U50,488H抑制缺氧/复氧心肌细胞线粒体分裂作用及机制

目的探讨外源性κ-阿片受体(κ-OR)激动剂U50,488H对缺氧/复氧(H/R) H9C2心肌细胞线粒体分裂的作用及机制。方法将H9C2心肌细胞随机分为常氧对照组(Control组)、H/R组、H/R+U50,488H组(H/R+U组)、H/R+κ-OR阻断剂(nor-BNI)+U50,488H组(H/R+N+U组)、H/R+磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂wortmannin+U50,488H组(H/R+W+U组)、H/R+蛋白激酶B(Akt)抑制剂MK2206+U50,488H组(H/R+M+U组)。采用CCK8试剂盒检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;激光共聚焦显微镜观察细胞线粒体形态;免疫印迹法检测细胞内PI3K、Akt、线粒体动力学分裂相关蛋白1(Drp1)的表达。结果与Control组比较,H/R组细胞活力降低,细胞凋亡率显著增加,线粒体分裂增加,磷酸化PI3K与Akt表达略增加,磷酸化Drp1 Ser637表达显著降低(P <0. 05);与H/R组比较,H/R+U组细胞活力增加,细胞凋亡率下降,线粒体分裂减少,磷酸化PI3K、Akt Ser473与Drp1 Ser637表达均显著增加(P <0. 05)。结论 H/R可引起心肌细胞凋亡及线粒体异常分裂,使用U50,488H激活κ-OR后,可通过PI3K-Akt通路促使Drp1 Ser637磷酸化,抑制H/R心肌细胞线粒体异常分裂,减少细胞凋亡。     

胍丁胺-I1咪唑啉受体对μ-阿片受体脱敏和下调的影响

目的:观察胍丁胺通过激活I1咪唑啉受体对阿片预处理引起的μ-阿片受体脱敏和下调的影响.方法:以CHO-μ和CHO-μ/IRAS (imidazoline receptor antisera-selected protein,咪唑啉受体抗血清选择性蛋白)细胞作为研究对象,用[35S]GTPγS和3H-二丙诺啡(diprenorphine)结合实验方法,确定胍丁胺-I1咪唑啉受体作用系统对μ-阿片受体脱敏和下调的影响.结果:在正常CHO-μ和CHO-μ/IRAS细胞中,μ-阿片受体的表达量和对配体的亲和力无显著差异;两细胞中μ-阿片受体对激动剂刺激的反应一致.阿片受体激动剂DAMGO[(D-Ala2,N-Me-Phe4,Gly5-ol)-脑啡肽(enkephalin),10 μmol/L]处理CHO-μ/IRAS细胞30 min μ-阿片受体出现脱敏,而胍丁胺(10 nmol/L～100 μmol/L)不影响μ-阿片受体脱敏过程.DAMGO(1 μmol/L)处理两细胞12 h后可出现μ-阿片受体的下调,胍丁胺(1～100 nmol/L)浓度依赖性地抑制CHO-μ/IRAS细胞中μ-阿片受体的下调,而相同浓度胍丁胺在CHO-μ细胞中无此作用.胍丁胺这一作用能被I1咪唑啉受体阻断剂依法克生(efaroxan,Efa)所阻断.结论:胍丁胺通过激活I1咪唑啉受体可抑制DAMGO长期处理所致的μ-阿片受体下调,此作用可能与胍丁胺抑制阿片依赖有关.     

