新型冠状病毒非结构蛋白NSP13通过调控IκBα蛋白降解抑制NF-κB信号通路

目的 研究新型冠状病毒非结构蛋白13(NSP13)调控NF-κB信号通路的作用机制。方法 利用GV367-NSP13-FLAG慢病毒感染的方法制备高表达NSP13的A549细胞（A549-NSP13）和A549对照组,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和ELISA检测NF-κB下游细胞因子白细胞介素6(IL-6)和趋化因子5(CCL-5)表达水平;Western印迹法检测NF-κB信号通路P65、磷酸化P65和NF-κB抑制因子α(IκBα)蛋白表达。放线菌酮10 mg·L-1处理细胞0,15,30,45,90和120 min,Western印迹法检测IκBα蛋白半衰期。结果 与A549对照组相比,A549-NSP13细胞检测到FLAG标签蛋白条带,且NSP13 mRNA表达显著上调（P<0.01）,表明A549-NSP13细胞系构建成功。与A549对照组相比,A549-NSP13细胞IL-6 mRNA和蛋白表达水平（P<0.01）及CCL-5 mRNA和蛋白表达水平（P<0.05,P<0.01）均显著降低;磷酸化P65蛋白表达下降（P<0.01）,而...     

小儿反复呼吸道感染的相关因素分析及护理

目的探讨儿童反复呼吸道感染的相关致病因素以及临床合理护理干预措施。方法选取本院2012年8月至2014年8月收治的反复呼吸道感染患儿93例为观察组,同时选择90例健康儿童为对照组。分别针对两组样本开展相关指标检测,通过结果比较总结相关致病因素,并总结临床最佳护理干预方法。结果观察组患儿的血清铁、Ig A、Ig G及IgM等指标结果与对照组比较均存在显著差异,具有统计学意义(P<0.05)。护理后观察组中仅1例患儿由于昏迷症状导致智力水平下降,其他患儿的相关症状均消失,经胸部X线检查肺部相关指标均获好转。结论小儿反复呼吸道感染不仅与抵抗例低下、喂养不当、环境污染等存在相关性,机体缺铁状况也会明显增加疾病的发生概率。针对该疾病患儿给予全面的护理干预措施能够显著提高症状改善效果,避免不良事件的发生概率。     

新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂对缺氧损伤心肌细胞的保护作用研究

目的：利用化学发光方法和细胞筛选模型,检测新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂（ histone deacetylase inhibitor, HDACi）JZ005的抑制组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases,HDACs）的活性;建立氯化钴损伤的心肌细胞缺氧模型,初步探讨JZ005对缺氧损伤细胞的保护作用。方法采用脂质体转染法将含有p21启动子元件的荧光素酶报告基因真核表达载体pCI-p21-Luc转入到人胚肾细胞293中,用G418筛选获得稳定转染荧光素酶报告基因的单克隆细胞系;采用已报道的HDACi曲古抑菌素A（ trichostatina A,TSA）为阳性对照,检测细胞筛选模型的稳定性;用HDACi化学发光检测试剂盒及上述细胞筛选模型测定JZ005抑制HDACs的活性;用不同浓度的JZ005处理氯化钴缺氧损伤的大鼠胚胎心肌细胞（H9c2）,MTT法检测JZ005对缺氧损伤细胞的保护作用。免疫印迹法检测JZ005处理后正常及缺氧损伤心肌细胞组蛋白H3的乙酰化水平变化。流式细胞术检测JZ005对H9c2细胞缺氧损伤后凋亡的影响。结果建立含p21启动子元件荧光素酶报告基因的HDACi细胞筛选模型;JZ005能够显著抑制HDACs的活性,浓度50～400μmol／L,抑制率＞50％。对缺氧损伤的心肌细胞具有明显保护作用,与对照组相比,细胞存活率提高38．33％、56．00％和35．20％,同时能够上调缺氧损伤心肌细胞组蛋白H3的乙酰化水平,拮抗缺氧损伤心肌细胞的凋亡,细胞凋亡数目从对照组的12．89％分别下降到给药组（25,50和100μmol／L）的6．63％、10．56％和8．89％。结论成功建立了HDACi的细胞筛选模型;JZ005作为一种新型的HDACi ,具有明显的保护心肌细胞拮抗缺氧损伤的作用,提示JZ005有可能开发成一种治疗缺氧损伤的药物。     

