单克隆抗体2A7亲和层析法纯化红细胞膜表面的CD59分子

用抗ＣＤ５９单抗２Ａ７与ＣＮＢｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联制备亲和层析柱，从正常人红细胞膜蛋白抽提物中分离纯化出ＣＤ５９分子。本法纯化的ＣＤ５９分子量为１８－２０ＫＤａ对还原剂敏感，与ＭｃＡｂｓｓＭＥＭ４３和１Ｆ５有高亲和性，再掺入豚鼠红细胞后，能够抑制人体补体的反应性溶血，本文还对三株抗ＣＤ５９单抗２Ａ７，ＭＥＭ４３及１Ｆ５的抗原特异性进行了初步分析。     

SRS－淋巴瘤小鼠淋巴细胞染色质理化性质的研究

本实验对正常及ＳＲＳ－淋巴瘤小鼠淋巴细胞染色质进行了化学组分、ＤＮａｓｅⅠ有限度消化、染色质附着蛋白释放，热变性的对比分析。结果表明：（１）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞染色质的非组蛋白（ｎｏｎ－ｈｉｓｔｏｎｅｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＮＨＣＰ）和ＲＮＡ高于正常细胞，提示随着肿瘤的发生染色质转录活性和与转录相关的ＮＨＣＰ呈升高趋势；（２）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞染色质的ＤＮａｓｅⅠ消化率明显高于正常淋巴细胞，提示肿瘤细胞含有较多优先被核酸酶消化的活性染色质；（３）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞较正常淋巴细胞蛋白释放量明显升高，提示参与活性染色质结合的ＮＨＣＰ与染色质活性位点及转录活性有密切相关；（４）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞染色质比正常淋巴细胞增色效应明显，提示肿瘤细胞比正常细胞染色质结构疏松。     

维生素E对冷适应大鼠红细胞膜钠-钾-ATP酶活性及丙二醛含量的影响

目的：研究膳食维生素Ｅ（ＶＥ）增强冷适应的机理。方法：用ＳＤ大鼠为研究对象，分别饲以高ＶＥ饲料（２３０ｍｇ／ｋｇ．饲料）和低ＶＥ饲料（３０ｍｇ／ｋｇ．饲料）。观察大鼠红细胞膜钠－钾－ＡＴＰ酶（Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ）活性和丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化。结果：冷适应大鼠红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性明显高于对照组（Ｐ＜０．０５），高ＶＥ摄入大鼠红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性明显高于低ＶＥ摄入组大鼠（Ｐ＜０．０５）；高ＶＥ摄入组大鼠红细胞膜ＭＤＡ含量明显低于低ＶＥ摄入组大鼠（Ｐ＜０．０５）；膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性和ＭＤＡ含量间呈明显负相关。结论：膳食ＶＥ可以提高冷适应大鼠红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性，降低膜ＭＤＡ含量     

SRS—淋巴瘤小鼠淋巴细胞染色质理化性质的研究

本实验对正常及ＳＲＳ－淋巴瘤小鼠淋巴细胞染色质进行了化学组分，ＤＮａｓｅ Ｉ有限度消化，染色质附着蛋白释放，热变性的对比分析。结果表明：（１）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞染色质的非组蛋白和ＲＮＡ高于正常细胞，提示随着肿瘤的发生染色质转录活性和与转录相关的ＮＨＣＰ呈升高趋势；（２）ＳＲＳ－淋巴瘤细胞染色质的ＤＮａｓｅ Ｉ消化率明显高于正常淋巴细胞，提示肿瘤细胞含有较多优先被核酸酶消化的活性染色质（３）ＳＲＳ－     

维生素E对冷适应大鼠红细胞膜钠—钾—ATP酶活性及丙二醛含量 …

目的；研究膳食维生素Ｅ（ＶＥ）增强冷适应的机理。方法：用ＳＤ大鼠为研究对象，分别饲以高ＶＥ饲料（２３０ｍｇ／ｋｇ，饲料）和低ＶＥ饲料（３０ｍｇ／ｋｇ，饲料），观察大鼠红细胞膜钠－钾－ＡＴＰ酶（Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰａｓｅ）活性和丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化。结果：冷适应在鼠红细胞Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰａｓｅ活性明显高于对照组，高ＶＥ摄入大鼠红细胞膜Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰａｓｅ活性明显高于低于ＶＥ摄入且大鼠；高ＶＥ摄入     

重组人免疫缺陷病毒Ⅰ型逆转录酶的纯化及其动力学性质

目的纯化重组人免疫缺陷病毒Ⅰ型逆转录酶（ＨＩＶ－１ＲＴ），筛选新的ＨＩＶ－１ＲＴ抑制剂。方法在适宜的培养条件下诱导工程菌Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９（ＰＫＲＴ２）可高效表达重组人免疫缺陷病毒Ⅰ型（ＨＩＶ－１）逆转录酶（ＲＴ）。应用ＤＥＡＥ－纤维素和磷酸纤维素离子交换柱层析法从细菌裂解液中分离、纯化重组ＲＴ。结果１升细菌培养液可得到１．１ｍｇ产物。ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示所纯化的重组ＲＴ为由两个分子量分别为６６ｋＤ和５１ｋＤ的亚基组成的杂二聚体。酶活性测定结果表明，经纯化的重组ＲＴ具有很高的逆转录酶活性（比活力为１．４×１０４ｕｍｇ）。结论本文通过对ＲＴ反应条件的研究，优化了ＲＴ反应系统，并测定了磷甲酸钠（ＰＦＡ）对重组ＲＴ的抑制效应，结果表明ＰＦＡ对重组ＲＴ的抑制反应动力学机制与天然ＲＴ相同，从而进一步说明用此法纯化的重组ＲＴ可直接用于抗ＨＩＶ药物的筛选与评价。     