慢性缺氧时心脏κ-阿片受体对β-受体信号的调节作用

为研究慢性缺氧时κ—阿片受体对β—受体信号的调节作用及机制,用光谱荧光法测定电刺激引起的细胞内[Ca^2 ]i瞬变,用RT—PCR测定κ—阿片受体mRNA的表达,用Western blot观察缺氧后G蛋白的变化。结果显示,κ—阿片受体选择性激动剂U50488H可明显抑制β—受体激动剂异丙肾上腺素增加[Ca^2 ]i瞬变幅度的作用,慢性缺氧后,该作用明显减弱;κ-阿片受体mRNA的表达和Gi蛋白的活性在慢性缺氧后无明显改变,而小Gs蛋白的活性明显降低。提示κ—阿片受体对β—受体信号的负性调节作用在慢性缺氧后显著减弱。其机制可能部分与介导β—受体信号的Gs蛋白的活性降低有关。     

64排螺旋CT诊断Abernethy畸形二例

病例资料病例1,女,53岁。以发现高血糖7年,双下肢浮肿5 d入院。入本院后体检：脾肋下可触及5 cm。实验室检查：乙肝标志物均阴性,空腹血糖8．0 nmol／L,肝功能：总胆红素（T-BIL）为110μmol／L（正常3．4-17．7μmol／L）,直接胆红素（D-BIL）6．7μmol／L （正常0-6．8μmol／L）,间接胆红素（I-BIL）45μmol／L（正常1．7-10．2μmol／L）,肌酐220．0μmol／L （男性44-133μmol／L,女性70-108μmol／L,小儿25-69μmol／L）,谷氨酰转氨酶（GT）205 U／L （0-50 U／L）,     

奥氮平对淀粉样β蛋白25-35诱导的PC12细胞凋亡的保护作用

目的探讨奥氮平对淀粉样β蛋白25-35（Aβ25-35）诱导的PC12细胞凋亡的保护作用机制。方法以Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡，采用MTT比色分析测定细胞存活率，应用Western blot检测Aβ25-35以及奥氮平对PC12细胞Bax、Caspase-3表达的影响，结果10^-14～10^-5mol／L的Aβ25-35减低PC12细胞存活率，50μmol／L及100μmol／I。奥氮平预处理24h可提高PC12细胞存活率，相同浓度Aβ25-35奥氮平预处理组与非处理组比较差异显著（P〈0．05）；0．01、2、20μmol／L Aβ25-35处理的PC12细胞Bax表达增加，50μmol／L奥氮平预处理使0．01μmol／L和20μmol／L Aβ25-35诱导的PC12细胞Bax的表达减低（P〈O．05）；2μmol／L及20μmol／L Aβ25-35处理的PC12细胞Caspase-3的表达增高，5μmol／L奥氮平预处理能抑制其表达升高，与非预处理比较差异显著（P〈O．05）。结论奥氮平可对抗Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用，其机制可能与抑制Bax、Caspase-3的表达有关。     

基于ERα-EGFP核颗粒形成的荧光成像分析快速识别环境中雌激素样物质

目的：利用基于荧光成像分析的细胞高内涵分析（ high content analysis ，HCA）技术，建立快速识别环境中雌激素样物质的方法。方法以稳定表达雌激素受体α（ ERα）-增强型绿色荧光蛋白（ enhanced green fluorescent protein，EGFP）融合蛋白（ERα-EGFP）的人骨肉瘤U2OS细胞为模型，以雌激素（17-β-雌二醇）为阳性对照药，以黄体酮为阴性对照药，基于ERα-EGFP核颗粒形成的荧光成像分析探查环境污染物质双酚A、壬基酚、邻苯二胺、对氨基苯酚、间苯二酚、间氨基苯酚、对苯二胺和甲基-2，5-二胺硫酸盐等对ERα-EGFP细胞核颗粒形成作用（ Foci作用）的影响，分析其量效关系；并利用荧光素酶报告基因实验验证HCA的结果。结果 HCA结果显示，仅有双酚A、壬基酚和阳性药17-β-雌二醇能够剂量依赖地促进ERα-EGFP 细胞核颗粒形成作用，其EC50分别为（1．48±1．79）μmol／L、（3．70±0．78）μmol／L及（4．17±0．41） nmol／L，最小检出浓度分别为1 nmol／L（17-β-雌二醇）、300 nmol／L（双酚A和壬基酚）；邻苯二胺、对氨基苯酚、间苯二酚、间氨基苯酚、对苯二胺和甲基-2，5-二胺硫酸盐等不能诱导ERα-EGFP细胞核颗粒形成作用。荧光素酶报告基因实验结果同样显示，活性药物双酚A、壬基酚和阳性药17-β-雌二醇能够剂量依赖地诱导ERα报告基因ERE-Luc的活性，其EC50分别为（2．31±0．21）μmol／L、（6．60±0．94）μmol／L及（4．46±0．56）nmol／L；最小检出浓度是3 nmol／L（17-β-雌二醇）、300 nmol／L（双酚A）和1μmol／L （壬基酚）。 HCA和荧光素酶报告基因实验的结果基本一致，但HCA方法更为灵敏，实验步骤更为简便。结论基于荧光成像定量分析的HCA技术能够快速和灵敏地识别具有ERα激动活性的环境物质，是分析环境雌激素的有效方法。受试化合物中双酚A和壬基酚有明确的ERα激动活性。     

