肥胖对雄性大鼠生殖功能影响的机制研究

目的研究肥胖对雄性大鼠生殖功能的影响,初步探讨其氧化损伤的相关机制。方法 6周龄SD雄性大鼠随机分成对照组(普通饮食,15只)和肥胖组(高脂饮食,30只)。喂养16周后,处死,测定体重、脏器系数、代谢参数和生殖内分泌激素(GnRH、FSH、LH、TT、E_2)和SHBG,检测睾丸生精细胞凋亡、氧化应激和附睾精子参数,比较两组各指标差异。结果与对照组大鼠相比,肥胖组大鼠体重和Lee指数明显增加,血清瘦素(Lep)[(3.17±0.23)ng/ml vs.(2.33±0.21)ng/ml]、胰岛素(INS)[(28.99±2.43)μU/ml vs.(20.62±1.72)μU/ml]和甘油三酯(TG)[(0.55±0.03)mmol/L vs.(0.36±0.04)mmol/L]显著升高,血清GnRH[(36.46±1.95)pg/ml vs.(45.51±2.75)pg/ml]、LH[(3.06±0.37)U/L vs.(4.67±0.70)U/L]、总睾酮(TT)[(0.81±0.13)ng/ml vs.(1.98±0.32)ng/ml]、SHBG[(55.31±3.80)nmol/L vs.(71.69±4.65)nmol/L]显著降低,差异均有统计学意义(P0.05);TUNEL结果显示,肥胖组大鼠睾丸生精细胞凋亡指数显著高于对照组[(4.26±0.35)%vs.(3.09±0.28)%,P0.05];氧化应激结果表明,肥胖组大鼠的MDA上升、SOD降低,差异有统计学意义(P0.05);附睾精子分析发现,与对照组相比,肥胖组大鼠的精子活力显著下降[(14.36±7.67)%vs.(36.40±9.17)%,P0.01],而精子浓度无显著性差异(P0.05)。结论高脂饮食诱导雄性大鼠的肥胖,代谢和生殖内分泌紊乱,氧化损伤增加,导致生精细胞凋亡增加,并最终使精子活力下降。     

男性不育患者生殖激素水平与精子质量的相关分析

目的研究并探讨男性不育患者生殖激素水平与其精子质量的相关性。方法收集2013年1月至2017年5月期间,在我院就诊的男性不育患者200例,所有患者进行生殖激素水平测定和精液分析,根据其精液分析结果中的精子形态学情况,分为A组(精子形态正常率4%)、B组(精子形态正常率≥4%且10%)、C组(精子形态正常率≥10%),比较不同精子形态学患者的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及睾酮(T)激素水平;再根据生殖激素水平检测结果将患者分为生殖激素水平正常组和生殖激素水平异常组,比较不同生殖激素水平患者的精子密度、精子活动力、精子存活率、精子形态正常率等指标,并对精子质量与其生殖激素水平进行相关性分析。结果 A、B、C三组患者之间的FSH、LH、T水平均呈显著上升趋势(P0.05);生殖激素水平异常组患者的精子密度[(13.21±7.09)#106/ml vs.(24.95±10.72)#106/ml]、精子活动力[(35.83±11.17)%vs.(53.74±15.86)%]、精子存活率[(48.79±8.95)%vs.(59.64±10.21)%]、精子形态正常率[(6.13±1.85)%vs.(10.56±4.29)%]均低于激素水平正常组,差异有统计学意义(P0.05);皮尔逊相关系数分析显示,精子密度、精子活动力、精子存活率、精子形态等精子质量指标均与患者生殖激素水平显著相关(P0.05)。结论男性不育患者的精子密度、精子活动力、精子存活率、精子形态等精子质量指标与其生殖激素水平显著相关,生殖激素水平检测联合精液分析,可为男性不育的临床诊治提供指导性意见。     

男性性欲与血清生殖激素水平相关性分析

目的:探讨男性性欲与血清生殖激素水平的相关性。方法:收集郑州大学第一附属医院男科门诊134例患者临床资料,以13项目男子性欲自评量表为标准,将研究对象分成性欲低下组和性欲正常组,所有患者均排除有甲状腺及肾上腺疾病,肝肾疾病且停用各种影响性功能及生殖激素的药物2周以上,统计两组的年龄、病史及病程,检测两组患者的血清T、E2、LH、FSH及PRL水平,并计算T/E2。并进一步分析性欲与生殖激素的相关性结果:性欲低下组病程显著长于性欲正常组[(2.91±0.08)年vs(1.83±0.44)年,P0.05],两组性欲评分[(19.56±0.89)分vs(31.47±1.28)分,P0.01]、T[(11.46±1.62) nmol/L vs(17.51±3.68) nmol/L,P0.01]、T/E2(12.42±1.38 vs 17.27±3.94,P0.01)差异均有统计学意义,而年龄[(31.98±2.19)岁vs(32.22±2.29)岁]、E2 [(94.45±10.37) pmol/L vs(114.38±14.72) pmol/L]、FSH[(7.43±3.84) IU/L vs(9.98±5.26)IU/L]、LH[(5.20±3.37)I U/L vs(5.70±3.17) IU/L]、PRL [(371.85±243.38) mIU/L vs(281.96±82.68) IU/L]差异均无统计学意义。相关性分析显示,两组性欲评分与T(r=0.535、0.329)、T/E2(r=0.603、0.542)呈正相关(P均0.01);T与E2(r=0.644、0.743)、T/E2(r=0.618、0.387)也具有相关性(P均0.01)。T、E2、T/E2三者ROC曲线下面积分别为:0.660、0.527、0.669,当T/E2为12.15～15.73时,诊断性欲低下的灵敏度和特异度相对较高(均0.5)。结论:①T、T/E2均是男性性欲的重要影响因素,E2也可能是男性性欲的影响因素之一;②男性性欲和T/E2的相关性更好,T/E2为12.15～15.73时,提示性欲可能正常,若打破这个平衡,无论高或低都可能出现性欲低下。     

