破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的分析

目的研究灵芝孢子粉多糖的组成、相对分子质量及相对分子质量分布,比较破壁与不破壁灵芝孢子粉多糖的异同。方法用不同提取方法提取灵芝孢子粉多糖,采用气相色谱-质谱(GC-MS)、高效液相色谱(HPLC)分析灵芝孢子粉多糖的单糖组成,用凝胶渗透色谱(GPC)分析灵芝孢子粉多糖的相对分子质量及其分布。结果不同提取方法所得灵芝孢子粉多糖的得率不同,破壁后灵芝孢子粉含的多糖是不破壁的1.7倍;灵芝孢子粉多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖,破壁与不破壁的多糖组成完全相同,其相对质量分数略有区别;破壁灵芝孢子粉多糖的GPC有两个多糖峰,相对分子质量分别为7.80×104和1.17×104,而不破壁灵芝孢子粉多糖只有相对分子质量为7.80×104的一个峰。结论破壁与不破壁孢子粉多糖的单糖组成相同,但破壁灵芝孢子粉多糖较不破壁孢子粉的多糖高出70%,增加部分为相对分子质量较小的多糖。这可以解释破壁灵芝孢子粉的功效好于不破壁灵芝孢子粉的原因。     

灵芝孢子中抗肿瘤成分的提取与分离

目的 :检测不同破壁率的灵芝孢子的醇提效果并用色谱技术对醇提物中的抗肿瘤成分进行分析。方法 :乙醇为溶剂对灵芝孢子粉进行振荡浸提 ,醇提物依次用硅胶柱和高效液相色谱分析 ,以各部分对Hela细胞的毒性作为其抗肿瘤活性的指标。结果 :未破壁孢子 ,60%～80%及 99%破壁率孢子的醇提率分别为5% ,25% ,33%。99%破壁率灵芝孢子的醇提物经硅胶柱分离 ,氯仿洗脱部分对Hela细胞无毒害作用 ;甲醇洗脱部分的抗肿瘤活性约为乙酸乙酯洗脱部分的 34倍 ;甲醇洗脱部分经高效液相色谱分析 ,得到 2种活性较强且组成较为简单的混合物(Ⅱ1和Ⅱ3 )。结论 :灵芝孢子破壁后醇提物含量远高于未破壁孢子 ;甲醇 水洗脱系统可用于灵芝孢子醇提物中抗肿瘤活性成分的RP HPLC分析。     

灵芝孢子粉、破壁灵芝孢子粉对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长和VEGF表达的比较研究

目的:比较灵芝孢子粉、破壁灵芝孢子粉对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:采用C_(57)BL/6小鼠左前肢腋下皮下接种建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,灵芝孢子粉、破壁灵芝孢子粉各设3、2、1g/kg三个剂量组,连续灌胃给药18天。给药期间观察小鼠体重,记录肿瘤体积变化;末次给药后处死,取肿瘤、胸腺和脾脏,称重并计算抑瘤率、胸腺指数和脾指数;HE染色观察肿瘤组织病理状况;Tunel法检测肿瘤组织细胞凋亡情况;免疫组化法检测肿瘤组织VEGF表达。结果:灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉均有抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤的作用,但破壁灵芝孢子粉(3、2g/kg)在提高荷瘤小鼠体重、脾指数、抑制肿瘤生长方面的效果优于灵芝孢子粉;破壁灵芝孢子粉能诱导肿瘤细胞凋亡,降低VEGF蛋白表达。结论:破壁灵芝孢子粉抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的效果优于灵芝孢子粉,其机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡、降低VEGF表达有关。     

灵芝孢子粉的质量研究

目的:建立灵芝孢子粉的质量标准。方法:采用显微观察法、含油率测定法、TLC法、酚-硫酸法测定多糖含量,HPLC法测定腺苷含量及薄层-分光光度法测定总三萜含量,对灵芝孢子粉的质量进行了较全面的研究。结果:采用上述方法,可以有效控制灵芝孢子粉的内在质量。结论:可以通过测定灵芝孢子粉的破壁率、含油率,TLC特征斑点及多糖含量、腺苷含量、总三萜含量等指标,有效控制灵芝孢子粉的质量。     

