高效液相色谱-单四极杆质谱仪结合同位素峰形校正检索技术快速确定头孢呋辛水溶液降解杂质

目的:探索一种利用同位素峰形校正检索技术(CLIPS),在低分辨率单四极杆液质联用仪上,实现对未知杂质元素组成的分析,进而快速推断降解杂质结构的方法。方法:头孢呋辛对照品经水浴降解获得未知杂质混合样品,用HPLC-MS进行分离,并获得降解产物的准分子离子和碎片离子的同位素峰形;用元素组成已知的同位素峰做校正,对未知降解杂质进行CLIPS校正分析,确定元素组成,再根据质谱谱图信息初步确定其结构式。结果:水浴降解溶液中7个降解杂质得到了有效分离。用CLIPS确定了降解杂质的准分子离子和部分碎片离子的元素组成,并初步推测出其中4个降解杂质的结构。结论:同位素峰形校正检索技术结合高效液相色谱-单四极杆质谱联用仪可以确定降解杂质的元素组成,进而帮助降解杂质的结构解析和确证。     

利奈唑胺主要降解产物的结构鉴定

目的:对利奈唑胺主要降解产物的结构进行鉴定。方法:对利奈唑胺原料药进行强力破坏试验,采用高效液相色谱法对降解产物进行分析,应用LC-MS对3个主要的降解产物进行结构鉴定,并利用合成所得杂质对照品对降解产物的结构进行了确证。结果:3个主要的降解产物分别为利奈唑胺的全水解物、开环水解物以及氨基物。结论:利奈唑胺在碱性和酸性条件下的降解产物不相同。在碱性条件下的降解产物主要为全水解物和开环水解物,而在酸性条件下的降解产物主要为氨基物。     

利用LC-MS和二维色谱相关光谱技术识别HPLC色谱图中杂质峰

采用二维色谱相关光谱技术,实现质控HPLC方法与LC-MS色谱系统色谱峰的相互识别。本文采用HPLC-DAD(中国药典2010版方法)得到头孢唑肟和头孢地尼混合降解杂质的色谱图,建立降解杂质标准色谱光谱数据;采用LC-MS的方法结合MassWorks软件的应用鉴别出头孢唑肟和头孢地尼的主要降解产物;通过计算光谱相关性对杂质色谱峰进行归属。色谱二维光谱相关法在不同色谱系统下能够准确定性,在没有杂质对照品的情况下,可为质控HPLC方法中的杂质峰的归属提供新的途径和新的思路。     

盐酸博宁霉素研发中有机杂质峰的确认方法探讨

目的 探讨对1.2类新药盐酸博宁霉素研发过程中有关物质分析中杂质峰确认的最佳方法.方法 通过对各国药典中常用的5种杂质峰确认方法的比较,证明系统适用性对照品(混合杂质对照品)法具有明显的优势.通过对盐酸博宁霉素杂质谱的深入研究,建立了系统适用性对照品;该对照品含有盐酸博宁霉素化学半合成工艺和微生物发酵工艺涉及的全部工艺杂质,可用于对盐酸博宁霉素研发过程中有机杂质峰的确认.结果 采用系统适用性对照品结合参考图谱法能快速、准确的确认盐酸博宁霉素中的诸有机杂质.结论 在杂质谱研究的基础上,以系统适用性对照品为主,结合其他峰确认方法能准确确认新药中有机杂质.     

利伐沙班降解杂质的合成

目的 为了加强对Xa因子抑制剂类抗凝药利伐沙班原料药的质量控制,合成了利伐沙班的3个降解杂质。方法 利伐沙班(1)经开环反应得到杂质A;杂质A经水解反应得到杂质B;杂质A经取代反应得到杂质C。结果 合成的3种降解杂质的结构经1H-NMR、13C-NMR和MS确证,纯度经HPLC检测均达到97.1%以上。结论 3个杂质可作为利伐沙班原料药质量控制的杂质对照品。     

盐酸氨溴索注射液降解杂质结构与降解途径分析

目的：对盐酸氨溴索注射液在氧化和光照条件下强制破坏产生降解杂质的结构和来源进行研究。方法：通过对盐酸氨溴索注射液在各条件下进行强制破坏,产生降解杂质,采用VisionHT C18色谱柱（250 mm × 4.6 mm,5 μm）。以0.01 mol·L-1磷酸氢二铵溶液（用磷酸调节pH至7.0）-乙腈（50∶50）洗脱,分离制备有关物质,采用质谱法,对主要降解产物的结构进行研究。归属杂质来源,推测形成路径。结果：确定了盐酸氨溴索注射液中8个降解杂质的分子结构,并明确了其质谱裂解反应机理。结论：成功推测了盐酸氨溴索注射液强制氧化和光降解产物的结构,并阐明其产生的路径。     