新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂对缺氧损伤心肌细胞的保护作用研究

目的：利用化学发光方法和细胞筛选模型,检测新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂（ histone deacetylase inhibitor, HDACi）JZ005的抑制组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases,HDACs）的活性;建立氯化钴损伤的心肌细胞缺氧模型,初步探讨JZ005对缺氧损伤细胞的保护作用。方法采用脂质体转染法将含有p21启动子元件的荧光素酶报告基因真核表达载体pCI-p21-Luc转入到人胚肾细胞293中,用G418筛选获得稳定转染荧光素酶报告基因的单克隆细胞系;采用已报道的HDACi曲古抑菌素A（ trichostatina A,TSA）为阳性对照,检测细胞筛选模型的稳定性;用HDACi化学发光检测试剂盒及上述细胞筛选模型测定JZ005抑制HDACs的活性;用不同浓度的JZ005处理氯化钴缺氧损伤的大鼠胚胎心肌细胞（H9c2）,MTT法检测JZ005对缺氧损伤细胞的保护作用。免疫印迹法检测JZ005处理后正常及缺氧损伤心肌细胞组蛋白H3的乙酰化水平变化。流式细胞术检测JZ005对H9c2细胞缺氧损伤后凋亡的影响。结果建立含p21启动子元件荧光素酶报告基因的HDACi细胞筛选模型;JZ005能够显著抑制HDACs的活性,浓度50～400μmol／L,抑制率＞50％。对缺氧损伤的心肌细胞具有明显保护作用,与对照组相比,细胞存活率提高38．33％、56．00％和35．20％,同时能够上调缺氧损伤心肌细胞组蛋白H3的乙酰化水平,拮抗缺氧损伤心肌细胞的凋亡,细胞凋亡数目从对照组的12．89％分别下降到给药组（25,50和100μmol／L）的6．63％、10．56％和8．89％。结论成功建立了HDACi的细胞筛选模型;JZ005作为一种新型的HDACi ,具有明显的保护心肌细胞拮抗缺氧损伤的作用,提示JZ005有可能开发成一种治疗缺氧损伤的药物。     

