针刺上巨虚穴对肠易激综合征大鼠血清一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的影响

目的观察针刺上巨虚穴对肠易激综合征（IBS）大鼠血清一氧化氮（NO）含量和一氧化氮合酶（NOS）活性的影响。方法将30只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组和电针组,各10只。模型对照组和电针组均采用直肠球囊扩张刺激法,持续刺激15 d制备IBS大鼠模型。电针组隔日1次针刺大鼠双侧上巨虚穴10 d。空白对照组、模型对照组每日陪同电针组抓取、固定,不做任何治疗。各组采用分光光度计比色法检测NO含量和NOS活性。结果模型对照组血清NO、NOS水平均较空白对照组显著升高（P〈0.01）,电针组血清NO、NOS水平均较模型对照组有不同程度降低（P〈0.05）。结论针刺上巨虚穴降低IBS大鼠血清NO及NOS水平,可能是针刺调节IBS胃肠运动,进而改善慢性内脏痛敏症状的机制之一。     

气滞血瘀证大鼠NO/NOS体系的变化

目的：观察气滞血瘀证大鼠一氧化氮／一氧化氮合成酶（NO／NOS）的体系变化。方法：将Wistar大鼠随机分成4组,对照组、模型组、血府逐瘀汤低、高剂量组。采用多因素联合刺激法建立气滞血瘀模型。运用分光光度法测定血浆和肝组织中NO含量以及肝组织中NOS活性,利用RT—PCR法测定肝组织中NOS基因表达。结果：模型组血浆NO含量（0．52±0．33）μmol／L显著低于对照组（2．77±1．73）μmol／L（P〈0．01）,低剂量组NO含量（2．37±0．53）μmol／L显著高于模型组（0．52±0．33）μmol／L（P〈0．01）;模型组肝组织NO含量（0．52±0．24）μmol／mg显著低于对照组（5．87±1．72）μmol／mg（P〈0．01）,低剂量组NO含量（3．72±1．53）μmol／mg显著高于模型组（0．52±0．24）μmol／mg（P〈0．01）;模型组肝组织eNOS基因表达水平显著低于对照组（P〈0．01）,低剂量组肝组织eNOS显著高于模型组（P〈0．05）。结论：气滞血瘀证大鼠NO／NOS体系下调,为进一步研究治疗血瘀症类疾病提供了借鉴和思路。     

益气健脾中药对脾气虚大鼠神经肽Y、血管活性肠肽和丝裂原活化蛋白激酶14基因表达的影响

目的观察脾气虚大鼠血清、小肠神经肽Y(NPY)和血管活性肠肽(VIP)含量,小肠组织丝裂原活化蛋白激酶14(Mapk14)mRNA表达的变化及益气健脾中药的干预效应,以揭示脾气虚证发生的内在机制。方法受试动物随机分为空白组、模型组(7、14、21 d组)、益气健脾组,每组10只。除空白组外,其余各组采用大黄法、力竭法及饥饿法复合法建立脾气虚证大鼠模型,造模同时益气健脾组每日给予四君子汤20 g/kg干预21 d,各组大鼠分时段采用放免法测定小肠、血清NPY和VIP含量,采用实时荧光定量PCR检测小肠组织Mapk14 mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠血清及小肠组织NPY含量降低(P0.05),VIP含量升高(P0.05),小肠组织Mapk14 mRNA相对表达量升高(P0.05),且以模型21 d组显著;与模型21 d组比较,益气健脾组大鼠血清及小肠组织NPY含量升高(P0.05),VIP含量降低(P0.05),小肠组织Mapk14 mRNA相对表达量降低(P0.05)。结论益气健脾中药具有调节脑肠肽NPY、VIP分泌及抑制小肠组织Mapk14 mRNA异常表达的作用。     

