基于ROS/GSK-3β信号通路研究淫羊藿次苷Ⅱ对过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨淫羊藿次苷Ⅱ对过氧化氢诱导的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞氧化损伤的保护作用。方法:以过氧化氢损伤SH-SY5Y细胞建立氧化损伤模型,以不同浓度淫羊藿次苷Ⅱ(12.5、25和50μmol/L)进行干预。采用MTT法检测细胞活力,采用DCFH-DA检测ROS的水平,TUNEL法和PI染色检测细胞凋亡,免疫印迹实验检测细胞中糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)蛋白表达。结果:不同浓度淫羊藿次苷Ⅱ(12.5、25和50μmol/L)能够抑制过氧化氢诱导的细胞死亡并呈浓度依赖性。模型组细胞氧化应激作用和凋亡率较对照组明显增强,给予淫羊藿次苷Ⅱ作用24 h后,能够显著降低活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)含量,升高超氧化物歧化酶(SOD)活力,抑制过氧化氢诱导的细胞凋亡并上调p-ser9-GSK-3β的蛋白表达,下调p-tyr216-GSK-3β蛋白表达。结论:淫羊藿次苷Ⅱ能够抑制过氧化氢对SH-SY5Y细胞的氧化损伤,其保护作用可能与抑制氧化应激引起的细胞凋亡并调控ROS/GSK-3β信号通路有关。     

女贞苷对Aβ42诱导神经细胞凋亡及相关蛋白NFκB、Bcl2变化的影响

目的：探讨女贞苷对Aβ42诱导神经细胞凋亡及相关蛋白NF-κB、Bcl-2变化的影响及其相关机制。方法：在人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞上,女贞苷梯度（50 μM、100 μM）预保护12小时后,加入浓度为15 μM的Aβ42诱导损伤12小时。MTT法测定终点细胞存活率, Western blot法检测NF-ΚB,Bcl-2的表达变化。结果： 50 μM、100 μM女贞苷可减少Aβ42引起SH-SY5Y细胞的凋亡。Western blot法检测女贞苷组NF-ΚB的蛋白表达较模型组来说减少（P﹤0.01）,抗凋亡因子Bcl-2的蛋白表达相对于模型组明显增加（P﹤0.01）。 结论：表明女贞苷可提高Aβ42诱导损伤的SH-SY5Y的细胞存活率,其可能机制为女贞苷抑制NF-ΚB的激活和增加抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,从而达到对细胞的保护作用。     

地黄饮子对β淀粉样蛋白_(1-42)致SH-SY5Y细胞线粒体损伤及细胞凋亡的影响

目的探讨地黄饮子药物血清对β淀粉样蛋白(Aβ)1-42致SH-SY5Y细胞线粒体损伤及细胞凋亡的保护作用机制。方法雄性SD大鼠以成人临床用药量20倍剂量地黄饮子灌胃给药,连续7 d,提取大鼠血清灭活后,制备药物血清。SH-SY5Y细胞采用5μmol/L Aβ1-42及0、1.25%、2.5%、5%、10%(V/V)等浓度药物血清共孵育。MTT法检测细胞存活率,PI/Annexin V双染流式细胞术分析细胞凋亡率,Western blot检测Bcl-2、Bax表达,ELISA检测caspase-3、caspase-9酶活性,JC-1法测定线粒体膜电位。结果地黄饮子药物血清可显著提高Aβ1-42损伤SH-SY5Y细胞的存活率,减少细胞凋亡,上调抗凋亡蛋白Bcl-2和下调促凋亡蛋白Bax表达,抑制Aβ1-42诱导caspase-3和caspase-9的激活,提高线粒体膜电位。结论地黄饮子药物血清通过保护Aβ1-42导致的线粒体损伤,抑制依赖线粒体的细胞凋亡通路激活,减少细胞凋亡,提高细胞存活率。     

