)均高于正常上限,17例患者HBV DNA均大于104拷贝/ml;治疗1个月后,ALT复常率为35.3%,9例患者HBV DNA降为检测下限以下;治疗3个月后,ALT复常率为58.8%,有11例患者HBV DNA降为检测下限以下.抗病毒治疗前、治疗1个月、治疗3个月患者针对HBV特异性蛋白总的T细胞反应阳性率分别为64.7%、76.5%和82.4%,其差别无统计学意义.不论治疗前后,患者对HBeAg的特异性T细胞反应频率和平均反应强度最高;治疗后,对3种蛋白的特异性T细胞反应频率和平均反应强度各有不同程度的增加,其中以对HBcAg蛋白的平均反应强度的增强最明显,治疗前和治疗3个月,治疗1个月和治疗3个月之间的差别都有统计学意义.患者对HBcAg蛋白的特异性T细胞反应平均反应强度与病毒载量有明娃负相关,与血清ALT无明显相关性.结论 本研究结果提示抗病毒治疗后,患者对HBV的特异性T细胞免疫应答有所增强,这种改变可能与HBV DNA的下降有关,检测HBV特异性T细胞反应对丁解患者的免疫状态有重要的意义.

Abstract：

Objective To explore the responses of antigen-specific T cells stimulated by hepatitis B virus(HBV)-specific proteins in chronic hepatitis B patients accepting antiviral therapy. Methods Seventeen patients with chronic hepatitis B (CHB) accepting antiviral therapy were included in this study. The peripheral blood monocular cell ( PBMC) were separated from the whole blood collected at the three different time of before and one and three months after accepting antiviral therapy. ELISPOT assay was used to detect the frequency and strength of secreting IFN-γ cells of PBMC stimulated by HBsAg, HBcAg and HBeAg. HBV virus loading, HBsAg, HBeAg, ALT and AST in serum were detected at the same time. Results After three months therapy, ALT, TBiL were improved in all patients, and HBV DNA level were dropped and undetectable in 11 cases. The rates of T cell response in patients to HBV specific proteins were 64. 7% , 76. 5% and 82. 4% at the time of before and one and three months after accepting antiviral therapy, respectively. The frequency of responses of antigen-specific T cells stimulated by HBcAg was higher than that stimulated by HBsAg or HBeAg, and the frequency was enhanced after antiviral therapy. The average response magnitude was expressed as spot forming cells (SFC) per million input cells. SFC of T cell responses to HBcAg was also higher than to HBsAg or HBeAg. There was no significant difference in SFC of T cell responses to HBsAg or HBeAg at the time of before and after antiviral therapy, but there were significant difference in SFC of T cell responses to HBcAg at the time of before and after antiviral therapy. SFC of T cell responses to HBcAg was negatively associated with HBV DNA, and no associated with level of ALT in serum. Conclusion The responses of antigen-specific T cells were improved in CHB patients accepting antiviral therapy which associated with the decrease of HBV DNA. It suggested to investigate HBV specific T cell responses was important.     

肝组织病理及肝内抗原表达与聚乙二醇干扰素α-2a抗乙肝病毒疗效关系的研究

目的观察聚乙二醇干扰素α-2a（PegIFNα-2a）治疗慢性乙型肝炎的疗效,探讨肝脏病理改变和肝细胞内病毒抗原的表达类型与PegIFNα-2a抗病毒疗效的关系。方法选择HBeAg阳性慢性乙型肝炎68例,HBeAg阴性慢性乙型肝炎45例,通过肝组织病理检测,观察肝脏病理改变和肝细胞内病毒抗原的表达类型与PegIFNα-2a治疗后血清HBV DNA的阴转率、HBeAg转换率和完全应答率之间的关系,并随访48周,观察持续应答情况。结果 HBsAg的阴转在不同的炎症活动度间差异无统计学意义;在HBeAg阳性患者中,G1组的HBeAg转换率和完全应答率与G3组比较差异有统计学意义（P均〈0.05）;炎症活动度高的病例经治疗后48周的持续应答率高于炎症活动度低的病例（χ2=4.311,P〈0.05）;肝细胞内HBcAg浆型表达者HBeAg阴转、HBeAg转换率、HBV DNA的阴转率均高于HBcAg核型表达者（P均〈0.05）。结论肝组织病理改变和病毒抗原在肝细胞的表达类型可能成为PegIFNα-2a抗病毒疗效的潜在预测因素。炎症活动度高、肝细胞内HBcAg浆型表达者可能对PegIFNα-2a的治疗应答更好。     

乙型肝炎病毒对肝内TGF-β1/Smads信号通路的作用

 目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）对肝内TGF-β1蛋白表达及Smads信号通路的作用,为制定慢性乙肝肝纤维化临床治疗策略提供理论依据。方法：(1)运用免疫组化PV-6000法检测对照组和慢性乙肝组肝组织中TGF-β1、HBsAg和HBcAg的表达,并采用荧光定量PCR法测定慢性乙肝患者血清HBV DNA含量。(2)应用体外细胞培养技术培养HBV刺激的人肝星状细胞系LX-2细胞,Western blotting方法测定其细胞内TGF-β1、Smad3和Smad7的蛋白表达。结果：(1)慢性乙肝组肝组织内TGF-β1的表达高于对照组（P＜0.01）;肝内TGF-β1表达水平与血清HBV DNA含量呈正相关（P＜0.01）,且HBcAg阳性肝组织水平较高（P＜0.01）。(2)体外细胞学实验中,HBV刺激组LX-2细胞内TGF-β1和Smad3蛋白含量高于对照组和HBV+抗-TGF-β1组（P＜0.01）;Smad7蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论：(1)TGF-β1在慢性乙肝患者肝组织中的表达与血清HBV DNA含量及肝内HBcAg的表达有关。(2)在TGF-β1/Smads信号通路中,HBV致纤维化作用机制以Smad3的正性调控为主,Smad7的作用不明显。