利拉鲁肽对缺氧和高糖所致心肌细胞钙超载和细胞凋亡的影响

 目的 研究利拉鲁肽对缺氧和高糖所致心肌细胞钙超载和细胞凋亡的影响。方法 采用原代培养的乳鼠心肌细胞,建立缺氧和高糖模型。实验分为:正常对照组、利拉鲁肽对照组、缺氧和高糖模型组、利拉鲁肽处理组、胰高血糖素样肽-1 (glucagon like peptide-1, GLP-1)受体抑制剂组、高渗对照组6组。采用荧光分光光度法检测心肌细胞内钙离子变化,化学荧光法检测活性氧族(reactive oxygen species, ROS)水平、利用生化方法检测Ca²⁺-ATP 和Na⁺-K⁺-ATP酶活性、RT-PCR技术检测钙敏感的钙蛋白酶(μ-calpain)基因表达、流式细胞仪测定细胞凋亡率、ELISA法检测细胞caspase-3活性。结果 与正常对照组相比,缺氧高糖模型组细胞内ROS水平、μ-calpain mRNA表达量、caspase-3活性均显著升高(P<0.01);Ca²⁺-ATP 和Na⁺-K⁺-ATP酶活性显著降低(P<0.01);游离钙离子浓度由(117.19±15.04)nmol/L增加至(508.53±26.11)nmol/L,细胞凋亡率由(3.95±0.12)%增加至(31.03±4.30)%(P<0.01)。利拉鲁肽处理组细胞较缺氧高糖模型组上述参数均明显改善,游离钙离子浓度和细胞凋亡率显著降低(P<0.01);GLP-1R抑制剂exendin(9-39)可拮抗利拉鲁肽的上述作用(P<0.05)。结论 利拉鲁肽可明显抑制缺氧和高糖所致心肌细胞钙超载及μ-calpain基因的上调,降低caspase-3水平,减少心肌细胞凋亡,对心肌细胞具有保护作用。     

神经肽Y1受体激动药诱导大鼠心肌细胞肥大的研究

 目的 探讨神经肽Y1受体激动药[Leu31,Pro34]NPY在诱导心肌细胞肥大中的作用.方法 用不同浓度[Leu31,Pro34]NPY刺激原代培养心肌细胞,采用放射性核素3H-leu掺入法检测培养心肌细胞蛋白质合成速率.应用荧光定量PCR方法检测[Leu31,Pro34]NPY对培养心肌细胞肥大相关基因ANF、β-MHC mRNA表达的影响.结果 [Leu31,Pro34]NPY(10-9 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L)作用心肌细胞24 h后可明显增加心肌细胞3H-leu的掺入量 (P＜0.01),并可诱导心肌细胞β-MHC表达增加(P＜0.01),对ANF表达的影响不明显.结论 神经肽Y1受体激动药[Leu31,Pro34]NPY可加快细胞蛋白质合成速率、促进心肌细胞β-MHC表达,直接诱导心肌细胞的肥大.     

δ、κ、μ受体在创伤失血性休克大鼠细胞免疫抑制中的作用

目的 探讨何种阿片受体亚型介导了血浆β-内啡肽（β－endorphin,β-EP)在创伤失血性休克后免疫抑制中的作用。方法 采用体外实验，分别以δ、κ、μ受体高选择性拮抗剂naltrindole(NTI)、nor-binaltorphimine(Nor-BNI)和小剂量纳洛酮（naloxone,NAL,相对选择性μ受体拮抗剂）为工具药，作用于休克1h血浆处理的脾细胞，观察刀豆素A诱导的脾细胞增殖、白细胞介素－2（IL－2）分泌及白细胞介素－2受体（IL－2R）表达的变化。实验分休克血浆组（I组）、受体拮抗剂治疗组（Ⅱ组）、受体拮抗剂自身对照组（Ⅲ组）及基础对照组（Ⅳ组）。结果 Ⅱ组与I组相比，10μmol/L NAL（非选择性阿片受体拮抗剂）非常显著地增强脾细胞增殖功能、IL－2分泌和IL－2R表达（P＜0．01）；小剂量NAL（1－100nmol/L)对各项观察指标均无明显影响。NTI和Nor-BNI显著降低休克血浆对脾细胞增殖功能、IL－2的分泌及IL－2R表达的抑制（P＜0．05或P＜0．01）；但各项指标都仍然未恢复到正常水平（P＜0．01）。Ⅲ组与Ⅳ组相比，NTI抑制脾细胞增殖功能、IL－2的分泌和IL－2R的表达，其中1000nmol/L的NTI抑制效果较显著（P＜0．05）。Nor-BNI和NAL自身对照组对各指标均无显著影响。结论 创伤失血性休克后外周β－EP的可能主要通过与δ、κ受体结合发挥免疫抑制作用，未观察到与μ受体有关。     