京尼平苷对Aβ_(1-42)诱导的SH-SY5Y细胞的保护作用及相关机制研究

目的研究京尼平苷对Aβ_(1-42)诱导的SH-SY5Y细胞的保护作用并探讨其作用机制。方法实验分为对照组、京尼平苷组、Aβ_(1-42)组、京尼平苷+Aβ_(1-42)组。将SH-SY5Y细胞株接种于96孔板,对照组采用无血清培养基培养,其他组加入相应药物进行干预培养。MTT法检测各组细胞存活率,Western blot法检测胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)及自噬相关蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Atg7的表达情况。结果 Aβ_(1-42)组SH-SY5Y细胞存活率及SH-SY5Y细胞中GDNF、Atg7蛋白表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显低于对照组和京尼平苷组(P均0.05),京尼平苷+Aβ_(1-42)组SH-SY5Y细胞存活率及SH-SY5Y细胞中GDNF、Atg7蛋白表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均明显高于Aβ_(1-42)组(P均0.05),对照组和京尼平苷组SH-SY5Y细胞存活率及SH-SY5Y细胞中GDNF、Atg7蛋白表达量和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论京尼平苷对Aβ_(1-42)诱导的SH-SY5Y细胞具有保护作用,这种作用可能与其增强自噬活性及神经营养因子的表达有关。     

女贞苷对Aβ42诱导的神经细胞凋亡及相关蛋白NF-κB、Bcl-2变化的影响

目的探讨女贞苷对Aβ42诱导的神经细胞凋亡及相关蛋白NF-κB、Bcl-2变化的影响及其相关机制。方法人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)用女贞苷(50,100μmol·L~(-1))预保护12 h后,加入浓度为15μmol·L~(-1)的Aβ42诱导损伤12 h,用MTT法测定终点细胞存活率,Western blot法检测NF-κB和Bcl-2的蛋白表达变化。结果 50,100μmol·L-1的女贞苷可减少Aβ42引起的SH-SY5Y细胞凋亡。女贞苷组NF-κB的蛋白表达较模型组减少(P0.01),抗凋亡因子Bcl-2的蛋白表达相对于模型组明显增加(P0.01)。结论表明女贞苷可提高Aβ42诱导损伤的SH-SY5Y细胞存活率,其机制可能与女贞苷抑制NF-κB的激活和增加抗凋亡因子Bcl-2的蛋白表达有关。     

五味子醇甲对Aβ1-42诱导SH-SY5Y细胞的RAGE-ROS-凋亡通路的影响

目的探讨五味子醇甲(Schisandrin,SCH)对Aβ1-42诱导SH-SY5Y的RAGE/ROS/凋亡通路的影响。方法MTT法检测control组、SCH高中低剂量组的细胞活力,探讨SCH高中低剂量组对SH-SY5Y细胞的保护作用。MTT法检测control组、Aβ组、Vitamin E组及SCH高中低剂量组细胞活力、双染法观察细胞凋亡和DHE染色法检测ROS含量,探讨SCH对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y的细胞损伤的保护作用。Western-blot法检测control组、Aβ组、SCH组RAGE蛋白,探讨SCH对Aβ1-42诱导SH-SY5Y的RAGE影响。结果与control组比较,SCH各剂量组细胞活力均显著增强(P<0.01)。与Aβ组比较,各给药组细胞活力均明显增强(P<0.01)和细胞凋亡率均明显下降(P<0.01);各给药组检测ROS的荧光强度均减弱(P<0.01),SCH(5.0μg/mL)组RAGE蛋白表达降低,有显著性差异(P<0.05)。结论SCH防治阿尔茨海默病的抗氧化作用机制可能与降低ROS含量、细胞凋亡率和下调RAGE蛋白表达有关。     

补脑软胶囊对Aβ_(1-42)诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

目的:研究补脑软胶囊对Aβ1-42诱导SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。方法:建立β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导SH-SY5Y细胞损伤模型,采用PBS溶解的补脑软胶囊内容物干预24h,采用CCK-8法测定细胞存活率,在Hochest33258染色荧光显微镜下观察SH-SY5Y细胞凋亡情况。结果:SHSY5Y细胞经Aβ1-42诱导损伤后采用补脑软胶囊干预24h,与模型组相比,用药组细胞突触结构消失减少,贴壁状态明显改善,提高了细胞存活率;Hoechst33258染色结果显示,对照组细胞呈现弥散均匀的弱荧光,而Aβ1-42模型组细胞核出现固缩形态和颗粒状荧光,补脑软胶囊干预后可明显减少细胞颗粒状荧光及固缩形态,提示补脑软胶囊可有效抑制Aβ1-42引起的细胞凋亡。结论:补脑软胶囊对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有一定的保护作用。     