采用HPLC法测定乙酰半胱氨酸颗粒中的主要降解产物

目的采用HPLC法测定乙酰半胱氨酸颗粒中的主要降解产物。方法色谱柱：C18柱;流动相：以硫酸铵缓冲液（取硫酸铵2．25g,庚烷磺酸钠1．82g,用水稀释至450mL,用7mol／L的盐酸溶液调节pH值至2．0）-甲醇（93：7）;检测波长：205nm;进样量：10恤L。结果经验证,经光照、氧化、酸、碱、高温破坏的乙酰半胱氨酸的降解产物峰与主成分峰及辅料峰的分离良好,其中该制剂的主要降解产物杂质C峰与其他杂质峰分离良好;乙酰半胱氨酸的检测限为0．5ng;杂质C的相对校正因子为0．9,因此采用不加校正因子自身对照法可准确测得杂质c含量。结论本法专属性强,操作简便,灵敏,可用于乙酰半胱氨酸颗粒中的主要降解产物杂质C含量。     

LC-MS-MS法分析伏立康唑的碱降解产物

目的:建立以液相色谱-串联质谱法快速分析伏立康唑的碱降解产物的方法。方法:借助色谱-串联质谱技术,比较并分析伏立康唑对照品和其碱降解产物的相对分子质量、碎片、光谱特征等信息。结果:伏立康唑与其降解产物能有效分离,2个主要降解产物分别为去4-乙基-5-氟嘧啶的同分异构体。结论:该方法快速、灵敏、专属性强,可用于推测伏立康唑降解产物的结构。     

大蒜辣素提取物及其降解产物的HPLC-MS/MS研究

对大蒜辣素提取物及其降解产物进行研究。采用HPLC-MS/MS一级质谱扫描总离子流、HPLC保留时间、二级质谱或对照品对照进行结构鉴定。并对大蒜辣素提取物在水溶液和不同浓度乙醇溶液中的稳定性分别进行了考察。结果表明大蒜辣素提取液中主要含有5种硫代亚磺酸酯类成分。水溶液于-20 ℃存放3个月, 各成分相对稳定, 而随着乙醇浓度增加, 可见明显的降解, 并对降解产物进行了初步鉴定。     

5个氨基糖苷类抗菌药降解杂质的合成

降解产物是氨基糖苷类抗菌药共有的一类杂质，药典对其限度均有要求。文章报道了妥布霉素、西索米星、奈替米星、卡那霉素和阿米卡星降解杂质的合成方法，通过酸水解法或衍生化氧化裂解法合成了4个一级降解杂质与1个共有的二级降解杂质，HPLC纯度均大于95%。这5个降解杂质的结构经¹H NMR和LC-MS确证，可作为氨基糖苷类抗菌药质量控制的杂质对照品。     

联合使用反相液相色谱,柱切换以及两性离子交换-反相亲水性相互作用混合模式色谱-质谱法分析抗生素中的杂质

建立并优化了一种二维柱切换、高效液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）系统,用于分析抗生素及其有关物质。在一维色谱中,采用两性离子交换-反相亲水性相互作用（ZIC-RP-HILIC）混合模式色谱柱对目标杂质进行分离,并采用液质联用技术（LC-MS/MS）进行检测。在二维色谱中,采用常规的反相LC色谱柱对供试品及其杂质进行分析。ZIC-RP-HILIC混合模式色谱系统的流动相为一种适用于LC-MS/MS的可挥发性缓冲盐,能够提高杂质的离子化效率,便于对目标杂质进行结构解析。直接采用ZIC-RP-HILIC-MS系统,对使用离子对反相色谱分离的抗生素杂质进行定性分析。ZIC-RP-HILIC混合模式色谱与反相LC色谱系统之间的正交性,进一步保证了杂质检测的全面性。此方法的优势体现在对青霉素V钾,苯唑青霉素钠、头孢曲松钠的杂质分析中。另外,该方法便于进行抗生素的杂质谱分析,并可用于其它药物的杂质分析。     

