经肝动脉化疗栓塞术对肝癌细胞凋亡抑制基因Survivin mRNA和蛋白的影响

目的 探讨肝动脉化疗栓塞术(TACE)对肝细胞癌(HCC)细胞凋亡抑制基因Survivin mRNA和Survivin蛋白的影响.方法 HCC患者分组:术前TACE组(A组,26例),单纯手术组(B组,30例),正常肝组织组(C组,16例).应用原位杂交法、抗生物素蛋白链菌素-过氧化物酶(streptavidin peroxidase,S-P)免疫组织化学法、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺El末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法进行分析.结果 (1)A组癌组织Survivin mRNA和Survivin蛋白阳性表达率、灰度差值＜B组(P＜0.05);A、B组癌旁组织、C组均无Survivin mRNA和蛋白表达.(2)A组癌组织的凋亡指数高于B组癌组织和C组(P＜0.05);B组癌组织的凋亡指数高于C组(P＜0.05).结论 TACE治疗可使HCC中Survivin mRNA和蛋白表达减少、凋亡指数增加.     

IRX2基因在原发性肝癌中表达的初步研究

目的 检测易洛魁族同源盒基因(IRX2)在原发性肝癌(HCC)组织中的表达及其临床意义.方法 收集手术切除的HCC组织标本及癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测IRX2在肝癌组织及相应癌旁组织的表达情况.采用免疫组化法分析IRX2蛋白在肝癌组织和癌旁组织中的表达及定位.比较高、中、低分化肝癌组织中IRX2蛋白表达与肝癌临床病理分期之间的关系.结果 80％(16/20)的肝癌组织中,IRX2 mRNA的表达量低于癌旁组织(P=0.04);IRX2蛋白在肝癌组织中的相对表达量(0.866)低于癌旁组织(1.803,P=0.009).随着肝癌分化程度的降低,IRX2蛋白表达量也随之降低,差异有统计学意义(P=0.001).进一步研究发现,高分化与低分化肝癌组织,中分化与低分化肝癌组织中IRX2蛋白的表达差异有统计学意义(P=0.006,P=0.001),而中分化与高分化组织IRX2蛋白表达差异无统计学意义(P=0.539).结论 HCC组织中IRX2的表达水平低于癌旁组织,IRX2的异常表达与HCC的分化程度有关.     

P21~(WAF1/CIP1)在胃癌组织中表达及其意义

采用免疫组化方法对32例胃癌及相应的癌旁组织同时进行P21~(WAFI)蛋白的检测,结合胃癌发生的年龄、病理类型及分级与预后作了探讨。结果表明:①32例胃癌标本中阳性染色11例,弱阳性7例,阴性14例。癌旁组织中,阳性染色24例,弱阳性7例,阴性1例。两者之间的阳性率存在显著性差异(P<0.01)。②P21蛋白表达与胃癌的分级有关,分化较好的Ⅰ级与分化差的Ⅱ级之间存在显著性差异(P<0.01)。③P21蛋白表达与患者年龄、组织病理类型无明显相关(P>0.05)。结论:P21高表达与胃癌的分化程度密切相关,检测P21有无过高表达对胃癌的予后判断有一定意义。     