消瘕丸治疗大鼠子宫肌瘤的实验研究

目的观察消瘕丸对大鼠子宫肌瘤模型的影响,阐明其作用机制。方法以外源性激素诱导大鼠建立子宫肌瘤病变模型,观察消瘕丸对子宫组织形态的影响及血清中过氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的活性变化;采用免疫组化SP法检测大鼠子宫肌瘤组织雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的表达。结果与模型组相比,消瘕丸治疗组能抑制子宫肌瘤组织增生,血清中SOD活性升高、MDA活性降低;ER、PR的表达明显减弱（P〈0.01）。结论消瘕丸对子宫肌瘤有治疗作用,其作用机制可能与抑制ER、PR的表达,降低MDA的活性,增加SOD的活性有关。     

High expression of peptide receptors as a novel target in gastrointestinal stromal tumours

Recent significant advances in understanding the biology of gastrointestinal stromal tumours (GIST) have led to the introduction of a new targeted therapy (imatinib mesylate, Glivec). Hopes of a new era of a specific cancer therapy, however, have been tempered by the recognition that a significant proportion of patients who initially respond to the drug eventually become resistant to it. Given the successful development of peptide receptor scintigraphy and radiotherapy for neuroendocrine tumours, we postulated that a similar approach could offer a valid alternative in the diagnosis and therapy of GIST. Using in vitro receptor autoradiography to measure peptide receptors, we found that 16/19 GIST expressed bombesin subtype 2 receptors, 16/19 expressed vasoactive intestinal peptide subtype 2 receptors (VPAC₂) and 12/19 expressed cholecystokinin subtype 2 receptors, in most cases in extremely high densities. All GIST metastases were shown to express two or more of these peptide receptors in very high density. Receptors were also expressed in non-responders to Glivec or after chemo-embolisation. Conversely, somatostatin subtype 2, cholecystokinin subtype 1, bombesin subtype 1 and 3, and neuropeptide Y subtype Y₁ and Y₂ receptors were not or only rarely expressed. These data represent a strong molecular basis for the use of radiolabelled bombesin, vasoactive intestinal peptide and/or cholecystokinin analogues as targeting agents to localise GIST tumours in patients by in vivo scintigraphy and/or to perform targeted radiotherapy to destroy GIST primaries, metastases and recurrences, including those resistant to Glivec.     

NMDA、甘氨酸、阿片受体与硫喷妥钠催眠作用的关系

目的探讨硫喷妥钠催眠作用与N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体、阿片受体和甘氨酸受体的关系。方法120只昆明种小鼠,雌雄不拘,随机分成NMDA组、纳络酮组和士的宁组。实验小鼠均于腹腔注射50mg/kg硫喷妥钠,待翻正反射消失1min后,NMDA组40只小鼠鞘内分别注射人工脑脊液(aCSF)和25、50、75ngNMDA(n=10);纳络酮组40只小鼠腹腔分别注射生理盐水(NS)和1.0、2.0、4.0mg/kg纳络酮(n=10);士的宁组40只小鼠腹腔分别注射NS和0.5、1.0、2.0mg/kg士的宁(n=10),记录小鼠睡眠时间。结果NMDA对硫喷妥钠催眠小鼠的睡眠时间无明显影响(P>0.05);而纳络酮或士的宁均能明显延长其睡眠时间(P<0.01)。结论NMDA受体与硫喷妥钠的催眠作用无明显关系,而甘氨酸受体和阿片受体均介导了硫喷妥钠的催眠作用。     