基于网络药理学与肠道菌群的柏子仁脂肪油改善Aβ25-35诱导小鼠脑损伤的作用研究

研究柏子仁脂肪油(Platycladi Semen oil, SP)对Aβ_25-35诱导小鼠脑损伤的保护作用及其机制,为临床治疗阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease, AD)提供理论依据。雄性昆明(KM)小鼠随机分为对照组、模型组(脑部注射200μmol·L^-1 Aβ_25-35溶液,0.15μL·g^-1)、阳性药多奈哌齐组(10 mg·kg^-1)及柏子仁脂肪油低、高剂量(0.5、1 mL·kg^-1)组。探究各组小鼠的学习记忆功能、神经元损伤、Aβ_1-42/Aβ_1-40、p-Tau、细胞凋亡、氧化应激相关指标、免疫细胞及鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1, SPHK1)/鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate, S1P)/鞘氨醇-1-磷酸受体5(sphingosine-1-phosphate receptor 5, S1PR5)通路相关蛋白或mRNA水平...     

茯苓酸对TNF-α诱导SH-SY5Y细胞炎症氧化应激反应和凋亡的拮抗作用研究

目的:探讨茯苓酸对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导SH-SY5Y细胞炎症、氧化应激损伤和凋亡的作用机制。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,用TNF-α诱导SH-SY5Y造模,将细胞分为正常组、模型组、茯苓酸组、依达拉奉组。采用噻唑蓝比色(MTT)法检测细胞增殖能力,用比色法检测乳酸脱氢酶(LDH),超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)和核因子E2相关因子2(nuclear Nrf2)的蛋白表达。结果:在50 mg/L浓度时, TNF-α对SH-SY5Y细胞有明显的抑制作用(P0.01)。与模型组比较,茯苓酸组和依达拉奉组SH-SY5Y细胞的LDH、MDA和IL-6、IL-1β的含量及BAX,p-ERK和nuclear Nrf2的表达显著减少(P0.05或P0.01),而SOD含量和BCL-2表达显著增加(P0.05或P0.01)。结论:茯苓有效成分茯苓酸具有抑制TNF-α诱导SH-SY5Y的炎症和氧化应激损伤作用,可能是通过下调ERK/Nrf2信号通路的Nrf2进入细胞核达到抑制细胞凋亡的作用机制。     

远志皂苷+β-细辛醚对阿尔茨海默病细胞模型Akt/GSK-3β信号途径的影响

目的:通过观察远志汤有效成分即远志皂苷+β-细辛醚对Aβ_(25-35)诱导的海马神经元损伤的影响,探讨远志汤对阿尔茨海默病(AD)氧化应激损伤的保护作用和可能机制。方法:通过Aβ_(25-35)诱导原代培养的C57BL/6J小鼠海马神经元建立Aβ毒性损伤细胞模型,把神经元分为正常对照组,Aβ_(25-35)诱导组,Aβ_(25-35)与远志皂苷+β-细辛醚共同孵育3个剂量组(5、10、20μmol·L~(-1)),采用WST-1比色法、流式细胞术、荧光显微镜和Western blot方法检测远志皂苷协同β-细辛醚对原代培养的海马神经元细胞活性、细胞凋亡率和ROS含量,以及AKt、GSK-3β和磷酸化蛋白表达的影响。结果:成功复制了Aβ_(25-35)致海马神经元氧化应激损伤模型;远志皂苷协同β-细辛醚可以提高Aβ_(25-35)损伤的海马神经元细胞活力,降低Aβ_(25-35)所致的细胞凋亡率,同时降低ROS含量,诱导Akt表达,抑制GSK-3β活化。结论:远志皂苷+β-细辛醚对Aβ_(25-35)诱导的海马神经元氧化应激损伤发挥保护作用,可能是通过调控Akt/GSK-3β信号途径。     

参知健脑方组分对淀粉样β蛋白β25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的:探讨SZJ对淀粉样β蛋白25-35(Aβ25-35)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用机制。方法:以Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡,采用MTT比色分析测定细胞存活率,应用Western blot检测Aβ25-35以及SZJ/APP17肽对SH-SY5Y细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3表达的影响。结果:25μmol/L的Aβ25-35减低SH-SY5Y细胞存活率,SZJ/APP17肽预处理24h可提高SH-SY5Y细胞存活率,相同浓度Aβ25-35 SZJ预处理组与非处理组比较差异显著(P<0.05);25μmol/L Aβ25-35处理的SH-SY5Y细胞Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Caspase-3的表达增高,SZJ/APP17肽预处理能抑制其表达升高,与非预处理组比较差异显著(P<0.05)。结论:SZJ可对抗Aβ25-35对SH-SY5Y细胞的毒性作用,其机制可能与抑制Bax、Caspase-3的表达,促进Bcl-2的表达有关。     

