清肺口服液对3I、7b型腺病毒感染人胚肺成纤维细胞TGF-β_1mRNA基因表达的影响

目的:采用治疗小儿病毒性肺炎痰热闭肺证的有效中药制剂清肺口服液,研究其对腺病毒3I、7b感染的人胚肺成纤维细胞的转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA基因表达的影响。方法: 以3I、7b型腺病毒分别攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞,用清肺口服液含药血清作用于该细胞,另设正常细胞组、病毒对照组、利巴韦林组,采用原位杂交法检测不同组细胞TGF-β1的mRNA 基因表达,并进行比较。结果:病毒对照组较正常细胞组的TGF-β1mRNA基因表达明显增强（P <0．01）,含药血清组可显著降低3I、7b型腺病毒攻击后细胞TGF-β1的mRNA表达（P<0．01）。结论:腺病毒感染可使人胚肺成纤维细胞TGF-β1mRNA表达增高;清肺口服液可下调TGF-β1的mR- NA表达,这可能是其抗病毒作用的机制之一。     

清肺口服液对3I、7b型腺病毒感染人胚肺成纤维细胞TGF-β1、PDGF-BB mRNA基因表达的影响

目的观察清肺口服液含药血清对腺病毒3I、7b感染的人胚肺成纤维细胞转化生长因子-β1（TGF—β1）、血小板衍生生长因子-BB（PDGF-BB）mRNA基因表达的影响。方法以3I、7b型腺病毒分别攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞，制备清肺口服液含药血清，作用于该细胞，另设正常细胞组、病毒对照组、利巴韦林组，采用原位杂交法检测TGF—β1、PDGF—BB mRNA基因的表达，进行各组间比较。结果病毒对照组较正常细胞组的TGF-β1、PDGF-BB mRNA表达均明显升高（P〈0．01），含药血清组对3I、7b型攻击后的TGF-β1、PDGF-BB mRNA表达均有显著降低作用（P〈0．01）。结论清肺口服液可下调TGF—β1、PDGF—BB mRNA表达，这可能是其抗病毒作用的机制之一。     

清肺口服液对3I、7b型腺病毒感染人胚肺成纤维细胞转化生长因子-β1和血小板衍生生长因子-BB蛋白表达的影响

目的探讨清肺口服液含药血清对腺病毒3Ⅰ、7b感染的人胚肺成纤维细胞之转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)蛋白表达的影响。方法细胞分为正常细胞组、病毒对照组、空白血清组、利巴韦林组和含药血清组,除正常细胞组外,其余4组均以3Ⅰ、7b型腺病毒分别攻击之,并分别加入相应药物至各组细胞中;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞上清液中TGF-β1、PDGF—BB的含量。结果病毒对照组较正常细胞组细胞中TGF-β1、PDGF-BB含量均明显增多(P<0．01),含药血清组比病毒对照组的细胞TGF-β1、PDGF—BB含量显著降低(P<0．01)。结论(1)腺病毒感染可使人胚肺成纤维细胞TGF-β1、PDGF—BB蛋白表达增高;(2)清肺口服液可降低TGF-β1、PDGF—BB细胞因子的蛋白表达,这可能是其抗病毒作用的机制之一。     

清肺口服液对呼吸道合胞病毒感染人胚肺成纤维细胞TGF-β1 mRNA基因表达的影响

目的 探讨清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)转化生长因子-β1(TGF-β1)基因表达的影响.方法 RSV攻击体外培养的HELF细胞后,以清肺口服液含药血清、利巴韦林含药血清及空白血清干预,采用实时荧光定量PCR法测定各组HELF TGF-β1表达变化.结果 病毒对照组较正常细胞组TGF-β1下降至1/3,清肺口服液含药血清组可显著升高TGF-β1水平至RSV感染细胞的2倍.利巴韦林含药血清和空白血清作用相似,对TGF-β1表达有一定的影响.结论 RSV感染可使HELF细胞TGF-β1 mRNA表达水平显著下降;清肺口服液可调节TGF-β1 mRNA表达,减缓RSV感染后细胞的异常变化,这可能是其抗病毒作用机制之一.     

清肺口服液对3I、7b型腺病毒感染人胚肺成纤维细胞TNF-α蛋白表达的影响

目的:探讨清肺口服液含药血清对腺病毒3I、7b感染的人胚肺成纤维细胞之肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达的影响.方法:以3I、7b型腺病毒分别攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞,制备清肺口服液含药血清,作用于该细胞,另设正常细胞组,病毒对照组,利巴韦林组,采用ELISA法检测不同组细胞上清液中TNF-α的含量,并进行比较.结果:病毒对照组较正常细胞组之TNF-α含量明显增多,清肺口服液含药血清组可显著降低3I、7b型腺病毒攻击后细胞TNF-α的浓度.结论:清肺口服液可低腺病毒感染所致人胚肺成纤维细胞TNF-α蛋白的高表达,这可能是其抗病毒作用的机制之一.     

