柴胡皂苷D对慢性应激诱导小鼠焦虑症的影响

目的:探讨柴胡皂苷D对慢性应激诱导焦虑模型小鼠的影响及其作用机制。方法:选取50只雄性ICR小鼠,按照随机数字表法分为五组,分别为正常组、慢性应激组、氟西汀组(20 mg/kg)、柴胡皂苷D低剂量组(20 mg/kg)和柴胡皂苷D高剂量组(40 mg/kg)。除正常组外,其余四组予慢性应激诱导小鼠建立焦虑症模型。通过蔗糖偏好实验、旷场试验、强迫游泳试验和悬尾试验检测小鼠行为学。采用酶联免疫技术检测IL-6、IL-β、TNF-α; 采用Western blot技术检测小鼠海马组织RIP140、p-NF-κB-p65、p-IκBα、p-IKKα和p-IKKβ蛋白表达; 采用免疫组化法检测小鼠海马组织RIP140蛋白表达。结果:柴胡皂苷D低剂量组、柴胡皂苷D高剂量组均能改善焦虑症模型小鼠行为学,并能降低血清IL-6、IL-β和TNF-α水平。柴胡皂苷D低剂量组、柴胡皂苷D高剂量组可降低小鼠海马组织RIP140、p-NF-κB-p65、p-IκBα、p-IKKα和p-IKKβ蛋白的表达。结论:柴胡皂苷D可以缓解慢性应激焦虑模型小鼠症状,其机制与调控RIP140/NF-κB信号通路相关。     

加味玉屏风汤对截肢应激小鼠巨噬细胞功能的调节作用

为观察高、中、低三种浓度加味玉屏风汤对截肢应激小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及其分泌ＴＮＦα（肿瘤坏死因子α）和ＰＧＥ２（前列腺素２）的调节作用，将二级小鼠随机分为正常对照组、应激对照组、应激＋５％加味玉屏风汤组、应激＋２５％加味玉屏风汤组、应激＋１２５％加味玉屏风汤组，应激组动物均行截肢手术，应激前注射各浓度加味玉屏风汤１周。结果示：加味玉屏风汤可拮抗应激小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的抑制和分泌ＴＮＦα、ＰＧＥ２的增加。提示：加味玉屏风汤可有效调节应激过程中巨噬细胞吞噬和分泌功能的紊乱，这可能是该方防治应激性免疫功能抑制的基础     

陈皮多甲氧基黄酮类成分对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：探讨陈皮多甲氧基黄酮类成分（CM）对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：制造小鼠荷瘤模型，采用巨噬细胞吞噬功能测定．血清溶血素生成试验．PHA诱导淋巴细胞转化试验和IL-2、TNF—α定量分析，观察CM对荷瘤小鼠非特异免疫、体液免疫、细胞免疫以及细胞因子的影响。结果：CM中、高剂量可提高荷瘤小鼠巨噬细胞的吞噬率以及吞噬指数．增强腹腔巨噬细胞吞噬功能并可提高荷瘤小鼠的血清溶血素水平，2组间作用无显著性差异；CM低、中、高剂量可提高荷瘤小鼠PHA诱导淋巴细胞的转化率．3个剂量组的作用有明显的量效关系：CM低、中、高剂量组均可提高荷瘤小鼠IL－2以及TNF-α生成水平。结论：CM通过对小鼠的非特异性及特异性免疫应答，提高荷瘤小鼠的免疫功能。     

牛大力多糖对LPS诱导RAW264.7细胞炎性因子释放的作用研究

目的 研究牛大力多糖对脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响,并观察核转录因子-κB（NF-κB p65）p65和抑制性卡巴蛋白-α（IκB-α）表达变化。方法 选用小鼠巨噬细胞RAW264.7,随机分为空白对照组、LPS模型组、牛大力多糖低、中、高剂量组（10,100,1000 ng?mL-1,孵育 2 h 后,再加入10 μg?mL-1 LPS 至培养板中继续培养10 h）,ELISA法测定各组细胞炎性因子白细胞介素1（IL-1）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量,Western Blot法检测IκB-α蛋白以及NF-κB p65 蛋白。结果 牛大力多糖高、中、低剂量组均能抑制LPS诱导炎性因子的释放,提高IκB-α与内参蛋白的比值,并降低NF-κB p65与内参蛋白的比值,且与牛大力多糖的剂量呈正相关。结论 牛大力多糖可通过增加IκB-α的表达,IκB-α与NF-κB结合增多,使得NF-κB的核定位信号被掩盖,从而降低炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α的释放,起到抗炎作用。     

