1例ABw表型的血清学和基因型检测

目的 鉴定对1例ABO疑难血型标本的表型和基因型.方法 1例ABO疑难血型标本用血清学方法做ABO表型检测,用PCR-SSP法做ABO基因鉴定,用直接测序法和克隆测序法对ABO基因的第6、7外显子做序列分析.结果 血清学定型:ABw表型;PCR-SSP法鉴定:AB型;直接测序:A101/B101等位基因杂合,但伴有nt1055的G/A突变;克隆测序:G1055A突变发生在B101等位基因上,该突变产生Bw07等位基因.结论 在中国人群中发现A101/Bw07基因型.     

基因分型结合血清学方法鉴定ABO血型亚型

目的准确鉴定红细胞ABO亚型。方法采用血清学方法鉴定12例ABO血型正反定型不符标本,结合PCR-SSP基因定型方法作检测鉴定,并对其中9例作基因测序确定基因型。结果 ABO基因分型结果与血型血清检测结果一致率为66.67%(8/12);其余不相符的4例:2例为B(A),1例为Cis AB,1例为新基因(新基因血型血清学结果不确定,PCR-SSP结果为A1/O02,测序结果为A102/O02型)。结论 ABO血型基因分型技术结合血清学定型可用于ABO亚型鉴定及ABO血型的正确定型。     

1例A3B亚型的血清学和分子生物学结果分析及家系调查

目的 分析1例ABO血型A亚B型标本的血清学和分子生物学特征,探讨ABO亚型鉴定的准确方法。方法 采用常规血清学方法分析了1例标本ABO表型,首先使用PCR-SSP方法对样本进行ABO基因分型,再采用直接测序的方法对样本的第6、第7外显子测序确定其基因型。结果 血型血清学检测结果为A亚B型;PCR-SSP分型结果为A₁B型;测序发现标本ABO基因的第6和第7外显子存在突变：第6号外显子发生297A>G突变,第7号外显子发生467C>T、526C>G、657C>T、703G>A、745C>T、796C>A、803G>C及930G>A突变,该样本基因型为A307/B01。先证者母亲血型血清学检测结果疑似为A亚型;基因测序结果为A₃型。先证者父亲血型血清学检测结果为B型。结论 血清学实验结合分子生物学方法可准确鉴定ABO亚型,分子生物学方法还有助于探索ABO亚型的形成机制。     

对1例罕见CisAB01/B血型的基因学研究

目的 探讨ABO血型系统中血型血清学定型正反定不一致的情况下,采用PCR-SSP技术与ABO基因测序技术对CisAB血型进行直接鉴定.方法 采用常规血型血清学技术检测ABO血型,采用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法进行CisAB血型的基因鉴定,然后经核酸测序分析其ABO基因EXON6,EXON7序列及突变位点.结果 血型血清学鉴定表明患者血型为A亚B,用PCR-SSP基因分型确定为CisAB01/B,其ABO位点的第6、第7外显子序列分析发现该标本EXON6测序结果2条等位基因261没出现碱基G缺失,说明不存在0基因,出现的有:297G/A.EXON7测序结果467C ＞T;803G＞C结果鉴定是CisAB01;526C＞ G;657C＞ T;703G＞ A796C＞A;803G＞C,930G＞A结果鉴定是B101.结论 基因学鉴定可对血清学试验结果进行确认.     

B(A)血型的血清学特点及基因分析—附1例报告

目的探讨1例B(A)血型的血清学特点,及采用基因测序技术对B(A)血型进行鉴定。方法采用血型血清学技术检测ABO血型表型,采用直接测序和克隆测序方法确定其ABO基因型。结果血清学结果正反定型不符,正定型为AB型,A抗原较弱,H抗原较正常B型明显增强;反定型血浆中有较弱的抗-A1;对ABO基因第6、7外显子进行基因测序,第6外显子有O_(02)等位基因,第7外显子存在640AG突变,证实为B(A)_(04)等位基因,基因型确定为B(A)_(04)/O_(02)。结论血型确定为B(A)血型,进一步基因型鉴定为罕见的B(A)_(04)/O_(02)。     