抑癌基因PTEN在鼻咽癌中的突变及表达

目的 探讨抑癌基因PTEN在鼻咽癌细胞株及组织中的基因突变和蛋白表达缺失情况.方法 收集鼻咽癌细胞株4种(CNE-1、CNE-2、HONE1、sUNE1)、经病理组织学确诊为未分化型非角化性鼻咽癌组织标本96例(其中71例同时取癌旁组织)和慢性鼻咽炎的组织标本5例.4种鼻咽癌细胞株、25例未分化型非角化性鼻咽癌组织和5例慢性鼻咽炎组织标本用于检测基因突变,其余71例未分化型非角化性鼻Ⅱ凼癌组织及癌旁组织进行免疫组化,检测PTEN的蛋白表达.采用RT-PCR和直接测序法分析PTEN编码序列基因突变;免疫组织化学SP法观察蜡块包埋的鼻咽癌组织和癌旁组织中PTEN蛋白的表达情况.免疫印迹法检测PTEN及相关蛋白在细胞株中的表达.结果 仅1例鼻咽癌组织检测到PTEN基因第8外显子中存在点突变,但属于沉默突变.71例鼻咽癌组织中PTEN蛋白的表达率(30.9%)显著低于癌旁组织(52.1%,P=0.017).Ⅲ-Ⅳ期肿瘤组织PTEN阳性表达率(25.5%)显著低于Ⅰ-Ⅱ期肿瘤组织(55%,P=0.026).EB病毒阳性组PTEN蛋白表达率与EB病毒阴性组比较明显降低(P=0.03).EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)可以下调PTEN蛋白的表达.结论 PTEN蛋白的表达缺失在鼻咽癌的发生、发展过程中起着重要作用,其缺失可能与EB病毒有关.     

CyclinD1、p21WAF1、p53及Ki-67在肝细胞癌中的表达及与预后的关系

目的探讨肝细胞癌(HCC)中cyclin D1、p21、p53及Ki-67蛋白的表达及其与HCC预后的关系。方法选择2000年1月-2005年1月在解放军总医院行手术切除的80例HCC患者的肝组织标本,采用EliVision法进行cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67免疫组化染色,分析其表达水平与HCC病理特征的关系,并进行生存分析。结果 Cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67在HCC中的阳性表达率分别为38.8%、40.5%、65.4%及80.0%,均明显高于癌旁肝组织(分别为19.0%、11.5%、0.0%、6.3%,P<0.005)。相关分析显示,cyclin D1阳性表达与核分级呈正相关(P=0.041),p21WAF1及p53阳性表达与肿瘤分化程度(P=0.032、P=0.031)和血管浸润(P=0.036、P=0.011)呈正相关,Ki-67阳性表达与肿瘤分化程度(P=0.004)、核分级(P=0.045)和血管浸润(P=0.001)呈正相关。生存分析显示,cyclin D1及Ki-67高表达者预后较差。Ki-67阳性表达与p53(P=0.000)及p21WAF1(P=0.047)阳性表达有明显相关性,其他各蛋白之间表达无明显相关。Cox回归模型分析显示,肿瘤大小(P=0.042)、肿瘤数目(P=0.004)及血管浸润(P=0.000)为HCC的独立预后因素。结论 Cyclin D1、p21WAF1、p53及Ki-67可能参与了HCC的生物学进程;cyclin D1及Ki-67阳性表达对HCC预后的判断有一定价值。     

HER-2、Syk在胃癌中的表达及其临床意义

 目的 探讨人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2, HER-2)、脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase, Syk)在胃癌中的表达及与胃癌的相关关系.方法 采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和SP免疫组化技术,检测62例胃癌及癌旁组织中HER-2、Syk表达状况,与胃癌临床病理检测结果进行相关性统计分析.结果 胃癌组织中HER-2 mRNA、HER-2蛋白阳性率分别是11.29%和30.65%,均高于癌旁组织(P＜0.05);Syk mRNA、Syk蛋白阳性率分别为27.42%和22.58%,均低于癌旁组织(P＜0.05).淋巴结转移的胃癌组织中,HER-2 mRNA、HER-2蛋白阳性表达率均高于无淋巴结转移组(P＜0.05),Syk mRNA、Syk蛋白阳性表达率均低于无淋巴结转移组(P＜0.05).HER-2表达与胃癌患病年龄、性别、肿瘤大小、部位均无相关性(P＞0.05),与肿瘤浸润深度、病理分期相关(P＜0.05),Syk表达与胃癌上述临床病理结果均无相关性(P＞0.05).HER-2蛋白与Syk蛋白在胃癌组织中的表达呈负相关.结论 胃癌发生和转移与HER-2表达和Syk表达密切相关.检测HER-2、Syk对胃癌的治疗及其预后评估具有指导意义.     

