姜黄素乳剂对化疗诱导小鼠S180肿瘤细胞多药耐药相关蛋白表达的影响

目的:探讨姜黄素对化疗诱导的肿瘤多药耐药干预的分子生物学基础,以指导临床应用姜黄素干预肿瘤多药耐药的产生。方法:化疗同时给予姜黄素乳剂4周,流式细胞荧光检测肿瘤细胞耐药蛋白P-糖蛋白(P170)、肺耐药蛋白(LRP)和拓扑异构酶(TOPOⅡ)。结果:姜黄素乳剂明显降低化疗诱导后耐药细胞P170、LRP的表达率和TOPOⅡ活性。结论:姜黄素通过调节相关耐药蛋白,干预化疗诱发的肿瘤细胞多药耐药的产生。     

苦参碱对获得性多药耐药小鼠S180肿瘤细胞基因表达产物P170、LRP及TOPOⅡ表达的影响

目的:实验观察苦参碱口服给药对化疗诱导的多药耐药基因表达产物P170、肺耐药蛋白LRP和拓扑异构酶Ⅱ的影响,探讨其干预多药耐药的分子生物学基础,以指导临床应用苦参碱干预化疗多药耐药的产生.方法:以亚于治疗剂量的联合化疗PFC方案,建立小鼠S180肿瘤细胞多药耐药模型,同时给予苦参碱4周,流式细胞仪荧光检测P170、LRP、TOPOⅡ.结果:苦参碱明显降低化疗诱导后耐药细胞P170、LRP的表达率和ROPOⅡ活性.说明苦参碱可通过对相关生物活性物质的调节,干预化疗诱发的肿瘤细胞多药耐药的产生.     

粉防己碱对获得性多药耐药小鼠S180肿瘤细胞P170,LRP,TOPO Ⅱ表达的调控

目的:观察粉防己碱口服给药对化疗诱导的多药耐药基因表达产物P₁₇₀、肺耐药蛋白LRP和拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)的影响。方法:以亚于治疗剂量的联合化疗PFC方案,化疗诱导建立小鼠S180肿瘤细胞多药耐药模型,同时给予粉防己碱4周,流式细胞仪荧光检测P₁₇₀,LRP,TOPOⅡ。结果:粉防己碱明显降低化疗诱导后耐药细胞P₁₇₀,LRP的表达率和ROPOⅡ活性。结论:粉防己碱可通过抑制耐药基因表达和DNA拓扑异构酶活性,干预化疗诱发的肿瘤细胞多药耐药的产生。     

中药逆转白血病多药耐药的研究进展

多药耐药（MDR）是白血病化疗失败的主要原因之一，其发生机制与P-糖蛋白（P—gP）、多药耐药相关蛋白（MRP）、谷胱甘肽-S-转移酶（GST）、拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）、蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）、细胞核因子KB（NF—KB）等多种因素密切相关。近年来，国内外学者致力于从中药中寻找高效、低毒、多靶点的多药耐药逆转剂，且在中药单体、复方及联合用药等方面均取得了一定进展。但也存在诸多不足，如药谱较窄，尚无相应系统理论总结，筛选缺乏针对性等。随着研究的不断深入，必将可以发现更多针对不同耐药机制的中药应用于临床治疗．从而全面、有效地解决在白血病治疗中遇到的多药耐药问题。     

