牛血小板TGF—β提取,纯化及其诱导小鼠股骨成骨作用

ＴＧＦ－β广泛存在于多种正常组织细胞及转化细胞中，不同种属间高度同源。目前认为血小板是ＴＧＦ－β最好的组织来源。本实验以牛血小板为原料，采用酸醇抽提方法，提取血小板蛋白。相继进行两次Ｂｉｏ－ＧｅｌＰ６０柱层析，分离纯化出其中分子量为２５ｋＤａ的ＴＧＦ－β。雄性昆明小鼠４０只，随机分成实验组和对照组。在实验组动物股骨中下段前方骨膜下注射ＴＧＦ－β溶液２０ｕｌ（４００ｍｇ）；在对照相应部位注射ＰＢＳ溶     

转移生长因子—β,碱性成纤维细胞生长因子诱导人成骨细胞表达血小板衍生生

目的 探讨转移生长因子（ＴＧＦ）－β、碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对人成骨细胞血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）－ＢｍＲＮＡ表达的影响及其意义。方法 体外分离培养人成骨细胞。在体外培养的成骨细胞中分别加入１０、２０、４０、８０、１６０ｕｇ／Ｌ梯度浓度的ＰＤＧＦ－ＢＢ培养细胞２４ｈ,以摄取＾３Ｈ－ＴｄＲ为细胞增殖指标检测细胞增殖状况。以４ｕｇ／Ｌ的ＴＧＦ－β和１０ｕｇ／Ｌ的ｂＦＧＦ培养细胞２４ｈ,寡核苷酸探针检测细胞ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ的表达。结果 １０～１６０ｕｇ／Ｌ的ＰＤＧＦ－ＢＢ可促进成骨细胞增殖（Ｐ〈０．０５）。在普通培养条件下,细胞下表达ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ;当培养体系中加入ＴＧＦ－β和ｂＦＧＦ,可见ＰＤＧＦ－ＢｍＲＮＡ的表达。结论 ＰＤＧＦ－Ｂ基因的表达可能是骨组织生长的储备因素,ＴＧＦ－β和ｂＲＮ     

蛋白激酶A在转化生长因子β-1刺激增生性瘢痕成纤维细胞增殖中的作用

目的：探讨蛋白激酶Ａ在转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）刺激增生性瘢痕和正常人皮肤皮纤维细胞（ＨＳ＿ＦＢ和ＮＳ－ＦＢ）增殖中的信号转导作用。方法：利用＾３２Ｐ掺入底物法测定ＨＳ－ＦＢ和ＮＳ－ＦＢ的ＰＫＡ活性;使用直接计数法和ＭＴＴ法测定ＴＧＦ－β１和ｃＡＭＰ、Ｈ７等刺激两种细胞后增殖能力的变化。结果：ＮＳ－ＦＢ被ＴＧＦ－β１刺激后ＰＫＡ的活性短暂升高后很快恢复（３０ｍｉｎ内,但Ｐ〉０．０５）。ＨＳ－ＦＢ则在３０～６０ｍｉｎ降低（Ｐ〈０．０５）,１ｈ后恢复;ＨＳ－ＦＢ的ＰＫＡ活性比ＮＳ－ＦＢ低（但Ｐ〉０．０５）。ＴＧＦ－β１能强烈刺激两种细胞增殖（３０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）,对ＨＳ－ＦＢ的刺激作用更强（刺激６０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）。ｃＡＭＰ可抑制两种细胞增殖（６０ｍｉｎ后Ｐ〈０．０５）,Ｈ７有拟ＴＧＦ－β１的刺     

碱性成纤维细胞生长因子增强人重组骨形态发生蛋白-2诱导成骨的调节机理

目的：对ｂＦＧＦ增强ｒｈＢＭＰ－２诱导成骨的调节机理进行探讨。方法：２１０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分为３组,每组７０只,试验侧均位于右后肢。设立ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体、单纯牛松质骨载体为对照组,分别于术后１２ｈ～２１ｄ共１１个时间点取材,观察其诱导成骨过程。结果：ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ／聚乙烯吡咯啉酮／牛松质骨载体组在诱导间充质细胞增殖、分化,软骨细胞、新生骨形成方面均早于ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体组,成骨量优于ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体组,而单纯牛松质骨载体组在２１ｄ仅出现了少量增殖的间充质细胞。结论：ｒｈＢＭＰ－２和ｂＦＧＦ在诱导成骨调节中存在着协同作用。     