乙酰化转移酶P300蛋白表达与乳腺浸润性导管癌生物学行为关系研究

目的探讨乙酰化转移酶P300蛋白表达与乳腺浸润性导管癌的生物学行为关系。方法将南京医科大学附属常州市第二人民医院2008—2010年收治的80例乳腺浸润性导管癌患者纳入乳腺浸润性导管癌组,另将18例不伴有乳腺导管增生性病变的乳腺纤维腺病患者纳入乳腺纤维腺病组,采用免疫组化技术检测两组患者乳腺组织切片中P300蛋白表达情况。结果乳腺纤维腺病组患者中,P300蛋白高水平表达12例,低水平表达6例,高水平表达率为66.7%(12/18);乳腺浸润性导管癌组患者中,P300蛋白高水平表达31例,低水平表达49例,高水平表达率为38.8%(31/80)。两组患者P300蛋白高水平表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤大小不同的患者的P300蛋白表达水平存在差异(P<0.05);年龄、月经情况、病理分级、分子分型、淋巴结转移、TNM分期不同的患者的P300蛋白表达水平差异不显著(P>0.05)。31例P300蛋白高水平表达乳腺浸润性导管癌患者中,复发转移3例(9.7%);49例P300蛋白低水平表达乳腺浸润性导管癌患者中,复发转移21例(42.9%)。P300蛋白低水平表达乳腺浸润性导管癌患者的复发转移率明显高于P300蛋白高水平表达乳腺浸润性导管癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 P300蛋白低水平表达时,乳腺浸润性导管癌肿瘤直径更大,肿瘤更易复发和转移,检测乳腺浸润性导管癌中P300蛋白表达水平可能有评估乳腺浸润性导管癌患者预后的应用价值。     

肝癌组织FHIT蛋白和Ki-67抗原的表达

目的:通过检测肝癌组织中FHIT蛋白、Ki-67抗原的表达,探讨它们的相互关系及其与肝癌临床病理特征之间的关系.方法:免疫组织化学SP法对70例肝癌及10例相应的癌旁组织和10例正常肝组织中的FHIT蛋白和Ki-67抗原的表达进行检测.结果:所有癌旁组织和正常肝组织均强阳性表达FHIT蛋白,Ki-67抗原的表达均为阴性.原发肝癌组织中FHIT的降低或缺失性表达率为58.57%, Ki-67抗原的阳性表达率为44.26%.①肝癌组织中FHIT基因表达水平显著低于癌旁组织及正常肝组织(P＜0.01);②肝癌组织中FHIT基因表达水平降低或缺失与肝癌TNM临床分期及侵袭性存在相关性(P＜0.05).Ki-67抗原的表达与组织学分级、临床分期和侵袭性相关(P＜0.05).结论:FHIT基因可能参与了对肝癌肿瘤细胞增殖的调节,其表达下降可能与肝癌的发生、发展过程有关.     

血管内皮生长因子表达与输尿管癌的生物学行为关系

 目的在分子水平上了解原发性输尿管癌生长、发展的机制。方法 应用免疫组化技术一两步法,测定26例原发性输尿管癌组织的血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达。结果 26例肿瘤组织中VEGF阳性表达16例(61.54％),显著高于正常输尿管组织及输尿管息肉(P＜0.01)。VEGF在原发性输尿管癌中的表达,Ⅲ级高于Ⅰ、Ⅱ级(P＜0.05),B以上高于T2以下(P＜0.05)。VEGF阳性组术后5a复发率明显高于阴性组(P＜0.01),5a生存率明显低于阴性组(P＜0.05)。结论VEGF蛋白表达与原发性输尿管癌的临床分期、病理分级及患者的预后相关。     