类孟买血型鉴定与输血策略研究

目的 研究类孟买血型的鉴定方法、血清学特点和输血策略。方法 对先证者及其四妹采用凝胶微柱法和试管法正反定型,吸收放散试验证实红细胞上弱表达的ABO抗原,测定唾液中的ABH物质,筛查血清中不规则抗体,应用PCR-SSP技术进行ABO基因和FUT1基因分型,并扩增ABO基因的第6、第7外显子和FUT1编码区序列后对PCR产物进行直接测序分析。采用血清学方法为先证者筛选适宜输注的红细胞。结果 先证者和其四妹血清学鉴定为Bm~h和Om~h,血清中有抗-H,ABO基因分型结果为BO2、0102,FUT1基因分型结果均为h1h1型。先证者ABO基因测序结果为B101/002,FUT1基因测序结果为第547-552位AG 2碱基缺失的纯合突变。结论 血型血清学联合分子生物学方法可准确鉴定类孟买血型;类孟买血型个体输血时应采取特殊输血策略,以避免输血不良反应的发生。     

类孟买血型鉴定及输血策略

目的了解类孟买血型血清学及分子生物学特点。方法用血型血清学方法对1例正反定型不符献血者标本检测ABO,H,Lewis血型,抗体筛选、鉴定及交叉配血试验,采用PCR-SSP方法检测ABO血型基因型,采用分子生物学测序进行类孟买血型确认。结果血清学检测结果为Ah分泌型;ABO血型基因检测结果为AO2;FUT1测序显示235GC,881_882d~(el)TT,FUT2测序只存在357CT。结论发现并准确鉴定血型是保证安全输血的必要条件,对于稀有血型献血者应告知并招募其加入稀有血型献血者队伍。     

利用三代测序技术鉴定c.586T>C突变导致的Bel亚型

目的 利用PacBio三代测序技术鉴定c.586T>C突变导致的Bel亚型,并分析Bel亚型家系的血型血清学特点。方法 ABO血型表型检测使用血清学方法,对ABO正反定型不符的家系标本进行ABO基因第6、7号外显子Sanger测序。利用PacBio三代技术对先证者及其子女的3例样本进行ABO基因全长单体型分析。结果 先证者血清学表型为Bel亚型,测序技术鉴定ABO基因序列第7外显子存在c.586T>C位点突变,三代测序单体型鉴定先证者ABO基因型为ABO*BEL(c.586T>C)/O01.02,其长子和长女基因型为：ABO*A1.02/BEL(c.586T>C)、ABO*B.01/BEL(c.586T>C)。结论 c.586T>C位点突变是导致本例Bel的分子基础,PacBio三代测序技术能够精准鉴定ABO亚型单体型。     

罕见B(A)血型的血清学及基因检测研究

本研究旨在通过血清学和分子生物学方法研究1例ABO血型系统中罕见B(A)型,并分析造成多次检测结果不一致的原因。采用血型血清学方法鉴定ABO血型血清型,同时采用PCR测序方法检测其基因型。结果表明,该献血者血清学结果正反定型结果不符,正定型AB型,反定型B型,ABO基因型为B(A)04/O01型,存在nt640A>G点突变,导致214位甲硫氨酸被缬氨酸置换。结论:对ABO血型血清学正反定型不符的标本,可用分子生物学方法进行辅助验证,并能阐述ABO血型弱表达现象的分子基础。     

CisAB与B(A)血型的鉴定分析——附报告5例

目的了解吉林地区人群中Cis AB和B(A)血型的特点及其表型与基因型的关联性。方法采用微孔板法对本血液中心无偿献血者共71 200名进行ABO血型筛查鉴定,对凝集强度减弱和正反定型结果不一致样本采用试管法进行血型血清学分析和亚型鉴定,对血清学检测为ABO亚型的样本再采用PCR-SBT方法对6、7外显子和部分内含子进行基因序列分析。结果经ABO基因测序确定Cis AB 3例、B(A)2例,等位基因有Cis AB01、Cis AB05、B(A)02、B(A)04,其中发现1例B(A)04/B(A)04纯合基因型,它们对应的血清学表型有A2B、A2Bx和Ax B。结论Cis AB和B(A)血型通过血清学表型通常难以区分,经基因测序可以明确血清学特征形成的分子基础。     

