地龙2号对大鼠肝纤维化α-SMA、TGF-β1、MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响

目的研究地龙2号对肝纤维化大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响.方法采用四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,52只雄性Wistar大鼠随机分成6组:正常组、阴性对照组、模型组、阳性对照组、地龙2号大剂量组和地龙2号小剂量组,8周末用免疫组织化学染色法检测肝组织中α-SMA、TGF-β1、MMP-13及TIMP-1蛋白表达情况.结果与模型组相比,地龙2号组肝纤维化程度明显减轻,α-SMA、TGF-β1、及TIMP-1蛋白表达均显著降低,MMP-13表达显著升高.结论地龙2号抑制大鼠肝脏纤维组织的形成可能与其降低α-SMA、TGF-β1、TIMP-1蛋白表达并促进MMP-13蛋白表达有关.     

硫化氢通过调控转化生长因子-β及基质金属蛋白酶-9/基质金属蛋白酶抑制剂-1改善糖尿病大鼠肾小管间质纤维化

目的探讨硫化氢(H_2S)气体信号分子对糖尿病大鼠肾小管间质纤维化及转化生长因子(TGF)-β、基质金属蛋白酶(MMP)-9/基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1表达的影响。方法单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型将成年雄性SD大鼠64只随机分为正常对照组(Control组)、STZ组、STZ+H_2S组、H_2S组。造模72 h后采尾静脉血检测,若血糖>16.7 mmol/L表明造模成功。H_2S组和STZ+H_2S组大鼠腹腔注射Na HS溶液100μmol·kg~(-1)·d~(-1),Control组和STZ组腹腔注射同等量生理盐水。8 w后取标本,Masson染色观察大鼠肾脏组织病理形态学改变,Western印迹检测大鼠肾脏TGF-β、MMP-9、TIMP-1、Ⅳ型胶原蛋白的表达水平。结果与Control组相比,STZ组存在明显肾小管间质纤维化,同时肾脏组织中Ⅳ型胶原、TGF-β、TIMP-1蛋白的表达升高,MMP-9蛋白的表达水平下降(P<0.05);与STZ组大鼠相比,STZ+H_2S组肾小管间质纤维化减轻,肾组织TGF-β、TIMP-1、Ⅳ型胶原蛋白的表达降低,MMP-9蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 H_2S可改善糖尿病大鼠肾小管间质纤维化,其机制可能与调控MMP-9/TIMP-1失衡以及TGF-β蛋白的表达水平有关。     

盐酸替罗非班对急性冠脉综合征hs-CRP和MMP-9的影响

目的观察盐酸替罗非班对急性冠脉综合征（ACS）患者治疗前后血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）,基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平的影响,探讨盐酸替罗非班能否抑制斑块炎症反应,及稳定斑块的可能机制。方法55例初诊为ACS的患者随机分为对照组（n=31）和试验组（n=24）,试验组在对照组给予口服阿司匹林,氯吡格雷等常规治疗药物的基础上加用静脉滴注盐酸替罗非班,用超敏乳胶增强免疫比浊法测定ACS患者治疗前后hs-CRP水平,酶联免疫反应试剂盒测定MMP-9水平。结果两组治疗前血清hs-CRP,MMP-9水平未见明显差异;两组治疗后hs-CRP,MMP-9水平均显著下降（P<0.01）;治疗后,替罗非班组下降更显著（P<0.01）。结论盐酸替罗非班能够显著影响血清hs-CRP,MMP-9水平,从而说明盐酸替罗非班亦能通过抑制血管炎症达到稳定斑块的作用。     