宁心涤痰汤通过STAT1/LXR-α通路介导的巨噬细胞内质网应激治疗支架内再狭窄的机制研究

目的 观察宁心涤痰汤对STAT1/LXR-α信号通路介导的巨噬细胞内质网应激的影响，从而阐明其抑制支架内再狭窄的分子机制。方法 人急性单核细胞白血病细胞（THP-1）体外诱导分化成巨噬细胞后分为空白组、模型组、宁心涤痰汤组和辛伐他汀组。通过ox-LDL诱导构建泡沫细胞模型，并给予相应的药物进行干预。分别采用Western blotting和ELISA法检测各组巨噬细胞STAT1/LXR-α通路与内质网应激相关蛋白的表达水平和炎症因子的含量。构建巨噬细胞与血管平滑肌细胞共培养体系，通过CCK8法和划痕实验检测各组平滑肌细胞增殖和迁移能力的改变。结果 与空白组相比，模型组巨噬细胞中p-STAT1、p-PERK、p-elf2α及CHOP蛋白的表达及细胞上清中肿瘤坏死因子-6(IL-6)、人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量均显著升高，LXR-α蛋白表达显著降低，差异有统计学意义（P <0.01）；与模型组比较，宁心涤痰汤组能够显著抑制巨噬细胞中p-STAT1、p-PERK、p-elf2α及CHOP蛋白的表达和上清中IL-6、MCP-1和TNF-α的...     

基于Rac1信号通路研究淫羊藿苷对慢性阻塞性肺疾病模型小鼠肺泡巨噬细胞胞葬及吞噬功能的影响

目的 探讨淫羊藿苷基于Rac1信号通路改善慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）模型小鼠肺泡巨噬细胞胞葬及吞噬功能障碍的作用机制。方法 40只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、Rac1抑制剂（2.5 mg/kg）组和淫羊藿苷低、高剂量（40、80 mg/kg）组,每组8只,除空白组外其余各组小鼠采用香烟烟雾熏吸8周的方法制备COPD模型,造模后ip Rac1抑制剂或ig淫羊藿苷,1次/d,每周给药6次,连续4周。检测小鼠体质量、肺功能指标;ELISA法检测肺组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、IL-6、乳脂球表皮生长因子8(milk fat globule EGF factor 8,MFG-E8)和生长停滞特异性蛋白6(growth arrest specific protein 6,GAS6)含量;流式细胞术检测肺泡巨噬细胞胞葬及吞噬能力、小鼠全血巨噬细胞M1/M2分型;苏木素-伊红染色（hematoxyl...     

启膈散对小鼠单核巨噬细胞功能的影响

目的探讨启膈散治疗食管癌作用机制。方法 100只小鼠随机分为10组,启膈散1、2、3、4、5、6、7组各10只,刀豆素A（ConA）组10只,脂多糖（LPS）组10只,磷酸缓冲液（PBS）组10只。四甲基偶氮唑盐（MTT）法、L929细胞毒生物法检测各组小鼠单核巨噬细胞代谢、吞噬功能及分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的功能。结果启膈散各组在促进小鼠单核巨噬细胞增殖、增强单核巨噬细胞吞噬功能及分泌TNF-α的功能方面与ConA组、LPS组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,启膈散组优于ConA组和LPS组,且存在明显量效关系。结论启膈散可通过促进小鼠单核巨噬细胞增殖、增强单核巨噬细胞吞噬功能及分泌TNF-α的功能从而达到抑制肿瘤生长的作用。     

