前列腺癌TSP-1的表达与血管新生的关系及意义

目的：探讨良性前列腺增生及前列腺癌中血管生成与血小板反应素-1（TSP-1）表达的相关性。方法：应用免疫组织化学方法检测32例良性前列腺增生和32例前列腺癌组织中TSP-1的表达及微血管密度（MVD）。结果：前列腺癌组织中TSP-1表达显著低于良性前列腺增生（P〈0．05）,MVD则明显升高（P〈0．05）;随着肿瘤分期的进展,浸润转移性癌中TSP-1的表达降低甚至缺失,而MVD却逐渐升高。结论：TSP-1在前列腺癌中呈低表达,与前列腺癌的血管新生相关;作为一种内源性血管新生抑制剂,它具有抑制肿瘤生长及血管新生的作用。     

Claudin-3在前列腺癌中的表达及其意义探讨

提要目的探讨Claudin-3在前列腺癌组织中的表达及其意义。方法用免疫组化法半定量测定前列腺癌80例、前列腺增生组织20例中Claudin-3的表达;用蛋白印迹结合图像分析法定量测定前列腺癌和前列腺增生组织的Claudin-3的表达。结果免疫组化及蛋白印迹均示前列腺癌组织中Claudin-3的表达显著高于良性前列腺增生组（P〈0.01）。结论Claudin-3蛋白在前列腺癌组织中表达较前列腺增生组织中的表达明显上调,Claudin-3可能成为诊断前列腺癌的候选癌标。     

血小板反应素-1在前列腺癌患者中的表达及意义

摘要：目的探讨血小板反应素1（TsP一1）在前列腺癌患者癌组织及其外周血中的表达及其意义。方法应用免疫组化技术检测TSP-1在前列腺癌组织（前列腺癌组）中的表达;以半定量RTPCR技术检测TSP-lmRNA在患者外周血中的表达,并与前列腺增生患者（前列腺增生组）进行比较。结果前列腺癌组TSP-1阴性表达6例,弱阳性表达16例,阳性表达4例,增生组TSP-1弱阳性表达12例,阳性表达16例,无阴性表达,前列腺癌组TSP-1表达强度较增生组显著降低（P〈O．01）;TSP-1mRNA在前列腺癌组织中较前列腺增生组织中表达明显下调（P〈0．01）。TSPlmRNA在前列腺癌组外周血中的表达较增生组明显下调（P〈o．01）。结论TSP-1基因及蛋白表达水平在前列腺癌组织中明显下调,在前列腺癌患者外周血中表达水平明显下调。     

前列腺癌组织中HMGA2的表达及其意义

目的探讨高迁移率族蛋白HMGA2在前列腺癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化法及RT—PCR法检测40例前列腺癌组织及良性前列腺增生组织中HMGA2的表达情况。结果RT-PCR法检测示良性前列腺增生组织中HMGA2少量表达;恶性组织中,随着病理分级增加,HMGA2mRNA相对表达量逐渐增高,免疫组化法显示前列腺癌组织中,有75．0％（30／40）HMGA2呈阳性表达。良性前列腺增生组织与前列腺癌组织两组间差异显著（t=3．32,P〈0．001）。结论HMGA2在前列腺癌中呈过度表达,并与前列腺癌病理分级有关,可能成为前列腺癌诊断与良恶性鉴别诊断的指标之一。     

MCM2在前列腺癌中的表达及临床意义

目的探讨MCM2在前列腺癌中的表达情况及其意义。方法采用免疫组化法检测MCM2与ki-67在49例前列腺癌（PCa）及20例良性前列腺增生组织（BPH）标本中的表达,计算其标记指数（LI）,同时分析MCM2表达与临床病理间的关系。结杲MCM2与ki-67中位数在前列腺增生组织分别为：0．1、0．08,腺癌细胞中为0．33、0．22;MCM2的u除良性腺上皮外均显著高于ki-67的u值（P〈0．01）,MCM2的表达与肿瘤的分化程度（P〈O．01）和临床分期有显著相关性（P〈0．05）,ki-67只与肿瘤分化相关,MCM2和n67的表达呈正相关（n=0．596,P〈0．01）。结论MCM2蛋白是前列腺癌组织的一种新的可靠增殖标志物,其表达与前列腺癌的发生发展密切相关。     

