大蒜素对结肠癌ＬｏＶｏ细胞增殖的影响

目的：观察大蒜素对结肠癌细胞ＬｏＶｏ生长、细胞凋亡及细胞周期的影响。方法：不同浓度的大蒜素作用于体外培养的ＬｏＶｏ细胞,倒置显微镜下观察ＬｏＶｏ细胞的形态学变化,采用ＭＴＴ法检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞增殖抑制能力,Ａｎ ｎｅｘｉｎＶ ＦＩＴＣ标记流式细胞术检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞的凋亡抑制率,流式细胞术检测大蒜素对ＬｏＶｏ细胞周期影响。结果：大蒜素可抑制人结肠癌ＬｏＶｏ细胞增殖,具有明显量效和时间依赖性,２４、４８和７２ｈ大蒜素抑制ＬｏＶｏ细胞的ＩＣ５０分别为３２.２３、１０.７４和６.５８μｇ／ｍｌ;大蒜素能够诱导ＬｏＶｏ细胞凋亡,作用２４ｈ其诱导凋亡率随着药物浓度的递增具有增高趋势,作用４８ｈ其诱导凋亡作用峰值浓度为８μｇ／ｍｌ,后再继续增加浓度凋亡率反而下降;大蒜素作用ＬｏＶｏ细胞２４ｈ后,大蒜素浓度低于４μｇ／ｍｌ时,ＬｏＶｏ细胞周期被阻滞于Ｇ２／Ｍ;     

脂肪酸合酶抑制剂对大肠癌细胞NF—кB活性的抑制作用

目的 探讨脂肪酸合酶抑制剂对大肠癌细胞ＮＦ－кＢ活性的抑制作用。方法 用脂肪酸合酶抑制剂（ＦＡＳＩ）－浅蓝菌素处理大肠癌ＬｏＶｏ细胞株，用凝胶电泳迁移率法（ＥＭＳＡ）检测ＮＦ－кＢ活笥。结果 实验分别用不同浓度浅蓝菌素（１０＾－９￣１０＾－５Ｍ）处理ＬｏＶｏ细胞１２ｈ后，可抑制ＮＦ－кＢ条带扫描像素积分比分别为０．７８７，０．４５１，０．３７９。０．３３８，０．３２２。结论 浅蓝菌素处理人大肠癌Ｖ     

地塞米松诱导结肠癌细胞凋亡的机制研究

目的：探讨地塞米松（Ｄｅｘ）体外抑制结肠癌细胞株的增殖并诱导其凋亡的作用机制。方法：采用ＭＴＴ及流式细胞仪检测细胞增殖抑制及凋亡,ＲＴ-ＰＣＲ检测ＧＲ、ＩκＢ及Ｂcl-２的表达改变,凝胶迁移或电泳迁移率实验（ＥＭＳＡ）检测Ｄｅｘ作用过程中的ＮＦ-κＢ活性改变。结果：Ｄｅｘ体外作用后,对４种结肠癌细胞株ＬｏＶｏ、ＨＣＴ-１１６、ＨＴ-２９及ＳＷ-４８０均有抑制作用,ＬｏＶｏ和ＨＣＴ-１１６细胞作用最显著。流式细胞仪检测显示,Ｄｅｘ（１×１０^-4mol/L）诱导７２ｈ后,在ＬｏＶｏ和ＨＣＴ-１１６细胞检测到细胞凋亡和坏死峰,明显高于未加Ｄｅｘ的对照组,具有显著性差异。ＲＴ ＰＣＲ检测显示Ｄｅｘ作用后ＧＲα、ＩκＢ表达升高,Ｂｃｌ-２无明显改变,ＥＭＳＡ结果也显示ＮＦ-κＢ活性明显降低。结论：地塞米松可能通过上调ＧＲα、ＩκＢ表达,抑制ＮＦ-κＢ活性来抑制ＬｏＶｏ细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