中药心康方对大鼠心力衰竭模型心肌胶原代谢的影响

目的观察中药心康方对大鼠心力衰竭模型心肌胶原代谢的影响。方法阿霉素腹腔注射法建立大鼠心力衰竭模型,随机分为对照组(10只)、模型组(9只)、心康方组(9只)和卡托普利组(9只)。Masson染色观察心肌胶原变化,Western blot检测心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原、转化生长因子β1(TGF-β1)、核因子κB的抑制蛋白(IκB)和p56的表达,Western blot和RT-q PCR分别检测心肌基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1和TIMP-2的蛋白和mRNA表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达显著增加,胶原容积分数显著升高(均为P<0.01);TGF-β1和p56表达显著增加,IκB显著降低(均为P<0.05);MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.01或P<0.05)。与模型组比较,心康方组和卡托普利组大鼠的心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达显著减少,胶原容积分数显著降低(均为P<0.01);TGF-β1和p56显著降低,IκB显著升高(均为P<0.05);MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的蛋白和mRNA表达水平显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论中药心康方可减轻心力衰竭大鼠的心肌胶原沉积,其机制可能与抑制核因子κB介导的TGF-β1上调有关。     

米诺环素对急性心肌梗死大鼠心肌基质金属蛋白酶-2及转化生长因子-β1表达的影响

目的探讨大鼠心肌梗死后心肌间质基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达与心室重塑的关系及米诺环素的干预影响.方法结扎SD大鼠冠状动脉前降支建立急性心肌梗死模型,随机分成心肌梗死对照组和米诺环素(30mg·kg-1·d-1)治疗组,2组又随机分为1、2和4周亚组;另设假手术组.应用免疫组化方法测定胶原的表达.用逆转录-聚合酶链反应法及免疫组化方法检测MMP-2、TGF-β1mRNA和蛋白表达情况.结果与假手术组相比,心肌梗死对照组MMP-2、TGF-β1的mRNA表达在各亚组明显升高(均P＜0.05),各亚组MMP-2、TGF-β1蛋白表达也均增高(均P＜0.05),非梗死区Ⅰ/Ⅲ胶原比例在2周和4周随之升高(均P＜0.05).而米诺环素治疗组MMP-2mRNA和蛋白表达在1、2和4周亚组,TGF-β1 mRNA和蛋白表达在1、2周亚组,均较心肌梗死对照组显著降低(均P＜0.05),Ⅰ/Ⅲ胶原比例在2周和4周亚组也显著降低(均P＜0.05).结论大鼠心肌梗死后心肌间质内MMP-2、TGF-β1的表达增高,非梗死区Ⅰ/Ⅲ胶原比例上升,是心室重塑发生发展的重要机制.米诺环素可通过抑制MMP-2、TGF-β1的表达,逆转Ⅰ/Ⅲ胶原比例改善心肌梗死后心室重塑.     

硫化氢经转化生长因子β/膜型基质金属蛋白酶通路改善糖尿病大鼠心肌纤维化

目的观察气体信号分子硫化氢对糖尿病大鼠心肌纤维化以及转化生长因子β(TGF-β)/膜型基质金属蛋白酶(MT3-MMP)蛋白表达的影响。方法将52只成年雄性SD大鼠随机分成4组(每组13只):正常对照组、糖尿病组、糖尿病+硫化氢组、正常大鼠+硫化氢组(硫化氢组)。以链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,注射72h后尾静脉采血测血糖水平,血糖16.7mmol/L提示造模成功。造模成功后,硫化氢组和糖尿病+硫化氢组大鼠腹腔注射NaHS溶液100μmol/(kg·d),正常对照组和糖尿病组腹腔注射等量生理盐水。8周后处死大鼠,取左心室心肌组织,Van Gieson(VG)染色观察大鼠心肌纤维化,Western blot检测大鼠心肌组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原,基质金属蛋白酶(MMP)1,MMP-2,组织型基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP)2蛋白的表达水平,以及TGF-β,MT3-MMP蛋白的表达水平。结果与正常对照组相比,糖尿病组存在明显心肌纤维化,心肌组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原,TIMP-2,TGF-β,MT3-MMP蛋白的表达升高(P0.01),MMP-1和MMP-2蛋白的表达水平降低(P0.01);与糖尿病组相比,糖尿病+硫化氢组大鼠心肌纤维化减轻,心肌组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原,TIMP-2,TGF-β和MT3-MMP蛋白的表达降低,MMP-1和MMP-2蛋白的表达升高(P0.01或P0.05)。结论硫化氢可改善糖尿病大鼠心肌纤维化,其机制可能与下调TGF-β、MT3-MMP蛋白的表达水平有关。     