消岩汤对耐顺铂人肺腺癌A549/DDP细胞多药耐药相关蛋白的调控作用

目的探讨消岩汤含药血清对耐顺铂人肺腺癌A545659/DDP细胞多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药蛋白(LRP)及其m RNA表达水平的影响,发现消岩汤对化疗耐药的作用靶点,为肺癌化疗耐药的临床治疗提供理论基础。方法 A549裸鼠皮下移植瘤模型ip给予等量生理盐水,2 mg/kg顺铂,消岩汤低、高剂量(20、40 g/kg)获得含药血清,选择耐顺铂人肺腺癌A549/DDP细胞系作为获得性耐药模型,采用Western blotting免疫印迹法及RT-PCR技术,检测各组含药血清作用下A549/DDP细胞多药耐药基因MRP1、LRP及其产物MRP1、LRP蛋白的表达水平。结果与对照组相比,随着血清中药物浓度的增加,消岩汤低、高剂量组LRP与MRP1蛋白表达逐渐减弱(P0.05)。LRP及MRP1 m RNA水平也有所下降(P0.05),且随着药物浓度的增加,基因表达抑制越明显。结论不同浓度的消岩汤含药血清对MRP1、LRP及其m RNA表达均具有不同程度的抑制作用,且浓度越高,抑制作用越明显,即与剂量呈正相关,揭示消岩汤逆转肺癌耐药可能与抑制MRP1和LRP蛋白功能有关。     

缺氧诱导因子-1α（（HIF-1α）与P糖蛋白（P—gp）在胆管癌中表达及相关性研究

目的：研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）与P糖蛋白（P—gP）在胆管癌中的表达并探讨其一临床意义及两者之间的相关性。方法：采用SP免疫组化法检测胆管癌组织及正常胆管组织中HIF—1α与P-gp的表达。应用SSPS17．0统计软件进行数据处理。结果：HIF—1α和P—gP在胆管癌中的阳性表达率为68．9％和62．2％,均显著高于两者在正常胆管组织中的表达,差异有统计学意义（P〈0．05）。胆管癌中HIF—1α的表达与淋巴结转移有关（P〈0．05）,P—gP的表达与肿瘤的分化程度有关（P〈0．05）,它们的表达与性别、年龄、部位及TNM分期无关（P〉0．05）。HIF—1α与p-gp的表达呈正相关关系（P〈0．05）。结论：HIF—1α与p-gP在胆管癌组织中高表达,且它们的表达呈正相关性。对两者的共同检测可评估临床化疗疗效及患者预后。     

骨巨细胞瘤nm23,mdm2和HER—2基因表达及其临床意义

为探讨nm23,mdm2和HER－2在骨巨细胞瘤（GCT）的表达及与GCT病理分级和复发的关系。应用SP免疫组织化学方法检测nm23,mdm2和HER－2在52例GCT中的表达（GCT按Jaffe分级,I级15例,Ⅱ级25例,Ⅲ级12例）。结果52例GCT中nm23,mdmd2和HER－2的阳性表达率分别为40．4％（21／52）,34．6（1852）和21．2％（1152）,其阳性表达与病理分级差异均无显著性（P＞0．05）,nm23,mdm2和HER－2在复发的病例中,阳性表达率分别为69．2％（9／13）,61．5％（8／13）和38．5％（5／13）,nm23,mdm2表达与GCT复发率差异有显著性（P＜0．05）。     

黄连解毒汤70%醇提物对小鼠S180细胞MDR相关因子表达的逆转作用

目的观察黄连解毒汤70%醇提物对小鼠多药耐药(MDR)基因表达产物P170、肺耐药蛋白(LRP)和拓扑异构酶(TOPO)的影响,明确其干预MDR的分子生物学基础,指导临床应用其逆转MDR的产生。方法模拟临床PFC方案,建立小鼠S180肿瘤细胞MDR在体模型,同时给予黄连解毒汤70%醇提物10d,流式细胞仪荧光检测P170、LRP、TOPO。结果黄连解毒汤70%醇提物明显逆转S180肿瘤细胞MDR相关基因表达产物P170、LRP、TOPO的过度表达。结论黄连解毒汤70%醇提物可通过逆转相关生物活性物质的过度表达,逆转化疗诱发的肿瘤MDR的产生。     