T-cadherin在肝细胞癌中的表达及其与肿瘤复发转移的关系

目的 探讨T-钙黏附蛋白(T-cadherin)在肝细胞癌中的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系.方法 收集2010年5月-2011年10月于南京军区福州总医院行手术切除的肝癌患者的新鲜癌组织和癌旁2cm以上肝组织标本,采用免疫组织化学方法观察不同恶性生物学程度以及手术前TNM分期相同,术后1年内出现或未出现复发和(或)转移的HCC患者的癌组织及癌旁组织中T-cadherin基因的表达;采用RT-PCR方法检测T-cadherin基因mRNA的表达情况.结果 肝癌组织中T-cadherin的异常表达率高达46.7％(28/60),明显高于癌旁肝组织6.7％(4/60),两组相比差异具有统计学意义(x2=24.55,P=0.000).在高分化与中低分化的HCC患者癌组织中T-cadherin的异常表达率分别为30.0％(6/20)和35.0％(7/20),两者比较差异无统计学意义(x2=0.114,P=0.736).在出现转移的HCC患者癌组织中T-cadherin的异常表达率[75％(15/20)]明显升高,与未出现转移的HCC患者[32.5％(13/40)]相比,差异具有统计学意义(x2=9.676,P=0.002).T-cadherin mRNA检测结果显示癌组织T-cadherin表达缺失(高度异常表达),癌旁组织在多数患者中呈正常表达(T-cadherin阳性).结论 T-cadherin基因在HCC中异常表达,且与肝细胞癌的复发转移密切相关,有可能作为判断HCC预后的预测指标和药物研究靶点.     

周围型肺癌P16蛋白表达及与CT表现的关系研究

目的 探讨周围型肺癌中Ｐ１６蛋白的表达及与ＣＴ表现的关系。材料与方法 对５７例经手术病理证实的周围型肺癌患者进行胸部ＣＴ扫描，并应用免疫且化技术ＳＡＢＣ法对全部手术切除标本进行Ｐ１６蛋白检测。结果 肺癌组织中Ｐ１６蛋白阳性表达率（５０．９‘％）明显低于癌旁正常肺组织（９３％）（Ｐ〈０．０１），且同时随肿瘤分化程度的降低而降低（Ｐ〈０．０１）。在ＣＴ表现中，当肿瘤直径〉３ｃｍ，出现深分叶、棘突征、瘤     

大肠癌P~(53)蛋白测定与临床生物学意义的相关研究

目的　探讨P53 蛋白表达与大肠癌的关系及临床生物学意义。方法　采用免疫组织化学技术对 32例大肠癌组织及 16例正常大肠组织中的p53 蛋白的表达进行观察和比较。结果　P53 在正常大肠组织中表达阴性 ,P53 蛋白在大肠癌组织中表达阳性率为 5 3 13%。P53 蛋白在大肠癌组织中的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、部位、大体分型、浸润深度、组织学类型、Ducks’分期及局部淋巴结转移无明显关系 (P >0 .0 5 )。P53 蛋白表达与大肠癌伴肝转移相关 (P <0 .0 5 )。结论　P53 蛋白在大肠癌组织中表达阳性 ,尤以伴肝转移者为著。p53 蛋白过度表达提示预后不良。     

KAI1和P53在滋养细胞疾病中的表达及意义

目的：探讨KAI1和P53蛋白在滋养细胞疾病中的表达及与滋养细胞肿瘤侵袭的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测正常早孕绒毛组织及滋养细胞肿瘤组织中KAI1和P53蛋白的表达情况。结果：①KAI1在恶性葡萄胎及绒癌中的表达与正常早孕绒毛及葡萄胎比较明显下降（P〈0．05），KAI1的表达与滋养细胞肿瘤患者的年龄和浸润情况相关（P〈0．05）；②P53在恶性葡萄胎及绒癌中的表达与正常早孕绒毛及葡萄胎比较明显升高（P〈0．05）；③P53和KAI1表达之间无明显相关（P〉0．05，rs=-0．8）。结论：P53、KAI1对预测滋养细胞的恶变，判断预后有一定的参考价值。     