中频穴位电刺激联合他莫昔芬片治疗少弱精子症患者的临床研究

目的:探讨中频穴位电刺激联合他莫昔芬片治疗少弱精子症的临床效果及其可行性与安全性。方法:120例少弱精子症患者随机分为他莫昔芬片口服治疗组(他莫昔芬组)、中频穴位电刺激治疗组(穴位电刺激组)与联合治疗组,每组40例。连续治疗8周,记录各组治疗前后的精液体积、精子总数及浓度、总活力、前向运动(PR)精子百分率及血清生殖激素(FSH、LH、T)水平,对比分析3组患者治疗前后的精液参数及生殖激素水平。结果:所有患者均完成本研究,治疗前后3组精液体积无明显改善(P0.05)。与治疗前对比,3组均可改善生殖激素(FSH、LH、T)水平(P0.05);他莫昔芬组可以显著提高精子总数[(42.65±5.78)×10~6vs(25.16±2.05)×10~6,P0.05]及精子浓度[24.31±2.59)×10~6/ml vs(12.15±2.51)×10~6/ml,P0.05],而精子总活力及PR精子百分率无明显改善[(22.61±5.75)%vs(21.78±8.81)%;(16.76±5.86)%vs(15.87±7.81)%,P均0.05];穴位电刺激组可以增加精子总活力率[(32.43±4.97)%vs(24.81±8.27)%,P0.05]及PR精子百分率[(27.17±5.09)%vs(19.71±9.15)%,P0.05],而精子总数及精子浓度无明显改善[(25.87±4.96)×10~6vs(23.23±3.14)×10~6;(14.12±2.47)×10~6/ml vs(11.27±2.24)×10~6/ml,P均0.05];联合治疗组不仅可以提高精子总数[(51.14±3.69)×10~6vs(26.17±5.05)×10~6,P0.05]及精子浓度[(27.28±1.98)×10~6/ml vs(12.78±2.41)×10~6/ml,P0.05],而且可以显著提高精子总活力[(37.12±5.33)%vs(23.89±9.05)%,P0.05]及PR精子百分率[(31.09±7.12)%vs(17.14±8.04)%,P0.05],并且显著优于他莫昔芬组和穴位电刺激组(P0.05)。联合治疗组总有效率(97.5%)显著高于他莫昔芬组(72.5%)和穴位电刺激组(75.0%),P0.05。结论:中频穴位电刺激联合他莫昔芬片口服可以明显改善特发性少弱精子症患者的精液质量和生殖激素水平,有一定的临床推广意义。     

益肾活血法对精子DNA损伤及自然妊娠结局的影响

目的:探讨益肾活血法治疗男性不育症的疗效,观察其对精子DNA损伤、自然妊娠结局的影响。方法:伴有精子DNA碎片指数(DFI)异常的50例男性不育症患者为观察对象,随机分为2组,最后42例纳入统计分析,其中益肾活血法组(试验组)22例,对照组20例。试验组予口服中药治疗,对照组予口服他莫昔芬片和维生素E胶丸,3个月为1个疗程。治疗前后检测精液常规参数、精子形态、DFI变化情况,并对自然妊娠情况随访。结果:与治疗前比较,治疗后试验组精子浓度[(36.82±29.16)×10^6/ml vs(50.00±39.16)×10^6/ml,P<0.05]、前向运动精子百分率[(20.62±9.10)%vs(36.82±13.45)%,P<0.05]、正常形态精子百分率[(1.28±1.00)%vs(3.44±1.33)%,P<0.05]显著升高,精子DFI显著降低[(29.07±11.52)%vs(15.51±11.31)%,P<0.05];对照组精子浓度[(34.56±37.03)×10^6/ml vs(40.72±47.37)×10^6/ml,P<0.05]、前向运动精子百分率[(21.25±9.11)%vs(26.18±10.60)%,P<0.05]、正常形态精子百分率[(1.48±0.91)%vs(2.57±1.32)%,P<0.05]也显著升高,精子DFI也显著降低[(24.43±8.46)%vs(18.53±10.44)%,P<0.05];两组比较,试验组在提高精子总活力、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率方面显著优于对照组(P<0.05),而在增加精子浓度和降低DFI差异无统计学意义(P>0.05)。试验组妊娠率(18.2%vs 15.0%)和活产率(18.2%vs 10.0%)均高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益肾活血法类中药有助于降低精子DNA损伤,改善自然妊娠结局。     

