经腹壁超声引导下宫腔手术的初步体会

宫腔手术是妇产科最常见手术之一,但操作有一定肓目性,当子宫位置屈曲或是异常妊娠时,手术有一定危险性。超声引导下行宫腔手术,可以改善上述情况。我院自1987年12月开始,经腹壁超声引导下宫腔手术69例。现将超声定位协助手术的体会总结如下。     

细胞移植治疗帕金森病的研究进展

目的:根据近年细胞移植治疗帕金森病的近况,认识细胞移植治疗帕金森病的最新进展及临床应用前必须解决的技术难题。资料来源:应用计算机检索Pubmed 2000-01/2006-10细胞移植治疗帕金森病的文章,检索词为"Cells transplantation,Parkinson disease",并限定文献种类为English。资料选择:对资料进行初审,选取包括细胞移植与帕金森病相关的文献,开始查找全文。纳入标准:①细胞移植在神经系统疾病中的应用。②细胞移植与帕金森病。排除标准:综述文献、重复研究、Meta分析类文章。资料提炼:共收集到175篇关于细胞移植与帕金森病的文献,纳入30篇文献。资料综合:细胞移植治疗帕金森病的主要细胞来源有肾上腺髓质细胞、胎儿中脑腹侧组织细胞、异种移植、神经干细胞、骨髓干细胞、胚胎干细胞等。其临床应用前仍存在许多技术难题,如移植物的来源、移植部位与方法、移植环境等。随着这些基础研究和临床治疗上难题的解决,细胞移植必将成为治疗帕金森病的重要手段。结论:细胞移植尤其是胚胎干细胞的应用,将为帕金森病的治疗带来新的曙光。     

妇科恶性肿瘤腹腔镜手术培训模型的建立

目的构建满意的妇科腹腔镜恶性肿瘤手术猪模型,并规范猪模型的手术步骤。方法采用全身麻醉的10头雌性猪,仰卧位,穿刺3个操作孔和1个检查孔,分别放置手术器械和腹腔镜镜头。记录子宫+输卵管卵巢切除、子宫角缝合、盆腔淋巴结切除、腹主动脉旁淋巴结切除以及膀胱修补操作的时间、失血量和并发症情况。结果共完成子宫+输卵管卵巢切除10例,子宫角缝合20例,10例盆腔淋巴结切除,10例腹主动脉旁淋巴结切除,膀胱修补10例。所有手术培训项目均顺利完成,统计学结果提示各类型手术的手术时间、术中出血量呈正态分布,无并发症发生。结论猪解剖特点可满足妇科常见类型手术的培训。使用猪作为妇科腹腔镜手术模型可以缩短手术医师适应腹腔镜手术操作过程和新器械的磨合过程。     

三种途径子宫切除术治疗子宫内膜异位症的临床效果分析

目的比较腹腔镜子宫切除术（LH）、阴式子宫切除术（TVH）与经腹子宫切除术（A11）治疗子宫内膜异位症的临床效果。方法回顾性分析2008年10月至2013年10月于解放军总医院诊断为子宫内膜异位症并行全子宫切除术治疗的232例患者临床资料、其中94例行LH（LH组）,85例行TVH（TVH组）,53例行AH（AH组）。对3组的术前一般情况、临床表现、手术结局及术后并发症等进行比较、结果LH、TVH与AH组手术时间分别为（160±43）、（116±30）和（213±31）min,m血量分别为（295±203）、（112±87）及（856±529）ml,组间两两比较差异均有统计学意义（P〈0．05）;术后件院时间分别为（6．2±2．0）、（7．1±4．6）及（9．4±3．3）d,AH组分别与LH组及TVH组组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）;术后发热发生率、脏器损伤率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论TVH具有创伤小、住院时间短等优点,在术者经验丰富、充分掌握手术技巧的前提下,对于盆腔粘连严重的子宫内膜异位症患者来说呵能是最好的选择。     