起始识别复合物结合位点对沉默子的辅助作用

背景:沉默子由起始识别复合物结合位点,阻遏活化蛋白RAP1等元件组成,人们对于沉默子的功能及相互关系有较多研究,但对组成沉默子的元件与基因沉默之间关系的研究很少。目的:研究起始识别复合物结合位点对沉默子基因沉默的辅助作用。方法:用右侧带有报告基因URA3的起始识别复合物结合位点,以及不带任何结合位点的序列替代酵母基因组HML区域的HML-I沉默子后,比较URA3基因表达量,并使用DNA拓扑法分析染色质的结构变化。结果与结论:HML-E沉默子单独存在的情况下,酵母无法在FOA平板上生长,但在起始识别复合物结合位点的辅助下,能够在FOA平板上生长,两者之间区域的染色质大多为负超螺旋。因此可知起始识别复合物结合位点能增加HML-E沉默子作用范围,产生这种作用的原因是两者相互作用下形成紧密的染色质结构。     

起始识别复合物结合位点对沉默子的辅助作用

背景：沉默子由起始识别复合物结合位点,阻遏活化蛋白RAP1等元件组成,人们对于沉默子的功能及相互关系有较多研究,但对组成沉默子的元件与基因沉默之间关系的研究很少。目的：研究起始识别复合物结合位点对沉默子基因沉默的辅助作用。方法：用右侧带有报告基因URA3的起始识别复合物结合位点,以及不带任何结合位点的序列替代酵母基因组HML区域的HML-I沉默子后,比较URA3基因表达量,并使用DNA拓扑法分析染色质的结构变化。结果与结论：HML-E沉默子单独存在的情况下,酵母无法在FOA平板上生长,但在起始识别复合物结合位点的辅助下,能够在FOA平板上生长,两者之间区域的染色质大多为负超螺旋。因此可知起始识别复合物结合位点能增加HML-E沉默子作用范围,产生这种作用的原因是两者相互作用下形成紧密的染色质结构。     

MRI在血透患者继发性甲状旁腺功能亢进术前定位诊断中的价值

目的 评价高场强磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)对维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者继发甲状旁腺功能亢进(secondary hyperparathyroidism,SHPT)时,术前对病变甲状旁腺的定位诊断价值.方法 MHD并不同程度甲状旁腺激素水平增高的患者11例,在病变甲状旁腺切除术前行高场强3.0T MRI检查.结果 11例患者经病理证实共有31枚增生甲状旁腺,术前MRI检出26枚,检出率达83.9%.其中T2WI压脂序列上病灶的异常高信号与周围组织对比明显,易于发现病灶;而T1WI序列上多个病灶之间或病灶与甲状腺之间的解剖分辨率好,多序列、多方位结合诊断准确率高.结论 高场强MRI检查对于SHPT患者多发甲状旁腺增生具有良好的组织分辨率和较高的术前定位诊断准确率,不失为一种有效的检查方法.     

硬膜外麻无痛分娩产程的护理

我院2004-04～2004-12将硬膜外阻滞麻醉无痛技术应用于自然经阴分娩后，效果满意，护理体会如下。     

氯氰单体中毒治愈1例临床体会

报道了1例在运送氯氰单体过程中因氯氰单体泄漏而中毒，致使患者发生肺水肿及肺部感染，眼及呼吸道黏膜的刺激症状，并伴有多处皮肤烧灼伤。因氯氰单体进入体内之后既有氯化物又有CN^-的毒性作用，故病情较重，但经过早期、足量、长疗程应用抗生素、激素等药物进行抗炎、抗肺水肿及镇咳、平喘、化痰治疗，1个月后临床痊愈出院。