四种生物碱逆转肿瘤获得性多药耐药与调控细胞凋亡的相关性研究

目的:观察四种中药生物碱对模拟临床化疗PFC方案诱导的小鼠S180细胞多药耐药基因mdr1表达蛋白P170过度表达的逆转与调控细胞凋亡相关性,探讨不同中药生物碱对肿瘤多药耐药逆转的差异,以指导临床应用,提高化疗疗效。方法:给予模拟临床PFC方案以亚于治疗剂量的联合化疗诱导四周的腹水型S180小鼠,苦参碱、粉防己碱、氧化苦参碱和盐酸小檗碱2周,流式细胞仪免疫荧光检测S180肿瘤细胞P170、TOPOⅡ、Fas、Trail和细胞凋亡率。结果:苦参碱、粉防己碱明显降低化疗诱导后耐药细胞P170表达率和TOPOⅡ活性,增加凋亡基因Fas表达率,促进耐药肿瘤细胞的凋亡;盐酸小檗碱明显降低化疗诱导后耐药细胞TOPOⅡ的表达率。结论:苦参碱、粉防己碱逆转肿瘤细胞获得性多药耐药P170过度表达与调控细胞凋亡有关。     

不同生物碱对小鼠S180肉瘤细胞获得性多药耐药相关生物因子表达的干预

目的:探讨中药生物碱口服给药对化疗诱导肿瘤MDR干预的分子生物学基础,以指导临床应用中药干预化疗所致MDR的产生。方法:以亚于治疗剂量的联合化疗,同时给予苦参碱、粉防己碱、氧化苦参碱和盐酸小檗碱4周,流式细胞仪荧光检测MDR肿瘤细胞P170、LRP、FOPOⅡ、Fas、CD54和细胞凋亡率。结果:苦参碱、粉防己碱明显降低化疗诱导后耐药细胞P170、LRP的表达率和TOPOⅡ活性,增加凋亡基因Fas表达率,减少细胞黏附因子CD54的表达,促进耐药肿瘤细胞的凋亡;而氧化苦参碱和盐酸小檗碱作用不明显。结论:苦参碱、粉防己碱可通过对MDR相关生物活性物质的调节,干预化疗诱发MDR的产生,并且其作用程度与生物碱的结构相关。     

汉防己甲素逆转肺癌化疗耐药和凋亡抗性的实验研究

目的：研究中药汉防己提取的生物碱汉防己甲素逆转肺癌化疗耐药产生与凋亡发生的机理。方法：实验分对照组（只加培养基）和阿霉素组（ADR组）、汉防己甲素合阿霉素组（Tet／ADR组），后2组采用不同浓度汉防己甲素和阿霉素作用于人肺癌敏感株GLC-82和阿霉素耐药株GLC-82／ADR细胞，通过MTT法检测抗肿瘤药物的细胞毒作用，流武细胞仪检测多药耐药相关蛋白（MRP）表达，碘化丙啶（PI）染色检测细胞凋亡。结果：GLC-82／ADR耐药肺癌细胞株耐药指数（RF）为5．43，说明耐药株肺癌细胞对阿霉素明显耐药；汉防己甲素作用耐药肺癌细胞后其RF降至1．89，说明汉防己甲素可毗逆转GLC-82／ADR耐药肺癌细胞对阿霉素的耐药。化疗耐药肺癌细胞MRP蛋白表达在12h、24h、36h、48h，ADR组与Tet／ADR组比较，差异有非常显著性意义（P〈0．01），说明汉防己甲素可以下调化疗耐药肺癌细胞MRP蛋白表达。化疗耐药肺癌细胞凋亡在6h、12h、18h、24h，Tet／ADR组与ADR组、对照组比较，差异有非常显著性意义（P〈0．01），说明汉防己甲素协同阿霉素增强对化疗耐药肺癌细胞凋亡作用。结论：汉防己甲素可以逆转GLC-82／ADR耐药肺癌细胞对阿霉素的耐药，下调化疗耐药肺癌细胞MRP蛋白表达，协同阿霉素增强对化疗耐药肺癌细胞凋亡作用。     