转化生长因子-β1对绒癌JEG-3细胞MMP-9 mRNA及TIMP-1 mRNA表达的影响

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)不同浓度和作用时间对绒癌JEG-3细胞基质金属蛋白酶-9基因(MMP-9 mRNA)及基质金属蛋白酶抑制剂-1基因(TIMP-1 mRNA)表达的影响.方法 先分别用TGF-β1 0、100、200 ng/ml作用于绒癌JEG-3细胞,48 h收获细胞;再以TGF-β1 100 ng/ml分别与JEG-3细胞作用0、12、24、48、72 h;最后用RT-PCR技术检测TGF-β1不同浓度和作用时间收获JEG-3细胞的MMP-9 mRNA及TIMP-1 mRNA表达.结果 随TGF-β1浓度升高和作用时间延长,各收获细胞的MMP-9 mRNA及TIMP-1 mRNA表达均明显升高,且MMP-9 mRNA与 TIMP-1 mRNA比值均＞1(P＜0.01或＜0.05).结论 在一定浓度和作用时间内,外源性TGF-β1可促进绒癌JEG-3细胞MMP-9 mRNA及TIMP-1 mRNA表达.     

2型糖尿病大鼠心肌组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达与胶原代谢的关系

目的 了解2型糖尿病（T2DM）大鼠模型心肌组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）及其组织抑制物1（TIMP-1）的mRNA表达变化、蛋白水平及组织定位，探讨MMPs／TIMPs在T2DM心肌病变发生发展中的作用。方法 Masson染色观察心肌胶原含量变化；RT-PCR方法观察心肌MMP-、MMP-9和TIMP-1mRNA表达；免疫组化方法测定MMP-2、MMP-9、TIMP-1的蛋白表达和组织定位。结果 T2DM大鼠心肌胶原纤维明显增多；MMP-2mRNA表达明显下调，蛋白水平下降；MMP-9、TIMP-1的mRNA表达均增加，MMP-9、TIMP-1的蛋白水平也升高，但MMP-9／TIMP-1的比值下降。结论 T2DM大鼠心肌组织胶原聚集，心肌纤维化。MMPs／TIMP-1比例失衡可能与T2DM心肌病变的发生有关。     

补脏通络方对糖尿病大鼠肾组织Ⅳ型胶原、转化生长因子-β表达及基质金属蛋白酶-9/金属蛋白酶抑制剂-1平衡的影响

目的观察补脏通络方对糖尿病(DM)大鼠肾组织Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、转化生长因子(TGF)-β表达及基质金属蛋白酶(MMP)-9/金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1平衡的影响。方法大鼠以脂肪乳灌胃21 d后一次性尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg造模,后予补脏通络方治疗。于第8周末取左肾,测算肾重指数;SABC-FITC免疫组织化学荧光法检测肾组织Ⅳ-C、TGF-β表达;免疫印迹法分析肾组织MMP-9、TIMP-1蛋白含量。结果病理组较正常组肾重指数增加(P<0.01),各治疗组较病理组肾重指数降低(P<0.01)。病理组肾小球体积增大,系膜区扩大病变经治疗后均有不同程度改善。病理组较正常组,肾组织Ⅳ-C、TGF-β、TIMP-1表达增高(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值下降(P<0.01);各治疗组较病理组,肾组织Ⅳ-C、TGF-β、TIMP-1表达下降(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值上升(P<0.01);中、高剂量组降低TIMP-1表达,升高MMP-9/TIMP-1比值的作用优于低剂量组(P<0.01)。结论下调肾组织TGF-β表达,调节MMP-9/TIMP-1平衡,促进胶原降解,可能是补脏通络方保护DM肾脏作用的机制之一。     