Kallikrein 10基因在前列腺癌组织中的表达及意义

目的：探讨Kallikrein10（KLK10）基因在不同前列腺组织中的表达情况。方法：采用荧光定量PCR方法检测3例正常前列腺组织、5例BPH组织、6例前列腺癌细胞株、35例前列腺癌组织中KLK10mRNA的表达水平。结果：正常前列腺组织、良性前列腺增生组织、前列腺癌细胞株、前列腺癌组织KLK10 mRNA表达相对值分别为0．521、0．487、0．021、0．018,组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）。骨转移前列腺癌与未转移前列腺癌KLKIOmRNA表达相对值分别为0．003、0．023,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：KLK10在前列腺癌组织中表达下调,在转移性前列腺癌中表达更低。KLK10表达下调可促进肿瘤的发生与进展。     

维生素E对前列腺癌微小染色体维持蛋白4的抑制作用及信号通路

目的探讨维生素E调节前列腺癌细胞DNA复制的新分子机制及信传导通路。方法利用基因转染、免疫印迹、实时定量聚合酶链反应（PCR）、免疫沉淀等方法研究不同浓度、不同时间琥珀酸维生素E（VES）对前列腺癌细胞内的微小染色体维持蛋白4（MCM4）的mRNA及蛋白表达水平的影响。结果YES可抑制前列腺癌MCM4mRNA的表达，并存在时效与量效关系，20μmol／LVES处理LNCaP细胞36h，MCM4的mRNA表达水平较对照组下降24．5％（P〈0．05），作用96h下降达60．3％；随着VES浓度的增加，MCM4mRNA的表达水平受抑制的程度逐步加深。Westernblot表明VES可抑制MCM4蛋白的表达。过表达E2F1可拮抗VES对MCM4的抑制作用。VES抑制Rb磷酸化，增加Rb与E2F1的结合程度。BrdU摄入试验表明20μmol／L与40μmol／L VES处理LNCaP细胞24h后，癌细胞内DNA合成较对照组下降63．4％与71．6％（P〈0．05）；48h后分别达74．8％与81．5％（P〈0．05）。结论我们识别了维生素E抑制前列腺癌细胞DNA复制的一种新机制是下调MCM4的表达，E2F1-Rb蛋白参与这一信号传导通路。     

脂肪酸合成酶在前列腺癌中的表达及临床意义

目的 研究前列腺癌中脂肪酸合成酶（fatty acid synthase，FASE）的表达及其临床意义。方法对68例前列腺癌手术或穿刺活检患者的石蜡标本进行FASE的免疫组织化学染色和半定量分析，并与良性前列腺增生进行对照。结果FASE在良性前列腺增生组织中的阳性表达率（12.8％）明显低于前列腺癌组织（47．1％，P〈0．05）。FASE表达与临床分期、病理分级、骨转移有关（P〈0．05）；与年龄、淋巴结转移、远处转移无关（P〉0．05）。FASE阳性和阴性患者的生存率有显著性差异（P=0．002）。结论FASE在前列腺癌组织中表达增高，酶活性增强；FASE在前列腺癌组织中表达增高有提示不良预后的作用。     

C-kit和SCF基因在胆管细胞癌中的表达及意义

目的 拟通过检测C-kit、SCF基因在胆管细胞癌中的表达来了解C-kit、SCF与胆管细胞癌发生和发展之间的关系。方法采用免疫组化S-P法检测48例肝胆管细胞癌及20例肝外胆管癌标本C-kit、SCF蛋白表达情况，同时取对应的癌旁胆管组织及另取30例肝及胆管良性病变胆管组织作对照，所有数据采用X^2检验。结果48例肝胆管细胞癌组织中C-kit、SCF蛋白表达分别为39例（81．3％）和36例（75．0％），20例肝外胆管癌组织中C-kit、SCF蛋白表达分别为12例（60．0％）和13例（65．0%），癌旁胆管组织中4例C-kit、5例SCF呈弱阳性表达，30例肝及胆管良性病变胆管组织C-kit、SCF蛋白均呈阴性表达。两癌组织与癌旁胆管组织、肝及胆管良性病变胆管组织C-kit、SCF表达阳性率比较差异有显著性（P〈0．05）。Ⅲ～Ⅳ期胆管细胞癌C-kit、SCF蛋白表达阳性率高于Ⅰ～Ⅱ期（P〈0．05），中低分化癌高于高分化癌（P〈0．05），有淋巴结转移癌高于无淋巴结转移癌（P〈0．05）。而肝外胆管癌组织中C-kit、SCF蛋白表达与其临床病理各因素无明显相关（P〉0．05）。C-kit、SCF蛋白表达与胆管细胞癌病人年龄、性别、肿瘤直径无关。结论 C-kit、SCF蛋白过表达可能在胆管细胞癌的发生、发展中发挥作用。     