生脉注射液联合姑息化疗治疗耐药性晚期结肠癌临床研究

肿瘤化疗失败的重要原因是肿瘤在多次化疗后产生多药耐药（multidrug resistance,MDR）,导致肿瘤细胞对一种化学药物产生耐药的同时,对结构和作用机制不同的多种抗肿瘤药物产生交叉耐药性。MDR的产生与P-糖蛋白（P—glycoprotein,P—gp）关系密切。研究表明,P—gp不仅在肿瘤细胞膜上表达,人外周血淋巴细胞（如NK细胞、T细胞、B细胞等）如长期受某些化学药物的作用,其细胞膜上P—gP表达也会显著增加。这为临床检测肿瘤耐药和寻找逆转肿瘤耐药药物带来了方便。     

适合中药研究的小鼠S180肿瘤获得性多药耐药模型的建立及稳定性研究

目的模拟临床化疗PFC(顺铂、环磷酰胺、5-氟脲嘧啶)方案,诱导小鼠S180肿瘤细胞多药耐药(MDR)相关生物因子的异常表达,建立获得性多药耐药基因表达产物P170(P糖蛋白)、LRP(肺耐药相关蛋白)及拓扑异构酶(TOPO)表达小鼠载体模型,并观察模型稳定性,为探讨药物干预MDR的有效途径提供实验模型,同时为临床提供全面定量检测肿瘤耐药程度的方法。方法应用流式细胞术动态检测MDR表达产物P170、LRP、TOPO表达情况及S180细胞凋亡指标(Fas因子,CD95),同法检测同期外周血淋巴细胞上述指标,模型小鼠传代后ig给予苦参碱100mg/kg,再次检测上述指标。结果实验组小鼠自化疗后1周P170、LRP、TOPO表达逐渐增高,自第4周后显著性增加(P<0.05);而S180细胞凋亡率、细胞杀伤率及Fas因子表达率则随化疗时间的延长而逐渐下降。MDR相关基因表达显著性增加时,S180细胞凋亡率等则显著性降低(P<0.05)。第5周时实验组MDR阳性表达小鼠占61.4%。实验组外周血淋巴细胞、凋亡率与S180细胞有显著相关性。结论传代后模型小鼠MDR相关基因表达稳定,给予钙离子拮抗剂苦参碱可逆转上述指标的表达。     

SWI和DSC在脑星形细胞瘤分级中的应用价值探讨

目的 探讨联合应用磁敏感加权成像（SWI）和动态磁敏感对比增强（DSC）灌注加权成像对脑星形细胞瘤分级的价值.方法 29例经病理证实的脑星形细胞瘤,其中,高级别19例（Ⅲ级12例,Ⅳ级7例）,低级别（Ⅱ级）10例,术前行常规MR扫描、SWI、DSC和T1WI增强扫描.分析肿瘤实质、瘤周1 cm水肿区最大相对脑血容量（rCBVmax）及瘤内磁敏感信号（ITSS）分级分别在不同级别星形细胞瘤间的差异.比较肿瘤相同层面rCBVmax、ITSS分级、病理分级之间的相关性,应用受试者工作特征（ROC）曲线评价联合应用ITSS分级和rCBVmax对脑星形细胞瘤分级的诊断效能.结果 肿瘤实质区,Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级星形细胞瘤rCBVmax分别为1.710±0.628、4.271±1.193、6.200±1.012,Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级两两间差异有统计学意义（P〈0.05）;瘤周1 cm水肿区,Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级星形细胞瘤rCBVmax分别为0.081±0.257、0.990±0.662、1.061±0.517,Ⅱ级分别与Ⅲ级、Ⅳ级间差异有统计学意义（P〈0.05）;ITSS分级在不同级别脑星形细胞瘤间差异有统计学意义（P〈0.05）;肿瘤相同层面rCBVmax、ITSS分级与病理分级两两之间均显著相关（P〈0.001）.rCBVmax、ITSS 分级及二者联合的ROC曲线下面积分别为0.937、0.918、0.989,阈值分别为0.776、0.613、0.328时,灵敏度分别为84.2%、78.9%、100%,特异度分别为100%、100%、90%.结论 联合应用SWI和DSC能提高对脑星形细胞瘤分级的准确性,有助于临床治疗和预后判断,是常规核磁的重要补充.     

