胎盘11β-HSD表达调节与糖皮质激素治疗

糖皮质激索(GC)可对胎儿生长发育产生复杂的效应.胎盘11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD)作为糖皮质激素代谢限速酶调节母胎间经胎盘转运糖皮质激素量,其分为11β-HSD1和11β-HSD2两种亚型.11β-HSD在不同物种胎盘之间表达具有种属差异,同一物种的胎盘不同部位表达也不完全一样.胎盘部位11β-HSD表达还随孕龄发生改变.胎盘部位11β-HSD表达调节机制复杂,尚未完全明确.雌激素、孕激素、某些金属离子、缺氧和细胞因子等参与11β-HSD表达调节.产前不同物种给予糖皮质激素后,胎盘11β-HSD表达具有差异,主要表现为灵长类动物胎盘11β-HSD2表达上调,而绵羊等动物11β-HSD2表达下调.胎盘11β-HSD与糖皮质激素的关系研究,将有助于阐明11β-HSD在糖皮质激素治疗中所起的作用以及指导临床用药.     

胎盘11β-羟基类固醇脱氢酶和促肾上腺皮质激素释放激素与胎儿发育和分娩发动的关系

胎盘是妊娠期间重要的内分泌器官,胎盘除合成一些经典的类固醇激素和蛋白质类激素外,还分泌下丘脑激素,如促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone, CRH)和存在大量的糖皮质激素的代谢酶--11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-hydroxysteroid dehydrogenase,11β-HSD).近来的研究提示,胎盘分泌的CRH可能起分娩发动的生物钟作用,它决定着分娩何时发动[1,2];胎盘表达的11β-HSD调节着糖皮质激素对胎盘和胎膜的作用;胎盘的11β-HSD还是妊娠期母体和胎儿之间的糖皮质激素的屏障,防止过多的糖皮质激素导致胎儿生长受限和编码一些与疾病相关的基因[3,4].本文将近年来胎盘CRH和11β-HSD与胎儿发育和分娩发动的关系的研究进展综述如下.     

胎盘11β-HSD2在子代成年后高血压病发生中的作用

胎盘是介导母体与胎儿血氧、营养物质及代谢物传递的一个重要器官。根据DOHaD理论,胎儿宫内生长环境的变化会影响胎儿的发育,导致子代成年后罹患高血压病等风险增加。大量研究显示,胎盘11β-羟类固醇脱氢酶(11β-HSD2)能有效地将母体糖皮质激素在通往胎儿的过程中灭活,使胎儿免受糖皮质暴露。因此,胎盘11β-HSD2水平降低会引起胎儿宫内糖皮质激素过度暴露,导致子代成年后发生高血压病的风险显著增高。本文拟阐述胎盘11β-HSD2在胎盘中的结构和功能及其在子代成年后高血压病发生机制中的作用。深入了解胎盘11β-HSD2的变化与子代高血压病之间的关系对研究胎盘功能及代谢、产前诊断、胎源性成人疾病防治等具有重要意义。     

地塞米松对人类胎盘糖皮质激素代谢酶11β-HSD2的调节

目的:研究地塞米松对人类胎盘糖皮质激素受体前代谢酶11β-HSD2活性的调节作用,探讨产前应用地塞米松对妊娠和胎儿的影响,为临床防治早产和合理应用糖皮质激素提供理论依据。方法:利用改良的Kliman法分离提纯胎盘滋养细胞,原代培养3天后药物处理,用放射性酶活性结合薄层层析法(TLC)测定地塞米松对11β-HSD2氧化酶活性的调节作用。结果:体外实验条件下,培养的胎盘滋养层细胞具有11β-HSD2氧化酶活性,且与时间呈依赖关系。地塞米松作用于细胞4h、8h后,胎盘合体滋养细胞11β-HSD2的氧化酶活性明显降低,但孵育24h后,酶活性无明显变化。结论:地塞米松可显著降低胎盘合体滋养细胞11β-HSD2的氧化酶活性,可能是地塞米松、对胎儿有不良影响的重要机制之一,因此产前应用地塞米松必须慎重。     