骨髓基质细胞体外培养骨发生潜能及条件研究

目的：建立一种骨髓基质细胞（ＢＭＳｃ）向成骨细胞转化的体外培养方法,观察其成骨过程,并探讨部分因子在ＢＭＳｃ转化及增殖中的作用。方法：将兔ＢＭＳｃ悬液进行体外培养,进行形态学观察和组织学检测;检测ｂＦＧＦ对ＢＭ－Ｓｃ的促增殖作用。结果：传代培养的细胞ＡＬＰ阳性率达８０％以上,细胞逐渐分化散在致密的岛状结构并分泌细胞外基质形成钙结节;ｂＦＧＦ能刺激ＢＭＳｃ的增殖。结论：培养的ＢＭＳｃ在体外仍具有成骨     

BMP,TGF-β和IL-1在创伤性异位化骨组织中的表达

为了探索创伤性异位化骨的形成机制,本研究采用免疫组织化学染色技术,观察骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）,转化生长因子β（ＴＧＦ－β）和白细胞介素１（ＩＬ－１）,在创伤性异位化骨组织中的表达,结果显示：ＢＭＰ,ＴＧＦ－β和ＩＬ－１在邻矿化组织的类软骨区中的一些细胞和正进行矿化的区域中的一些成骨细胞中表达。ＴＧＦ－β与ＩＬ－１还在邻矿化骨组织的血管内皮细胞中表达。ＢＭＰ,ＴＧＦ－β和ＩＬ－１的表达显示与创伤性异位化骨的形态学事件密切相关。我们认为ＢＭＰ,ＴＧＦ－β和ＩＬ－１相互协同,在创伤性异位骨形成发展中起重要作用。     

重组转化因子β1的表达及修复骨缺损的研究

目的 动用基因重组的方法,对人ＴＧＦ－β１的进行基因克隆,在大肠杆菌中表达,并进行重组ＴＧＦ－β１修复骨缺损的实验研究。方法 以ｐＢＶ２２０作为原核细胞表达载体,将ＴＧＦ－β１ｃＤＮＡ片段定向重组到ｐＢＶ２２０的多克隆位点上,构建原核细胞表达质粒ｐＴＧＦ－β１并转化至大肠杆菌中进行温度诱导表达。在兔顶骨两侧各制造直径为１０ｍｍ的骨缺损,左侧缺损植入纤维蛋白加重组ＴＧＦ－β１１００μｇ作为实验组,右侧缺损单纯植入纤维蛋白作为对照组,术后进行组织学和平均来重测量。结果 表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,该表达体系可高效表达ＴＧＦ－β１,其表达产物占菌体可溶性蛋白的２３％,用ＮＲＫ细胞检测本研究生产的ＴＧＦ－β１具有该蛋白的野生活性。实验组缺损区组织学及平均灰重明显优于对照组（Ｐ〈０．０５）。结论 ＴＧＦ－β原核表达体     

转化生长因子－β对骨膜成骨作用的研究进展

转化生长因子－β对骨膜成骨作用的研究进展宋守礼，朱盛修一、前言转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）是一族具有多种功能蛋白多肽。目前已鉴定出５个密切相关的成员，即ＴＧＦ－β＿１～ＴＧＦ－β＿５。ＴＧＦ－β＿（１、２、３）由哺乳动物的细胞表达，亦存在于骨组织中...     

TGF－β复合牛松质骨载体修复节段性骨缺损的实验研究

本实验将ＴＧＦ－β溶解后与经化学处理后的牛松质骨载体在负压下进行充分混匀，冻干后植于兔桡骨中上段１．５ｃｍ节段性缺损区。分别于４，８，１２，１６周取材，观察比较其骨愈合进程。结果显示，术后第１２周，实验组中缺损区完全骨性修复，其密度接近正常骨，可见骨髓腔结构；对照组１６周时仅骨折端及其尺侧骨膜有轻度反应性增生，呈骨不连征象，缺损区明显可见。实验提示，外源性ＴＧＦ－β可以启动骨生成过程，对骨折以及骨缺损的修复有促进作用。     

转化生长因子β1在骨折愈合过程中的表达

目的 从分子水平认识转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）在骨折愈合过程中的作用。方法采用地高辛（ＤＩＧ）标记寡核苷酸探针的原位杂交方法,光镜观察成年新西兰白兔桡骨中段骨折愈合过程中,ＴＧＦβ１、ｍＲＮＡ在骨痂区各组织细胞中的表达变化情况。结果 在骨折愈合早期,可见少量ＴＧＦβ１表达阳性的单核细胞、间充质细胞和血管内皮细胞。在膜内成骨期,ＴＧＦβ１在成骨细胞内有显著表达,尤其是多角形丰满成骨细胞。在成软骨     