针刺联合糖克煎剂对糖尿病肾病大鼠TGF-β1/CTGF/MMP-9的影响

目的探讨针刺联合糖克煎剂对糖尿病肾病大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和结缔组织生长因子(CTGF)的影响。方法选取54只SPF级SD雄性大鼠,从中随机选出8只为正常对照组,余下大鼠进行糖尿病肾病(DN)模型复制,即一次性大鼠尾静脉注射现配链脲佐菌素,随机将成模后大鼠分为模型组、厄贝沙坦组、糖克煎剂组(中药组)、针刺组和针刺联合糖克煎剂组(针药联合组)。观察大鼠一般情况,测定体质量、血糖、肾质量/体质量、24 h尿蛋白、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC);HE染色、Masson染色和糖原染色(PAS),观察肾组织形态学的改变;Western blot分别检测肾脏组织中TGF-β1、MMP-9、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、CTGF和TIMP-1的蛋白表达水平。结果与模型组相比,针药联合组、糖克煎剂组和厄贝沙坦组体质量、肾质量/体质量比、24 h尿蛋白、BUN、SCr、TG、TC明显改善,针药结合效果更显著,针刺组轻微改善。TGF-β1及CTGF蛋白表达水平降低明显,通过调整MMP-9的蛋白表达下调TIMP-1的表达,加快CollafenⅠ水解。针药联合组肾脏表达TGF-β1、CTGF、TIMP-1较糖克煎剂组或厄贝沙坦组下降明显,MMP-9表达增多。针药联合组比糖克煎剂组、厄贝沙坦组疗效更为显著。结论针刺联合糖克煎剂相对于糖克煎剂组治疗效果明显,能有效调控TGF-β1、MMP-9和CTGF的表达从而减轻肾小球硬化,降低蛋白尿排量,使肾功能得到保护,糖尿病肾病的进展被延缓。     

Gab2在胶质瘤组织中的表达及对胶质瘤大鼠模型MMP-2、MMP-9的表达影响

目的探讨Gab2在胶质瘤组织中的表达及对胶质瘤大鼠模型MMP-2、MMP-9表达的影响。方法荧光定量PCR检测40例胶质瘤和瘤旁组织中Gab2的m RNA表达;培养C6胶质瘤细胞,分为A:对照组;B:空载体组;C:Gab2-si RNA组,RT-PCR检测3组细胞Gab2的表达;大鼠注射胶质瘤细胞和Gab2-si RNA胶质瘤细胞,构建大鼠模型,检测注射两组细胞1、2、3周后大鼠肿瘤体积和肿瘤强化程度,RT-PCR检测注射两组细胞3周后大鼠MMP-2、MMP-9的m RNA和蛋白表达。结果胶质瘤组Gab2的表达显著高于瘤旁组织(P0.01);Gab2-si RNA组Gab2蛋白表达显著低于对照组(P0.01),空载体组Gab2蛋白表达与对照组差异不显著(P0.05);第2周大鼠的肿瘤体积和强化程度显著高于第1周,第3周显著高于第2周(P0.01);注射Gab2-si RNA胶质瘤组大鼠的肿瘤体积和肿瘤强化程度显著低于胶质瘤组(P0.01),Gab2-si RNA胶质瘤组MMP-2、MMP-9的m RNA和蛋白表达显著低于胶质瘤组(P0.01)。结论 Gab2在胶质瘤组织中高表达,能通过下调MMP-2、MMP-9的表达降低胶质瘤体积和肿瘤强化程度。     

盐酸替罗非班对急性冠状动脉综合征患者经皮冠状动脉介入治疗术后血清炎症因子影响

目的:观察盐酸替罗非班对急性冠脉综合征（ACS）经皮冠状动脉介入治疗后血清炎症因子的影响。方法:85例初次确诊为ACS患者分为未应用盐酸替罗非班患者对照组41例,和应用盐酸替罗非班试验组44例,测定其可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)、高敏C反应蛋白(hs-CRP) 、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平。结果: 应用盐酸替罗非班试验组,急性冠脉综合征患者的血清hs-CRP、sCD40L、MMP-9水平显着低于未应用盐酸替罗非班的对照组，有统计学差异(均P<0.05)。结论: 急性冠脉综合征（ACS）经皮冠状动脉介入治疗应用盐酸替罗非班对可明显降低血清炎症因子的水平，改善该病进程。     