重度子痫前期孕妇脂氧素A4及11β羟基类固醇脱氢酶2的表达及意义

目的:检测重度子痫前期孕妇外周血中脂氧素A4(LXA4)水平以及胎盘组织中11β羟基类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)表达,探讨LXA4和11β-HSD2参与重度子痫前期发生的机制。方法:选择在本院产前检查并分娩的妊娠妇女共45例,其中正常妊娠组20例,重度子痫前期组25例。ELISA法测定孕妇外周血血浆中LXA4水平;酶化学发光分析法检测孕妇血清中游离皮质醇浓度;免疫组织化学染色法检测胎盘组织11β-HSD2蛋白表达;实时荧光定量RT-PCR法测定胎盘组织11β-HSD2 mRNA的表达;分析LXA4与11β-HSD2蛋白或mRNA、皮质醇与平均动脉压之间的相关性。结果:重度子痫前期组与正常妊娠组相比,LXA4水平明显降低(P<0.05),皮质醇浓度虽有升高,但无显著性差异(P>0.05);胎盘组织中11β-HSD2蛋白及mRNA表达均显著低于正常妊娠组(P<0.05);两组孕妇的LXA4水平与11β-HSD2蛋白表达量、LXA4水平与11β-HSD2 mRNA表达量、皮质醇与平均动脉压均无相关性(P均>0.05)。结论:LXA4和11β-HSD2参与重度子痫前期的发生。     

妊娠期母体/胎儿皮质醇的代谢及调节

皮质醇是妊娠期母体代谢与胎儿发育代谢不可缺少的物质.母体内与胎体内的皮质醇浓度梯度提示,胎盘是阻止母体皮质醇到达胎儿的屏障,11β-羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD)在这个屏障中起主导作用.在妊娠不同阶段,皮质醇代谢与调节存在差异.母体的皮质醇能在妊娠中晚期通过胎盘.多种因素会影响11β-HSD的活性,进而影响皮质醇在母体与胎儿间的代谢调节.     

TNF-α和IL-6对绒毛膜11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型和前列腺素合成酶Ⅱ型的调节

目的：研究肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(Ⅱ-6)对胎膜糖皮质激素代谢酶11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅰ型(11β-HSD1)和前列腺素合成酶Ⅱ型(PGHS-2)的影响，以探讨细胞因子导致分娩启动的机制。方法：利用薄层层析法(TLC)和Western blot杂交法分别从酶活性、蛋白表达水平，研究Ⅱ-6、TNF-α对原代培养的人类绒毛膜细胞11β-HSD1及PGHS-2水平的影响。结果:TNF-α和IL-6对绒毛膜滋养层细胞11β-HSD1还原酶活性有促进作用，对绒毛膜细胞11β-HSD1和PGHS-2的蛋白表达均有上调作用。结论：IL-6、TNF-α对胎膜11β-HSD1及PGHS-2的诱导作用可能是其导致分娩启动的机制之一。     

脂氧素受体激动剂5(S),6(R),7-三羟基庚酸甲酯对地塞米松所致小鼠胎儿生长受限的保护作用及可能机制

目的 探讨5(S),6(R),7-三羟基庚酸甲酯[5(S),6(R),7-trihydroxyheptanoic acid methyl ester,BML-111]对地塞米松所致小鼠胎儿生长受限的影响及可能机制. 方法 60只清洁级ICR雌性小鼠受孕后随机分为对照组、地塞米松组和BML-111组.地塞米松组孕鼠妊娠第9天开始皮下注射地塞米松(5 mg/kg),2h后皮下注射生理盐水(1 mg/kg) ;BML-111组孕鼠妊娠第9天开始皮下注射地塞米松,2h后腹腔注射BML-111(1 mg/kg);对照组孕鼠相应时间皮下注射生理盐水(1 mg/kg).均为每天1次,连续6d.妊娠第18天眼球取血后处死孕鼠,取胎盘和子宫组织,免疫组织化学方法检测胎盘组织11β-羟基类固醇脱氢酶2(11β-hydroxysteroid dehydrogenase 2,11β-HSD2)蛋白表达;逆转录聚合酶链反应技术检测胎盘组织11β-HSD2、白细胞介素- 1β(in terleukin-1β,IL-1β)及子宫组织脂氧素A4受体——甲酸基肽受体3(formyl peptide receptor 3,FPR3) mRNA的表达;酶联免疫吸附试验检测孕鼠血清脂氧素A4水平.组间差异比较采用单因素方差分析及两两检验.结果 地塞米松组胎鼠平均体重为(0.823±0.054)g,低于对照组[(1.103±0.218)g]及BML-111组[(0.992±0.207)g],差异均有统计学意义(t分别为-4.108和-2.890,P均＜0.05).免疫组织化学方法检测显示,11β-HSD2表达于绒毛部位合体滋养层细胞胞质内,地塞米松组11β-HSD2蛋白表达强度较对照组及BML-111组低(0.030±0.019与0.058±0.015和0.049±0.025),差异均有统计学意义(t分别为-3.107和-2.211,P均＜0.05).地塞米松组11β-HSD2 mRNA也较对照组及BML-111组低,分别为0.457±0.062、0.943±0.057和0.698±0.071,差异有统计学意义(t分别为-9.418和-4.617,P均＜0.05).地塞米松组IL-1β mRNA(0.543±0.103)介于对照组(0.710±0.085)及BML-111组(0.229±0.031)之间,差异有统计学意义(t分别为-3.736和7.025,P均＜0.05).地塞米松组FPR3 mRNA(0.323±0.019)较对照组(0.857±0.057)及BML-111组(0.499±0.050)低,差异有统计学意义(t分别为-14.630和-4.822,P均＜0.05).地塞米松组孕鼠血清脂氧素A4浓度[(64.463±22.144)pg/ml]低于对照组[(101.610±24.916)pg/ml],差异有统计学意义(t=3.152,P＜0.05). 结论 孕鼠过早过多接触地塞米松可导致胎儿生长受限.BML-111可能通过调节11β-HSD2的表达,从而改善糖皮质激素在孕鼠体内的代谢而对地塞米松所致胎儿生长受限起保护作用.     