安心颗粒对心力衰竭大鼠血清一氧化氮及心肌JAK_1蛋白表达的影响

目的探讨安心颗粒对心力衰竭大鼠血清一氧化氮（NO）及心肌JAK1蛋白表达的影响。方法 72只SD大鼠随机分为6组：正常对照组（A组）、模型组（B组）、卡托普利组（C组）、安心颗粒小剂量组（D组）、安心颗粒中剂量组（E组）、安心颗粒大剂量组（F组）。采用阿霉素腹腔注射造模。同时,各用药组分别灌胃给药,每周1次,连续6周。6周后测定各组心功能、血清一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）水平及心肌JAK1蛋白表达。结果 B组NO、NOS水平与心肌JAK1蛋白表达活性均高于A组（P〈0.01）;C组、D组、E组、F组NO、NOS水平和心肌JAK1蛋白表达活性均低于B组（P〈0.05或P〈0.01）。结论安心颗粒可抑制JAK活性,降低血清NO、NOS浓度,改善左心室功能。     

心之络病“孙络绌急”模型大鼠血清NO水平及心肌组织NOS mRNA的表达研究

目的探讨心之络病＂孙络绌急＂大鼠模型中血清一氧化氮（NO）及心肌组织一氧化氮合成酶（NOS）mRNA表达变化。方法将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组,造模5 min组、10 min组、20 min组以及30 min组。采用大鼠股静脉注射垂体后叶素法制备心之络病＂孙络绌急＂模型。酶联免疫吸附法检测血清NO水平,实时定量PCR法检测eNOS mRNA、iNOS mRNA表达。结果与正常对照组比较,各模型组血清NO水平均显著升高（P〈0.01）。在心肌组织中,iNOS mRNA表达在造模5min组、10min组显著上调（P〈0.01）,在30 min组表达显著下调（P〈0.01）。与正常对照组比较,e NOS mRNA在各模型组表达均显著下调（P〈0.01）。结论 NO的调节与释放在＂孙络绌急＂微观病理演变过程中发挥着重要作用。     

脾气虚大鼠小肠组织钙调蛋白信号通路中钙调蛋白、钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ基因表达规律的研究

目的：观察脾气虚大鼠小肠组织钙调蛋白信号通路中钙调蛋白（CaM）、钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）基因表达规律,揭示脾气虚证发生的内在机制。方法 ：将48只大鼠随机分为正常对照组和脾气虚7d、14d、21d组4组,每组12只。除正常对照组外,其余各组采用复合法（苦寒破气法、力竭法及饥饱失常法）建立脾气虚证大鼠模型,观测各组大鼠一般生存状态、脾虚证宏观证候积分、平均每日体质量增加量、负重游泳耐力时间和基础肛温;同时,采用实时荧光定量PCR技术检测小肠组织钙调蛋白信号通路中CaM、CaMKⅡ基因表达水平的变化。结果：与正常对照组对比,脾气虚模型7d、14d、21d组大鼠平均每日体质量增加量、负重游泳耐力和基础肛温降低,脾虚证宏观证候积分升高,小肠组织CaM、CaMKⅡ基因相对表达量显著升高,且以脾气虚模型21 d组变化显著（P〈0.05）。结论：脾气虚大鼠小肠组织钙调蛋白信号通路中CaM、CaMKⅡ基因表达水平异常增高。     

脾虚大鼠血及延髓VIP/NO信号转导通路变化

目的:探讨脾虚证小肠运动异常的细胞信号转导机制。方法:采用“破气苦降加饥饱失常法”塑造大鼠脾气虚证模型,分别采用放射免疫法、硝酸还原酶法及分光光度法测定各组大鼠延髓和血中血管活性肠肽(VIP)、一氧化氮(NO)含量与一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:脾虚组大鼠延髓中VIP、NO含量与NOS活性明显低于正常组和四君子汤组,四君子汤组和正常组之间无显著差别;血中VIP、NO含量与NOS活性则比正常组和四君子汤组显著升高,四君子汤组和正常组之间差异不显。结论:脾虚证与VIP/NO信号通路之间具有广泛相关性,该信号通路变化可能是脾虚证小肠运动异常以及脾虚证主要病理生理机制之一。     