清肺口服液对3I、7b型腺病毒感染人胚肺成纤维细胞TNF-α蛋白表达的影响

目的探讨清肺口服液含药血清对腺病毒3I、7b感染的人胚肺成纤维细胞之肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达的影响。方法以3I、7b型腺病毒分别攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞,制备清肺口服液含药血清,作用于该细胞;另设正常细胞组、病毒对照组、利巴韦林组,采用ELISA法检测不同组细胞上清液中TNF-α的含量,并进行比较。结果病毒对照组较正常细胞组之TNF-α含量明显增多(P<0.01),含药血清组可显著降低3I、7b型腺病毒攻击后细胞TNF-α的浓度(P<0.01,P<0.05)。结论腺病毒感染可使人胚肺成纤维细胞TNF-α蛋白表达增高;清肺口服液可降低TNF-α的蛋白表达,这可能是其抗病毒作用的机制之一。     

清肺口服液对腺病毒3I、7b感染人胚肺成纤维细胞bcl-2mRNA表达的影响

目的:探讨清肺口服液含药血清对腺病毒3I、7b感染的人胚肺成纤维细胞(HPF)bcl-2mRNA表达的影响。方法:细胞分为正常细胞组、病毒对照组、空白血清组、利巴韦林组和含药血清组,除正常细胞组外,其余4组均以3I、7b型腺病毒分别攻击,并分别加入相应药物至各组细胞中,用原位杂交方法比较各组细胞bcl-2mRNA的表达。结果:病毒对照组较正常细胞组细胞中bcl-2mRNA表达降低(P<0.01),含药血清组比病毒对照组细胞bcl-2mRNA表达明显上升(P<0.01)。结论:腺病毒感染可使人胚肺成纤维细胞bcl-2mRNA表达降低。清肺口服液可增强bcl-2mRNA表达,从而抑制由腺病毒引发的细胞凋亡。这可能是其抗病毒作用机制之一。     

清肺口服液对呼吸道合胞病毒感染人胚肺成纤维细胞TGF-β_1 PDGF-BB mRNA基因表达的影响

目的:探讨清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)基因表达的影响。方法:RSV攻击体外培养的HELF细胞后,以清肺口服液含药血清,利巴韦林含药血清及空白血清干预,采用实时荧光定量PCR法(RealTime-PCR)测定各组人胚肺成纤维细胞TGF-β1、PDGF-BBmRNA表达变化。结果:病毒对照组较正常细胞组PDGF-BB上升为3倍、TGF-β1下降为1/3,清肺口服液含药血清组可显著降低PDGF-BB至RSV感染细胞的1/5、升高TGF-β1至RSV感染细胞的2倍。利巴韦林含药血清和空白血清作用相似,对TGF-β1,PDGF-BB表达有一定的影响。结论:(1)RSV感染可使HELF细胞PDGF-BBmRNA表达水平显著升高,TGF-β1mRNA表达水平显著下降;(2)清肺口服液可调节TGF-β1、PDGF-BB等细胞因子的mRNA表达,缓减RSV感染后细胞的异常变化,这可能是其抗病毒作用机制之一。     

清肺口服液对3I、7b型腺病毒感染人胚肺成纤维细胞转化生长因子-β1和血小板衍生生长因子-BB蛋白表达的影响

目的探讨清肺口服液含药血清对腺病毒3Ⅰ、7b感染的人胚肺成纤维细胞之转化生长因子β1(TGFβ1)、血小板衍生生长因子BB(PDGFBB)蛋白表达的影响。方法细胞分为正常细胞组、病毒对照组、空白血清组、利巴韦林组和含药血清组,除正常细胞组外,其余4组均以3Ⅰ、7b型腺病毒分别攻击之,并分别加入相应药物至各组细胞中;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞上清液中TGFβ1、PDGFBB的含量。结果病毒对照组较正常细胞组细胞中TGFβ1、PDGFBB含量均明显增多(P<0.01),含药血清组比病毒对照组的细胞TGFβ1、PDGFBB含量显著降低(P<0.01)。结论(1)腺病毒感染可使人胚肺成纤维细胞TGFβ1、PDGFBB蛋白表达增高;(2)清肺口服液可降低TGFβ1、PDGFBB细胞因子的蛋白表达,这可能是其抗病毒作用的机制之一。     