补肾益气方对流产大鼠胎盘孕酮生成通路的影响

目的:探讨补肾益气方对流产大鼠胎盘孕酮生成通路中相关重要上游因素低密度脂蛋白受体(LDLR)、细胞色素P450链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)的影响及其与孕酮(P)分泌的关系。方法:溴隐亭皮内注射法建立流产大鼠模型,分别于孕1-8 d、1-11 d灌服补肾益气方药,黄体酮肌注作为阳性对照组,采用放免法测定大鼠血清P水平;RT-PCR技术检测LDLR、P450scc、3β-HSD在不同组动物胎盘中的mRNA表达。结果:模型组LDLR、P450scc、3β-HSD mRNA表达较正常对照组明显降低;中药组及黄体酮组不同程度提高模型大鼠胎盘LDLR、P450scc、3β-HSD mRNA表达,表达强度随孕天和给药时间逐渐升高,与血P有显著相关性。结论:补肾益气方清热益气、固肾安胎,能调控胎盘滋养细胞LDLR、P450scc、3β-HSD基因表达,促进孕激素合成分泌增加,从而达到保胎维持妊娠的目的。     

子痫期胎盘组织差异表达基因PP2ACβ的初步研究

目的寻找并克隆子痫期胎盘组织高表达基因蛋白磷酸酶2A催化亚基β（PP2ACβ）,研究其mR-NA及蛋白水平的表达,探讨其在子痫期中的作用。方法标本取自2004年5月至2004年12月天津中心妇产科医院重度子痫期及正常孕妇各30例。应用荧光mRNA差异显示技术（FDD）发现并克隆子痫期胎盘组织差异表达的基因PP2ACβ,进一步应用半定量RT-PCR及免疫组化技术分析差异表达基因PP2ACβmRNA及其蛋白水平PP2A的表达。结果通过FDD发现PP2ACβ基因在子痫期胎盘组织中高表达,半定量RT-PCR证实PP2ACβmRNA在子痫期胎盘组织中的表达（0.888±0.104）高于正常胎盘组织（0.692±0.099）,差异有统计学意义（P〈0.05）,免疫组化验证其蛋白水平PP2A的表达（0.14±0.02）亦高于正常（0.12±0.02）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论FDD可有效用于筛选子痫期胎盘组织差异表达基因;PP2A可能通过促进胎盘滋养层细胞的凋亡及阻碍血管生成而参与子痫期的发病。     

妊娠期母体／胎儿皮质醇的代谢及调节

皮质醇是妊娠期母体代谢与胎儿发育代谢不可缺少的物质。母体内与胎体内的皮质醇浓度梯度提示,胎盘是阻止母体皮质醇到达胎儿的屏障,11β-羟基类固醇脱氢酶（11β—HSD）在这个屏障中起主导作用。在妊娠不同阶段,皮质醇代谢与调节存在差异。母体的皮质醇能在妊娠中晚期通过胎盘。多种因素会影响11β—HSD的活性,进而影响皮质醇在母体与胎儿问的代谢调节。     