海洋天然产物Epoxysorbicillinol通过诱导Nrf2核转位对APP/PS1转基因AD小鼠的保护作用

目的海洋化合物是治疗阿尔茨海默(Alzheimer disease,AD)的最新候选药物来源,化合物Epoxysorbicillinol是从Haliclona sp.海绵的共生真菌Trichoderma longibrachiatum(长梗木霉)中提取的一种新的聚酮类化合物。本实验通过观察了Epoxysorbicillinol对APP/PS1转基因AD模型小鼠大脑中氧化应激水平和β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)斑块沉积的影响,揭示Epoxysorbicillinol对AD的治疗作用和可能的作用机制。方法给予5月龄APP/PS1转基因AD小鼠不同剂量的Epoxysorbicillinol和阳性对照药石杉碱甲Epoxysorbicillinol 3个月。水迷宫法检测小鼠的学习记忆能力;ELISA法检测小鼠脑内Aβ1-42和Aβ1-40含有量,并观察脑内MDA水平。为阐明Epoxysorbicillinol的抗氧化机制,检测Epoxysorbicillinol对Aβ1-42诱导损伤的SH-SY5Y细胞内氧化应激水平的影响,并检验其对Nrf2蛋白核转位的作用。结果实验数据显示Epoxysorbicillinol可以有效的降低AD转基因小鼠脑内的Aβ生成,降低脑内的氧化应激水平;并能有效降低Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤,其机制可能是通过促进转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)的核转位而增强了细胞抗氧化酶的表达。结论 Epoxysorbicillinol可以抑制AD小鼠中枢过高的氧化应激水平,减少中枢Aβ的形成,其作为一种抗AD的候选化合物,具有进一步深入研究开发的潜力。     

红花黄色素对Aβ_(1-42)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用研究

目的:探讨红花黄色素对Aβ_(1-42)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其机制。方法:采用Aβ_(1-42)损伤SH-SY5Y细胞模拟体外AD,不同浓度(0. 01、0. 1、1g/l)红花黄色素进行干预。倒置显微镜下观察细胞形态; MTT法测定细胞存活率;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞内Aβ_(1-42)水平; Western Blot检测SH-SY5Y细胞内APP、BACE-1、SAPPα、NEP、IDE、ERK和P-ERK蛋白表达水平。结果:红花黄色素各剂量均能够减少Aβ_(1-42)引起的SH-SY5Y细胞的损伤,使细胞的存活率显著提高,且具有剂量依赖性;ELISA结果显示,红花黄色素0. 1、1g/L可降低SH-SY5Y细胞内的Aβ_(1-42)水平; Western Blot结果显示红花黄色素各剂量均可以上调SAPPα、NEP、IDE和P-ERK蛋白的表达,下调APP和BACE-1蛋白的表达。结论:红花黄色素可以通过调节Aβ_(1-42)相关代谢酶而减少Aβ_(1-42)的含量,发挥抗AD作用,该作用可能与MAPK/ERK通路的激活有关。     

丹皮酚对Aβ1-42致神经元细胞毒的保护作用及机制

目的:考察丹皮酚对β-淀粉样蛋白(Aβ)损伤神经元的保护作用及机制.方法:取生长良好的新生大鼠海马神经元和经诱导分化后的SH-SY5Y细胞株,在培养液中加入不同浓度(1,5,10 μmol·L-1)的丹皮酚孵育6h后,再加入Aβ1-42寡聚体(30 μmol·L-1)分别孵育24,48 h.采用Heochst33258荧光染色法观察神经元的凋亡形态,Annexin V/PI双染流式细胞术测定SH-SY5Y细胞凋亡率,RT-PCR法检测神经元BDNF和Bcl-2 mRNA的表达.结果:与模型组比较,各剂量丹皮酚(1,5,10 μmol·L-1)显著减少海马神经元核固缩,降低SH-SY5Y细胞的凋亡率至22.4％,18.1％,16.4％,显著增加海马神经元BDNF和Bcl-2 mRNA的表达.结论:丹皮酚可通过增加神经元BDNF和Bcl-2的表达,拮抗Aβ1-42寡聚体诱导的神经细胞损伤.     

