中药活性成分治疗非酒精性脂肪肝作用靶点的研究进展

非酒精性脂肪肝是一种与胰岛素抵抗和遗传易感密切相关的代谢应激性肝脏损伤。近年来中药治疗非酒精性脂肪肝的研究越来越多,研究结果表明中药活性成分治疗非酒精性脂肪肝的作用机制与其激活AMPK信号通路,改善胰岛素抵抗,调节PPARγ活性和表达,抗氧化应激,抗炎,调节肠道菌群等有关。该文将归纳总结近年来中药治疗非酒精性脂肪肝的作用靶点,为今后非酒精性脂肪肝的中医药治疗提供新的思路。     

基于肠道菌群论苦寒药的临床应用

苦寒中药在临床广泛应用于内外妇儿疾病。肠道菌群的稳态与失衡是治病与致病的内在因素。既往对苦寒中药在临床的应用研究大都集中在胃肠动力、胃肠激素等基础研究上,从肠道菌群的角度未见到深入的研究与阐述。该文从肠道菌群的结构、比例及分布的微观角度,阐述苦寒中药恢复脾胃功能的作用,进一步证明肠道菌群在苦寒中药治疗脾胃病中的重要性,为临床实践与基础实验提供更多理论依据。      

重建线粒体动态平衡对NK细胞NK2型活化影响

目的立于“线粒体功能紊乱-细胞异常活化”视角,探讨NK细胞NK2型活化机制。方法将NK-92MI细胞分为空白组、TSLP组、1、5、10μmol·L^-1 Mdivi-1组。ELISA法测定各组IL-4、IL-5、IFN-γ水平;蛋白印迹法分析各组p-Drp1、MnSOD蛋白表达;DHE染色及流式检测各组ROS水平;激光共聚焦观察各组线粒体形态。结果ELISA显示,与对照组比较,TSLP组IL-4、IL-5水平明显升高,IFN-γ水平下调(P<0.05);与TSLP组比较,5、10μmol·L^-1 Mdivi-1组IL-4、IL-5水平降低,10μmol·L^-1 Mdivi-1组IFN-γ浓度有所回升(P<0.05)。DHE染色及流式显示,TSLP组ROS水平较对照组升高;而5、10μmol·L^-1 Mdivi-1组ROS水平较TSLP组降低(P<0.05)。共聚焦显示,TSLP刺激后,细胞内大量圆球状线粒体生成,5、10μmol·L^-1 Mdivi-1干预后该现象得到改善。蛋白印迹显示,TSLP组p-Drp1水平明显上调,MnSOD表达下降,Mdivi-1干预则有效逆转了上述变化。结论线粒体动态失衡可能是NK细胞异常活化内在机制之一,其或是调控NK细胞NK2型活化介导的变应性炎症反应的重要靶点。     

中医辨证及客观生物学指标与2型糖尿病患者血清GLP-1水平的相关性分析

目的:探讨2型糖尿病脾虚热盛患者中医辨证及客观生物学指标与血清胰高血糖素样肽-1(GLP-1)水平的相关性。方法:将辨证为脾虚热盛型2型糖尿病患者45例分为脾虚及热盛两组,采集患者空腹及餐后2h静脉血,检测血清GLP-1水平,同时记录被检测者各项生命体征及相关理化指标,探讨其中的相关性及与中医辨证分型的关系。结果:患者空腹GLP-1水平与体质量指数呈直线正相关,有统计学意义(P0.05);中医辨证为热盛患者空腹及餐后2h GLP-1水平明显高于脾虚患者,差异有统计学意义(P0.05)。结论:血清GLP-1水平与体质量指数呈直线正相关,热盛型患者GLP-1水平明显高于脾虚型患者。     

大黄素调节Sirt1表达改善脂肪细胞糖代谢的研究

目的研究大黄素对脂肪细胞葡萄糖代谢的影响及其机制。方法以分化成熟的脂肪细胞为研究对象,检测10μmol/L的大黄素对脂肪细胞葡萄糖代谢的影响。以流式细胞术检测脂肪细胞对2-NBDG荧光葡萄糖类似物的吸收;以免疫荧光-激光共聚焦技术检测葡萄糖转运蛋白4在细胞内的定位和表达;以qPCR检测Sirt1基因的mRNA的表达;以Western Blot检测Sirt1蛋白的表达。结果流式细胞术检测葡萄糖吸收实验结果表明,大黄素可显著促进成熟脂肪细胞对葡萄糖的吸收。经10μmol/L大黄素处理脂肪细胞3h后,葡萄糖的吸收量平均增加了46.01%(P0.05)。免疫荧光显示经大黄素处理的脂肪细胞的葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)显著从细胞内膜泡转位至细胞膜表面(P0.01);同时,大黄素使Sirt1的基因表达与蛋白表达都显著增加(P0.05),这可能是大黄素改善脂肪细胞葡萄糖代谢的机制之一。结论大黄素可能通过调节Sirt1表达改善脂肪细胞的葡萄糖代谢。     