ABO血型正反定型不一致原因分析及对策探讨

目的探讨ABO血型定型中正反定型不一致的原因和解决方法。方法对正反定型不一致血液标本进行不同的血型血清学试验,对存在疑问的标本进行基因分型、测序,分析正反定型不一致的原因,进行正确的红细胞分型。结果共检查ABO血型正反定型不一致标本45例,其中冷自身抗体5例、亚型11例、抗体缺失及减少7例、抗原性减弱10例、因输血或妊娠发生同种抗体5例,自身免疫性贫血7例。对其中9例血型血清学难鉴定标本和亚型标本进行PCR扩增,测序,确定其基因型。结论对ABO血型正反定型不一致无法定型的血液标本,可以采用基因分型及其他辅助手段正确鉴定ABO血型,以保证输血安全性和有效性。     

Ael亚型血清学及基因型分析一例

目的对本血站正反定型不符的1例献血者标本进行血清学疑难血型鉴定和分子生物学机制分析。方法常规血清学检测;PCR-SSP做ABO基因初步分型,并直接测序;单克隆测序检测标本DNA序列的单体型。结果血清学结果显示标本正定型为O型,反定为A型;PCR-SSP结果显示标本基因型为O1/A型;直接测序和单体型测序结果显示标本基因型为Ael05/O102。结论疑难血型鉴定有时需要结合血清学和分子生物学方法才能准确定型,此例血清学正反定型不符标本表型为Ael,其基因型为Ael05/O102。     

Bx02等位基因的鉴定及家系遗传分析

目的:对ABO正反定型不符的疑难标本进行血型鉴定,并对其家系的ABO基因的分子生物学特点进行探讨。方法:采用PCR-SSP对血清学方法定型为B亚型的先证者及其家系共5份样本做基因分型,并对其ABO血型基因第6、7外显子扩增后进行直接测序及单倍型测序,分析后确定其基因型。结果:该家系中3份标本ABO基因序列与ABO*B101相比,在第905位碱基发生了AG的突变。结合血清型学表现,先证者ABO基因型可定为Bx02/O102。结论:采用DNA序列分析法可以对ABO血型血清学正反定型不符的标本进行验证,并能阐述ABO血型正反定型不符或弱表达现象的分子基础。     

人类ABO血型基因型检测的研究

ABO血型—直采用血清学方法鉴定ABO血型的基因产物，结果可靠、准确，但不能检测出基因型。本文通过ABO血型基因中几个不同位点的差异，设计了特异性引物，采用PCR-SSP技术特异性地扩增A、B和。基因，该方法简单、快速，可鉴定出6种ABO血型基因型AB、AA、AO、BB、BO、OO。本文利用该技术对240名献血者进行了ABO血型的基因型多态性分析．结果P基因频率0.2292，q基因频率0.2125，r基因频率0.5683。     

在A型个体中发现ABO~* A213等位基因

目的鉴定A抗原弱阳性个体的血型血清学特点及基因特征。方法对1名A抗原弱阳性个体采用正反定型鉴定其ABO血型,并用PCR技术对ABO基因的7个外显子和启动子分别扩增后测序。结果血型血清学鉴定该个体表达弱A抗原,测序结果显示ABO合子型为A/O型,其中ABO*A等位基因第7外显子742位为T碱基。结论在A型个体中发现A213等位基因。     

中国人群血型ABO亚型的分子基础研究

目的:对我国人群血型ABO亚型的表型与基因型进行关联性研究,以探讨ABO亚型的分布特点及分子背景。方法:采用血清学方法对2014年7月至2019年6月间1 545 505名献血者和116 209例受血者中检出的血型ABO亚型进行表型鉴定,用直接测序或克隆后测序分析ABO基因的DNA序列。结果:血型血清学鉴定在1 545 505名献血者和116 209例受血者中共检出ABO亚型617例,检出率为3.71/万,检出率最高的表型为B(A)(0.066‰),其次是B3(0.045‰)和Bx(0.039‰)。544例ABO亚型样本经基因测序鉴定出42种ABO亚型等位基因,其中ABO*BA.04的检出构成比最高(25.20%),其次为ABO*BA.02 (11.55%)和ABO*cis-AB.01(9.71%)。关联分析提示,ABO亚型等位基因所对应的表型可与首次检测的表型不一致,即一种基因型可对应多种表型。结论:中国人群血型ABO亚型检出率为3.71/万,B(A)表型是中国人群中最常检出的ABO亚型,B3和Bx相关的亚型次之;较常检出的亚型等位基因则是ABO*BA.04、ABO*BA.02和ABO*cis-AB.01。     