高效液相色谱法测定瑞舒伐他汀钙片中8种有关物质的含量

目的：建立瑞舒伐他汀钙片有关物质测定方法;方法制备瑞舒伐他汀钙片中8种杂质,以色谱柱：Agilent extend-C18（4.6 mmx250 mm,5μm）;流动相：0.05 M磷酸二氢钠缓冲液（用磷酸调pH至2.0）：乙腈：甲醇=46：20：34;检测波长：242 nm;流速：0.7 mL·min-1为色谱条件,采用对照品对照法计算瑞舒伐他汀钙片中8种杂质的含量;结果瑞舒伐他汀非对映异构体、5-氧化-瑞舒伐他汀、瑞舒伐他汀-5S-内酯在3批瑞舒伐他汀钙片中含量最高;结论规定瑞舒伐他汀钙片中杂质A、B、C的含量不得过0.5%,杂质D、E、F、G、H不得过0.2%,单杂不得过0.2%,总杂质不得过1.5%。     

注射用头孢呋辛钠中降解杂质的研究

目的 对注射用头孢呋辛钠中4个未公开报道的降解杂质进行研究,并推导其化合物结构。方法 采用YMC C8色谱 柱(4.6 mm×50 mm, 3 μm);以0.005 mol/L醋酸铵溶液-乙腈为流动相梯度洗脱,流速0.5 mL/min。离子源：电喷雾离子(ESI)源。 结果 注射用头孢呋辛钠中4个未知杂质得到有效分离,使用Q EXACTIVE高分辨质谱确定了杂质的分子量,并依据头孢类化合 物的裂解及降解理论推测出其结构与形成机理,与头孢类已知杂质相异,杂质Ⅳ为本品特有的氨降解杂质。结论 本方法操作 简便,灵敏度高,可用于评价注射用头孢呋辛钠中的未知杂质,同时,研究结果为注射用头孢呋辛钠的质量标准制订和质量控 制提供了重要的参考依据。     

长春西汀注射剂中有关物质定位的数字化研究

目的：用相对保留时间（RRT）的方式定位长春西汀注射剂4个已知杂质。方法：考察长春西汀4个杂质的RRT对不同的色谱仪、试剂、色谱柱及色谱条件的耐用性,确定理想的色谱方法。结果：确定流动相0．2mol·L^-1醋酸铵溶液-乙腈（40：60）（pH6．83）及不同品牌的5根色谱柱,杂质a,d,b,c和主成分的RRT分别为0．4,0．66,0．78,0．87和1。结论：通过对此方法的耐用性考察,探讨了杂质对照品定位数字化的影响因素和应对方法,希望对今后标准研究工作具有一定的借鉴作用。     

对《中国药典》2010年版利巴韦林注射液有关物质检查方法的探讨

目的：对利巴韦林注射液有关物质检查方法进行探讨。方法：按照《中国药典》2010年版二部利巴韦林注射液有关物质检查的方法,对利巴韦林注射液进行破坏性试验,同时对利巴韦林的降解产物进行考察。结果：利巴韦林杂质峰与氯化钠峰难以分开。因此,利巴韦林注射液处方中如有氯化钠的存在,将干扰利巴韦林注射液有关物质的检查。结论：建议有关物质检测时扣除氯化钠峰的影响,或者企业在利巴韦林注射液的处方中标注氯化钠的量或不加氯化钠。     

复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中盐酸异丙嗪和氯氮的有关物质分析

目的:建立测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中盐酸异丙嗪和氯氮产生的有关物质。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为ZORBAX SB-C8,流动相为0.05 mol/L磷酸二氢铵(p H 3.2)-甲醇(梯度洗脱),检测波长为254 nm;按照对照品保留时间归属各杂质及采用液质联用法确定氯氮中的杂质,面积归一化法计算51批10个企业样品中有关物质的量。结果:主成分与有关物质能有效分离,且空白辅料和其他组分对检测成分未见干扰,盐酸氯丙嗪和氯氮中杂质检测限分别为2.5、2 ng;51批次样品检查结果显示盐酸异丙嗪的杂质量较低(均低于1%),而氯氮的杂质量普遍较高(大多在2%⁵%),且后者中的主要杂质为7-氯-5-苯基-1,3-二氢-1,4-苯并二氮杂-2-酮(4-氧化物)。结论:本方法可用于分析复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中盐酸异丙嗪和氯氮产生的有关物质。     