Syncytin及其受体ASCT2 mRNA在正常妊娠和子痫前期胎盘中的表达

目的研究人内源性逆转录病毒的膜糖蛋白syncytin及其受体ASCT2 mRNA在正常妊娠和子痫前期胎盘中的表达差异。方法应用实时定量RT-PCR测定正常妊娠晚期胎盘组织（11例）和子痫前期胎盘组织（11例）中syncytin及其受体ASCT2 mRNA的相对表达量。结果syncytin mRNA在两组中均有表达，其在子痫前期胎盘的表达明显低于正常妊娠晚期胎盘的表达（P=0．0024）。ASCT2 mRNA在两组中表达差异无显著性（P=0．1877）。结论syncytin mRNA表达下降，可能与子痫前期的病因及病理生理有关。     

雌激素受体α和β与骨代谢的关系研究

探讨雌激素受体（ER）α和β与骨代谢的不同关系。对ERα和β在骨中的表达、骨相关基因的激活、雌激素对ER的调节以及与骨量维持的关系等的差异进行综述。随着骨龄增长和成骨细胞分化，ERα和β表达水平呈不同趋势的变化过程。ERα和β受雌激素的不同调节而激活转录不同的骨相关基因。ERα可能是雌激素骨保护效应上的主要介导者，ERβ能对ERα存在抑制而又互补的复杂关系。     

TGF-β和IGF表达异常与滋养层相关疾病关系的研究

目的:探讨转化生长因子(TGF-β)和胰岛素样生长因子(IGF)等与滋养层侵入调节密切相关的细胞因子在胎盘绒毛组织中的表达,及与葡萄胎、先兆子痫等滋养层细胞相关妊娠疾病病理机制的关系。方法:采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测方法,分别以正常早孕绒毛和正常足月(自然分娩或剖宫产)胎盘绒毛组织为对照,观察葡萄胎组织与先兆子痫足月胎盘绒毛组织中TGF-β和IGF的表达。结果:5种胎盘绒毛组织中均可检测到IGF-I mRNA的表达,且先兆子痫足月胎盘绒毛组织中IGF-I的表达量明显低于正常足月胎盘绒毛组织,而葡萄胎组织中IGF-I的表达略高于正常早孕绒毛。在3种足月胎盘绒毛组织中可检测到IGF-ⅡmRNA的表达,但相互之间无明显差异。葡萄胎组织中IGF-Ⅱ的表达低于早孕绒毛。5种胎盘绒毛组织中均有TGF-β3的表达,而TGF-β1和TGF-β2的表达并未检测到。在表达量上,葡萄胎组织中TGF-β3的表达明显高于正常早孕绒毛组织,先兆子痫胎盘绒毛组织中TGF-β3的表达强于足月自然分娩的正常胎盘绒毛组织,而剖宫产胎盘绒毛组织中,TGF-β3的表达亦相对较强。结论:TGF-β3和IGF-I在胎盘绒毛组织中的表达变化,可能和葡萄胎、先兆子痫等与滋养层密切相关的妊娠疾病的发生有关。     

NK细胞在人类胎盘种植中的作用

自然杀伤细胞（ｎａｔｕｒａｌｋｉｌｅｒｃｅｌ,ＮＫ细胞）是机体抗感染、抗肿瘤细胞转移的第一道防线,它也可通过产生细胞因子调节生理性造血功能。它大量地存在于许多物种的胎盘种植部位,在胎盘形成的调控中起着自身稳定作用。最近研究提示,胎盘种植可能是受自然杀...     

胎盘11β—羟基类固醇脱氢酶和促紧胪腺皮质激素释放激素与胎儿发育和分娩发动的关系

胎盘是妊娠期间重要的内分泌器官 ,胎盘除合成一些经典的类固醇激素和蛋白质类激素外 ,还分泌下丘脑激素 ,如促肾上腺皮质激素释放激素 (ｃｏｒｔｉｃｏｔｒｏｐｉｎ ｒｅｌｅａｓｉｎｇｈｏｒｍｏｎｅ,ＣＲＨ)和存在大量的糖皮质激素的代谢酶——— 11β 羟基类固醇脱氢酶 (11β ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ,11β ＨＳＤ)。近来的研究提示 ,胎盘分泌的ＣＲＨ可能起分娩发动的生物钟作用 ,它决定着分娩何时发动[1,2 ] ;胎盘表达的 11β ＨＳＤ调节着糖皮质激素对胎盘和胎膜的作用 ;胎盘的 11β ＨＳＤ还是妊娠…     