TP53基因rs1042522单核苷酸多态性与男性不育相关性研究

目的:探讨肿瘤蛋白p53(TP53)基因rs1042522位点单核苷酸多态性与男性不育的关系。方法:采用病例-对照研究,收集南京地区特发性男性不育患者380例(病例组),有生育史的健康男性398例(对照组);并将病例组分为无精子症组(n=140)和少精子症组(n=240)。用Sequence Mass Array技术检测TP53基因rs1042522位点的基因型,通过Logistic回归分析该位点多态性与男性不育的相关性。结果:病例组与对照组前向运动精子百分率[(10.38±5.57)%vs(42.55±9.57)%]、精子浓度[(13.13±24.96)×106/ml vs(77.34±49.24)×106/ml]、T[(14.07±5.36)nmol/L vs(11.89±4.50)nmol/L]、FSH[(16.80±18.20)U/L vs(4.55±7.17)U/L]存在显著性差异(P0.05)。经Logistic回归分析,未发现各基因型与男性不育有统计学意义的相关性,亚组分析也未发现相关性。结论:TP53基因rs1042522位点的单核苷酸多态性与男性不育无显著相关性。     

男性不育患者精子DNA完整性与精浆氧化应激水平的关系及其对体外受精的影响

目的:探讨男性不育患者精子DNA完整性与精液常规参数、精浆氧化应激水平的关系,以及对体外受精(IVF)结局的影响。方法:采用精子染色质扩散法(SCD)检测433个IVF周期中精子DNA损伤性,根据精子DNA碎片指数(DFI)的不同,分为低DFI组(DFI30%)、高DFI组(DFI≥30%),比较2组精子浓度、前向运动精子百分率、快速前向运动精子百分率、精浆丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(TAC)水平及受精率、卵裂率、优胚率的差异。结果:高DFI组与低DFI组比较,前向运动精子百分率及快速前向运动精子百分率显著降低[(29.2±16.8)%vs(48.6±16.7)%、(9.4±6.6)%vs(19.0±9.1)%,P0.01],高DFI组精子浓度与低DFI组相比差异无显著性[(52.3±32.4)×106/ml vs(51.4±30.9)×106/ml,P0.05];高DFI组精浆中的MDA含量明显高于低DFI组[(2.28±0.26)nmol/L vs(0.95±0.18)nmol/L,P0.01],高DFI组精浆中的TAC含量明显低于低DFI组[(10.2±3.5)U/L vs(33.2±7.9)U/L,P0.01];高DFI组IVF受精率明显低于低DFI组[(58.9±30.0)%vs(77.2±25.0)%,P0.01],两组间卵裂率[(70.7±35.6)%vs(80.4±15.6]、优胚率[(40.4±31.3)%vs(41.7±29.4)]比较差异均无显著性(P均0.05)。结论:精子DNA损伤与氧化应激有关,同时精子DNA损伤可降低IVF受精率,影响IVF结局。     

化痰祛湿方对肥胖少弱精子症大鼠模型脂代谢及精子质量的影响

目的:探究化痰祛湿方(HTQSD)对肥胖少弱精子症大鼠脂代谢与精子质量的干预作用及可能机制。方法:8周龄Wistar雄性大鼠,按照体重随机区组法分为空白组,模型组,五子衍宗丸(WZYZP)组,化痰祛湿方(HTQSD)高、中、低剂量组,每组16只。空白组给予普通饲料,其余各组大鼠给予高脂饲料喂养8周。在饲喂相应饲料的同时,空白组及模型组灌胃相同体积生理盐水,WZYZP组给予五子衍宗丸(1.07 g/kg),其余各组给予化痰祛湿方高、中、低剂量(26.25、13.125、6.5625 g/kg),灌药体积均为1 ml/100 g。于实验周期的第1、4、8周末测量各组大鼠的体重,第4、8周末检测血清TG、TC、HDL-C、LDL-C,肝脏、睾丸系数及精子活率和浓度,第8周检测血血红素氧合酶1(HO-1)mRNA表达水平。结果:造模及干预的第8周,与空白组相比,模型组大鼠体重显著增加[(523.1±25.54) g vs(451.50±27.53) g,P0.01],血清TG、TC、LDL-C显著升高[(8.58±0.39)nmol/L vs(2.18±0.28)nmol/L,(4.41±1.44)nmol/L vs(1.68±0.18)nmol/L,(2.06±0.17)nmol/L vs(0.48±0.57)nmol/L,P0.01],血清HDL-C、精子活率、精子浓度、HO-1 mRNA表达显著降低[(27.92±0.40)nmol/L vs(57.47±1.52) nmol/L,(11.31±4.87)%vs(39.66±2.77)%,(31.07±10.52)×10~6/ml vs(65.37±6.30)×10~6/ml, 0.16±0.03 vs 1.06±0.20,P0.01]。与模型组相比,HTQSD中剂量组体重显著下降[(445.13±34.19) g vs(523.1±25.54) g,P0.00],血清TG、TC、LDL-C水平显著降低[(2.05±0.27)nmol/L vs(8.58±0.39) nmol/L,(1.63±0.21) nmol/L vs(4.41±1.44) nmol/L,(0.45±0.07) nmol/L vs(2.06±0.17)nmol/L,P0.01],血清HDL-C、精子活率、精子浓度显著升高[(48.35±3.63) nmol/L vs(27.92±0.40) nmol/L,(32.84±6.22)%vs(11.31±4.877)%,(46.90±6.39)×10~6/ml vs(31.07±10.52)×10~6/ml,P0.01或P0.05],HTQSD低剂量组HO-1 mRNA表达显著增加(0.76±0.13 vs 0.16±0.03,P0.01)。结论:化痰祛湿方可以预防性调节大鼠的血脂,并且其可能通过改善血清中相关的抗氧化物,减轻氧化应激程度,改善少弱精子症大鼠精液质量。     