盐酸安非他酮缓释片中的有关物质研究

目的建立同时测定盐酸安非他酮缓释片中3种杂质的反相HPLC方法,并对未知杂质进行定性研究。方法采用Agelar Venusil MP C18（4.6 mm×150 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-三氟乙酸-水（10：0.04：90）为流动相A,乙腈-三氟乙酸-水（95：0.03：5）为流动相B,梯度洗脱,检测波长226 nm,对已知杂质进行定性、定量分析。未知杂质用制备液相色谱纯化,再采集质谱和核磁共振谱的数据,用于结构确定。结果在选定的色谱条件下,盐酸安非他酮与各杂质峰均能良好的分离,方法学考察符合分析检测要求。根据质谱和核磁共振谱数据,对分离提纯的未知杂质进行结构确认。结论建立的方法简便、灵敏,专属性好,可同时测定盐酸安非他酮缓释片中3种杂质,对未知杂质结构的确定,为盐酸安非他酮的质量研究提供了依据。     

硫酸卷曲霉素的质量评价及标准提高研究

目的 建立新方法对硫酸卷曲霉素进行补充检测,综合现行标准检验结果对其质量现状进行评价.方法 采用Agela Venusuil XBP C18 （L）色谱柱,以磷酸盐缓冲液（pH 2.3）（0.2 mol·L^-1磷酸二氢钾-0.015 mol·L^-1的己烷磺酸钠溶液,用磷酸溶液调节pH至2.3）-乙腈（93：7）为流动相A,以磷酸盐缓冲液（pH 2.3）-乙腈（90：10）为流动相B,梯度洗脱,流速1.0 mL,min^-1,柱温25℃,检测波长为268 nm,测定了硫酸卷曲霉素的有关物质、组分及含量;并依据现行法定质量标准,对硫酸卷曲霉素原料及制剂进行检验,分析国内硫酸卷曲霉素的总体质量水平;对其有关物质进行了杂质谱分析.结果 该方法分离了卷曲霉素ⅠA、ⅠB、ⅡA、ⅡB四个主成分,有关物质测定方面制剂的最大单杂在0.4％～1.2％之间,总杂在1.3％～4.0％之间;组分及含量测定方面制剂的Ⅰ组分均值为96.2％,含量均值为106.1％;杂质谱研究结果显示硫酸卷曲霉素制剂中主要杂质23个,其中3个未知杂质含量均较高,各企业制剂杂质谱基本固定.结论 目前国产硫酸卷曲霉素质量状况较好;硫酸卷曲霉素重金属、有关物质、组分及含量的标准提高更有助于产品质量的严格控制;杂质谱研究为今后目标杂质的控制提供了参考.     

离子色谱-抑制电导检测法同时测定唑尼沙胺原料中有关杂质

目的建立一种快速、灵敏的离子色谱法，以同时测定抗癫痫药唑尼沙（zonisamide，ZNS）原料药中有关杂质1，2-苯并异嗯唑-3-甲基磺酸钠（BOS—Na）和1，2-苯并异嗯唑-3-乙酸（BOA—H）以及两种一般杂质Cl-和SO4^2-。方法采用离子交换色谱法，DionexIonpacAS4A—SC型阴离子分析柱，淋洗液为0．3mmol／LNa2C03和1．6mmol／LNaHCO，的混合溶液，电导检测。结果各待测组分在所设计的质量浓度范围内线性关系良好（r=0．9975—0．9995），加样回收率为97．4％-103．4％。结论所建立的分析方法快速、准确、选择性好，可同时测定ZNS中有关杂质BOS—Na和BOA-H以及一般杂质Cl-和SO4^2-。     

高效凝胶色谱法测定注射用头孢哌酮钠他唑巴坦钠中的高聚物

目的建立测定注射用头孢哌酮钠他唑巴坦钠(4∶1)中高聚物的高效凝胶色谱法。方法采用Ohpak SB-802.5HQ凝胶色谱柱,以pH=7.0的磷酸盐缓冲液[0.03 mol/L磷酸氢二钠溶液-0.03 mol/L磷酸二氢钠溶液(61∶39)]-乙腈(70∶30)为流动相,主成分自身对照法定量。结果建立了在该系统下以保留时间小于头孢哌酮钠所有杂质峰面积的总和进行质量控制的检测方法。结论所用方法简便,结果可靠,可用于注射用头孢哌酮钠他唑巴坦钠(4∶1)中高聚物的检测。