烧伤后血粒细胞集落刺激因子的变化及其与感染的关系

作者观察了２０例烧伤患者（ＴＢＳＡ≥３０％）血清粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）的变化，探讨了其与感染的关系。８例ＴＢＳＡ≥５０％的患者，７例出现早期Ｇ－ＣＳＦ升高；５例ＴＢＳＡ≥７０％的患者，除１例有创面脓毒症而Ｇ－ＣＳＦ无变化外，其余患者均在伤后第１天即升高；１２例ＴＢＳＡ〈５０％的患者，７例升高但为时较晚。对１１例临床诊断为创面脓毒症患者的分析表明，Ｇ－ＣＳＦ的改变与感染有关，创面脓毒症时９     

TGF—β复合牛松质骨载体修复节段性骨缺损的实验研究

本实验将ＴＧＦ－β溶解后与经化学处理后的牛松骨骨载体在负压下进行充分混匀，冻干后撞于兔桡骨中上段１．５ｃｍ节段性缺损区。分别于４，８，１２，１６周取材，观察比较其骨愈合进程。结果显示，术后第１２周，实验组中缺损区完全骨性修复，其密度接近正常骨，可见骨髓腔结构，对照组１６周时仅骨折端及其尺侧骨膜有轻度反应性增生，呈骨不连征象，缺损区明显可见。实验提示，外源性ＴＧＦ－β可以启动骨生成过程，对骨折以及骨     

骨痂组织冰冻切片前胶原及转化生长因子－β1基因表达的原位定位

目的观察骨痂组织中前胶原、转化生长因子－β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１,ＴＧＦ－β１）基因表达模式,分析ＴＧＦ－β１在骨折愈合过程中的作用,探索骨组织冰冻切片原位杂交技术。方法采用不脱钙的大鼠骨痂组织冰冻切片进行原位杂交,观察骨痂组织中前胶原和ＴＧＦ－β１基因的表达,并与先前研究作对照。结果杂交信号清晰,定位良好,特异性高。骨折第１周末,成纤维细胞的Ⅲ型前胶原基因表达占主导,Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ阳性成骨细胞也出现于膜内化骨区。ＴＧＦ－β１在分化、增殖的成骨细胞以及接近成熟的软骨细胞有显著表达。骨折第２周末,Ⅱ型前胶原和ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ在成熟的软骨细胞大量表达,而Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达也明显增加。骨折第４周末,软骨骨痂基本被骨组织替代,见散在Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达阳性的成骨细胞。同时证实共有表型表达的现象存在。结论实验结果与以往有关研究结果的吻合,提示ＴＧＦ－β１在骨折愈合过程中,尤其在细胞分化、增殖中,起重要的调节作用。同时,也说明了此方法是一种快捷、灵敏、又不失特异性的骨组织原位杂交方法。     

肝再生过程中转化性生长因子β对肿瘤细胞生长的促进作用

目的 观察转化性生长因子β（ＴＧＦ－β）对肝癌细胞的促进作用。方法 ＢＵＦ大白鼠在接种７３１６Ａ肝癌细胞的同时应用人γＴＧＦ－β１治疗，并于接种后５～２０天测量肿瘤体积，γＴＧＦ－β１还分别加入混合淋巴细胞培养（ＭＬＲ）及７３１６Ａ肝癌细胞培养中，结果 大白鼠经ＴＧＦ－β治疗组的肿瘤体积显著大于对照组（Ｐ〈０．０１）；ＴＧＦ－β明显抑制了Ｔ淋巴细胞的ＭＬＲ反应（Ｐ〈０．０５），但对７３１６Ａ肝癌细     

成骨蛋白的生物学与应用

成骨蛋白又称骨形态发生蛋白，成骨蛋白－１（ＯＰ－１）又称ＢＭＰ－７与ＢＭＰ－２的均属转化生长因子β（ＴＧＦ－β）超家族成员，将重组人ＯＰ－１和ＢＭＰ－２应用于骨缺损的动物实验的结果令人满意，并已开始向临床应用过渡。     