葛根素注射液对K562/Adr细胞化疗药物敏感性及机理研究

目的：通过观察葛根素注射液协同化疗药物对K562／Adr白血病耐药细胞的抑制作用，探讨葛根素增加白血病耐药细胞对化疗药物的敏感性及作用机理。方法：选K562／Adr耐药细胞株作为靶细胞，采用MTT法观察不同浓度的葛根素注射液对K562／Adr耐药细胞增殖的影响，及细胞对化疗药物的敏感性。RT—PCR的方法检测葛根素对耐药相关基因（MDR1／P-gp、MRP）表达的影响。结果：①MTT法结果显示低到中等浓度的葛根素（25～100μg／mL）对15562／Adr耐药株的生长与对照组相比无显著差异（P〉0.05），但当葛根素浓度提高至250μg／mL以上时，对细胞则出现增殖抑制作用，且随浓度增加抑制作用增强。②用不同浓度的葛根素和化疗药物（Adr 1μg/mL）合用时结果显示，低浓度（25～50μg／mL）的实验组与对照组无显著差异（P〉0．05）；随着葛根素浓度增加（100～500μg／mL），Adr对细胞的抑制作用明显，即K562／Adr对Adr的敏感性与葛根素呈剂量依赖吴系。③K562／Adr细胞经葛根素（100μg/mL）处理1周后，MDR1基因表达受到抑制，是未经处理细胞的2．5倍，MRP基因表达在处理前后无明显变化；当处理1个月后，细胞中MDR1、MRP两基因表达均明显低于未经处理过的细胞，分别是未经处理细胞的2．6倍和3．5倍。结论：葛根素注射液在一定浓度下，能直接抑制白血病耐药细胞增殖，并能提高耐药细胞对化疗药物的敏感性；其机制可能通过对耐药相关基因（MDR1、MRP）表达抑制来起作用。     

乾坤胶囊对中晚期非小细胞肺癌化疗的增效减毒机制研究

目的观察乾坤胶囊对中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者化疗前后外周血中肺癌转化生长因子(TGF-α)、T淋巴细胞亚群变化及对患者活检组织中增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数及多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药相关蛋白(LRP)基因表达的影响,探讨其对化疗的增效减毒作用机制。方法将60例NSCLC患者随机分为2组,治疗组30例予乾坤胶囊联合化疗治疗,对照组30例予单纯化疗治疗。测定外周血中TGF-α、CD3、CD4、CD8、CD4/CD8含量,检测活检组织中PCNA阳性细胞数,检测活检组织中MRP、LRP基因的表达。结果 2组治疗后TGF-α含量均较本组治疗前降低(P0.01,P0.05),治疗组治疗后TGF-α含量低于对照组(P0.05)。治疗组治疗后CD3、CD4、CD8、CD4/CD8与本组治疗前比较差异有统计学意义(P0.05,P0.01),对照组治疗后CD4/CD8较本组治疗前升高(P0.05),治疗组治疗后CD3、CD4、CD4/CD8均高于对照组(P0.05)。2组治疗后PCNA阳性细胞数均较本组治疗前降低(P0.01),治疗组PCNA阳性细胞数下降较对照组更显著(P0.05),治疗组治疗后MRP、LRP基因表达水平均较本组治疗前下降(P0.05)。结论乾坤胶囊治疗NSCLC疗效确切,通过降低TGF-α含量,调节T淋巴细胞亚群的比例,影响PCNA阳性细胞数及MRP、LRP基因表达,从多种机制上对NSCLC化疗起到增效减毒的作用。     