情志应激激活潜伏单纯疱疹病毒1型建立“肝郁化火”动物模型的研究

目的:建立情志应激引起潜伏单纯疱疹病毒1型(HSV-1)复发的“肝郁化火”动物模型。方法:小鼠通过鼻滴感染HSV-1 4周后,采用定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)和空斑法分别检测三叉神经节(TG)中HSV-1潜伏相关转录体(LAT)的表达和病毒颗粒,确定单纯疱疹病毒1型(HSV-1)潜伏模型成功建立。小鼠每天拘束应激12 h,持续应激4 d,采用致细胞病变效应(CPE)法和免疫荧光法检测三叉神经节中HSV-1的gB蛋白的表达,检测情志应激诱导HSV-1激活情况。HSV-1潜伏小鼠于拘束应激前3 d给予“清肝泻火”经典方丹栀逍遥散或清肺热的经典方泻白散,以方测证判定模型的中医证型。采用眼球摘除法对小鼠血浆进行取样,液质色谱-质谱法(LC-MS)检测各激素的含量。用Western Blotting法检测TG中脂质氧化指标4-HNE和固有免疫指标干扰素-β(IFN-β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)蛋白的表达情况。结果:小鼠鼻滴感染HSV-1 4周后,可在其三叉神经节中建立潜伏,小鼠拘束4 d后可再次激活。与激活组比较,丹栀逍遥散比泻白散更能有效降低HSV-1的激活率,并能减轻复发性眼部感染。激活组以及丹栀逍遥散组的血浆中皮质酮水平都明显增加,2组差异无统计学意义。此外,丹栀逍遥散能降低TG中4-HNE和IFN-β的表达,并能减少HSV-1复发引起的TNF-α和IL-6炎症介质蛋白的表达。结论:丹栀逍遥散可增强固有免疫,降低情志应激介导的HSV-1重激活,并能减轻HSV-1激活复发而引起的氧化应激以及炎症反应。     

刺槐素通过核因子κB信号通路抑制脂多糖诱导的巨噬细胞损伤

目的：探讨刺槐素（Acacetin）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠骨髓巨噬细胞（BMDMs）的抗炎作用机制。方法：CCK-8法检测各浓度刺槐素（5 μmol/L,10 μmol/L,20 μmol/L,40 μmol/L）对小鼠骨髓巨噬细胞增殖的影响,筛选最佳剂量;分离培养小鼠骨髓巨噬细胞,LPS（50 ng/mL）预处理BMDMs（0 min,10 min,30 min,60 min）,加入刺槐素（10 μmol/L）孵育0.5 h。蛋白质印迹法检测p65、磷酸化p65（p-p65）、核因子κB抑制蛋白α（IκBα）、磷酸化IκBα（p-IκBα）的表达,激光共聚焦观察核因子κB核转位情况。结果：CCK-8结果显示,5~40 μmol/L的刺槐素对小鼠骨髓巨噬细胞增殖无明显影响,结合课题组前期研究结果,选择10 μmol/L刺槐素作为后续研究剂量;与空白对照组比较,LPS不同时间刺激组p-p65、p-IκBα的表达水平均显著增加,给予刺槐素治疗后,能显著降低p-核因子κB p65和p-IκBα的表达;刺槐素能抑制LPS介导的核因子κB p65核转位。结论：刺槐素的抗炎作用与抑制核因子κB信号通路有关,刺槐素可作为一种有潜力的候选抗炎药物。     

逍遥散对慢性应激小鼠巨噬细胞功能的影响及机制

目的:研究逍遥散对慢性应激小鼠巨噬细胞杀伤活性的影响及机制。方法:采用束缚手段制备慢性应激动物模型,分别以不同剂量逍遥散灌胃干预,给药10 d后检测指标,采用MTT法检测巨噬细胞杀伤活性,采用Griess试剂盒检测细胞内NO水平,采用ELISA试剂盒检测血清中皮质醇(Cor T)和ACTH水平。结果:与空白组相比,应激模型组小鼠巨噬细胞杀伤活性、NO含量均显著降低(P0.01),并且血清Cor T、ACTH显著升高(P0.01),与应激模型组相比,逍遥散中剂量和高剂量组巨噬细胞杀伤活性及细胞内NO含量明显或显著升高(P0.05或P0.01),低、中、高剂量逍遥散对应激小鼠血清中Cor T均有明显或显著抑制作用(P0.05或P0.01),中、高剂量逍遥散对ACTH均有明显或显著抑制作用(P0.05或P0.01)。结论:逍遥散可提高慢性应激小鼠巨噬细胞杀伤活性,这除了与其直接的免疫调节作用有关外,也与其对神经递质的调节作用有关。