B(A)血型鉴定及临床输血策略探讨——附1例B(A)02/O01血型报道

目的探讨降低B(A)亚型漏检率及其临床紧急输血流程。方法对1例急诊手术患者,采用血清学方法进行血型鉴定,根据鉴定结果初步确认为ABO亚型,后采用2种方法进行交叉配血。运用PCR(聚合酶链式反应)对该患者的ABO血型基因扩增并测序,明确基因型。结果该患者血型血清学结果显示正反定型不符,正定型为A弱B强,血清中存在较弱的抗-A1,H抗原较B细胞明显增强;术中输注B型洗涤红细胞4U、AB型血浆600mL,无输血不良反应。患者ABO基因测序结果与A101标准序列比对,符合(A)02/O01基因型。结论 B(A)血型的血清学特征不明显,血清学检测必须严格遵守标准化操作流程,降低漏检率。本研究对B(A)患者制定了紧急输血流程,保证临床用血。同时其明确鉴定需进一步结合分子生物学检测,ABO基因测序联合单克隆测序可以有效明确其分型,必要时可选择二代测序的方法。     

一例Bm~h类孟买血型的基因分析

目的鉴定1例ABO正反定型不符的血型,并分析其基因变异情况。方法使用标准血清学方法鉴定患者血型;对ABO基因的第6和第7外显子进行PCR扩增及测序;对FUT1基因的第4外显子和FUT2基因的第2外显子进行PCR扩增及测序。结果经血清学检测,此例ABO血型正定型为O型,反定型为B型;Lewis血型为Le(a-b+)。经基因测序分析,ABO基因型为B101/O01;FUT1基因型为h3/h3(c.658CT纯合突变);FUT2基因型为Se/Se。结论发现1例由FUT1基因c.658CT纯合突变导致的Bm~h类孟买血型。     

B_w31的血型血清学和分子生物学研究——附1例报告

目的对1例正反定型不符的标本进行血清学疑难血型鉴定和分子生物学机制分析。方法应用常规血型血清学方法进行血型鉴定;对ABO基因的Exon6和Exon7扩增后进行直接测序,并进行单体型测序确定其基因型。结果该例标本血清学表现为B_w,红细胞与抗-A不凝集,与抗-B 2+凝集,与抗-A1不凝集,血清中存在抗-A;直接测序及单体型测序显示,此例标本的B等位基因在Exon7存在nt664GA突变。结论经测序检测证实,此例血清学表现为B_w的标本,其基因型为罕见的B_w31/O01型。     

ABO*BEL.11 等位基因突变致红细胞B 抗原弱表达的家系血型血清学及分子机制研究

目的 探讨由ABO*BEL.11 等位基因导致的ABO 正反定型不符样本及家系的血清学和分子生物学特性,研究其遗传方式。方法 常规血型血清学方法和吸收放散试验鉴定样本的ABO 血型表型;PCR 方法扩增ABO 基因7 个外显子及其侧翼内含子,对扩增产物进行直接测序和克隆测序分析,并对先证者的亲属进行家系调查。结果 先证者血型血清学结果为B弱;测序显示:存在ABO*B.01/O.01.01 杂合且伴c.586C/T 突变;克隆测序:c.261delG,297A>G,c.526C>G,c.586T>C,c.657C>T,c.703G>A,c.796C>A,c.803G>C 和c.930G>A 共9 个突变,基因型结果为ABO*BEL.11/O.01.01。家系调查显示先证者父亲、母亲、妻子和女儿血型血清学结果分别为B 型、O 型、A 型及B 弱,其中先证者父亲及女儿的ABO 基因存在ABO*BEL.11 等位基因。结论 ABO*B.01 等位基因上c.586T>C 的突变产生ABO*BEL.11 等位基因,从而导致红细胞上B 抗原的弱表达,且能够稳定遗传突变。