健脾益气中药对脾气虚证大鼠血管紧张素Ⅱ及一氧化氮的影响

目的:研究脾气虚证大鼠血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素1、一氧化氮(NO)的变化及健脾益气中药对其的影响。方法:实验动物分成空白组、模型组、四君子汤组、六君子汤组、归脾汤组。分别采用ELISA法、硝酸还原酶法检测各组大鼠血浆中AngⅡ、ET-1,血清中的NO含量。结果:与空白组比较,其他各组的AngⅡ、ET-1含量升高,NO含量降低;与模型组比较,中药治疗组的AngⅡ、ET-1含量降低明显,NO含量升高明显。结论:脾气虚证大鼠血浆中AngⅡ、ET-1含量升高,NO含量降低,而健脾益气中药能改善这一情况,为健脾益气中药可防治心脑血管疾病提供实验室依据。     

脾气虚证小肠运动异常的VIP/NO信号转导机制初探

目的探讨脾气虚小肠运动异常的细胞信号转导机制。方法Wistar健康大鼠30只,随机分为正常组、模型组、四君子汤防治组,每组10只。采用“破气苦降加饥饱失常法”塑造大鼠脾气虚证模型,分别采用放射免疫法、硝酸还原酶法及分光光度法测定各组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌中血管活性肠肽(VIP)、一氧化氮(NO)含量与一氧化氮合酶(NOS)活性;同步观察各组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌张力变化。结果模型组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌中VIP、NO含量与NOS活性明显低于正常组和四君子汤组,四君子汤组和正常组之间无显著差别;模型组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌张力较正常组和四君子汤组明显增强,但四君子汤组和正常组之间未见明显改变。结论脾气虚证与小肠平滑肌VIP/NO信号通路之间具有较好的相关性,该信号通路变化可能是脾虚证小肠运动异常以及脾虚证主要病理生理机制之一。     

补肾柔肝活血法对缺血性中风大鼠脑组织中NO、NOS的影响

目的：探讨补肾柔肝活血法对缺血性中风大鼠脑组织中NO、NOS的影响。方法：采用改良的Longa法建立大鼠左侧大脑中动脉梗阻（MCAO）再灌注模型,造模成功后随机分为6组,假手术组、模型组、西药组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组。给予相应药物治疗14 d后测定大鼠脑组织中一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（TNOS与iNOS）水平。结果：①与假手术组比较：模型组大鼠脑组织中NO,TNOS及iNOS的含量明显高于假手术组（P〈0.05）;②与模型组比较：各治疗组的NO、TNOS、iNOS的水平均有所下降,治疗各组脑组织内NO和iNOS水平均极明显低于模型组,有极明显的差异性（P〈0.01）,但中药低剂量组及中药高剂量组脑组织内TNOS水平与模型组无明显差异（P〉0.05）,中药中剂量组和西药组脑组织内的TNOS水平明显低于模型组,有明显差异性（P〈0.05）;③与西药组比较：中药各治疗组脑组织内的NOS水平与西药组无明显差异性（P〉0.05）,中药中剂量组脑组织内的NO水平均明显低于西药组,有明显的差异性（P〈0.05）,但中药高剂量组和中药低剂量组脑组织内的NO水平与西药组比较,差异无显著性（P〉0.05）。结论：补肾柔肝活血法治疗能明显降低大鼠脑组织中NO、NOS水平。     

补中益气汤退热作用及机制的探讨

目的:探讨补中益气汤退热作用机制.方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、脾虚发热组、补中益气汤组共3组,每组10只.采用饮食失节+过度疲劳+注射LPS法复制脾虚发热模型.每周测体温1次.第18天开始补中益气汤组每天ig(6.83 g·kg-1),正常组和脾虚发热组给予同体积蒸馏水,每天1次,连续5d.第22天AM 8:00脾虚发热组和补中益气汤2组大鼠ip脂多糖(LPS,80μg·kg-1)诱导发热,正常组ip等体积生理盐水.测量各组大鼠ip LPS后30,60,120,180,220 min肛温及绘制体温曲线,测定下丘脑环磷酸腺苷(cAMP)、前列腺素E2(PGE2).结果:与正常对照组相比,脾虚发热组大鼠体温曲线明显上抬,各观察点体温均明显升高,下丘脑PGE2和cAMP明显升高(P＜0.05或P＜0.01).与脾虚发热组比较,补中益气汤组大鼠体温曲线明显下移,下丘脑PGE2和cAMP均明显下降(P＜0.05或P＜0.01).结论:补中益气汤对脾虚发热模型大鼠具有明显的退热效用,其退热作用可能与降低中枢发热介质PGE2和cAMP有关.     