早期子宫内膜癌和子宫内膜非典型增生患者保守治疗后的IVF-ET治疗结局

目的分析早期子宫内膜癌和子宫内膜非典型增生患者应用保留生育功能治疗并放置左炔诺孕酮宫内节育系统(曼月乐)后进行IVF-ET助孕的临床情况和胚胎体外培养结局。方法收集经保守治疗后完全缓解,于2017年10月至2020年4月期间转诊至我院生殖中心进行辅助生殖治疗的34例早期子宫内膜癌和子宫内膜非典型增生患者资料共57个IVF周期作为研究组,根据年龄、BMI、不孕原因、促排卵方案等在同时期匹配114个子宫内膜正常的IVF周期作为对照组。比较两组患者的基本资料、促排卵情况和胚胎体外培养情况。结果两组患者基本资料中年龄、BMI、不孕年限、基础激素水平(FSH、E2、PRL、LH)均无显著差异(P>0.05),仅研究组基础睾酮(T)水平显著低于对照组[(1.16±0.72)nmol/L vs.(1.71±0.68)nmol/L,P<0.001]。研究组较对照组Gn起始剂量[(271.2±56.3)U vs.(247.0±63.7)U]和总量[(3534.4±1263.3)U vs.(3104.9±1282.2)U]显著增高(P<0.05),研究组HCG日内膜厚度较对照组薄[(7.07±2.08)mm vs.(11.57±2.38)mm,P<0.05];两组间Gn天数无显著差异(P>0.05);HCG日激素水平除FSH无显著差异(P>0.05)外,其他所检测的激素水平(E 2、P、T、LH)在研究组均显著低于对照组(P<0.05)。两组间获卵数[(9.0±5.8)vs.(10.4±6.4)]、MII卵数[(7.9±5.4)vs.(9.1±6.1)]、受精率(90.42%vs.90.50%)、卵裂率(99.75%vs.99.26%)和优质胚胎率(10.37%vs.10.58%)均无显著差异(P>0.05);研究组囊胚形成率显著高于对照组(47.41%vs.40.75%,P<0.05)。34位患者中有19位进行了共27个周期的冻融胚胎移植,每移植周期的妊娠率为44.4%(12/27),累积妊娠率为63.2%(12/19)。结论子宫内膜病变保守治疗后体外受精过程与其他患者类似,对于存在不孕病史的早期子宫内膜癌和子宫内膜非典型增生患者,保守治疗后体外受精-胚胎移植可以提供可靠的生育结局。     

CMTM2改善环磷酰胺致转基因小鼠模型生殖毒性作用并影响StAR蛋白的表达

目的:探讨在转基因小鼠模型中CMTM2能否改善环磷酰胺(CP)引起的生殖毒性作用以及其对固醇合成快速调节蛋白(StAR)表达的影响。方法:随机选取CMTM2转基因小鼠20只分成2组:CMTM2+CP[CMTM2转基因小鼠腹腔内连续7 d注射50 mg/(kg.d)CP]组和CMTM2+NS(CMTM2转基因小鼠腹腔内连续7 d注射等量生理盐水)组,另取同源野生型C57BL/6J小鼠20只分成2组:WT+CP[野生型C57BL/6J小鼠腹腔内连续7 d注射50 mg/(kg.d)CP]组和WT+NS(野生型C57BL/6J小鼠腹腔内连续7 d注射等量生理盐水)组。30 d后各组小鼠处死取相应标本,放免法检测血清睾酮水平,分析各组小鼠精子浓度、精子活动率差异,Western印迹检测睾丸StAR蛋白表达。结果:对比CMTM2+NS组,CP能够降低CMTM2+CP组小鼠的血清睾酮含量[(42.98±3.25)nmol/L vs(46.74±3.38)nmol/L]、精子浓度[(16.89±1.17)×106/ml vs(24.68±0.95)×106/ml]以及精子活动率[(72.75±1.25)%vs(85.14±1.12)%](P<0.05),表现出明显的生殖毒性;对比WT+CP组,CMTM2+CP组小鼠血清睾酮[(42.98±3.25)nmol/L vs(37.97±4.17)nmol/L]、精子浓度[(16.89±1.17)×106/ml vs(12.75±1.02)×106/ml]以及精子活动率[(72.75±1.25)%vs(50.52±1.37)%]下降程度均明显减弱(P<0.05),而CMTM2+CP组的StAR蛋白表达水平则较高(1.16±0.07 vs 0.69±0.08,P<0.05)。结论:CMTM2可能通过调节StAR蛋白表达对抗CP引起的生殖毒性,从而在生殖系统中发挥一定的保护作用。     