生物碱逆转肿瘤多药耐药性的研究进展

肿瘤细胞多药耐药（MDR）是化疗失败的主要原因，近年来逆转肿瘤多药耐药的研究越来越受到重视。MDR的机制涉及P-糖蛋白（P-glycoprotein，P—gp）的高表达、多药耐药相关基因（MRP）等。总结了中药生物碱逆转MDR的近7年研究进展，并讨论它们的主要特点和作用机理。     

丹参酮ⅡA对小鼠Lewis肺癌获得性多药耐药及相关酶系影响的实验研究

目的:观察丹参酮ⅡA对化疗诱导的小鼠Lewis获得性多药耐药(MDR)模型化疗敏感性及对P-糖蛋白(P-gp)、拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)的影响.方法:采用体外培养的方法建立耐阿霉素(ADM)Lewis肺癌细胞株,皮下注射复制肿瘤获得性多药耐药模型,分组给予化疗药环磷酰胺(CTX)及丹参酮ⅡA 4周,观察各组瘤体大小,计算抑瘤率.流式细胞仪荧光检测干预后MDR肿瘤细胞凋亡及P-gp、TOPOⅡ表达变化.结果: 丹参酮ⅡA能显著提高CTX的抑瘤率及肿瘤细胞凋亡, 降低P-gp、TOPOⅡ表达.结论:丹参酮ⅡA有逆转小鼠Lewis肺癌获得性多药耐药的作用,可能与降低P-gp、TOPOⅡ表达有关.     

ERCC1、TS在胃癌组织中的表达与术后辅助化疗预后的关系

目的：探讨胃癌术后患者核苷酸切除修复交叉互补基因1（ERCC1）、胸苷酸合成酶（ TS）表达与术后辅助化疗预后的关系。方法选取86例初次诊断为胃癌行胃癌根治术、术后病理诊断为Ⅱ～Ⅲ期的患者,术后均采用XELOX辅助化疗方案化疗,并进行4年以上随访。运用免疫组化方法检测患者癌组织中ERCC1、 TS蛋白表达情况,分析ERCC1、TS表达与术后辅助化疗预后的关系。结果86例胃癌患者癌组织中ERCC1和TS的阳性表达率分别为40％和36％。 ERCC1和TS阳性表达率与肿瘤的分化程度相关。 ERCC1阴性表达者和TS阴性表达者平均生存期均明显长于阳性表达者（ P均＜0．05）。多因素COX回归分析表明,ERCC1、TS阳性表达者术后辅助化疗预后差[HR＝0．29,95％CI（0．12,0．69）,P ＝0．006;HR＝0．49,95％CI（0．20,0．87）,P＝0．010]。结论 ERCC1与TS表达情况可以作为预测胃癌术后辅助化疗预后的分子标志物。     

黄连解毒汤醇提物预防给药对MDR模型小鼠相关基因表达产物的影响

目的：观察黄连解毒汤70%醇提物预防给药对小鼠多药耐药(MDR)基因表达产物P170、肺耐药蛋白(LRP)和拓扑异构酶II(TOPO II)的影响,探讨其干预MDR的分子生物学基础,指导临床应用以预防MDR的产生。方法：小鼠随机分为非耐药模型组、耐药模型组、黄连解毒汤70%醇提物100,50 mg·kg^-1组,模拟临床PFC方案,建立小鼠S180肿瘤细胞多药耐药在体模型,同时给予黄连解毒汤70%醇提物4周,流式细胞仪荧光检测P170,LRP,TOPOII。结果：黄连解毒汤70%醇提物明显降低化疗诱导后耐药细胞P170,LRP的表达率和ROPOII活性。结论：黄连解毒汤70%醇提物可通过对相关生物活性物质的调节,干预和逆转化疗诱发的肿瘤MDR的产生。