简单快速制备壳聚糖支架导管的方法

背景：乳液冷冻干燥法是近年来最常用制备壳聚糖的方法，制备工艺复杂。 目的：介绍一种简单的壳聚糖支架导管制备方法并分析其生物特性。 设计、时间及地点：对比观察实验，于2007～04／12存中国医科大学附属第二医院中心实验室完成。 材料：SPF级出生8周的Wistar大鼠10只。散装医用级壳聚糖粉，纯度99％，脱乙酰度为99％，为山东济南海洋生物制品，有限公司产品。 方法：利用乙酸溶液制备8％壳聚糖乙酸水溶胶，溶胶放置1d，将硬塑料管浸入溶胶后迅速取出放入1mol／L氢氧化钠液内3min，见管外溶胶变白凝固成胶冻状，取出后晾到五分干后轻轻退下内管，晾干后即成为壳聚糖导管。取内径5mm壳聚糖管，切成段，长度2mm，将其植入大鼠右侧麦氏点皮下肌肉组织内，同时在大鼠左侧相当于麦氏点处切口，分离到肌肉层，不植入壳聚糖管，单纯缝合，作为对照。 主要观察指标：壳聚糖管的大体观察，壳聚糖管存大鼠肌肉组织中的降解百分比，苏术精-伊红染色观察壳聚糖周组织炎症变化。 结果：制成的壳聚糖导管光滑、坚韧。肌内埋植实验强示，术后4，8周壳聚糖管可分别被组织吸收50％和90％以上，管周组织炎性反应逐渐减退。 结论：采用该方法制备壳聚糖管具有所需材料少，成本低廉，制作方法简单，制作时间短的特点，并证实所制备壳聚糖管具有良好的组织相容性和生物可降解性。     

负载可降解缓释微球壳聚糖支架的生物相容性

背景:负载缓释转化生长因子β1微球壳聚糖支架在体外能够促进软骨细胞生长,且可以诱导骨髓间充质干细胞向软细胞分化,有望作为软骨缺损修复的组织工程材料,然而要进行相应体内实验,其生物相容性是不容忽视的.目的:制各负载缓释微球壳聚糖支架并对其生物相容性进行体内外评价.方法:以溶血试验、急性毒性实验、皮内刺激实验、热源性实验、肌内植入实验,评价自制负载缓释微球壳聚糖支架的生物相容性.结果与结论:支架溶血率为1.6%,镜下未见明显红细胞破坏;材料急性毒性评价程度为无毒;皮内原发刺激记分及原发刺激指数均为0;热源性实验体温升高为(0.17±0.06)℃;肌内植入实验大鼠均成活,全身良好、无感染,4周左右新生毛正常分布,8周大体观察支架周围血管明显增多,与周围肌组织整合良好,心肝肺肾等内脏均无特殊变化,随时间延长,淋巴细胞浸润逐渐减少,可见血管及纤维长入支架,包裹逐渐变薄,支架渐降解.结果说明负载微球多孔壳聚糖支架具有优良的生物相容性.     

壳聚糖/聚乳酸羟基乙酸组织工程化神经植入犬体内的慢性生物相容性

背景:2个月以内短期生物相容性实验显示,壳聚糖、聚乳酸和聚羟基乙酸对大鼠外周神经均无毒性,可作为组织工程化神经材料。目的:评价壳聚糖/聚乳酸羟基乙酸组织工程化神经植入Beagle犬体内6个月后的慢性生物相容性。方法:在壳聚糖神经导管中插入聚乳酸羟基乙酸纤维制备成组织工程化神经,移植桥接Beagle犬坐骨神经50mm缺损,同时以Beagle犬50mm自体神经移植作为对照组。结果与结论:植入壳聚糖/聚乳酸羟基乙酸组织工程化神经6个月后,Beagle犬精神、食欲、活动等一般情况良好,体质量增加与对照组相当;植入后2,4,6个月血液学和血清生化检测结果与对照组无明显差异;再生神经及其周边组织未出现变性、坏死,心、肝、脾、肺、肾等主要脏器大体解剖和组织切片未见异常。表明壳聚糖/聚乳酸羟基乙酸组织工程化神经植入Beagle犬体内6个月后慢性生物相容性良好。     