放线菌酮和硫酸锌对儿茶素诱导大肠癌细胞凋亡的拮抗作用

目的 探讨儿茶素诱导体外培养的ＬｏＶｏ大肠癌细胞株凋亡及放线菌酮和硫酸锌对儿茶素诱导细胞凋亡的拮抗作用。方法：用儿茶素处理ＬｏＶｏ细胞，加或不加放线菌酮和硫酸锌，用琼溪糖凝胶电泳，荧光显微镜和流式细胞仪方法。观察Ｌｏｖｏ细胞生化和形态学方面的改变。结果：荧光显微镜下可见ＬｏＶｏ细胞在形态学上出现典型的细胞核固缩，碎裂等凋亡细胞的形态学改变３，琼脂糖凝胶电泳呈典型的“梯状”（ＤＮＡｌａｄｄｅｒ）带，     

浅蓝菌素可抑制大肠癌细胞

上海医科大学病理学博士生黄培林在其导师朱世能教授的悉心指导下，历经４年研究完成了《脂肪酸合酶抑制剂诱发人结肠癌细胞凋亡及其机理的研究》课题、他运用核转录因子－ＫＢ等先进技术，在国内外首次用脂肪酸合酶抑制剂来研究结肠癌的发病机理，研究发现浅蓝菌素作为脂肪酸合酶抑制剂，是一种潜在的选择性抗肿瘤物质，在体内和体外实验中均具有较强的遏止ＬｏＶｏ细胞增殖作用，并可诱导细胞凋亡。 黄培林博士应用细胞培养、裸鼠肿瘤移植、ＦＣＭ、ＲＴ－ＰＣＲ、ＥＭＳＡ、组织病理学、免疫组化、电镜等多种技术，从整体、细胞、蛋白和…     

ＴＲＡＩＬ联合蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２诱导肺癌Ａ５４９细胞凋亡的实验研究

目的　观察ＴＲＡＩＬ对肺癌Ａ５４９细胞的体外生长抑制及诱导凋亡作用,并探讨ＴＲＡＩＬ与蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２联合用药诱导细胞凋亡的作用及其机制。方法　采用ＭＴＴ法检测不同浓度ＴＲＡＩＬ对肺癌Ａ５４９细胞增殖的影响;应用流式细胞仪技术检测ＴＲＡＩＬ、蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２及其两药联合干预２４ｈ对肺癌Ａ５４９细胞凋亡率的影响;采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测药物干预前后细胞凋亡相关蛋白Ｃａｓｐａｓｅ-８、Ｃａｓｐａｓｅ-９以及核转录因子ＮＦ-κＢ的表达情况。结果　ＭＴＴ结果显示不同浓度ＴＲＡＩＬ对肺癌Ａ５４９细胞的体外抑制作用与剂量效应正相关,２４ｈＩＣ５０为９６.３２２μｇ／ｍｌ,４８ｈＩＣ５０为４３.５９μｇ／ｍｌ;流式细胞术显示ＴＲＡＩＬ与ＭＧ１３２联合用药后肺癌Ａ５４９细胞凋亡率明显增高（平均６７.６５％）,与ＴＲＡＩＬ（平均２３.５５％）、ＭＧ１３２（平均２５.９１％）单药组比较,有显著性差异（Ｐ＝０.０１６）;Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ结果显示,与ＴＲＡＩＬ单药组比较,两药联合后细胞凋亡相关蛋白Ｃａｓｐａｓｅ-８、Ｃａｓｐａｓｅ-９表达明显增强（Ｐ＝０.００６）,抑制细胞凋亡因子ＮＦ-κＢ表达则明显减弱（Ｐ＝０.０４）。结论　ＴＲＡＩＬ可抑制Ａ５４９细胞的增殖,呈浓度依赖关系;ＴＲＡＩＬ与蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２联合应用可以明显提高细胞凋亡率,可能与蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２降低ＮＦ-κＢ的活性,增强细胞对ＴＲＡＩＬ诱导凋亡的敏感性,促进凋亡相关蛋白Ｃａｓｐａｓｅ-８及Ｃａｓｐａｓｅ-９的表达有关。     