血清剥夺与β-巯基乙醇联合诱导孕足月羊水干细胞向神经元样细胞分化

背景：羊水干细胞是一种新的干细胞来源,具有不同于成体间充质干细胞的生物特性。目前有关羊水干细胞的研究多数以孕中期羊水为基础,对孕足月羊水所知甚少。 目的：探讨孕足月羊水干细胞向神经元分化的可能性。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2007-10/2008-08在解放军总医院妇产科及解放军军事医学科学院干细胞及再生医学研究室完成。 材料：孕足月羊水来自在解放军总医院行剖宫产、排除胎儿畸形的孕38~40周健康孕妇。 方法：贴壁法从羊水中体外分离培养羊水干细胞,胰酶-EDTA消化传代。取第四五代细胞,用含1 mmol/Lβ-巯基乙醇、体积分数为20%胎牛血清、10 μg/L碱性成纤维生长因子的低糖培养基预诱导24 h,去除培养液,洗涤后加入含5 mmol/Lβ-巯基乙醇的无血清低糖培养基向神经元方向诱导4.0~5.0 h;对照组不加任何诱导剂。 主要观察指标：孕足月羊水干细胞的形态及免疫表型,诱导后向神经元样细胞的分化。 结果：培养的羊水干细胞呈梭形,漩涡状排列,间质干细胞来源标志CD105,CD29及I类组织相容性抗原HLA-ABC均呈阳性表达,胚胎干细胞标志性基因SSEA-4亦呈阳性表达,不表达造血干细胞标志。诱导后,细胞形态发生明显改变,胞浆回缩,出现类似轴突的细长的两极或多极突起,免疫荧光染色神经元特异性烯醇化酶呈阳性表达。 结论：在血清剥夺与β-巯基乙醇联合诱导条件下,孕足月羊水干细胞具有向神经元样细胞分化的潜力。     

卵巢癌分子靶向治疗的研究进展

在女性生殖器官恶性肿瘤中,卵巢癌发病率占第三位,但病死率一直居第一位[1]。这是因为大多数卵巢癌发病隐匿,约75%患者一经发现已属于晚期。对于晚期卵巢癌,肿瘤细胞减灭术加铂类/紫杉醇联合化疗,可暂时缓解病情,然而复发率却高达85%以上。复发性卵巢癌耐药性明显增加,使用化疗药物缓解率不足30%,且化疗药物显著的毒副作用限制了使用剂量。因此,迫切需要寻找新的、特异性强而患者可耐受的治疗卵巢癌的有效方法。近年来,分子靶向治疗的飞速发展使这一希望日趋成为可能。     

筛查某家族性局灶节段硬化性肾小球肾炎家庭的NPHS2基因

目的 为某个有两个儿童患者死于局灶节段硬化性肾小球肾炎的家庭查找致病原因.方法 取孕18周后的羊水进行染色体检查,同时提取夫妇静脉血DNA、死亡男童肾组织DNA及胎儿羊水DNA,进行NPHS2基因检测.结果 胎儿染色体未见异常;孕妇NPHS2基因检测发现c.954C＞T变异,此改变位于第8外显子,不引起氨基酸的改变,为...     

羊水来源干细胞的研究进展

羊水中含有来自胎儿的细胞。从20世纪70年代开始,从孕中期羊水中分离培养胎儿细胞进行染色体核型分析成为最常用的产前诊断技术。近年,有关羊水中干细胞的研究逐渐引起关注。由于羊水取材方便,对母婴创伤小,没有伦理学方面的限制,使羊水干细胞有希望成为理想的种子细胞来源之一。有关羊水干细胞的研究尚处于起步阶段,现对羊水干细胞的来源、培养方法、生物特性及应用前景作一综述。     