实验性脾气虚大鼠胃泌素的基因表达及四君子汤的干预作用

目的:观察脾气虚证大鼠胃窦黏膜胃泌素(gastrin,GAS)基因表达的改变及不同用药时间段四君子汤对其调整作用,探讨脾气虚证的本质及四君子汤的作用机制。方法:以三因素复合的方法复制脾气虚证大鼠模型,造模大鼠随机分成模型组、四君子汤组,在干预后不同时间段,用逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测四君子汤对脾气虚大鼠胃窦GAS mRNA表达的影响。结果:脾气虚模型组血清GAS水平、胃窦GAS mRNA表达下降,与正常组比较差异有显著性(P<0.05);四君子汤组血清GAS含量、胃窦GAS mRNA表达随用药时间的延长呈递增的趋势,用药21天时,与模型组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:GASmRNA表达失衡是脾气虚证的本质之一,而四君子汤上调GAS mRNA表达是其治疗脾气虚证的机制之一。     

补中益气汤对脾气虚证大鼠胃泌素基因表达的影响

目的:探讨补中益气汤不同浓度、不同时间对脾气虚证大鼠胃泌素(gastrin,GAS)基因表达的影响。方法:以大黄法、游泳力竭法、饥饿法三因素复合的方法复制脾气虚证大鼠模型,造模大鼠随机分成模型组、补中益气汤低、中、高剂量组,在干预后不同时间(7d,14d,21d),用逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测补中益气汤对胃窦GAS mRNA表达的影响。结果:与模型组比较,补中益气汤中、高剂量组血清GAS水平升高(P<0.05,P<0.01)、胃窦GAS mRNA表达上调(P<0.05,P<0.01);中、高剂量组比较,差异有显著性意义(P<0.05),以中剂量组为佳。结论:补中益气汤能上调GAS mRNA表达可能是其治疗脾气虚证的机制之一。     

加味黄芪建中汤对脾气虚证大鼠胃泌素基因表达的影响

目的:探讨加味黄芪建中汤不同浓度、不同时间对脾气虚证大鼠胃泌素(gastrin,GAS)基因表达的影响。方法:以大黄法、游泳力竭法、饥饿法三因素复合的方法复制脾气虚证大鼠模型,造模大鼠随机分成模型组、加味黄芪建中汤低、中、高剂量组,在用药后不同时间(7d、14d、21d),用RT-PCR方法检测加味黄芪建中汤对胃窦GAS mRNA表达影响。结果:与模型组比较,加味黄芪建中汤中、高剂量组血清GAS水平升高(P<0.05,P<0.01)、胃窦GAS mRNA表达上调(P<0.05,P<0.01);中、高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05),以中剂量组为佳。结论:加味黄芪建中汤能上调GAS mRNA表达可能是其治疗脾气虚证的机制之一。     

针刺对多发梗死性痴呆大鼠一氧化氮/一氧化氮合酶的影响

目的：探讨针刺对多发梗死性痴呆（MID）大鼠一氧化氮（NO）/一氧化氮合酶（NOS）的影响.方法：MID大鼠随机分为模型组、针刺组和非穴组,并设正常组和假手术组.观察各组大鼠血清及不同脑区NO含量、NOS活性及各脑区神经元型NOS（nNOS）基因的表达.结果：与正常组比较,模型组大鼠血清、皮质、海马NO含量升高,海马及纹状体NOS活性升高,各脑区nNOS mRNA及蛋白表达增强.针刺可明显逆转上述异常改变.结论：针刺可抑制MID大鼠 nNOS的过度表达,降低NOS活性,减少NO的产生,从而通过NO/NOS途径起到一定的神经保护作用.     