三黄汤通过抑制脂肪组织间巨噬细胞浸润及炎症因子表达改善肥胖小鼠的胰岛素抵抗

目的探讨三黄汤改善肥胖小鼠胰岛素抵抗与其抑制炎症因子表达的相关性。方法 C57BL/6雄性小鼠高脂饮食喂养12周诱导为肥胖鼠,随机分为模型组,三黄汤治疗组和二甲双胍阳性药组,治疗组分别以三黄汤和二甲双胍灌胃治疗2周;另设空白对照组小鼠给予正常饮食,模型组与空白对照组给予生理盐水。小鼠进行OGTT葡萄糖耐量实验,处死后取血清检测胰岛素、炎症因子表达;分离附睾脂肪组织以流式细胞术检测组织间浸润的CD8+T细胞和巨噬细胞数量。结果三黄汤降低肥胖小鼠的空腹血糖和空腹胰岛素,降低胰岛素抵抗指数,显著抑制脂肪组织间的巨噬细胞浸润,同时显著抑制血清TNF-α、IL-1β、MCP-1、Resistin的表达;三黄汤对脂肪组织间CD8+T细胞数量无显著影响。结论三黄汤可能通过抑制巨噬细胞浸润,抑制炎症因子表达改善肥胖小鼠的胰岛素抵抗。     

清肺口服液对呼吸道合胞病毒感染人胚肺成纤维细胞TGF-β_1 PDGF-BB mRNA基因表达的影响

目的:探讨清肺口服液含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)基因表达的影响。方法:RSV攻击体外培养的HELF细胞后,以清肺口服液含药血清,利巴韦林含药血清及空白血清干预,采用实时荧光定量PCR法(RealTime-PCR)测定各组人胚肺成纤维细胞TGF-β1、PDGF-BBmRNA表达变化。结果:病毒对照组较正常细胞组PDGF-BB上升为3倍、TGF-β1下降为1/3,清肺口服液含药血清组可显著降低PDGF-BB至RSV感染细胞的1/5、升高TGF-β1至RSV感染细胞的2倍。利巴韦林含药血清和空白血清作用相似,对TGF-β1,PDGF-BB表达有一定的影响。结论:(1)RSV感染可使HELF细胞PDGF-BBmRNA表达水平显著升高,TGF-β1mRNA表达水平显著下降;(2)清肺口服液可调节TGF-β1、PDGF-BB等细胞因子的mRNA表达,缓减RSV感染后细胞的异常变化,这可能是其抗病毒作用机制之一。     

人参皂苷Rb1通过上调脂肪组织葡萄糖转运体促进葡萄糖消耗

人参的主要活性成分人参皂苷Rb1(gisenoside Rb1,Rb1)能够激活胰岛素信号通路,促进脂肪细胞葡萄糖转运体(glucose transporters,GLUTs)的转位,增加葡萄糖的转运,但是其对GLUTs表达的影响尚不清楚。该研究利用肥胖糖尿病小鼠和体外脂肪细胞实验,主要研究Rb1对脂肪细胞GLUTs表达以及葡萄糖代谢的影响。在雄性肥胖糖尿病db/db小鼠中,按20 mg·kg-1体重每天腹腔注射Rb1治疗14 d后,Rb1明显降低肥胖糖尿病小鼠的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)(P<0.05,n=5),胰岛素水平和空腹血糖有下降趋势;在糖尿病小鼠附睾脂肪中,Rb1促使GLUT1和GLUT4蛋白表达量以及AKT磷酸化水平上调恢复;体外培养分化成熟的3T3-L1脂肪细胞中,加入10μmol·L-1Rb1处理24 h后,葡萄糖消耗显著增加(P<0.05,n=4),同时GLUT1和GLUT4的mRNA和蛋白表达量均显著上调(P<0.05,n=3),此外,在3T3-L1脂肪细胞中,Rb1处理3 h后,脂肪细胞的AKT被磷酸化激活。该研究结果表明人参皂苷Rb1不仅能够激活胰岛素信号通路,还能上调葡萄糖转运体的表达,促进葡萄糖的消耗,进一步阐明其改善机体胰岛素抵抗和糖代谢异常的作用机制。     

抑火理脾颗粒剂治疗2型糖尿病高脂血症临床分析

目的观察抑火理脾颗粒剂对2型糖尿病高脂血症患者血脂水平的影响。方法 120例患者随机分为治疗组和对照组,两组均给予饮食教育、适量运动及诺和灵30R治疗。治疗组予"抑火理脾颗粒剂",每日1剂,共8周,对照组予"抑火理脾颗粒剂安慰剂"治疗。观察2组治疗后血脂变化。结果治疗组经治疗后TC、TG、APOB较治疗前明显改善,差异有统计学意义,P0.01,LDL、APOA较治疗前亦明显改善,差异有统计学意义,P0.05;对照组TC、LDL较治疗前亦明显改善,差异有统计学意义,P0.05。治疗后,治疗组TC、TG、LDL较对照组明显改善,差异有统计学意义,P0.05。结论抑火理脾颗粒剂可明显降低2型糖尿病脂代谢紊乱患者血脂水平。     

冬凌草甲素对胰腺癌细胞骨架蛋白F-actin的影响

背景与目的:中医药治疗肿瘤不良反应低且疗效显著,在防治胰腺癌方面有较大的潜力与优势,日益受到国内、外医学界的关注。本研究观察中草药冬凌草的有效成分冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990凋亡及细胞骨架蛋白F-actin的影响。方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的SW1990细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,DAPI染色法染色后荧光显微镜观察细胞核凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜观察F-actin形态学变化。结果:冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的增殖抑制作用,荧光显微镜见到典型的凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示,25、50μmol/L冬凌草甲素给药组早期凋亡的百分率显著高于对照组(3.78±0.46,9.51±0.63 vs 0.73±0.06,P<0.05),晚期凋亡和坏死细胞的百分率也显著高于未给药组(14.40±1.78,20.53±2.54 vs 4.16±0.31,P<0.05)。细胞骨架蛋白F-actin呈现解聚状态。结论:冬凌草甲素可抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能是药物引起了细胞骨架蛋白F-actin解聚。