灵芝破壁孢子与不破壁孢子的显微镜观察与生化测定比较研究

首次对灵芝破壁孢子与不破壁孢子进行了初步的比较研究。显微镜下观察，破壁孢子粉与不破壁孢子粉的形态明显不同，采取水提、酸提、水煮三种不同的提取方式，破壁孢子粉提取液中还原糖与多肽含量都明显高于不破壁孢子粉，结果提示经过破壁处理后，灵芝孢子中的化学成分更容易被提取出来。     

灵芝及灵芝孢子提取物的抗肿瘤及对DNA拓扑异构酶作用的研究

目的：观察灵芝子实体水提物及醇提物混合品（灵芝提取物）、灵芝孢子粉提取物（油）的体内外抗肿瘤作用,并测定它们对DNA拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ的作用。方法：台盼蓝计数法、MTT法观察体外对肿瘤细胞的抑制作用;应用小鼠移植瘤模型研究体内抗肿瘤作用,同时测定荷瘤小鼠的胸腺指数及脾指数;DNA超螺旋解旋法测定拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ活性。结果：灵芝提取物对K562、HL60、SGC-7901细胞作用24h的IC50值分别为0.44mg/ml、0.39mg/ml、0.90mg/ml,灵芝孢子油对K562、HL60、SGC-7901细胞作用24h的IC50值分别为1.13mg/ml、2.27mg/ml、6.29mg/ml;体内实验中,对S180、H22移植瘤株的抑制率灵芝提取物4g/kg分别为39.1%、44.6%,灵芝孢子油1.2g/kg分别为30.9%、44.9%;灵芝提取物1g/kg和2g/kg对S180的抑制率分别为15.6%和19.0%,对H22的抑制率分别为28.8%和38.5%;灵芝提取物对荷瘤小鼠的免疫功能有一定的上调影响,灵芝孢子油则无明显作用;两者对拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ的活性均有抑制作用。结论：灵芝提取物、灵芝孢子油均具有体内外抗肿瘤作用,二者的抗癌机制与抑制拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ的活性有关。     

灵芝破壁孢子粉中总三萜酸含量测定

灵芝孢子为多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.exFr.) Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao,Xu et Zhang的子实体发育后期弹射释放出的种子,是灵芝的生殖细胞.孢子内含有脂肪油、三萜酸类、多糖等;孢壁含有纤维索2.36～3.52％,几丁质52.08％～57.64％[1],矿物元素硅9.2mg/g和钙713μg/g等,使得孢壁坚硬有韧性[2],结构复杂且耐酸、碱,孢子内含物的有效成分在体内难以释放,影响临床疗效[3],故采用现代工艺技术进行破壁,称破壁孢子粉.近代药理研究证明灵芝破壁孢子粉有抗肿瘤、增强免疫、降血糖、降血脂、镇静、清除自由基、抗辐射、促进新陈代谢、延缓衰老[4-6]等作用,而灵芝三萜类化合物涵盖了绝大部分孢子粉的药理活性.因此,对破壁孢子粉中三萜酸含量进行测定有利于控制其质量.文献报道的总三萜酸测定方法有5％的香草醛-冰醋酸溶液、高氯酸溶液显色法[7-10]、硫酸无水乙醇检测法[11]等.但上述方法都忽略了脂肪油对三萜酸含量测定的干扰,从而影响了测定结果的准确性.本文采用萃取法对灵芝破壁孢子粉三萜酸提取液进行除油预处理,既消除脂肪油对三萜酸测定的干扰,义避免显色过程的不平行性对结果的影响,使测定结果更准确的反映破壁孢子粉中总三萜酸的含量.     

灵芝能抗癌吗?