乙肝相关肝癌组织中Jagged-1的表达及其临床意义

 目的 观察乙肝相关肝癌组织中Jagged-1蛋白的表达及其临床意义。方法 收集2008-11至2012-06就诊并接受肝切除术治疗肝癌患者的110例乙肝相关肝癌组织及其对应的癌旁组织,通过组织芯片技术检测癌及癌旁标本中Jagged-1蛋白的表达水平,并分析其与临床指标和预后的关系。结果 组织芯片提示乙肝相关肝癌组织Jagged-1蛋白高表达率(44.5%)高于对应癌旁组织(22.3%)(χ²=12.16,P<0.0001)。Jagged-1蛋白的高表达水平与微血管侵润(microvascular invation,MVI)显著相关(P<0.001)。Jagged-1高表达组患者的1、3、5年生存率(87.5%、64.1%、46.5%)均低于低表达组(96.7%、84.5%、66.9%,P=0.0139)。结论 乙肝相关肝癌组织Jagged-1蛋白的高表达水平与肝癌的MVI及不良临床预后有关。     

乳腺癌P~(53)蛋白表达和微血管密度计数的临床意义

目的　探讨乳腺癌中P53蛋白表达和微血管密度 (MVD)计数间的关系及其临床意义。方法　应用S P免疫组织化学方法检测乳腺癌中P53蛋白的表达并对微血管密度进行计数 ,同时对结果进行分析。结果　乳腺癌和癌旁不典型增生组织P53蛋白的阳性率分别为 3 9 6% (3 8/96)和 8.9% (6/5 6)。组织学Ⅲ级癌P53蛋白阳性率 (5 5 .3 % ,2 1 /3 8)高于Ⅰ级癌 (2 0 .8% ,5 /2 4) (P <0 .0 5 )。乳腺癌P53蛋白的阳性率与淋巴结转移和ER状态相关 (P <0 .0 5 ) )。 96例乳腺癌平均MVD(5 1 .3± 1 7.0 )明显高于癌旁不典型增生组织 (2 9.3± 9.5 ) (P <0 .0 1 )。MVD计数与组织学分级 (P <0 .0 1 )和淋巴结转移 (P <0 .0 1 )密切相关 ,但与ER状态无关 (P >0 .0 5 )。MVD计数与P53蛋白表达呈正相关 ,与 5年生存率呈负相关。结论　联合检测P53蛋白表达和MVD计数不但可以作为乳癌患者的预后指标 ,而且对揭示早期乳腺癌是有帮助的。     

P16INK4A及Ki-67在宫颈腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨P 16INK4A及Ki-67蛋白在宫颈腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 选取61例宫颈腺癌(官颈腺癌组)及34例正常官颈组织(对照组)的石蜡标本,采用SP免疫组化法测定P16INK4A及Ki-67蛋白的表达,并对61例浸润性宫颈腺癌的临床及病理资料进行回顾性分析.结果 对照组正常宫颈腺上皮P16INK4A及Ki-67表达阳性率分别为23.53％、20.59％,而宫颈腺癌组分别为80.33％、81.97％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).P16INK4A的表达与宫颈腺癌的临床分期、宫颈间质浸润深度、肿瘤直径有关(P＜0.05),与宫颈腺癌的病理分型、肿瘤恶性程度及淋巴结转移无关(P＞0.05).Ki-67的表达与宫颈腺癌的病理分化程度、肿瘤直径及淋巴结转移有关(P＜0.05).子宫颈腺癌组织中P16INK4A与Ki-67的表达相关(P＜0.01).结论 联合检测P16INK4A及Ki-67蛋白表达可作为宫颈腺癌的辅助诊断方法,有较好的临床应用价值.     