烧伤创面应用生长因子后的DNA分析

将基因重组的人表皮细胞生长因子（ｒｈ－ＥＧＦ）、酸性成纤维细胞生长因子（ｒ－ａＦＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｒ－ｂＦＧＦ）和牛脑提取液（ｂＢＥ）外用于烧伤创面，旨在探讨皮肤组织和细胞ＤＮＡ的含量及周期变化。实验结果显示：烧伤创面经应用ｒｈ－ＥＧＦ，ｒ－ａＦＧＦ，ｒ－ｂＦＧＦ和ｂＢＥ后第５天与生理盐水组（ＮＳ）相比，创面愈合率、表皮细胞和全厚层皮肤组织的ＤＮＡ含量均高于ＮＳ组（Ｐ＜０．０１）；全厚层皮肤ＤＮＡ的流式细胞仪分析表明，应用生长因子各组的Ｓ期细胞数百分比均高于ＮＳ组（Ｐ＜０．０１），细胞分裂增殖旺盛，Ｇ期细胞不断进入Ｓ期，使Ｓ期细胞数增加，ＤＮＡ的合成和含量增加。提示：烧伤创面外用细胞生长因子可促进表皮细胞的增殖，加速创面的愈合。     

肝部分切除促进肿瘤细胞生长的机制研究

作者为验证肝部分切除对肿瘤细胞生长的促进作用，探讨其发生机制，将１８只ＢＵＦ大白鼠接种了７３１６Ａ肝癌细胞，并分为三组：Ａ组施行单开腹；Ｂ组行７０％肝切除；Ｃ组行单开腹并加转化性生长因子（ＴＧＦ－β）治疗。术后测量肿瘤体积；取Ａ组及Ｂ组术后５天的血清和脾粘着细胞加入混合淋巴细胞培养（ＭＬＲ）及ＣＣＬ－６４细胞培养中；将ＴＧＦ－β也加入ＭＬＲ和７３１６Ａ肝癌细胞培养中。结果表明，Ｂ组及Ｃ组大白鼠，肿瘤细胞生长速度明显增快（Ｐ＜０．０１）；Ｂ组的血清及脾粘着细胞明显抑制ＭＬＲ及ＣＣＬ－６４细胞增殖（Ｐ＜０．０５）；ＴＧＦ－β也显著抑制ＭＬＲ，但对７３１６Ａ肝癌细胞增殖无作用。提示肝部分切除后的血清中存在着ＴＧＦ－β生物活性，ＴＧＦ－β抑制了免疫活性细胞的增殖，从而造成了有利于肿瘤细胞生长的生物环境。     

β转化生长因子研究进展

β转化生长因子研究进展孙玉鹏，胡蕴玉β转化生长因子（ＴＧＦ－β）是一族具有多种功能的蛋白多肽，广泛存在于动物正常组织细胞以及转化细胞中，以骨组织和血小板中含量最为丰富。目前已鉴定出４种不同分子类型的ＴＧＦ－β，即ＴＧＦ－β１～ＴＧＦ－β４，其氨基酸有...     

bFGF调节PDGF对人成骨细胞的促增殖作用

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）促成骨细胞增殖作用的影响及其机制。方法 分离培养人成骨细胞;以ＰＤＧＦ－ＡＢ（１００ｎｇ／ｍｌ）单独培养、ｂＦＧＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）与ＰＤＧＦ－ＡＢ（１００ｎｇ／ｍｌ）混合培养、不加生长因子等３种方式培养细胞,绘制细胞生长曲线;ｂＦＧＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）与ＰＤＧＦ－ＡＡ或ＰＤＧＦ－ＢＢ（浓度均为４０ｎｇ／ｍｌ）以不同方式联     

碱性成纤维细胞生成因子对经胎盘诱发鼠脑肿瘤的生长及新生 …

目的 观察碱性成纤维细胞生成因子（ｂ－ＦＧＦ）以经胎盘主动性鼠脑肿模型的影响。方法 取孕１７天大鼠，腹腔注射亚硝基乙基脲（ＮＥＵ，１００ｍｇ／ｋｇ）建立脑肿瘤模型；取１２０天子代鼠，立体定向注射ｂ－ＦＧＦ或生理盐水建立实验组和对照组；标本行ＨＥ和ＧＦＡＰ染色，ＩＢＳＡ４８６细胞图像分析仪测定肿瘤和新生血管的情况。结果 ｂ－ＦＧＦ组的肿瘤直径、肿瘤截面积、血管面积和血管数均大于对照组。结论 ｂ－ＦＧ