清肺口服液对3I、7b型腺病毒感染人胚肺成纤维细胞Fas、FasL蛋白表达的影响

目的:探讨清肺口服液含药血清对腺病毒3I、7b感染的人胚肺成纤维细胞Fas、FasL表达的影响。方法:细胞分为正常细胞组、病毒对照组、空白血清组、利巴韦林组和含药血清组,除正常细胞组外,其余4组均以3I、7b型腺病毒分别攻击,并分别加入相应药物至各组细胞中;用流式细胞仪检测比较各组细胞Fas、FasL蛋白的表达。结果:病毒对照组较正常细胞组细胞中Fas、FasL表达升高,含药血清组比病毒对照组细胞Fas、FasL表达降低。结论:腺病毒感染可使人胚肺成纤维细胞Fas、FasL蛋白表达增高;清肺口服液可降低Fas、FasL蛋白表达,从而抑制由腺病毒引发的细胞凋亡,这可能是其抗病毒作用的机制之一。     

清肺口服液对呼吸道合胞病毒感染人胚肺成纤维细胞肿瘤坏死因子-α转化生长因子-β_1蛋白表达的影响

目的:探讨清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒感染的人胚肺成纤维细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)、转化生长因子(TGF-β1)蛋白表达的影响。方法:用呼吸道合胞病毒Long株感染人胚肺成纤维细胞,用清肺口服液含药血清作用于该细胞,并设空白血清、和正常细胞做对照,24h后采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞上清液TNF-α、TGF-β1蛋白水平。结果:清肺口服液含药血清组两种细胞因子明显升高(P0.01)。结论:清肺口服液含药血清可以在病毒感染早期升高TNF-α、TGF-β1蛋白表达,从而增加病毒清除,抑制过度的免疫反应,这可能是该药治疗呼吸道合胞病毒感染的机理之一。     

清肺口服液对3Ⅰ、7b型腺病毒感染人胚肺成纤维细胞TNF-α蛋白表达的影响

目的：探讨清肺口服液合药血清对腺病毒3Ⅰ、7b感染的人胚肺成纤维细胞之肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达的影响。方法：以3Ⅰ、7b型腺病毒分别攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞，制备清肺口服液合药血清，作用于该细胞，另设正常细胞组，病毒对照组，利巴韦林组，采用ELISA法检测不同组细胞上清液中TNF-α的含量，并进行比较。结果：病毒对照组较正常细胞组之TNF-α含量明显增多，清肺口服液合药血清组可显著降低3Ⅰ、7b型腺病毒攻击后细胞TNF-α的浓度。结论：清肺口服液可低腺病毒感染所致人胚肺成纤维细胞TNF-α蛋白的高表达，这可能是其抗病毒作用的机制之一。     

开肺化痰解毒法对人胚肺成纤维细胞Fas表达的影响

目的：研究开肺化痰法对腺病毒作用后的人胚肺成纤维细胞Fas表达的影响。方法：用31、7b型腺病毒攻击人胚肺成纤维细胞后，分别加入清肺口服液含药血清及利巴韦林注射液，用流式细胞仪检测各组细胞FAS蛋白的表达。结果：经31、7b型腺病毒攻击后，病毒组Fas(CD95)的表达较正常组明显降低，含药血清组、利巴韦林组与病毒组比较，Fas(CD95)的表达均明显升高，空白血清组与病毒组比较无显著性差异，含药血清组与利巴韦林组比较无显著性差异。腺病毒31型攻击后，含药血清组、利巴韦林组与正常细胞组比较有显著性差异。腺病毒7b型攻击后，含药血清组、利巴韦林组与正常细胞组比较无显著性差异。结论：31、7b型腺病毒对人胚肺成纤维细胞Fas的表达有一定的影响，腺病毒可能通过此机制延长其在细胞内的存活时间，以利于自身复制。清肺口服液含药血清对Fas的表达具有一定的调节作用，此作用可能是其清除病毒在体内的感染，对机体起保护作用的机制之一。     

清肺口服液对腺病毒3I、7d诱导细胞凋亡调控作用研究

目的:观察清肺口服液(含药血清)对腺病毒3I、7d所致人胚肺成纤维细胞凋亡的影响作用.方法:采用体外培养细胞,流式细胞仪检测病毒攻击及用药后细胞凋亡率的改变,Giemsa染色及荧光染色观察细胞形态.结果:腺病毒攻击24h可致人胚肺细胞凋亡,清肺口服液具有抑制凋亡的作用.结论:清肺口服液可通过抑制腺病毒所诱导的细胞凋亡达到抗病毒作用.     