阿齐沙坦对转化生长因子诱导的自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及迁移的影响

目的探讨阿齐沙坦对转化生长因子-β（TGF-β）诱导的自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖及迁移的影响。方法采用组织块贴壁培养法进行血管平滑肌细胞的原代培养,取3～5代细胞用于实验。用MTT法测定细胞增殖情况,用Boyden小室测试细胞迁移情况。采用10ng/ml TGF-β刺激VSMCs,并用阿齐沙坦干预,24h后用Western blot和RT-PCR检测VSMCs中MMP-2、MMP-9及TIMP-1蛋白和mRNA的表达。结果 TGF-β可促进大鼠VSMCs的增殖及迁移,并增加大鼠VSMCs的MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白表达。阿齐沙坦则可抑制TGF-β诱导的大鼠VSMCs的增殖和迁移,并降低大鼠VSMCs的MMP-2、MMP-9及TIMP-1表达。结论阿齐沙坦可能通过下调MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达来抑制TGF-β诱导的自发性高血压血管平滑肌细胞的增殖及迁移。     

Genistein对大鼠肝星状细胞的增殖及TGF-β1、MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的:观察4,5,7-三羟基异黄酮(Genistein)对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及TGF-β1、MMP-2及TIMP-2基因表达的影响,探讨其抗肝纤维化的可能机制.方法:将体外培养的大鼠HSC-T6分别给予不同浓度的Genistein作用24 h后,用噻唑兰比色法(MTT)检测测定活细胞数,采用半定量RT-PCR法检测细胞中TGF-β1、MMP-2及TIMP-2的mRNA水平.结果:Genistein作用于大鼠HSC-T6后,活细胞数目减少,12.5、25及50 mg/L 3个作用浓度组与对照组的4值比较有显著性差异(0.306±0.0067,0.256±0.0085,0.1316±0.0049VS 0.4468±0.0299,均P<0.05).不同浓度的Genistein干预HSC-T6,MMP-2 mRNA表达水平与对照组比较均明显增强(均P<0.05);TGF-β1和TIMP-2 mRNA表达水平与对照组比较均明显降低(均P<0.05).结论:Geni Steill可能通过增强大鼠HSCMMP-2 mRNA的表达,同时抑制TGF-β与TIMP-2 mRNA的表达发挥抗纤维化的作用.     

乳腺癌组织中MMP-2、TIMP-2、TGF-β1、TGF-β1 RⅠ的表达及相关性分析

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP)-2及其抑制物(TIMP-2)与转化生长因子(TGF)-β1及其Ⅰ型受体(TGF-β1RⅠ)在乳腺癌组织中的表达及其相关性.方法 应用免疫组化SP法检测80例乳腺癌组织中的MMP-2、TIMP-2与TGF-β1、TGF-β1RⅠ蛋白.结果 乳腺癌中MMP-2、TIMP-2、TGF-β1和TGF-β1RⅠ阳性表达率分别为67.5%、45.0%、80.0%和67.5%;无淋巴结转移者MMP-2、TIMP-2阳性表达率为44.4%、66.7%,与转移淋巴结个数1～3(85.7%、21.4%)、＞3个(87.5%、37.5%)相比,P均＜0.01;TNM分期为Ⅰ期的MMP-2、TIMP-2阳性表达率分别为0、75%,分别与Ⅱ(65.0%、55.0%)、Ⅲ(86.7%、26.7%)、Ⅳ期(100%、0)相比,P均＜0.05;肿瘤直径≤2 cm者TIMP-2阳性表达率为66.7%,与直径2～5(51.9%)、＞5 cm(20.0%)相比,P均＜0.05;MMP-2和TGF-β1的表达呈正相关(r=0.454,P＜0.01),MMP-2和TGF-β1RⅠ的表达呈负相关(r=-0.481,P＜0.01).结论 MMP-2和TIMP-2的表达情况与乳腺癌侵袭转移有密切关系.MMP-2的表达与TGF-β1、TGF-β1RⅠ关系密切,MMP-2可能在一定程度上受到TGF-β1及其受体的调控.     