三七皂苷R1对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的: 探讨三七皂苷R₁对Aβ_1-42诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护机制. 方法: MTT法检测细胞存活率;PI/Annexin V双染流式细胞术分析细胞凋亡率;Western blot法检测细胞中Bax,Bcl-2的表达;ELISA法检测caspase-3,caspase-8及caspase-9的酶活性. 结果: 6.25,12.5,25,50,100 nmol·L^-1的三七皂苷R₁对Aβ_1-42诱导的SH-SY5Y细胞凋亡均有一定保护作用,并呈剂量依赖关系;PI/Annexin V双染流式细胞术检测结果表明Aβ_1-42可诱导SH-SY5Y细胞发生凋亡,6.25~100 nmol·L^-1的三七皂苷R₁可显著降低细胞凋亡率.Western blot结果显示,6.25~100 nmol·L^-1的三七皂苷R₁可下调Bax表达,上调Bcl-2表达;ELISA分析显示不同剂量的三七皂苷R₁可抑制Aβ_1-42诱导的SH-SY5Y细胞caspase-3和caspase-9的激活,但对caspase-8的激活没有影响. 结论: 三七皂苷R₁通过抑制线粒体相关的凋亡通路激活,减少Aβ_1-42诱导的SH-SY5Y细胞凋亡.     

西洋参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的:探究在以SH-SY5Y细胞作为神经元代表,β淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导凋亡的阿尔茨海默症(Alzheimer′s Disease,AD)体外细胞模型中,西洋参水提物(water extracts of American Ginseng,WEAG)对神经元的保护作用.方法:流式细胞仪(FCM)检测确定Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡的最佳浓度和时间,以及WEAG抗凋亡的浓度,MTT法检测细胞存活率,Hoechst33258染色观察细胞形态的变化.结果:50 μmol/L Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞72 h后,细胞变圆,聚集,Hoechst33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光,FCM检测凋亡率达(37.30±0.69)%,与对照组(1.56±0.80)%比较,差异具有显著性意义(P<0.05).而Aβ25-35和不同浓度的WEAG(0.5、1、5 mg/ml)同时孵育后,细胞形态明显改善,MTT值显著高于Aβ25-35处理组(P<0.01),凋亡率分别降低到(16.71±1.08)%、(10.52±2.11)%和(3.39±1.65)%,与Aβ25-35损伤组(37.30±0.69)%相比,差异具有统计学意义(p<0.05),并呈现出剂量依赖关系.结论:西洋参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有显著的保护作用.     

松果菊苷通过调控GFRα1/AKT信号通路抑制MPP~+诱导的多巴胺能细胞SH-SY5Y凋亡

目的研究肉苁蓉提取物松果菊苷(echinacoside)对1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)诱导帕金森病模型SH-SY5Y细胞的保护机制。方法 SH-SY5Y细胞分别接受磷酸缓冲溶液(PBS)、MPP+和/或松果菊苷处理后,分析细胞生长情况,采用Western blot结合免疫荧光法分析各处理组细胞内胶质细胞源性神经营养因子家族受体α1(GFRα1)及其下游抗凋亡AKT(蛋白激酶B)磷酸化及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)水平变化,并观察AKT抑制剂LY249002对松果菊苷对SH-SY5Y的保护功能的影响。结果松果菊苷可以显著缓解MPP+诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡[MPP+vs MPP+/松果菊苷,(25.12±4.33)%vs(5.13±1.51)%,P0.01]。松果菊苷可以抑制MPP+下调SHSY5Y细胞内GFRα1表达和AKT磷酸化。进一步的研究表明特异性阻断AKT信号通路可以取消松果菊苷促进SHSY5Y在MPP+诱导损伤下生存的功能,但不影响松果菊苷提高GFRα1的表达。对SH-SY5Y细胞内Caspase-3活性分析的结果显示,松果菊苷可以抑制MPP+诱导Caspase-3的活化[MPP+vs MPP+/松果菊苷,(7.22±1.51)vs(1.81±0.42),P0.01],但是这一作用可以被AKT抑制剂阻断。结论松果菊苷通过上调GFRα1/AKT通路抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,发挥保护神经细胞存活的功能。     