唾液酸化Lewis X与P16蛋白在大肠癌表达的对比研究

为了探讨唾液酸化Lewis X和P16在大肠癌表达及其与肿瘤发生发展、浸润转移和预后的关系，应用免疫组化微波－LSAB法检测90例大肠癌唾液酸化Lewis X和P16蛋白的表达状况。结果显示，大肠癌组织唾液酸化Lewis X和P16表达阳性率分别为92.2%和42.2%，唾液酸化Lewis X高表达和P16低表达与大肠癌转移和预后有关，提示联合检测唾液酸化Lewis X和P16更有助于判断大肠癌恶性程序、预测生物学行为和评估患者预后。     

肝动脉栓塞化疗术对肝细胞癌bcl-2、fas和bcl-xl表达的影响

目的　探讨经导管肝动脉栓塞化疗术 (TACE)对肝细胞癌 (HCC)细胞凋亡相关蛋白bcl 2、fas和bcl xl表达的影响 ,评价TACE对HCC的疗效。资料与方法　经病理证实的HCC 6 3例 ,包括单纯手术组 4 2例 ,TACE组 2 1例(为TACE治疗 2次后有手术机会而行切除者 ) ;采用免疫组织化学SP法检测标本bcl 2、fas和bcl xl的表达情况 ,将两组结果进行对照分析。结果　TACE组fas表达阳性率为 4 7.6 2 % (10 /2 1) ,单纯手术组fas表达阳性率为 2 1.4 3%(9/4 2 ) ,二者之间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TACE组明显高于单纯手术组 ;TACE组bcl xl表达阳性率为 2 3.81%(5 /2 1) ,单纯手术组阳性率为 5 4 .76 % (2 3/4 2 ) ,二者之间亦有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TACE组明显低于单纯手术组 ;bcl 2的表达阳性率在单纯手术组和TACE组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　TACE治疗可以促进肝癌细胞fas表达增高 ,使bcl xl表达降低 ,从而在总体上增加肝癌细胞凋亡率 ,促使肿瘤缩小。关于TACE治疗对bcl 2的影响有待进一步研究     

大肠癌组织中Skp2、P27kip1蛋白的表达及其临床意义

 目的 了解Skp2和P27kip1蛋白在大肠癌组织中的表达并探讨其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化法检测正常大肠黏膜、大肠腺瘤性息肉及大肠癌组织中Skp2、P27kip1蛋白表达情况,分析与临床病理参数的关系.结果 从正常大肠黏膜、大肠腺瘤性息肉、大肠癌中,Skp2表达逐渐增强,P27kip1表达逐渐减弱;随肿瘤细胞分化程度降低、浸润程度加深、病理分期延迟及伴有淋巴结的转移,P27kip1表达率降低,Skp2表达率升高(P＜0.05);二者的表达均与大肠癌患者的年龄、性别无关(P＞0.05).大肠癌组织中Skp2与P27kip1表达呈显著负相关性(r=-0.747,P＜0.01).结论 大肠癌中Skp2和P27kip1分别扮演了原癌基因和抑癌基因蛋白的作用;过表达的Skp2可能通过泛素-蛋白酶体途径,对细胞周期蛋白激酶抑制剂P27kip1的降解而共同参与大肠癌的发生和发展;检测二者的表达可为判断大肠癌恶性进程和预后提供重要参考.     

CyclinD1、P27、CK19、ALDH1A1在乳腺病变中表达及意义

目的探讨细胞周期D1(Cyclin D1)、P27、细胞角蛋白19(CK19)、ALDH1A1在乳腺病变中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测79例乳腺组织标本(包括正常乳腺、乳腺增生、乳腺导管原位癌、乳腺浸润性导管癌)中Cyclin D1、P27、CK19、ALDH1A1的表达情况,分析其与乳腺癌干细胞增殖及乳腺病变组织分化程度之间的关系。结果正常乳腺、乳腺增生、乳腺导管原位癌、乳腺浸润性导管癌中Cyclin D1、ALDH1A1的表达逐渐上升,P27、CK19的表达逐渐下降;乳腺正常及良性增生组织中Cyclin D1、CK19、ALDH1A1的表达明显低于乳腺导管原位癌及浸润性导管癌(P<0.05);乳腺正常及良性增生组织中P27的表达明显高于导管原位癌及浸润性导管癌(P<0.05)。结论 Cyclin D1、P27相互作用调节乳腺癌干细胞的发生及发展过程,CK19、ALDH1A1可作为乳腺癌诊断及恶性程度评估的参考指标。