脾虚发热证大鼠模型的研究

目的:复制并评价脾虚发热大鼠模型。方法:大鼠随机分为正常对照组、单纯脾虚组、脾虚发热组。大鼠采用饮食失节+过度疲劳法复制脾虚模型,于造模第22天腹腔注射LPS(80μg/kg)诱导发热,测定各时间点的肛温、体重、外观行为变化积分值、尿D-木糖排泄率和外周血相关指标。结果:①与正常对照组比较,脾虚发热组大鼠体温除在30min有一过性降低外,其余各观察点均呈显著性升高(P0.01,P0.05);单纯脾虚组大鼠体温除在60min时有一过性升高外,其余各点无显著性差异;脾虚发热组与单纯脾虚组大鼠在第1、2、3周末的体重均明显降低;第2、3周末的外观行为变化总积分值呈显著性增加(P0.05,P0.01);第3周末的尿D-木糖排泄率、血GAS、MTLI、L-1β、IL-2、T3、T4、TSH均降低I,L-6和SS升高(P0.05,P0.01);②与单纯脾虚组相比,脾虚发热组大鼠体温在30min时有一过性降低,之后体温一直呈显著性升高(P0.01);外周血T4含量显著性降低(P0.01),其余各指标的差异无显著性。结论:饮食失节+过度疲劳+LPS注射可引起大鼠出现类中医脾虚发热证。     

模拟中医病因所致脾气虚、脾阳虚大鼠模型的证候比较研究

目的:以多因素复合法分别建立脾气虚证、脾阳虚证大鼠模型,对两组模型大鼠进行比较研究以探讨脾气虚、脾阳虚的证候实质与差异。方法:动物随机分为正常组、脾气虚组和脾阳虚组,以相应造模方法进行模型复制,并以四君子汤和理中汤进行药物反证。结果:脾气虚和脾阳虚大鼠宏观证候计分高于正常组(P0.01),且以脾阳虚组为著(P0.01);两组血清GAS均低于正常组(P0.01);脾气虚组的血浆MTL低于正常组(P0.01),而脾阳虚组高于正常组(P0.01);经健脾中药干预后,各项脾虚症状和体征逐渐缓解或消失;血清GAS、血浆MTL紊乱回复。结论:多因素复合法复制的脾气虚、脾阳虚证大鼠模型符合证候的生物学特征,稳定性良好,且经得起药物反证;脾气虚、脾阳虚大鼠的脾虚宏观证候呈递进关系;血浆MTL在脾气虚和脾阳虚中变化趋势不一致,可作为鉴别两证的微观指标。     

"脾虚"大鼠胃黏膜组织一氧化氮含量及补中益气汤的作用

目的：研究“脾虚”大鼠胃黏膜组织一氧化氮（NO）含量的变化及补中益气汤的作用。方法：采用Griess试剂法和紫外分光光度法检测胃黏膜组织的一氧化氮代谢产物（NO2^-和NO3^-）和过氧化亚硝酸（ONOO^-）。结果：大黄“脾虚”大鼠胃黏膜组织中NO3^-、iNOS及ONOO^-水平均低于正常大鼠，经补中益气汤治疗后能恢复到接近正常水平。结论：“脾虚”大鼠胃黏膜组织一氧化氮（NO）含量低于正常，补中益气汤能升高“脾虚”大鼠胃黏膜组织中NO的含量。     

健脾活血方抗酒精性肝损伤脂质过氧化主效应中药分析

目的:探索具有显著抗酒精性肝损伤作用的中药复方健脾活血方抗脂质过氧化的主效应中药,并分析相关作用机制.方法:采用均匀设计法及Lieber-DeCarli乙醇液体饲料诱导的大鼠乙醇性肝损伤模型,以肝组织丙二醛(MDA)含量作为效应指标筛选主效应中药,并再次以该模型验证其药效;进一步检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及血清铁离子(Fe2+)含量以分析主效应中药抗脂质过氧化的机制.结果:含8味中药的健脾活血方中“抗脂质过氧化”主效应药物组合为:葛根、泽泻、五味子、姜黄(剂量比为250∶50∶17∶50),验证及药理分析实验显示:与模型组相比,抗脂质过氧化主效应中药组肝组织MDA,NOS,iNOS及血清Fe2+含量显著降低,SOD,GSH-Px活性显著升高.结论:健脾活血方8味中药中对大鼠乙醇性肝损伤模型“抗脂质过氧化”的主效应中药组合为“葛根+泽泻+五味子+姜黄”,其药理机制在于抑制促氧化物质NOS,iNOS及血清Fe2+产生,增加抗氧化自由基清除酶SOD,GSH-Px活性.