细胞内pH,钙离子与细胞凋亡

细胞凋亡与细胞内ｐＨ（ｐＨｉ）、细胞内钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）密切相关，不同的刺激信号通过复杂的信息传递途径引起ｐＨｉ和［Ｃａ２＋］ｉ的变化，细胞内酸化或［Ｃａ２＋］ｉ的增高并伴有细胞内碱化分别是ＤＮａｓｅⅡ或ＤＮａｓｅⅠ激活的必要条件，但单独的细胞内碱化并不能激活ＤＮａｓｅⅠ。核酸内切酶的激活及其催化的基因组ＤＮＡ在核小体间降解是细胞凋亡的特征性生化事件。而Ｎａ＋／Ｈ＋交换蛋白－１（ＮＨＥ－１）的失活可能在诱导凋亡中起关键作用。     

维生素D3受体对hsp90β基因表达的调控作用

鉴于热休克蛋白９０β（ｈｓｐ９０β）基因内含子中含有维生素Ｄ３受体（ＶＤＲ）结合位点，为探讨作为核受体家族成员的ＶＤＲ是否对核受体特异分子伴侣的ｈｓｐ９０β基因的表达具有调控作用，我们开展了本项研究。分别将野生型ＶＤＲ、含Ｎ端（１～１３３氨基酸残基）及Ｃ端（２８１～４２７氨基酸残基）片段的ＶＤＲ突变体真核表达质粒与人ｈｓｐ９０β基因调控片段（－１０３９／＋１５３１）介导的氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）报告基因质粒共转染Ｊｕｒｋａｔ细胞，检测正常及经热休克（４２℃，１ｈ）处理后细胞裂解液中ＣＡＴ活性。结果表明ＶＤＲＮ端增强、而Ｃ端抑制ｈｓｐ９０β的组成性表达；在热诱导条件下野生型ＶＤＲ对ｈｓｐ９０β的表达有一定的抑制作用，而其Ｃ端片段的抑制较强。为进一步研究ＶＤＲ对细胞内源性热休克基因表达的影响，我们用ＲＴＰＣＲ方法研究了ＶＤＲ的对细胞内ｈｓｐ９０β基因ｍＲＮＡ水平的影响，发现ＶＤＲ过表达对ｈｓｐ９０β的热诱导表达明显抑制。结果提示ＶＤＲ对ｈｓｐ９０β基因的组成性和热诱导表达的调控机制不同。     

人类血管内皮细胞一氧化氮合成酶基因启动子序列的功能分析

目的 血管内皮细胞一氧化氮合成酶（ｅｎｄｏｔｈｉｌｉａｌ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙｎｔｈａｓｅ,ｅｃＮＯＳ）在体内催化一氧化氮合成。为研究一氧化氮合成酶基因转录的调控,对一氧化氮合成酶基因启动子序列进行功能分析。方法 以血管内皮细胞核提取物为材料,采用凝胶迁移实验和ＤＮａｓｅⅠ足迹法实验。结果 启动子序列有３个区域与蛋白／转录因子结合。其中（－１０６～－８８）ＧＣ含量丰富,为转录因子ＳＰ１所     

高压氧对小鼠肺毛细血管Na^＋—K^——ATPase影响的图像分析

采用Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ电镜细胞化学方法，观察在高压氧和高压氧中毒悟上小鼠肺毛细血管Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性的分布，活性强度与超微结构改变之间的联系，并用计算机图像定量分析方法对酶活性进行了１４个参数的定量分析，这些定量参数表明，高压氧条件下，肺毛细血管Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性升高，在高压氧中毒条件下，肺毛细血管Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性减弱。     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.

     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

局部注射辛伐他汀对骨质疏松大鼠股骨髁骨小梁的改建效应

背景：局部注射具有成骨作用的辛伐他汀,可显著增加骨质疏松大鼠股骨颈及股骨髁部的骨密度及力学强度,分析局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。 目的：进一步研究骨质疏松大鼠股骨内局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。为将辛伐他汀应用于临床骨质疏松局部治疗提供实验基础。 方法：18只雌性SD大鼠双侧卵巢切除后3个月,制备大鼠骨质疏松模型。实验大鼠随机数字表法均分为3组,分别在实验大鼠的右侧股骨髓腔内单次注射辛伐他汀溶液5 mg、10 mg,对照组单纯注射空白载体。分别在注射后1个月处死大鼠并取材。Micro-CT扫描并定量分析骨组织形态变化。 结果与结论：给药后1个月,Micro-CT扫描结果显示,辛伐他汀治疗组的骨微结构参数如骨皮质厚度、骨小梁密度及连接率明显优于对照组。说明疏松骨骼单次注射小剂量辛伐他汀可显著促进股骨髁部骨小梁改建,改善骨骼微结构,可为强化局部、防治骨质疏松骨折的新选择进一步提供实验基础。