壳聚糖/聚乳酸羟基乙酸组织工程化神经植入犬体内的慢性生物相容性

背景：2个月以内短期生物相容性实验显示,壳聚糖、聚乳酸和聚羟基乙酸对大鼠外周神经均无毒性,可作为组织工程化神经材料。目的：评价壳聚糖/聚乳酸羟基乙酸组织工程化神经植入Beagle犬体内6个月后的慢性生物相容性。方法：在壳聚糖神经导管中插入聚乳酸羟基乙酸纤维制备成组织工程化神经,移植桥接Beagle犬坐骨神经50mm缺损,同时以Beagle犬50mm自体神经移植作为对照组。结果与结论：植入壳聚糖/聚乳酸羟基乙酸组织工程化神经6个月后,Beagle犬精神、食欲、活动等一般情况良好,体质量增加与对照组相当;植入后2,4,6个月血液学和血清生化检测结果与对照组无明显差异;再生神经及其周边组织未出现变性、坏死,心、肝、脾、肺、肾等主要脏器大体解剖和组织切片未见异常。表明壳聚糖/聚乳酸羟基乙酸组织工程化神经植入Beagle犬体内6个月后慢性生物相容性良好。     

一种壳聚糖神经组织工程支架的制备及表征

目的:用自行研制的模具制备一种具有轴向排列多通道壳聚糖神经修复导管.方法:实验于2004-05/09在清华大学生物系生物材料与组织工程实验室完成.首先制备多孔或致密的壳聚糖空管,管内径为2～5 mm,壁厚0.2～1.0 mm.将一组不锈钢针平行贯穿于壳聚糖空管,用钢针固定片固定不锈钢针,然后在此壳聚糖空管中注入壳聚糖溶液,最后用冷冻干燥法成型.然后,对所得到的支架进行理化性能表征,评价多通道壳聚糖导管的溶胀性、体外降解情况,并用瑞氏染色与扫描电镜用来观察N2a细胞(Neuroblastoma cells, mouse)在导管内生长情况.结果:①在0.1 mol/L磷酸盐缓冲液中溶胀后,多通道壳聚糖导管的内径无显著性变化(P > 0.01),管壁厚度增大明显(P < 0.01).②导管在溶菌酶溶液中降解8周后,形态结构无明显变化,而且保持了足够的机械强度和韧性.③瑞氏染色显示N2a细胞核染成深蓝色,铺展在通道表面及成团分布在导管内基质之中.扫描电镜观察可清晰地显示出细胞的形态及在导管中的分布情况.结论:实验制备的多通道壳聚糖导管具有合适的溶胀性、机械强度以及神经细胞亲和性,有潜在的研究与应用价值.     

角膜内不同部位植入壳聚糖-胶原复合膜的生物相容性

背景:角膜基质层间植入是评价材料角膜内生物相容性的理想模型,但将材料植入角膜基质层间的位置不同,可能会影响材料的降解以及角膜的代谢,最终影响到材料在角膜内生物相容性评价结果.目的:观察壳聚糖胶原复合膜(胶原含量为30%)植入兔角膜不同部位基质层的组织相容性.方法:制备厚度为20 μm的壳聚糖胶原复合膜.将新西兰大白兔以抽签法随机分为两组:一组角膜周边基质层间植入壳聚糖胶原复合膜材料;另一组角膜中央基质层间植入壳聚糖胶原复合膜材料.裂隙灯显微镜观察材料植入后眼表及前房的反应、材料植入部位角膜和材料的相互反应及植入部位角膜透明性改变.6周后取角膜做组织切片,观察植入部位角膜组织和材料的组织学改变.结果与结论:角膜周边植入组的复合膜逐渐降解,最终完全降解,并对角膜结构无明显影响,显示了良好的角膜组织相容性;中央植入组复合膜植入早期眼表稳定,也显示了良好的生物相容性,但是2周过后伴随着材料的缓慢降解,材料周边变得不透明,伴随着炎症细胞浸润,最终在第34,42天分别有一只发生角膜溶解.结果说明薄的壳聚糖胶原复合膜材料透明性好、力学性能匹配,植入角膜周边基质层间后在短时间内能完全降解,适宜作为角膜修复材料,特别是作为角膜缘干细胞的载体可以用来修复角膜缘干细胞损伤引起的角膜疾病.     