清肺口服液对呼吸道合胞病毒感染人胚肺成纤维细胞ICAM-1、IL-8 mRNA基因表达的影响

目的:探讨清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)细胞间黏附分子(ICAM-1)、白细胞介素-8(IL-8)基因表达的影响。方法:RSV攻击体外培养的HELF细胞后,以清肺口服液含药血清,利巴韦林含药血清及空白血清干预,采用实时荧光定量PCR法(RealTime-PCR)测定各组人胚肺成纤维细胞ICAM-1、IL-8 mRNA表达变化。结果:病毒感染后ICAM-1、IL-8以GAPDH为内参的△Ct值明显小于正常细胞组及生理盐水血清对照组,而清肺口服液含药血清、利巴韦林含药血清作用后△Ct值显著增大。结论:(1)RSV病毒作用后ICAM-1及IL-8 mRNA表达水平显著升高;(2)清肺口服液可以降低ICAM-1、IL-8的表达,缓解RSV感染后细胞的异常变化,起到间接预防RSV肺炎的作用。     

清肺口服液对呼吸道合胞病毒感染人胚肺成纤维细胞PDGF-BB mRNA基因表达的影响

目的 观察清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)基因表达的影响.方法 RSV攻击体外培养的HELF细胞后,以清肺口服液含药血清、利巴韦林含药血清及空白血清干预,采用实时荧光定量PCR法(RealTime-PCR)测定各组人胚肺成纤维细胞PDGF-BB mRNA表达变化.结果 病毒对照组较正常细胞组PDGF-BB上升3倍,清肺口服液含药血清可显著降低PDGF-BB至RSV感染细胞的1/5.利巴韦林含药血清和空白血清作用相似,对PDGF-BB表达有一定的影响.结论 RSV感染可使HELF细胞PDGF-BB mRNA表达水平显著升高;清肺口服液可调节PDGF-BB等细胞因子的mRNA表达,缓减RSV感染后细胞的异常变化,这可能是其抗病毒作用机制之一.     

清肺口服液多途径给药体外抗腺病毒3I 7b作用研究

目的:探讨清肺口服液体外抗腺病毒3I、7b作用及作用环节.方法:用100TCID50腺病毒3I、7b攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞造成腺病毒感染模型,分别在感染前、感染时、感染后加入清肺口服液含药血清,同时设空白血清组、病毒唑组及正常细胞对照组,MTT法比较结果.结果:含药血清各组OD值显著大于病毒组及空白血清组,与病毒唑组无显著性差异.结论:清肺口服液具有多环节体外抗腺病毒作用.     

清肺口服液多途径给药体外抗腺病毒3I 7b作用研究

目的：探讨清肺口服液体外抗腺病毒3I、7b作用及作用环节。方法：用100TCID50腺病毒3I、7b攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞造成腺病毒感染模型，分别在感染前、感染时、感染后加入清肺口服液含药血清，同时设空白血清组、病毒唑组及正常细胞对照组，MTT法比较结果。结果：含药血清各组OD值显著大于病毒组及空白血清组，与病毒唑组无显著性差异。结论：清肺口服液具有多环节体外抗腺病毒作用。     

清肺口服液含药血清对小鼠肺上皮细胞TGF-β1及PDGF-BB mRNA基因表达的影响

目的:探讨清肺口服液含药血清对小鼠肺上皮细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)基因表达的影响。方法:用清肺口服液含药血清、利巴韦林含药血清及空白血清分别作用于体外培养的小鼠肺上皮细胞TC-1,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法测定药物作用前后各组TC-1细胞TGF-β1、PDGF-BB mRNA表达水平。结果:清肺口服液血清作用于TC-1细胞后,使TGF-β1、PDGF-BB mRNA表达水平下调至原来的1/2;利巴韦林血清作用细胞后,细胞中TGF-β1 mRNA升高1倍、PDGF-BB mRNA升高2倍。结论:清肺口服液可能通过抑制TGF-β1与PDGF等细胞因子的过度表达,延缓肺泡炎及肺纤维化形成,在病毒性肺炎的治疗中发挥疗效。     

小儿病毒性肺炎中医证治规律研究

研究小儿病毒性肺炎的中医证候特点,调查480例住院患儿,统计分析资料,提出了各项指标在本病不同证型中的出现率及表现特点,得出了风寒袭肺证、风热犯肺证、痰热闭肺证、阴虚肺热证、肺脾气虚证各证型的Bayes判别函数.以利巴韦林注射液为对照,作了评价清肺口服液治疗小儿病毒性肺炎痰热闭肺证有效性和安全性的分层区组随机、平行对照、盲法、多中心临床研究,符合方案集试验组231例、对照组115例,两组痊愈、显效、进步、无效例数分别为:119、88、22、2,33、52、27、3.经秩和检验,P＜0.001,试验组疗效显著优于对照组.实验研究证实了清肺口服液对腺病毒31、7b型的拮抗作用,以及其对腺病毒3I、7b型诱导细胞凋亡调控作用、对人胚肺成纤维细胞Fas/FasL和bcl-2表达的影响、对人胚肺成纤维细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)表达的影响,证实了其分子生物学作用机理.