前列腺癌组织中Skp2、PTEN的表达及临床意义

目的：探讨Skp2和第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因（Phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10．PTEN）在前列腺癌中的表达及临床意义。方法：用免疫组织化学EnVision^TM办法检测Skp2和PTEN蛋白在41例前列腺癌和20例BPH组织中的表达情况。结果：在前列腺癌中的Skp2蛋白染色阳性率显著高于BPH（P〈0．01）,Skp2蛋白表达与前列腺癌术前血清前列腺特异抗原（PSA）水平、局部浸润、肿瘤分期、病理分级呈密切正相关（P〈0．05）。在前列腺癌中的PTEN蛋白染色阳性率显著低于BPH（P〈0．01）,PTEN蛋白表达与上述临床病理特征呈负相关（P〈0．05）。前列腺癌中Skp2蛋白与PTEN蛋白表达呈负相关（P〈0．01）。结论：Skp2蛋白在前列腺癌的发生发展中起重要作用,抑癌基因PTEN可能参与Skp2表达的调节。     

基于在线数据库分析E2F转录因子家族成员信使RNA在胰腺癌组织中表达水平及其在胰腺癌患者中的预后意义

目的基于在线数据库分析阐明E2F转录因子家族成员mRNA在胰腺癌组织中的表达水平及其在胰腺癌患者中的预后意义。方法利用基因表达谱交互式分析(GEPIA)在线分析数据库,采用Mann-Whitney U检验及Kaplan-Meier生存分析的统计学方法分别分析E2F转录因子家族成员mRNA在179例胰腺癌与171例癌旁组织的差异性表达,分析其每百万转录本(TPM)表达差异,并分析E2F转录因子家族成员mRNA表达与胰腺癌病理分期之间的关系。基于Kaplan-Meier Plotter数据库分析E2F转录因子家族成员mRNA表达水平与胰腺癌患者预后的关系,及其在胰腺癌患者亚组中的预后价值。采用Mann-Whitney U检验比较胰腺癌与癌旁组织E2F转录因子家族成员的表达水平;并采用Log-rank检验及Kaplan-Meier法对数据库中的纳入患者进行预后分析。结果GEPIA数据库分析结果表明,胰腺癌组织中E2F转录因子家族成员mRNA表达均高于癌旁组织。其中,胰腺癌组织中E2F1、E2F3和E2F8 mRNA表达水平均显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。此外,TPM表达分析结果也提示胰腺癌组织中较高的E2F1、E2F3和E2F8 TPM水平,差异有统计学意义(P<0.05)。GEPIA数据库分析结果还提示E2F2、E2F3、E2F6以及E2F8 mRNA表达与胰腺癌患者肿瘤病理分期显著相关,差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析结果提示,高表达的E2F1、E2F2、E2F3、E2F7以及E2F8 mRNA与胰腺癌患者较低的总体生存率显著相关(P<0.05),而高表达的E2F6则与胰腺癌患者较好的总体生存率显著相关(P<0.05)。此外,高表达的E2F1、E2F2、E2F3、E2F7以及E2F8 mRNA与胰腺癌患者较差的无复发生存率显著相关(P<0.05),而E2F4高表达则与胰腺癌患者无复发生存率较好显著相关(P<0.05)。亚组分析结果则表明E2F1、E2F2、E2F3、E2F7及E2F8在不同肿瘤阶段、不同性别以及不同突变负荷的胰腺癌患者中均具有一定的预后价值。结论E2F转录因子家族成员在胰腺癌中高表达且与胰腺癌患者预后较差显著相关,尤其在早期胰腺癌中,提示其可能成为早期胰腺癌预后预测及治疗的新靶点。     

姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞Notch信号通路的影响

目的 观察姜黄紊(Curcumin,Cur)对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC3体外生长及Notch信号通路的影响.方法 应用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术、透射电镜、RT-PCR法观察了6.25、12.5、25.0、50.0 μmol/L浓度姜黄素对PC3细胞生长及Notch1 mRNA和蛋白,Jagged1、Hes1mRNA表达的影响.结果 姜黄素以剂量和时间依赖性方式抑制PC3细胞的生长(F6.25=17.840,F12.5=20.479,F25=99.091,F50=8.40,F24=1081.70,F48=51.495,F72=155.24,P均＜0.01);诱导G2/M期停滞(FS=1708.20,FG2/M=1580.40,P均＜0.01);促进凋亡(F=208.23,P＜0.01);随着Cur梯度浓度引起Notchl、Hesl mRNA分别增高(F=4.872,P＜0.05;F=29.562,P＜0.01),Notch1蛋白表达升高(F=4.579,P＜0.05),JaggedlmRNA的表达下降(F=74.160,P＜0.01).结论 姜黄素能上调Notch1、Hes1,下调Jaggnd1的表达,激活Notch信号通路,是其发挥抗前列腺癌的机制之一.     

E2F1在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的：探讨E2F1在肾透明细胞癌中的表达及意义。方法：通过实时定量PCR和Western blot方法检测E2F1在肾透明细胞癌及对应瘤旁组织中mRNA和蛋白的表达情况,并分析E2F1的mRNA水平与临床病理资料的关系及表达相关性。结果：与对应瘤旁组织相比,E2FJ的mRNA水平在肾透明细胞癌手术标本中表达明显升高（P=0．0002）,相应的蛋白水平对比与mRNA变化一致;E2F1的mRNA水平在不同年龄、性别组间差异无统计学意义（P〉0．05）,而在组织学分级、肿瘤直径大小、T分期、临床分期和大血管浸润与否差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：E2F1表达上调可能在肾透明细胞癌的肿瘤形成中发挥作用,且E2F1表达升高可能促进肾透明细胞癌的恶性进展。     

前列腺癌组织中TGF-β1 mRNA表达及其临床意义

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在前列腺癌中的表达及意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对前列腺癌组织中TGF-β1mRNA表达进行研究。结果:TGF-β1mRNA的相对含量值:在正常前列腺组织为0.74±0.11;在前列腺癌T1~T2期为(0.69±0.10),T3~T4期为(0.44±0.08);Gleason评分≤5分者为(0.70±0.12),6~8分者为(0.54±0.11),≥9分者为(0.42±0.09)。T1~T2期与正常前列腺相比,差异无显著性(P>0.05),T3~T4期与正常前列腺组织相比,差异有极显著性(P<0.01),T3~T4期与T1~T2期前列腺癌相比,差异有显著性(P<0.05)。Gleason评分≤5分者与正常前列腺相比,差异无显著性(P>0.05),6~8分者与正常前列腺相比,差异有显著性(P<0.05),≥9分者与正常前列腺相比,差异有显著性(P<0.01),≥9分者与≤5分及6~8分者相比,差异均有显著性(P<0.01和P<0.05)。结论:TGF-β1的mRNA表达与临床分期、病理分级呈负相关。     

FOXN2在前列腺癌组织的表达及对前列腺癌细胞生物学的影响

探讨双头框蛋白N2（FOXN2）在前列腺癌（PCa）组织中的表达以及对PCa细胞生物学的影响。方法 选取宜宾市第二人民医院50例接受手术治疗的PCa患者的标本及癌旁组织,通过RT-qPCR实验和Western blot实验分别检测PCa组织和癌旁组织中的FOXN2 mRNA及蛋白的表达水平,并分析PCa组织中FOXN2与患者临床病理特征的相关性。通过RT-qPCR实验检测正常前列腺细胞RWPE-1、PCa细胞PC-3、DU145、LNCaP中FOXN2 mRNA的表达水平。选取PC-3细胞为研究对象,分为FOXN2过表达组、空载体对照组以及对照组,分别通过MTT实验、流式细胞实验、Transwell实验以及Western blot实验检测各组细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭情况以及相关蛋白Bax、CyclinD1、MMP-2的表达量。结果 与癌旁组织相比,FOXN2的mRNA和蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,与TCGA数据库中结果一致。FOXN2低表达与PCa患者淋巴转移、TNM分期以及Gleason评分有关（P=0.003、0.005、0.002）。与人正常前列腺细胞RWPE-1相比,FOXN2在PCa细胞PC-3、DU145、LNCaP中均呈现低表达（P<0.05）,其中PC-3细胞中表达量最低。与对照组和空载体对照组相比,FOXN2过表达组的PC-3细胞在作用24 、48 、72 h后增殖能力显著下降（F=290.400、57.735、113.014,P<0.05）,CyclinD1蛋白表达水平显著下降（P<0.05）;PC-3细胞的凋亡率显著升高（P<0.05）,Bax蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;PC-3细胞的迁移和侵袭能力显著下降（P<0.05）,MMP-2蛋白表达水平显著下降（P<0.05）。结论 FOXN2在PCa组织及细胞中低表达,过表达FOXN2可抑制PCa细胞的增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。     