E-钙黏附素和β-连环素在重度子痫前期胎盘中的表达

目的探讨E-钙黏附素（E-cadherin，E-cad）和β-连环素（beta-catenin，β-cat）与子痫前期发生、发展的关系，以及早发型重度子痫前期发病机制的特点。方法采用免疫组织化学染色及图像分析方法检测35例重度子痫前期患者（重度子痫前期组）和20例正常晚期妊娠妇女（对照组）的胎盘组织中E-cad和β-cat的水平，并分析子痫前期组患者胎盘组织中E-cad和β-cat表达的相关性。结果与对照组比较，重度子痫前期患者胎盘组织中E-cad和β-cat的表达显著升高（P〈0．05），且两者呈正相关（r=0．749，P〈0．001），早发型重度子痫前期与晚发型重度子痫前期比较，差异无显著性（P〉0．05）。结论E-cad和β-cat在胎盘组织中的高表达可能与重度子痫前期的发生有关。     

子前期胎盘组织差异表达基因PP2ACβ的初步研究

目的寻找并克隆子前期胎盘组织高表达基因蛋白磷酸酶2A催化亚基β(PP2ACβ),研究其mR-NA及蛋白水平的表达,探讨其在子前期中的作用。方法标本取自2004年5月至2004年12月天津中心妇产科医院重度子前期及正常孕妇各30例。应用荧光mRNA差异显示技术(FDD)发现并克隆子前期胎盘组织差异表达的基因PP2ACβ,进一步应用半定量RT-PCR及免疫组化技术分析差异表达基因PP2ACβmRNA及其蛋白水平PP2A的表达。结果通过FDD发现PP2ACβ基因在子前期胎盘组织中高表达,半定量RT-PCR证实PP2ACβmRNA在子前期胎盘组织中的表达(0.888±0.104)高于正常胎盘组织(0.692±0.099),差异有统计学意义(P<0.05),免疫组化验证其蛋白水平PP2A的表达(0.14±0.02)亦高于正常(0.12±0.02),差异有统计学意义(P<0.05)。结论FDD可有效用于筛选子前期胎盘组织差异表达基因;PP2A可能通过促进胎盘滋养层细胞的凋亡及阻碍血管生成而参与子前期的发病。     

子(癎)前期患者胎盘组织中Toll样受体2和Toll样受体4的表达及意义

目的研究子痫前期（PE）患者胎盘组织中Toll样受体2（TLR2）和Toll样受体4（TLR4）的表达及其与胎盘中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6）表达的关系,探讨PE胎盘中Toll样受体变化的意义。方法2005年1月至2006年12月在哈尔滨医科大学第一临床医学院采用免疫组化和RT-PCR法检测PE患者和正常晚期妊娠妇女胎盘组织中TLR2和TLR4的定位及表达,同时用脂多糖（LPS）体外刺激胎盘组织中的TLR4,检测其上清液中TNF-α、IL-6的变化。其中PE患者44例（PE组）,同期正常晚期妊娠妇女22例（对照组）。结果PE组和对照组胎盘组织中均有TLR2和TLR4的表达,其中PE组TLR4表达明显比对照组增强,组间差异有显著性意义（P〈0.05）;LPS体外刺激PE组胎盘组织,导致TNF-α、IL-6分泌量增加,刺激后2hPE组TNF-α、IL-6分泌量与对照组比较差异无显著意义（P〉0.05）,刺激后6hPE组TNF-α、IL-6的分泌量升高明显,与对照组比较,差异有显著性意义（P〈0.01）。结论PE患者胎盘中TLR4表达增加与TNF-α、IL-6改变密切相关,是造成局部细胞因子微环境异常的主要因素,其增加可能是PE发病机制中的关键环节之一。     

雌激素受体α和β与骨代谢的关系研究

探讨雌激素受体(ER)α和β与骨代谢的不同关系.对ER α和β在骨中的表达、骨相关基因的激活、雌激素对ER的调节以及与骨量维持的关系等的差异进行综述.随着骨龄增长和成骨细胞分化,ERα和β表达水平呈不同趋势的变化过程.ERα和β受雌激素的不同调节而激活转录不同的骨相关基因.ERα可能是雌激素骨保护效应上的主要介导者,ERβ可能对ERα存在抑制而又互补的复杂关系.