正广西新闻网讯目前,市场上一些灵芝孢子粉和灵芝孢子油被一些商家吹捧为"抗癌产品"。在网上搜索一下关键词"灵芝孢子粉和灵芝孢子油",发现该产品宣称可以"治疗肿瘤",售价不菲。现实中有不少肿瘤患者对灵芝以及其产品抱有一种幻想,以为吃了这些药品或保健品,就可     

变温压差脆化破壁灵芝孢子技术研究

目的：对灵芝孢子进行破壁工艺研究,提高灵芝孢子粉破壁率。方法：以灵芝孢子粉的含水量和影响破壁的硬度为输出指标,分别选取了脆化温度、抽空干燥温度、抽空干燥时间三个因素,进行L9(34)的正交设计,确定变温压差脆化最佳条件,结合超微粉碎进行破壁,并与超微粉碎进行破壁率比较。结果：脆化最佳温度100℃,抽空干燥温度80℃,抽空时间1 h,在此条件下,灵芝孢子粉含水量为3.0 %,破壁硬度3.7 kg;脆化、干燥后的灵芝孢子粉,经超微粉碎破壁50 min,灵芝孢子破壁率可达到99.5%,破壁率提高7.9%。 结论：变温压差脆化结合超微粉碎技术可提高灵芝孢子破壁率。     

灵芝孢子粉多糖研究进展

灵芝Ganoderma lucidum为多孔菌科灵芝属药食两用真菌,是我国具较高药用价值的传统珍贵药材。灵芝孢子粉多糖是灵芝中的主要活性成分,现已证实其具有多种生物活性,在医药领域中有广阔的应用前景。对近15年来国内外灵芝孢子粉多糖结构、提取工艺和生物活性方面的研究进展进行综述,为其保健功能与药用价值的开发提供重要参考。     

Comparative studies on the immunomodulatory and antitumor activities of the different parts of fruiting body of Ganoderma lucidum and Ganoderma spores

Ganoderma lucidum (GL, Lingzhi) has been suggested as a candidate for immunomodulation and cancer treatment. The present study aimed at comparing the different parts of the fruiting body (whole fruiting body, pileus and stipe) of GL as well as Ganoderma spores (sporoderm-broken and -unbroken), with regard to their antitumor and immunomodulatory activities in S-180 sarcoma-bearing mice. The hot water extracts of different parts of GL or the Ganoderma spores were orally administered to the sarcoma-bearing mice. The results showed that GL whole fruiting body, stipe and sporoderm-broken spore possessed stronger inhibitory activities on sarcoma growth when compared with the pileus extract. Higher immunomodulatory activities in terms of enhancing the proliferative responses and the cytokines (IFN-gamma, IL-4 and IL-6) production of spleen lymphocytes were also found in GL stipe and sporoderm-broken spore treatment groups. The sporoderm-broken spores had higher stimulatory effects on mitogen-activated spleen lymphocytes of healthy mice than those of sarcoma-bearing mice. In addition, the immunostimulatory activities of GL hot water extracts and Ganoderma spores were shown to be comparable; hence the latter did not show superiority in efficacy. This is the first comparative study on the immunomodulatory activities of Ganoderma spores and the fruiting body extracts.     

灵芝菌对茯苓药材的生物转化研究

目的：利用灵芝菌对中药材茯苓药材进行固态生物转化,研究转化产物中总多糖和总三萜量的变化情况。方法：采用微波法提取茯苓及转化产物中的总多糖并采用苯酚-硫酸法进行含量测定;采用超声法提取茯苓及转化产物中总三萜并用香草醛-高氯酸法进行含量测定。结果：经生物转化后产物中的总多糖含量明显高于未经转化的茯苓药材（P<0.01）,而总三萜含量明显升高（P<0.01）,说明灵芝菌的生物转化过程改变了茯苓药材的原始特性;茯苓对灵芝生长具有促进作用,表现为灵芝菌丝生长旺盛未受抑制、转化产物中总多糖及总三萜含量显著高于茯苓原药材。结论：利用灵芝菌对中药茯苓进行生物转化来提高总多糖和总三萜含量,具有方法简单、成本低等优点,在中药现代化中有较高的应用价值。     

灵芝孢子油对MCF-7细胞凋亡及迁移的影响

目的：观察灵芝孢子油对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：CCK-8法检测灵芝孢子油对MCF-7增殖的影响;伤口愈合实验观察灵芝孢子油对MCF-7细胞迁移的作用;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT—PCR法检测抗凋亡基因Bcl-2、促凋亡基因Bax及血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达水平。结果：不同浓度的灵芝孢子油对MCF-7的增殖和迁移均有一定程度的抑制作用,且呈时间、剂量依赖性;灵芝孢子油能显著诱导MCF-7细胞凋亡;RT—PCR结果显示,灵芝孢子油能上调Bax同时下调Bcl-2和VEGF的mRNA表达水平。结论：灵芝孢子油能抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移,并促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调VEGF和Bcl-2／Bax的比值有关。     