LRP16、E-cadherin、ER与PR在子宫内膜异位症中的表达及其意义

目的 探讨LRP16与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)在子宫内膜异位症(EM)患者在位和异位内膜中的表达及其意义.方法 采用免疫组化SP二步染色法,对72例EM患者在位和异位内膜中的LRP16、E-cadherin、ER、PR进行免疫组化染色.结果 腺上皮细胞胞质中LRP16在在位内膜中的表达高于异位内膜(P＜0.05);胞核中LRP16在位和异位内膜中的表达无明显差异;腺上皮细胞膜中E-cadherin在在位内膜中的表达低于异位内膜(p＜0.05).但在位和异位内膜中LRP16和E-cadherin的表达无相关性(P＞0.05).腺上皮细胞核中ER、PR在在位内膜中的阳性表达率高于异位内膜(P＜0.05),异位内膜中PR的阳性表达率高于胞核中LRP16的阳性表达率(P＜0.05),ER的阳性表达率低于LRP16,且ER与胞核中LRP16表达存在相关性.在位内膜胞核中LRP16的表达高于ER、PR(P＜0.05).结论 LRP16和E-cadherin、ER、PR在在位和异位内膜中的表达异常可能与EM的发生发展有关.     

创伤后应激障碍样行为异常大鼠海马糖皮质激素与盐皮质激素受体表达研究

目的：在建立海马惊厥阈下电刺激创伤后应激障碍（PTSD）动物模型基础上，进一步探讨脑组织糖皮质激素受体（GR）与盐皮质激素受体（MR）变化规律。方法：采用频率25Hz、波宽1ms、串长10s、串隔7min、强度100μA的恒流、单脉冲电流，反复刺激大鼠海马，并通过旷场行为及拒俘反应性检查观测大鼠情感行为改变；利用免疫印迹法检测脑组织GR与MR表达。结果：成功诱发了实验大鼠较长时程的活动习性改变，警觉水平增高，惊恐行为，环境适应能力下降，躲藏逃避反应等PTSD样行为异常表现。免疫印迹检测显示，电刺激停止后2d-1周，阈下刺激组大鼠海马GR表达明显增高；电刺激停止后1dMR表达增高，2－3d则明显降低；而额叶皮层二者表达无明显改变。结论：海马CA1区惊厥阈下电刺激可基本模拟PTSD多种临床表现，而海马结构GR持续性高表达与MR较长时程降低在PTSD样行为异常的发生发展中可能有重要意义。     

Whole hemisphere autoradiography of the postmortem human brain

Whole hemisphere autoradiography (WHA) with selective high-affinity radioligands is a new tool in studying the distribution of receptors and of other neuronal components postmortem in brains from controls vs. subjects with psychiatric and neurologic diseases. WHA can be performed with several different isotopes (e.g.,³H, ¹²⁵I, and ¹¹C), and is in addition to characterization studies also used as a tool in early radioligand development. Moreover, using this technique, high-resolution images are obtained that are complementary to those obtained in vivo with e.g., PET and SPECT. Results on dopamine and serotonin receptor subtypes as well as of their transporters show that WHA is a very suitable technique for the detailed characterization of the distribution in the whole human brain.     

三阴乳腺癌受体表型转化情况对乳腺癌患者临床预后的影响

目的 评价乳腺癌患者雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER-2)的表达及复发前后受体表型的转化情况对解救治疗疗效及临床预后的影响.方法 纳入解放军307医院1994年9月-2011年11月收治乳腺癌患者211例,根据ER、PR和HER-2受体表型转化情况分为3组.A组(n=20):原发肿瘤灶为三阴乳腺癌(ER、PR和HER-2表达均为阴性,TNBC),复发转移后转化为非TNBC;B组(n=73):原发肿瘤灶为非TNBC,复发转移后转化为TNBC;C组(n=118):原发肿瘤及复发转移灶均为TNBC.对患者的一般资料进行总结,分析复发转移情况、解救治疗疗效及临床预后.结果 全组211例患者复发转移时中位年龄52(22 ～ 78)岁,以单发转移为主,首发转移最常见的部位依次为淋巴结、骨和皮肤.A、B、C三组患者的中位无病生存期分别为34.0、25.0、20.0个月.B、C组一、二、三线解救治疗的临床有效率显著高于A组(P=0.030、0.003、0.001),但A组在解救内分泌治疗中的临床获益率显著高于B、C组.211例患者的中位随访时间为68(20～127)个月.A、B、C三组复发后中位生存期分别为63.1、33.7、25.8个月(P=0.000),中位总生存期分别为156.7、67.8、47.4个月(P=0.000).结论 乳腺癌患者复发前后ER、PR和HER-2受体表型转化可影响临床预后,在制定解救治疗方案时应对ER、PR和HER-2受体的表达情况进行检测.     