铁死亡在重症急性胰腺炎引起的急性肾损伤中的作用及其机制

目的探讨铁死亡在重症急性胰腺炎(SAP)诱发急性肾损伤(AKI)的作用及其机制。方法胰腺炎建模后24 h,将36只SD大鼠(购自青岛大学医学部实验室动物中心)采用完全随机分组法分为3组(n=12):假手术组(SO组)、重症急性胰腺炎组(SAP组)、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1干预组(SAP+Fer组)。建立SAP模型24 h后,检测血清淀粉酶(AMY)、肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN)水平;检测肾组织中铁含量、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)变化及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)活性;苏木精-伊红(HE)染色观察胰腺和肾脏组织学改变;透射电镜(TEM)观察铁死亡的形态学特征;蛋白质印迹法(Western blot)、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光染色等方法分析长链脂酰CoA合成酶4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和铁蛋白重链1(FTH1)等铁死亡相关蛋白和基因的表达。组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果SAP组大鼠血清AMY[(6276.5±562.2)比(1086.6±192.3)U/L]、Cr[(98.0±16.2)比(19.5±5.2)μmol/L]、BUN[(17.1±2.8)比(7.2±1.7)mmol/L]水平明显高于SO组(t=30.314、15.927、10.375,P值均<0.01),差异均有统计学意义;肾组织铁[(0.65±0.13)比(0.44±0.12)mg/g]、MDA[(7.25±0.81)比(1.84±0.24)μmol/g]、ROS[(68.54±7.04)比(15.67±5.21)×104/mg]高于SO组(t=3.855、22.167、11.496,P值均<0.01),GSH[(358.38±41.59)比(518.64±55.72)nmol/g]和GPX4[(7.75±1.09)比(14.72±2.56)U/mg]明显低于SO组(t=7.984、8.674,P值均<0.01),差异有统计学意义;胰腺和肾组织病理损伤程度增加;线粒体出现明显萎缩;肾脏ACSL4蛋白(0.84±0.03比0.34±0.02)表达高于SO组(t=7.876,P<0.01),GPX4、FTH1蛋白(0.69±0.03比1.04±0.06、0.26±0.02比0.83±0.04)表达低于SO组(t=5.651、8.134,P值均<0.01),差异有统计学意义;ACSL4、铁响应元件结合蛋白2(IREB2)mRNA(0.87±0.06比0.24±0.03、1.23±0.05比0.32±0.02)表达高于SO组(t=12.864、15.163,P均<0.01),差异有统计学意义。SAP+Fer组大鼠血清AMY[(5124.3±483.5)比(6276.5±562.2)U/L]、Cr[(55.2±13.7)比(98.0±16.2)μmol/L]、BUN[(9.8±2.1)比(17.1±2.8)mmol/L]水平显著低于SAP组(t=5.287、6.989、7.359,P值均<0.01),差异有统计学意义;肾组织铁[(0.54±0.07)比(0.65±0.13)mg/g]、MDA[(4.67±0.73)比(7.25±0.81)μmol/g]、ROS[(28.39±6.36)比(68.54±7.04)×104/mg]低于SAP组(t=2.639、7.176、8.247,P值均<0.05),GSH[(448.21±45.51)比(358.38±41.59)nmol/g]和GPX4[(11.31±1.89)比(7.75±1.09)U/mg]高于SAP组(t=5.048、5.639,P值均<0.01),差异有统计学意义;胰腺和肾组织病理损伤程度减轻;线粒体轻度萎缩;肾脏ACSL4蛋白(0.49±0.02比0.84±0.03)表达低于SAP组(t=2.781,P<0.05),GPX4、FTH1蛋白(0.69±0.03比1.04±0.06、0.26±0.02比0.83±0.04)表达高于SAP组(t=2.427、2.876,P值均<0.05),差异有统计学意义;ACSL4、IREB2 mRNA(0.52±0.04比0.87±0.06、0.74±0.04比1.23±0.05)表达低于SAP组(t=5.843、6.781,P值均<0.01),差异均有统计学意义。结论铁死亡参与SAP引起的AKI,抑制铁死亡能改善肾功能,减轻肾组织脂质过氧化和病理损伤。     

磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路在丁苯酞保护心肌缺血再灌注损伤中作用机制的实验研究

目的观察丁苯酞预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用以及磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路在此过程中的作用。方法将大鼠心肌细胞(H9C2)随机分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、丁苯酞预处理组(I/R+NBP组)。通过氧气剥夺以及无糖培养基的更换模拟6 h缺血4 h复灌心肌缺血模型。通过细胞计数检测试剂盒(CCK-8)检测不同药物浓度细胞活性,探索丁苯酞的最佳药物浓度;比色法检测各组乳酸脱氢酶(LDH)以及丙二醛(MDA)含量;蛋白质印迹法(Western blot)检测PI3K、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和Akt的蛋白表达水平;定量聚合酶链反应(qPCR)技术检测白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在核糖核酸(mRNA)水平的表达。多组之间比较采用单因素方差分析,两组之间比较采用t检验。结果丁苯酞的最佳用药浓度为100μmol/L;I/R组MDA、LDH的表达量高于Sham组[(172.03±14.99)nmol/L比(38.98±6.49)nmol/L、(195.04±14.50)%比(100.00±0.00)%,t=14.106、11.354,P<0.05];I/R组IL-1β、TNF-α的表达量高于Sham组(22.36±2.71比1.00±0.00、6.20±0.31比1.00±0.00,t=13.660、28.874,P<0.05);I/R组PI3K、p-Akt的表达量也高于Sham组(0.61±0.34比0.34±0.01、0.95±0.04比0.36±0.04,t=13.487、18.392,P<0.05),差异有统计学意义。I/R+NBP组MDA、LDH的表达量低于I/R组[(56.98±4.79)nmol/L比(172.03±14.99)nmol/L、(140.34±4.44)%比(195.04±14.50)%,t=12.661、7.890,P<0.05];I/R+NBP组IL-1β、TNF-α的表达量低于I/R组(6.66±0.60比22.36±2.71、1.76±0.11比6.20±0.31,t=9.798、23.352,P<0.05),差异有统计学意义;I/R+NBP组PI3K、p-Akt的表达量高于I/R组(1.00±0.05比0.61±0.34、1.27±0.04比0.95±0.04,t=11.440、10.432,P<0.05),差异有统计学意义。结论丁苯酞可以通过减少细胞损伤、抑制氧化及炎性反应进而减轻心肌缺血再灌注损伤,该过程可能有PI3K/Akt通路的参与。     

来曲唑联合卵泡期高孕激素促排卵对高龄患者IVF/ICSI妊娠结局的影响

目的探讨在高龄患者行IVF/ICSI过程中应用卵泡期高孕激素促排卵(PPOS)方案联合来曲唑(LE)对妊娠结局的影响。方法回顾性分析2016年6月至2018年9月在我院生殖中心行IVF/ICSI助孕治疗的318个周期的临床资料。根据是否在PPOS方案早卵泡期应用LE进行分组,PPOS早卵泡期应用LE者为A组(n=120)和不应用LE者为B组(n=198),比较两组患者的一般情况和妊娠结局。结果A组患者在诱发排卵日血清E 2水平显著低于B组[(1730.55±1570.02)pmol/L vs.(2910.56±2084.52)pmol/L,P<0.05],而促性腺激素(Gn)使用天数及Gn用量显著高于B组[分别为(8.91±3.62)d vs.(7.83±2.72)d;(2245±1079)U vs.(1934±842)U,P<0.05];两组患者间获卵数、成熟卵子数、可利用胚胎数和周期取消率比较差异均无统计学意义(P>0.05);A组受精率显著低于B组(58.82%vs.69.71%,P<0.05);冻融胚胎移植后两组患者的累积妊娠率(20.85%vs.27.73%)和累积分娩率(11.69%vs.16.71%)均无显著差异(P>0.05)。结论应用PPOS方案促排卵时联合应用LE并不影响高龄患者IVF/ICSI的妊娠结局;应用LE导致的诱发排卵日E 2降低并不影响获卵数及可利用胚胎数。     

GnRH-a降调节后内膜准备方案对PCOS患者冻融胚胎移植结局的影响

目的比较应用长效促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)降调节后人工周期和单纯人工周期这两种方法准备子宫内膜对PCOS患者冻融胚胎移植(FET)妊娠结局的影响。方法回顾性分析2013年6月至2015年6月在吉林大学第二医院生殖中心就诊的PCOS患者的临床资料,根据在子宫内膜准备过程中是否应用长效GnRH-a降调节将152个周期分成两组:降调节后人工周期(A组,76周期),单纯人工周期(B组,76周期)。比较两组患者的临床指标和结局。结果两组患者的年龄、不孕年限、体重指数(BMI)、基础LH、E_2以及睾酮(T)水平、空腹血糖、空腹胰岛素水平、总胆固醇、甘油三脂等均无统计学差异(P0.05);两组患者的移植周期数、移植日子宫内膜厚度、黄体酮转化日平均孕酮水平及移植胚胎数均无统计学差异(P0.05),但A组黄体酮转化日的LH[(5.34±4.50)U/L]、E_2[(145.26±57.50)pmol/L]及T[(2.15±0.45)nmol/L]水平均显著低于B组[分别为LH(10.14±0.88)U/L、E_2(179.71±89.89)pmol/L、T(2.53±0.28)nmol/L](P0.05);A组的胚胎着床率和临床妊娠率均显著高于B组[分别为45.06%vs.32.20%和61.54%vs.42.11%)](P0.05)。结论应用长效GnRH-a降调节后人工周期建内膜方案可能改善PCOS患者FET结局。     