不同生长阶段灵芝中微量元素与重金属含量分析

利用ICP-MS、AFS和AAS对同一菌种灵芝深层发酵菌丝体、不同生长阶段的子实体及孢子粉中微量元素与重金属含量进行分析。发酵菌丝体、子实体及孢子粉中均含有生物必需微量元素和重金属,以孢子粉中含量相对较高。硒的含量在各个阶段几乎相同,而锗的含量则呈现生物富集的现象。     

3种灵芝多糖的研究

 目的对3种灵芝多糖的含量、单糖组成和糖蛋白含量进行研究。方法提取和纯化灵芝子实体、菌丝体和发酵液多糖,应用高效液相色谱法和凯氏定氮法对多糖的含量、单糖组成及糖蛋白质含量作了分析、比较。结果3种灵芝多糖含量分别为：子实体含0.75%;菌丝体含2.13%;发酵液含0.982 g·L^-1。3种多糖均由葡萄糖、果糖组成,这两种单糖在子实体和菌丝体多糖中的摩尔比相同,为7∶1;在发酵液多糖中的摩尔比为2∶1。3种灵芝多糖中糖蛋白含量分别为：子实体多糖含12.22%;菌丝体多糖含26.62%;发酵液多糖含2.92%。结论研究结果为综合开发利用灵芝提供了科学依据。     

稀土对灵芝生长影响的初步研究

 目的：研究在灵芝培养料中添加稀土元素对灵芝的菌丝生长、子实体的鲜重和干重的影响。方法：采用稀土拌料的方法。结果：稀土的浓度对灵芝菌丝的生长均有一定程度的抑制作用,抑制率在7.49％～10.96％之间;稀土浓度对灵芝的菌丝均有增白作用,洁白度随稀土浓度的增加而降低。稀土在100,150μg·g^-1时,灵芝子实体的干重和鲜重有显著增加。在50μg·g^-1时,虽灵芝子实体的鲜重有所减少,但其干重却增加2.0％。结论：稀土浓度在100～150μg·g^-1时,灵芝的产量增加显著,可供生产使用。     

Inhibition of lipid peroxidation and oxidative DNA damage by Ganoderma lucidum

Reactive oxygen species (ROS), such as superoxide anions and hydroxyl radicals, are associated with carcinogenesis and other pathophysiological conditions. Therefore, elimination or inactivation of ROS or inhibition of their excess generation may be beneficial in terms of reducing the risk for cancer and other diseases. Ganoderma lucidum has been used in traditional oriental medicine and has potential antiinflammatory and antioxidant activities. In the present study, we tested the amino-polysaccharide fraction (designated as 'G009') from Ganoderma lucidum for the ability to protect against oxidative damage induced by ROS. G009 significantly inhibited iron-induced lipid peroxidation in rat brain homogenates and showed a dose-dependent inactivation of hydroxyl radicals and superoxide anions. It also reduced strand breakage in phiX174 supercoiled DNA caused by UV-induced photolysis of hydrogen peroxide and attenuated phorbol ester-induced generation of superoxide anions in differentiated human promyelocytic leukaemia (HL-60) cells. These findings suggest that G009 from Ganoderma lucidum possesses chemopreventive potential.     

5种中草药水提取液对灵芝三萜含量的影响

目的研究5种中草药水提取液对灵芝液体培养的菌丝体生物量和三萜含量的影响。方法在基本培养基中分别添加了终浓度为5%的中草药水提取液,液体培养4 d后,测定各灵芝菌丝的生物量和三萜含量。结果与结论中草药水提取液对菌丝体生物量均有促进作用,其中银杏促进作用最明显,增幅达27.7%,而生地最弱,增幅为4.6%;而生地水提取液对灵芝菌丝体的三萜含量有抑制作用,其余4种有促进作用,其中银杏增幅最高为17.1%。