在体大鼠心肌缺血再灌注中MMP-2/9、TIMP-1/2mRNA和蛋白表达及MMP-2/9酶活性的同步动态变化

目的同步观察大鼠心肌缺血再灌过程中注基质金属蛋白酶（MMP-2）和MMP-9、基质金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）和TIMP-2的mRNA和蛋白表达以及MMP-2和MMP-9的酶活性。方法80只大鼠随机分为8组：假手术组（Sham）;单纯缺血30min组（I30min）;再灌注1min组（R1min）、5min组（R5min）、10min组（R10min）、30min组（R30min）、再灌注1h组（R1h）和再灌注2h组（R2h）,每组各10只。分别采用RT-PCR技术和免疫组化法检测心肌组织中MMP-2,-9和TIMP-1,-2的mRNA表达和蛋白表达;以酶谱分析法测血浆中MMP-2和MMP-9的酶活性。结果缺血再灌注过程中：（1）MMP-2、-9的mRNA表达呈升高趋势;MMP-2的mRNA表达在R1h组和R2h组分别与Sham组和I30min组比均显著差异;MMP-9的mRNA表达无明显变化;TIMP-1,-2的mRNA表达逐渐降低。MMP-2/TIMP-2,MMP-9/TIMP-1比值升高;（2）MMP-2,-9蛋白表达呈上升趋势,MMP-2蛋白表达于R2h达峰值;MMP-9蛋白表达R1h后开始显著升高;TIMP-1蛋白表达再灌注即刻即显著下降;TIMP-2蛋白表达于R5min,开始显著下降;（3）MMP-2酶活性于R1min开始升高,R5min达峰值,R1h后逐渐降至假手术组水平;MMPO酶活性旱升高趋势,R2h较Sham组呈显著差异。结论缺血再灌注过程中MMP-2,-9的mRNA与蛋白表达及酶活性较正常对照明显升高;TIMPs的mRNA和蛋白表达湿著下调;MMPs／TIMPs比值失衡。MMPs／TIMPs比值失衡可能是治疗缺血冉灌注损伤的一个潜在靶点。     

抗病毒治疗对HBeAg阴性CHB患者TGF-β1、TIMP-1、MMP-1水平的影响

目的 探讨TGF-β1、TIMP-1、MMP-1在HBeAg阴性CHB患者肝纤维化诊断中的作用以及抗乙肝病毒治疗对其影响.方法 以正常体检健康者为对照组,HBeAg阴性CHB分轻度、中度、重度组,依据抗病毒治疗48周后HBV DNA低于检测下限分为治疗有效组和治疗无效组,ELISA法测定各组血清中TGF-β1、TIMP-1、MMP-1含量,免疫组化检测肝组织TIMP-1、MMP-1表达.结果 HBeAg阴性慢性乙型肝炎外周血TGF-β1、TIMP-1水平明显高于正常对照组(P＜0.01),而血清MMP-1则明显低于正常对照组(P＜0.01).随慢性肝炎轻度-重度逐渐发展,血清TGF-β1、TIMP-1的水平逐渐增高,且差异有统计学意义(P＜0.05).TIMP-1蛋白在肝纤维化组织的阳性表达,随肝纤维化程度的加重而增强,呈正相关(rs=0.618,P=0.002);MMP-1蛋白在肝纤维化组织的阳性表达与肝纤维化程度无相关性(rs=0.077,P=0.732).抗病毒治疗48周后有效组血清TGF-β1、TIMP-1的含量明显下降,MMP-1水平上升(P＜0.01).无效组血清TGF-β1、TIMP-1、MMP-1水平变化不明显(P＞0.05).结论 联合检测TGF-β1、TIMP-1、MMP-1是判断慢性肝病患者有无纤维组织增生敏感而可靠的指标,动态观察上述指标的变化,对临床判断肝纤维化程度和活动度有着重要价值,同时也为临床疗效的判断提供有效的实验依据.     