反义寡聚核苷酸对阿片类药物药理作用的影响

阿片受体及受体后信号转导分子的反义寡聚核苷酸能影响相应阿片受体亚型激动剂的药理作用 ,其中包括阿片类药物的镇痛及其所致的耐受和依赖。其作用机制可能与抑制阿片受体表达 ,减少阿片受体量 ,影响受体后信号转导分子功能有关。这方面的研究对直接在分子水平探讨特定阿片受体的功能 ,阿片受体分型 ,分析阿片类药物产生镇痛、耐受和依赖等一系列药理作用的确切机制具有重要意义     

阻断糖皮质激素受体对肝总动脉结扎大鼠肝功能的影响

目的 观察肝缺血损伤与糖皮质激素受体(GR)通路之间的关系,为从提高GR的途径减轻肝脏缺血后损伤提供理论依据.方法 208只SD大鼠随机分为正常对照组(n=8)、单纯结扎组(n=40)、阻断50％ GR组(n=40)、阻断80％GR组(n=40)、阻断50％GR伴结扎组(n=40)、阻断80％GR伴结扎组(n=40).采用肝总动脉结扎的方法建立大鼠肝缺血模型,动态观察肝总动脉结扎后GR的变化及GR阻断对模型大鼠血清肝功能指标[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)]和肝脏组织结构的影响.结果 肝总动脉结扎后,GR阻断组与单纯结扎组相比,ALT、AST、ALP较单纯结扎组峰值升高,且随着GR阻断程度加深呈现酶峰提前,恢复时间延长的趋势;肝脏组织炎性浸润、缺血坏死程度也较单纯结扎组明显加重.免疫组织化学提示GR阻断后,肝总动脉结扎2h时肝细胞内GR较单纯结扎组明显减少,6h达到最低,其中80％阻断组较50％阻断组减少更为明显.结论 GR的减少对肝缺血后损伤发生的过程具有重要影响.     

间歇性高容量血液滤过对严重脓毒症患者Toll样受体表达及器官功能的影响

目的 探讨间歇性高容量血液滤过(pulse high volume hemofiltration,PHVHF)对严重脓毒症患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)表面Toll样受体2(Tolllike receptor 2,TLR2)和TLR4 mRNA表达的临床意义. 方法 40例严重脓毒症患者按随机数字表法分为常规治疗组和PHVHF组,每组20例.另选15例健康志愿者作为对照组.在治疗前、治疗24,48,72 h RT-PCR法检测单核细胞TLR2和TLR4 mRNA表达,ELISA检测血浆中TNF-α和IL-6浓度.比较各组生命体征、血清胆红素(BIL)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、乳酸水平(Lac)、氧合指数(PaO2/FiO2)、急性生理和慢性健康评估Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)评分、序贯器官功能衰竭(sequential organ failure assessment,SOFA)评分变化及预后,并监测治疗过程中的并发症. 结果 脓毒症组TLR2和TLR4 mRNA表达及TNF-α、IL-6的浓度水平均明显高于对照组(P＜0.01).PHVHF组72 h后,TNF-α和IL-6水平较治疗前明显下降(P＜0.01),PBMC表面TLR2和TLR4表达分别与常规治疗组同时相点比较显著降低(P＜0.01);而常规治疗组治疗前后比较差异无统计学意义.PHVHF组治疗72 h后,平均动脉压(MAP)和PaO2/FiO2较治疗前明显上升,Cr、BUN、Lac、APACHEⅡ评分和SOFA评分均较治疗前显著降低(P＜0.05),且与常规治疗组同时相点比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 PHVHF可降低严重脓毒症患者的全身炎症反应,改善重要器官功能水平,缩短ICU住院时间,下调PBMC 表面TLR2、TLR4表达可能是其治疗严重脓毒症的新机制.