不同比例壳聚糖胶原复合骨、软骨缺损支架材料的制备及性状比较

背景:骨组织工程支架材料由最初的自体骨,软骨材料到生物活性陶瓷,乃至后来的有机材料胶原蛋白等细胞外基质材料,其生物相容性及性能越来越优越,越来越接近体内的真实情况.但是这些材料在抗压性及强度方面还有待进一步提高.目的:应用胶原与壳聚糖制备生物支架并对其检测其生物学性质,为骨、软骨缺损提供移植替代物.方法:将不同比例壳聚糖-胶原蛋白溶解,经冷冻冻干后紫外线交联后冷冻干燥,二次冻干制备好支架.检测不同比例支架的孔隙率,降解率,溶胀率.扫描电镜观察孔径的大小及形态.结果与结论:制备的支架外观呈海绵多孔状.支架的孔径大小随着胶原比例增加而减小.胶原比例的增加对支架孔隙率的影响较轻微.支架的溶胀率可达到80%左右,支架的溶胀程度随胶原比例增加而减少.胶原含量越大支架柔韧度增加明显.支架的降解率随着胶原比例增加而增加,而壳聚糖含量越高,降解速度越慢.结果提示,通过调整壳聚糖-胶原蛋白比例使支架具有作为骨、软骨缺损移植材料的替代物可能.     

羧甲基纤维素钠新型敷料的降解性和生物相容性

目的通过动物体内埋置实验，观察羧甲基纤维素钠新型敷料的可降解性和生物相容性。方法将羧甲基纤维素钠新型敷料埋植入小鼠皮下，分别在1、2、3、4周进行大体观察和取材，冰冻切片HE染色光镜观察。结果羧甲基纤维素钠新型敷料在体内3周已基本降解。体内植入大体观察及组织形态学检查显示其具有良好的可降解性和生物相容性。结论羧甲基纤维素钠新型敷料可被降解吸收，生物相容性好。     

壳聚糖膜在大鼠脊髓组织中的降解及其生物相容性

背景：以往关于壳聚糖的生物相容性研究多局限于神经细胞的体外实验，而壳聚糖在神经系统体内尤其是在脊髓局部的相容性尚不清楚。目的：观察壳聚糖在大鼠脊髓组织内的降解率及生物相容性。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2005—08／2006-07在武汉协和医院泌尿外科实验室完成实验。材料：健康成年SD大白鼠36只。随机分为壳聚糖组和对照组，每组18只。方法：在壳聚糖组和对照组大鼠脊髓分别植入壳聚糖膜和医用丝线。主要观察指标：于术后1，2，4周测定壳聚糖膜质量，计算降解率：观察2组大鼠植入区局部炎细胞数量变化，评估生物相容性。结果：壳聚糖可在大鼠体内逐渐降解，术后1，2，4周降解率分别为14．8％，18．9％，25．0％。壳聚糖植入局部炎细胞计数高于对照组（P〈0．05），但同属异物炎症反应，并无明显的全身不良反应。结论：壳聚糖膜易于降解并与脊髓组织有良好的生物相容性。是一种可应用于脊髓损伤修复的生物材料。     

壳聚糖与大鼠嗅鞘细胞的生物相容性

背景:众多研究证实,嗅鞘细胞移植和生物导管在修复中枢神经系统损伤中发挥了显著的作用,课题组前期研究已证实了壳聚糖在大鼠体内神经系统具有良好的生物相容性.目的:观察壳聚糖与大鼠嗅鞘细胞的生物相容性.设计、时间及地点:体外细胞学对比观察,于2005-12/2006-05在武汉协和医院泌尿外科实验室完成.材料:将壳聚糖粉溶于10 g/L的乙酸溶液中,配制成10 g/L的壳聚糖溶液;显微剥离成年大鼠嗅球表面层,按常规方法行原代细胞培养.方法:实验分为3组,每组10孔.壳聚糖组将制备好的壳聚精溶液0.1 mL加入到培养板中,50℃烘箱至成膜干燥,加入40 g/L氧氧化钠溶液中和乙酸,双蒸水漂洗,晾干即可.多聚赖氨酸组按常规方法赖氨酸包被培养板.未包被组不用任何材料包被.将原代培养的嗅鞘细胞分别接种至壳聚糖包被、多聚赖氨酸包被和未包被的培养板上进行培养.主要观察指标:于培养第3,5天显微镜下观察细胞形态学变化,MTT比色实验检测细胞存活和增殖状况.结果:嗅鞘细胞可在壳聚糖膜上贴壁生长,细胞形态及数量与未包被组相比差异无显著性意义,但与多聚赖氨酸组相比细胞数量偏低.结论:嗅鞘细胞与壳聚糖有良好的生物相容性.