红景天苷通过Nrf2-HO-1保护Aβ25-35诱导的原代皮层神经元损伤

目的探讨红景天苷对Aβ25-35诱导的皮层神经元损伤的保护作用。方法:随机将培养成熟的原代皮层神经分为5组:正常对照组、模型组、红景天苷5μmol·L^-1组、红景天苷10μmol·L^-1组、激动剂组。后3组分别使用5μmol·L^-1红景天苷、10μmol·L^-1红景天苷、10μmol·L^-1TBHQ培养24 h,余组正常换液。然后除正常对照组,将余组更换为终浓度为20μmol·L^-1Aβ25-35并维持各药物组终浓度的培养液,24 h后使用CCK8试剂盒测细胞活性、LDH试剂盒测细胞LDH释放量、免疫组化和Western Blot测Nrf2、HO-1、Caspase-3、Bax、Bcl-2等蛋白的表达水平。结果红景天苷5μmol·L^-1组、红景天苷10μmol·L^-1组、TBHQ组都能够提高Aβ25-35损伤后细胞的活性、减少LDH的释放改善细胞损伤,红景天苷10μmol·L^-1组、TBHQ组都能够增加Nrf2、HO-1的表达水平,下调Caspase-3蛋白表达水平、上调Bcl-2/Bax的蛋白表达水平。锌原卟啉ZnPP可逆转红景天苷及TBHQ对Aβ25-35诱导的皮层神经元的保护作用。结论红景天苷对Aβ25-35诱导的皮层神经元细胞的保护作用,可能主要通过改善凋亡相关蛋白、上调Nrf2/HO-1信号通路表达实现。     

细叶远志皂苷通过Aβ25-35诱导PC12细胞损伤对氧化应激及炎症因子的影响

目的 探讨细叶远志皂苷（Tenuifolin, Ten）对Aβ_25-35诱导PC12细胞氧化应激及炎症因子的影响。方法 根据前期实验结果,20μM Aβ_25-35作用于PC12细胞,建立细胞损伤模型。40μg/ml TEN予以细胞保护作用。实验分为空白组、模型组、TEN组。试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）表达水平;Western Blot检测白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF-α）蛋白水平。结果 高与空白组比较,SOD、GSH水平下降,MDA水平升高;细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达升高;与模型组比较,TEN能提高SOD、GSH水平,降低MDA水平;降低细胞炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平。结论 TEN能减轻Aβ_25-35诱导PC12细胞的细胞炎性反应及氧化应激,起到细胞保护作用。     

藿苓益智方对阿尔茨海默病模型小鼠神经细胞凋亡线粒体通路的作用研究

目的:探讨藿苓益智方对阿尔茨海默病线粒体通路神经细胞凋亡的调控作用。方法:采用Aβ的活性片段Aβ_25-35诱导PC12细胞凋亡建立阿尔茨海默病的细胞模型。本实验设置六个组,即对照组、Aβ_25-35组、Aβ_25-35+盐酸多奈哌齐组、Aβ_25-35+藿苓益智方提取物(50、100、200 μg/ml)组。利用流式细胞仪、荧光酶标仪和透射电镜等技术,检测霍苓益智方提取物对阿尔茨海默病细胞模型中细胞存活率、神经细胞凋亡率、线粒体超微结构的变化。结果:藿苓益智方提取物50 μg/ml组的细胞存活率与Aβ_25-35组相比有一定的增高(P<0.05); 盐酸多奈哌齐组和藿苓益智方提取物(100、200 μg/ml)组与Aβ_25-35组相比,细胞存活率显著升高(均P<0.01),但藿苓益智方提取物200 μg/ml组升高的更明显; 藿苓益智方低、中、高剂量+A_25-35组细胞凋亡率则逐步下降,其中中、高剂量组与Aβ_25-35组相较差异均具有统计学意义(均P<0.01); 藿苓益智方低、中、高剂量+Aβ_25-35组对细胞核的损害程度上,经治疗以后逐步缓解,且呈剂量依赖性趋势。结论:藿苓益智方对阿尔茨海默病的治疗中可对Aβ诱导的PC12细胞凋亡具有明显的抑制作用,改善细胞存活率,减少线粒体细胞凋亡。