AcSDKP对大鼠心脏成纤维细胞MMP-1、TIMP-1及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响

目的探讨N-乙酰基—丝氨酰—天门冬酰—赖氨酰—脯氨酸（AcSDKP）抗心肌纤维化的可能机制。方法将大鼠心脏成纤维细胞随机分为三组,对照组予0.4%胎牛血清的DMEM;转化生长因子（TGF）-β1组在0.4%胎牛血清的DMEM中加入终质量浓度为5 ng/ml的TGF-β1;AcSDKP组在5 ng/ml的TGF-β1诱导刺激同时加入终质量浓度为10-9mol/L的AcSDKP。Western blot法检测MMP-1、TIMP-1、Ⅰ和Ⅲ型胶原表达。结果 TGF-β1可使MMP-1表达下降,TIMP-1表达升高,MMP-1/TIMP-1值下降;AcSDKP抑制TGF-β1对MMP-1的作用,使MMP-1表达增加,但对TIMP-1表达无明显影响,MMP-1/TIMP-1值增加。同时AcSDKP减弱由TGF-β1诱导的Ⅰ和Ⅲ型胶原表达,并降低Ⅰ/Ⅲ型值。结论 AcSDKP抗纤维化的作用机制可能是调节胶原合成/降解代谢的平衡,加速细胞外基质降解,同时抑制Ⅰ和Ⅲ型胶原生成。     

钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂对糖尿病肾脏疾病大鼠降糖作用及肾脏保护机制的研究

目的探讨钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT-2)抑制剂药物卡格列净对DKD大鼠的肾脏保护作用和可能机制。方法 DKD大鼠随机分为模型组(Mod)、格列美脲组(Glim)、吡格列酮组(Pio)和卡格列净组(Can),每组10只,给药4周。正常大鼠10只为空白对照组(NC)。行OGTT检测FBG,以及尿蛋白总量(UTP)、尿尿素(UUN)、尿肌酐(Ucr)、BUN和Scr含量,计算Ccr。HE染色检测大鼠肾脏组织病理,免疫组织化学法(SP)、Western blot和RT-PCR测定大鼠肾脏中Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制剂1 (TIMP-1)和转化生长因子β(TGF-β)表达。结果 1～4周不同时间点比较,Glim、Pio和Can组血糖水平降低(P0.05)。给药1次,与Mod组比较,Glim、Pio和Can组血糖在0.5、1、2和4h降低(P0.01)。OGTT显示,各药物治疗组较Mod组血糖及曲线下面积(AUC)均降低(P0.01);Can组AUC低于Glim组和Pio组(P0.05)。与Mod组比较,Glim、Pio和Can组UTP、UUN、BUN和Ccr均不同程度降低(P0.05),Can组UTP、Scr和Ccr降低(P0.05)。Mod组肾小球系膜基质增多,Glim、Pio和Can组无明显改变。与NC组比较,DKD各组Col-Ⅳ、MMP-9、TIMP-1和TGF-β蛋白及mRNA的表达均较高(P0.05),Mod组Col-Ⅳ和TIMP-1蛋白及mRNA呈高表达(P0.05),MMP-9蛋白及mRNA的表达较低(P0.05);Glim组、Pio组Col-Ⅳ、MMP-9、TIMP-1和TGF-β蛋白及mRNA的表达与Mod组比较,差异无统计学意义(P0.05);而Can组MMP-9蛋白及mRNA的表达高于Mod组(P0.05),TIMP-1、TGF-β和Col-Ⅳ蛋白及mRNA的表达低于Mod组(P0.05),Can组Col-Ⅳ、TGF-β和TIMP-1蛋白及mRNA的表达均低于Glim组和Pio组(P0.05)。结论卡格列净能改善DKD大鼠的血糖水平,降低肾脏病理评分,其肾脏保护作用机制可能与下调TIMP-1、TGF-β和Col-Ⅳ的表达、上调MMP-9的表达相关。     

中药通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨中药通心络超微粉对糖尿病(DM)大鼠心肌纤维化的影响。方法制备大鼠DM模型并给予通心络灌胃,12 w后光镜观察病理变化检测心肌胶原容积分数(CVF),免疫组化、W estern印迹技术检测转化生长因子(TGF)-β1、基质金属蛋白酶(MMP)-9及组织型基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1蛋白表达及含量。结果与正常对照(NC)组相比,DM组CVF值明显增大,TGF-β1、MMP-9、TIMP-1蛋白表达及含量均明显升高,MMP-9/TIMP-1比值降低,TXL组上述异常均明显减轻。结论 TGF-β1、MMP-9及TIMP-1三者平衡失调可能是使DM心肌纤维化发生的机制之一,中药通心络可通过调节三者之间的平衡,有效改善DM心肌纤维化。