全反式维甲酸诱导大肠癌细胞分化的实验研究

作者采用全反式维甲酸对大肠癌细胞株ＬｏＶｏ进行体外实验，结果细胞增殖受抑制，呈时间剂量依赖关系，细胞周期改变，被阻滞于Ｇｏ／Ｇ１期，Ｓ期比例下降，分化标志酶ＡＬＰ比活性增高，双层软琼脂糖培养细胞集落形成能力降低，提示全反式维甲酸具有诱导ＬｏＶｏ细胞分化作用，实验结果有重要的临床指导意义。     

IN VITRO AND IN VIVO CHEMOTACTIC EFFECT OF MIP-1a GENE TRANSFECTED TUMOR VACCINE ON IMMUNE EFFECTOR CELLS

ＩＮＶＩＴＲＯＡＮＤＩＮＶＩＶＯＣＨＥＭＯＴＡＣＴＩＣＥＦＦＥＣＴＯＦＭＩＰ－１ａＧＥＮＥＴＲＡＮＳＦＥＣＴＥＤＴＵＭＯＲＶＡＣＣＩＮＥＯＮＩＭＭＵＮＥＥＦＦＥＣＴＯＲＣＥＬＬＳ１ＣｈｅｎＧｕｏｙｏｕ陈国友ＣａｏＸｕｅｔａｏ２曹雪涛ＬｅｉＨｏｎｇ雷虹...     

阻断己糖激酶-Ⅱ基因表达对结肠癌化疗的影响及其机制

目的：观察阻断己糖激酶-Ⅱ（ＨＫ-Ⅱ）基因表达对结肠癌ＬｏＶｏ细胞化疗敏感性的影响及其机制。方法：应用质粒介导的短发夹ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）真核表达法特异性阻断ＨＫ-Ⅱ基因表达。通过半定量逆转录 聚合酶链反应（ＲＴ-ＰＣＲ）和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析ＲＮＡ干扰效应。ＭＴＴ法检测氟尿嘧啶（５-ＦＵ）和奥沙利铂（Ｌ-ＯＨＰ）对ＬｏＶｏ细胞的半数抑制浓度（ＩＣ５０）;底物比色法测定半胱氨酸蛋白水解酶（ｃａｓｐａｓｅ）-３活性;Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测胸苷酸合成酶（ＴＳ）表达变化。结果：ＲＮＡ干扰技术特异性下调结肠癌ＬｏＶｏ细胞ＨＫ-Ⅱ基因表达,ｍＲＮＡ和蛋白质水平的表达抑制率分别为７２.１％和７１.２％。阻断ＨＫ-Ⅱ基因表达后,结肠癌ＬｏＶｏ细胞５-ＦＵ和Ｌ-ＯＨＰ的ＩＣ５０值分别为（４.７０±０.４０）μｇ／ｍｌ和（６.２７±０.５９）μｇ／ｍｌ,均明显低于正常培养细胞的（１１.９３±０.１５）μｇ／ｍｌ和（９.７７±０.６０）μｇ／ｍｌ（Ｐ＜０.０１）;与正常培养细胞相比,ＲＮＡ干扰的ＬｏＶｏ细胞ｃａｓｐａｓｅ-３活性明显增高,ＴＳ蛋白表达下降。结论：阻断ＨＫ-Ⅱ基因表达可能通过活化ｃａｓｐａｓｅ-３和降低ＴＳ表达的途径来增加结肠癌ＬｏＶｏ细胞化疗敏感性。     

ATRA诱导结肠癌细胞株LoVo分化与凋亡

目的 体外研究维甲类化合物的衍生物ＡＴＲＡ对ＬoＶo结肠癌细胞株的作用。方法 观察ＡＴＲＡ作用下ＬoＶo细胞的增殖、细胞周期和凋亡。结果 ＡＴＲＡ使细胞增殖抑制,细胞阻滞于Ｇo/Ｇ１期,高浓度组出现亚“Ｇo/Ｇ１”峰。ＡＬＰ比值增高,高浓度组电镜下见凋亡细胞,ＴＤＴ法测凋亡细胞比例增高,但传６代后不增加。结论 提示ＡＴＲＡ可诱导ＬoＶo细胞分化及凋亡,但有一定限度;实验结果为临床应用ＡＴＲＡ化学预防结肠癌提