胎儿胰岛中干细胞的分离与鉴定

目的:已证实胰腺来源的干细胞或祖细胞在体内外均能分化为胰岛素分泌细胞,但成人胰腺来源的干细胞增殖潜能较差.实验旨在分离并鉴定胎儿胰岛样细胞团中的干细胞,为糖尿病细胞移植治疗寻找可用的种子细胞.方法:实验于2006-10/2007-07在解放军军事医学科学院输血研究所干细胞与再生医学研究室完成.①对象:所用胰腺标本取自流产胎儿,胎龄14～20周,由解放军总医院妇产科提供,胎儿组织的使用得到孕妇本人的知情同意,实验经医院医学伦理委员会批准.②实验方法:无菌条件下取出胎儿胰腺,37 ℃下用0.5 g/L的V型胶原酶进行消化,分离得到胎儿胰岛样细胞团,悬浮培养,加入含体积分数为0.1胎牛血清、1 mmol/L丙酮酸钠、1 mmol/L谷氨酰胺、71.5 μmol/L β-巯基乙醇、100 U/mL青霉素和100 mg/L链霉素的RPMI1640培养基,每日转皿除去贴壁细胞,72 h后挑选出悬浮生长的胰岛样细胞团予以贴壁培养,待长成上皮样单层细胞克隆时传代.③实验评估:将悬浮培养的胰岛样细胞团行双硫腙染色.另将少部分胰岛样细胞团及第4代细胞种植于24,96孔板中,采用免疫荧光染色检测细胞表面分子标志物增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、角蛋白19、波形蛋白、胰岛素、胰高血糖素、CD29的表达情况.MTT法分析第6代细胞的生长曲线.结果:①悬浮及贴壁培养的胰岛形态:刚分离出的胰岛呈簇状,边缘不规整,细胞排列较疏松.贴壁后胰岛样细胞团由簇状逐渐展开形成上皮样单层细胞克隆.传代后细胞形态发生改变,呈梭形或分支样,增殖较快.②悬浮培养的胰岛双硫腙染色检测:分离得到的胎儿胰岛样细胞团双硫腙染色呈阳性表达.③细胞表面标志免疫荧光染色检测:贴壁的第1代细胞大部分呈增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、波形蛋白阳性,极少数细胞呈胰岛素、胰高血糖素阳性,而角蛋白19为阴性.传代后仍呈增殖细胞核抗原、胰十二指肠同源盒基因1、Nestin、波形蛋白阳性,角蛋白19弱阳性,而胰岛素、胰高血糖素为阴性,所有细胞均不表达CD29.④细胞生长曲线:传代第3天细胞进入对数生长期,第6天进入平台期,细胞生长曲线呈"S"形.结论:由胎儿胰岛成功分离并培养出具有自我更新和良好增殖能力的干细胞,稳定表达多种胰腺干细胞特征性标志,而不表达胰岛细胞标志物,提示该细胞可作为候选的胰岛干细胞用于糖尿病细胞移植治疗.     

荧光原位杂交技术检测宫颈癌及癌前病变组织中hTERC基因的扩增及临床意义

目的检测子宫颈病变组织中人端粒酶RNA基因(hTERC)的异常扩增情况,探讨其临床病理学意义。方法收集不同宫颈病变组织195例,包括慢性宫颈炎33例,CINⅠ级34例,CINⅡ-Ⅲ级37例,宫颈鳞癌30例,宫颈腺癌61例。应用双色荧光原位杂交(FISH)技术检测宫颈病变组织中hTERC基因的异常扩增情况,并分析其与临床病理学参数的关系。结果 hTERC基因扩增的阳性率分别为:慢性宫颈炎3.03%,CINⅠ级29.41%,CINⅡ-Ⅲ级72.97%,宫颈鳞癌100%,宫颈腺癌91.8%。宫颈鳞癌及腺癌hTERC基因扩增率明显高于CINⅠ级、CINⅡ-Ⅲ级(P<0.05),CINⅡ-Ⅲ级hTERC扩增率显著高于CINⅠ级(P<0.05),但宫颈鳞癌与腺癌hTERC基因扩增率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论应用FISH技术检测hTERC基因的异常扩增可作为组织学诊断困难病变的确诊、病变预测及治疗后风险评估手段。