高孕激素下促排卵方案用于FSH升高DOR患者的临床效果观察

目的 探讨高孕激素下促排卵(PPOS)方案应用于FSH升高的卵巢储备功能减退(DOR)患者的临床结局,旨在探索DOR患者最优的控制性促排卵(COH)方案。方法 回顾性分析2015年1月至2016年1月在我中心诊断为DOR行IVF/ICSI-ET助孕的患者的临床资料,共264个周期。根据促排卵方案的不同对研究对象进行分组,采用PPOS方案的117个周期为PPOS组,采用克罗米芬(CC)微刺激方案的147个周期为CC组。比较两组的Gn用量、平均Gn天数、促排过程中血清激素水平的变化、获卵数、优胚率、顶级优胚率、临床妊娠率等。结果 PPOS组患者促排过程中LH最高值[(3.92±0.23)vs.(8.56±0.45)U/L]、HCG日E2水平[(4 703.76±3 149.46)vs.(7 021.02±4 249.32)pmol/L]、HCG日LH水平[(2.52±1.74)vs.(7.49±6.41)U/L]均显著低于CC组(P0.05);PPOS组的Gn用量及用药天数显著高于CC组(P0.05);PPOS组的优胚率(82.63%vs.69.51%)及顶级优胚率(28.39%vs.20.98%)显著高于CC组(P0.05);两组HCG日直径14mm的卵泡数、获卵数、成熟卵母细胞数、正常受精数、卵裂数、可利用胚胎数等比较均无显著性差异(P0.05),两组的FET临床妊娠率比较无显著性差异(P0.05)。结论 对于FSH升高的DOR患者,行PPOS方案促排卵能有效抑制早发LH峰,但临床妊娠率与CC微刺激方案比较无显著性差异。     

高孕激素状态下促排卵方案用于卵巢正常反应患者IVF-ET的自身对照研究

目的探讨第一周期采用降调节长方案行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)未获成功的卵巢正常反应患者,改用高孕激素状态下促排卵(PPOS)方案的临床效果。方法回顾性分析2014年1月至2015年11月我科第一周期长方案促排卵后助孕治疗未获成功,第二周期PPOS方案后行冻融胚胎移植(FET)的卵巢正常反应患者共42例,自身对照两种促排卵方案中激素水平、药物使用、获卵及胚胎情况以及PPOS方案后FET的妊娠结局。结果PPOS方案中Gn天数[(10.33±2.00)d]、Gn总量[(2 325.00±449.08)U]显著低于长方案[分别为(13.00±2.27)d、(3 182.98±904.91)U](P0.05);PPOS方案扳机日血清LH水平[(1.64±1.31)U/L]显著高于长方案[((0.91±1.01)U/L]、孕酮(P)水平[(2.25±0.86)nmol/L]显著低于长方案[(3.87±1.68)nmol/L](P均0.05);PPOS方案的平均获卵数、成熟卵母细胞数、正常受精数、可利用胚胎数与长方案比较无显著性差异(P0.05),正常受精率[(71.82±17.64)%]、优胚数[(3.62±1.97)枚]和优胚率[(62.21±24.04)%]均显著高于长方案[分别为(63.75±15.77)%、(2.79±1.65)枚、(48.48±22.53)%](P0.05)。PPOS方案中有3例患者因无冷冻胚胎取消周期;39例患者行FET(共46个周期),22个周期获得临床妊娠,周期临床妊娠率47.83%,种植率24.74%,显著高于长方案[分别为7.02%、3.64%](P0.05)。结论对于长方案促排后助孕未获成功的卵巢正常反应患者,PPOS方案可获得较好的临床妊娠结局,为促排卵治疗提供了一种新的选择方案。     

多囊卵巢综合征患者身体成分分析的临床价值

目的通过对多囊卵巢综合征(PCOS)患者进行身体成分分析,评判患者的体型、脂肪分布及营养状况,为PCOS患者的健康管理及并发症的预防提供依据。方法收集2018年6月至2019年8月在江苏省人民医院妇科内分泌门诊就诊的PCOS患者123例为PCOS组,选择同期就诊、月经正常的女性121例为对照组。记录所有研究对象的年龄、身高、体重等参数,采用人体成分分析仪(InBody S10),以生物电阻抗法为原理进行相关指标的测定。比较两组对象一般情况及检测指标的差异,并根据BMI进一步行分层分析。结果两组对象年龄、身高、体重比较均无统计学差异(P均>0.05),PCOS组的BMI[(27.14±4.60)vs.(25.82±4.58)kg/m^2]、全身脂肪含量[(26.55±8.67)vs.(24.23±8.36)kg]、内脏脂肪面积[(100.37±29.98)vs.(92.40±29.34)cm^2]和体脂率[(37.03±6.69)%vs.(35.23±7.06)%]均显著高于对照组(P均<0.05)。根据BMI数值进行分层,当BMI<24 kg/m^2时PCOS组的全身脂肪含量[(15.86±4.71)vs.(13.13±3.39)kg]、内脏脂肪面积[(64.65±19.67)vs.(55.09±13.96)cm^2]和体脂率[(29.10±5.84)%vs.(25.31±4.82)%]亦显著高于对照组(P均<0.05);两组患者细胞外水分率、骨骼肌及骨矿物质含量比较无显著性差异(P均>0.05)。当BMI≥24 kg/m^2时,PCOS组的全身脂肪含量[(29.85±6.73)vs.(27.89±5.91)kg]、内脏脂肪面积[(111.39±23.28)vs.(104.71±21.64)cm^2]亦显著高于对照组(P均<0.05);两组患者体脂率、细胞外水分率、骨骼肌及骨矿物质含量比较无显著性差异(P均>0.05)。结论PCOS患者中超重和肥胖,尤其是腹型肥胖的发生率较高,且无论PCOS患者体重是否正常,全身脂肪含量及内脏脂肪面积均明显高于正常女性。因此,建议对PCOS患者进行体脂及相关指标等检测,以更好地指导临床进行营养与运动管理,改善PCOS患者的体脂分布及比例,有利于改善临床症状及预防远期并发症。     