Bone morphogenetic protein-6 expression in normal and malignant prostate

Summary Bone morphogenetic proteins (BMPs) have multiple biologic functions, including bone formation and embryonic induction. One of these proteins, BMP-6, was reportedly expressed at high levels in human prostate cancers that had also metastasized to bone. This study investigated both BMP-6 mRNA and protein expression in normal and malignant rat and human prostate tissues. BMP-6 was detected in both rat normal prostate and in Dunning rat-prostate adenocarcinoma sublines. The levels of BMP-6 mRNA and protein were similar for normal and malignant rat prostate, regardless of the metastatic potential. Moreover, castration had no apparent effect on BMP-6 production in rat normal ventral prostate, suggesting an androgen-independent gene regulation of this protein. BMP-6 mRNA and protein were also produced by normal and neoplastic human prostate cancer (radical prostatectomy specimens and human carcinoma cell lines DU145 and PC3). BMP-6 mRNA and protein expression, however, was higher in prostate cancer as compared with adjacent normal prostate, with higher-grade tumors (Gleason score of 6 or more) having greater BMP-6 immunostaining than the lower-grade tumors (Gleason score of 4 or less). Taken together, these results suggest that BMP-6 protein expression may serve as a potential marker for prostate cancer but not as a metastatic marker. Moreover, BMP-6 may contribute to prostate neoplastic behavior even in the absence of androgens.     

转化生长因子调控表皮生长因子受体在雄激素非依赖型前列腺癌细胞中表达的意义

目的 :探讨转化生长因子 (TGF)α对前列腺癌雄激素非依赖型细胞系中表皮生长因子受体 (EGFR)表达的调控。　方法 :采用逆转录 多聚酶链式反应和Western印迹法对TGFα刺激前列腺癌雄激素非依赖型细胞系PC3、ARCaP后EGFRmRNA表达及其蛋白水平进行定量分析。　结果 :TGFα引起PC3、ARCaP的EGFRmRNA表达升高 ,分别为 5 .0 1± 0 .4 5和 9.0 5± 0 .6 3,明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。PC3细胞系TGFα治疗后EGFR蛋白水平为 2 .2 8±0 .5 3,明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;而ARCaP细胞系TGFα治疗后EGFR仅为 1 .2 4± 0 .2 2 ,和对照组比较无差别 (P >0 .0 5 )。　结论 :TGFα可以明显提高前列腺癌细胞的EGFR表达量 ;TGFα EGFR自分泌环参与雄激素非依赖型前列腺癌的形成     

ITGB1通过激活MAPK/ERK通路促进前列腺癌细胞侵袭

目的 研究ITGB1基因在前列腺癌中的表达情况及对前列腺癌细胞侵袭行为的影响和可能作用机制.方法 实时荧光定量PCR检测ITGB1在前列腺癌标本和前列腺癌细胞株PC3和LNCaP中的表达水平.设计小干扰RNA干扰ITGB1的表达,观察干扰效率以及干扰后对前列腺癌PC3和LNCaP细胞的迁移和侵袭能力的影响.结果 ITGB1 mRNA在前列腺癌标本中表达水平上调(t =5.12,P＜0.05),在前列腺癌细胞株LNCaP和PC3中表达水平也较正常前列腺上皮高(P＜0.01).siRNA成功干扰ITGB1表达后,划痕实验显示,前列腺癌Lncap和PC3细胞迁移能力显著下降.Transwell侵袭实验显示干扰ITGB1后,前列腺癌细胞的侵袭能力较对照组也显著下降.GCBI基因网络分析显示,ITGB1与MAPK通路具有显著相关性.进一步行蛋白质免疫印迹杂交实验显示,干扰ITGB1后,MAPK通路中ERK蛋白和磷酸化的ERK的蛋白表达下降,并且下游MMP9蛋白水平也呈现下降.结论 ITGB1通过激活MAPK信号通路,促进前列腺癌细胞迁移和侵袭.