不同促排卵方案HCG日优势卵泡比例对IVF结局的影响

目的探讨不同促排卵方案HCG日优势卵泡比例对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响。方法回顾性分析2015年6月至2020年2月在我院生殖医学中心接受IVF治疗的721例患者的病历资料,按照促排卵方案分为拮抗剂方案组(A组,n=259)和PPOS方案组(B组,n=462);按照HCG日优势卵泡的比例将患者再细分为3组:低比例组(优势卵泡比例≤30%,A1、B1组);中比例组(30%<优势卵泡比例<60%,A2、B2组);高比例组(优势卵泡比例≥60%,A3、B3组)。分析不同促排卵方案HCG日优势卵泡比例对IVF结局的影响。结果A组患者平均年龄显著小于B组[(30.07±3.71)vs.(30.86±4.16),P<0.05];A组Gn天数、HCG日子宫内膜厚度显著高于B组[分别为(9.85±1.38)d vs.(9.51±1.28)d和(10.56±2.06)mm vs.(7.89±1.56)mm,P<0.01];A组HCG日LH水平显著低于B组[(2.55±2.79)U/L vs.(3.18±2.51)U/L,P<0.01];两组的优势卵泡比例、获卵数、受精率、2PN率、MⅡ卵率、优胚率、可利用胚胎率均无显著性差异(P>0.05)。A组各亚组中,A1组Gn天数显著高于A3组[(10.28±1.65)d vs.(9.41±1.37)d,P<0.05],其余各项实验室指标均无统计学差异(P>0.05);B组各亚组中,B2组基础FSH水平显著低于B3组[(6.82±1.44)U/L vs.(7.30±1.50)U/L,P<0.05);B1组获卵数、MⅡ卵率显著高于B3组[分别为(14.43±2.84)vs.(13.22±2.33)和82.23%vs.78.52%,P<0.05],其余实验室指标均无统计学差异(P>0.05)。结论拮抗剂方案和PPOS方案HCG日优势卵泡的比例相似;HCG日优势卵泡比例的高低在拮抗剂和PPOS方案中对实验室指标的影响不大。     

生长激素不同应用时间对IVF助孕结局的影响

目的通过分析重组生长激素(rGH)不同应用时间对多周期体外受精(IVF)患者助孕结局的影响,探讨rGH应用于多周期IVF患者的最佳时间。方法选择西北妇女儿童医院生殖中心2017年1月至2018年6月多周期行IVF助孕且采用rGH辅助治疗的198例患者,其中一部分患者采用长期辅助治疗即促排卵前1月开始用rGH直至HCG日,为长期治疗组(109例);另一部分患者采用短期辅助治疗即促排卵同步应用rGH至HCG日,为短期治疗组(89例)。比较两组患者正常受精率、优胚率、临床妊娠率、早期流产率等的差异。结果两组患者间年龄、不孕年限、基础窦卵泡数(AFC)、基础FSH及BMI比较均无显著性差异(P>0.05);促排卵过程中两组患者的Gn用量及Gn天数亦均无显著性差异(P>0.05);长期治疗组和短期治疗组的内膜厚度[(11.80±2.59)mm vs.(10.94±2.40)mm]、获卵数[(10.28±5.59)vs.(8.35±4.88)]、HCG日E 2水平[(13963.90±10209.89)pmol/L vs.(10893.43±8240.21)pmol/L]及HCG日P水平[(4.42±2.13)nmol/L vs.(3.66±2.13)nmol/L]比较均有显著性差异(P<0.05);两组患者间正常受精率和早期流产率比较均无显著性差异(P>0.05),长期治疗组的优胚率(30.77%vs.31.42%)和临床妊娠率(46.15%vs.54.55%)低于短期治疗组,但均无显著性差异(P>0.05)。结论rGH长时间辅助治疗,可增加促排卵获卵数和子宫内膜厚度,但是对于正常受精率、优胚率及临床妊娠率均无显著改善。长时间GH辅助治疗后妊娠率出现下降趋势,究其原因是否与孕酮上升有关仍需要进一步研究探讨。