骨组织脱钙过程中脱钙量的观察

目的观察3种脱钙液在脱钙过程中不同时段和终点钙的脱出量。方法取6月龄健康新西兰兔双侧桡骨,用3种脱钙液分别在室温和微波条件下进行脱钙,每小时末更换一次脱钙液、用电子天平称重,分别收集脱钙液,用原子分光光度仪分别测定钙含量。结果3种脱钙液在室温和微波脱钙过程中,钙累计脱出率逐渐增加,3小时后钙脱出率减小,骨脱钙后的重量比脱钙前减少40%-48%;不同时间段脱钙率:第1小时脱钙率最高,随着时间的增加每小时脱钙率逐渐减少,接近终点时曲线变平稳。终点钙脱出量为54-69mg/100mg标本骨,组间比较无显著性差异(P>0.05)。结论脱钙过程中钙脱出量呈规律性变化:随着脱钙时间的延长逐渐增加,与时间呈正相关;第1小时钙脱出率最高,随后每小时钙脱出率逐渐较少。     

改良硝酸脱钙方法的研究及应用

目的探讨低温微波-硝酸快速脱钙方法对骨、牙齿及其他钙化组织的脱钙效果。方法实验组采用＂低温微波-硝酸快速脱钙＂方法脱钙,对照组采用室温（20℃）硝酸脱钙液脱钙,硝酸脱钙液的浓度均为10%。应用HE染色,显微镜下观察染色效果。结果低温微波-硝酸快速脱钙方法与室温（20℃）硝酸脱钙液脱钙比较,前者能得到一张高质量的HE切片。结论低温微波-硝酸快速脱钙能在短时间内获得满意的染色效果。     

"低温微波-硝酸快速脱钙"技术研究及应用

目的 探讨低温微波-硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法 根据实验条件分为4组：①低温(10℃)微波硝酸；②室温(20℃)微波硝酸；③室温(20℃)硝酸，硝酸脱钙液的浓度分别是5％、8％、10％和13％；④10％乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)脱钙液。应用免疫组织化学LSAB染色，光镜观察免疫组化染色结果。结果 以硝酸作为脱钙剂时，①组和④组的阳性细胞相近，均显著高于②、③组，经8％和10％硝酸脱钙的免疫组化染色阳性细胞明显多于5％和13％的硝酸。低温微波硝酸快速脱钙技术能显著缩短脱钙时间。结论 低温微波．硝酸快速脱钙能在短时间内获得满意的染色效果。     

骨与钙化组织脱钙过程的探讨(脱钙终点的控制问题)

<正> 习用的脱钙终点控制多赖于操作者的经验作近似终点的定性判断,难于确切地取得最佳切片染色效果。Mawhinney 和 Richar-dson 等人提出称量组织块失重作为脱钙终点控制依据,把定性判断提高到了定量水平。但对含水样块难于精确地称取实际重量,加以手续麻烦,妨碍了广泛应用。本文作者认为以脱出到溶液中的总钙量不再增加或骨标本中的钙正好脱尽,作为脱     

不同脱钙液对骨髓组织切片HE染色效果的对比研究

目的:探讨不同脱钙液对骨髓组织切片HE染色质量的影响。方法:选用10%乙二胺四乙酸钠(EDTA)、HA S复合酸脱钙液和10%硝酸3种不同的脱钙液,分成A、B、C 3组用于脱钙,通过记录脱钙时间,观察HE染色效果,评价室温下(20~28℃)不同脱钙液对骨髓组织切片制作的影响。结果:A组脱钙液所制切片染色效果良好,但脱钙速度缓慢,所需时间较长;B组脱钙液脱钙速度快,所制切片染色好;C组脱钙液所制切片的染色强度和对比度均不如前两种脱钙液。结论:在制作骨髓组织切片时,EDTA脱钙液和HA S复合酸脱钙液所制切片均能取得良好的染色效果,但EDTA脱钙液脱钙周期过长;HA S复合酸脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合于临床速检工作;硝酸脱钙液组染色效果较差。     

骨组织病理制片三种脱钙液的比较

目的:比较三种骨组织脱钙液的脱钙效果,以找到一种更加高效,简便快捷的方法应用于临床。方法:选取各种类型的骨的骨干、骨端骨皮质和骨髓质120份,分成A,B,C三组,分别用A,B,C三种脱钙液在常温下进行脱钙处理,记录脱钙的时间。最后比较三组样本的切片的质量及染色效果。结果:C组脱钙液的脱钙时间短于B组(t=8.67,P<0.05),B组脱钙时间短于A组(t=6.78,P<0.05)。另外,C组的切片质量良好占95%,HE染色效果良好的占95%;B组切片质量良好占80%,HE染色效果良好的占77.5%;A组切片质量良好占70%,HE染色效果良好的占70%。结论:三种脱钙液的比较,C液的效果是最好的,脱钙时间最短,染色效果最好。     

不同脱钙方式观察牙髓组织切片的效果比较

目的比较乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetra-acetic acid,EDTA)脱钙法和复合酸脱钙法处理的牙齿石蜡切片的牙髓组织学形态特点。方法选用10%EDTA及复合酸(Plank-Rychlo)脱钙液,分别用于牙齿石蜡切片脱钙,通过记录脱钙时间,观察HE染色效果,评价室温下(20～28℃)2种不同脱钙液对切片制作的影响。结果 EDTA脱钙液处理的石蜡切片牙髓细胞、成牙本质细胞、牙本质小管结构清晰,色泽对比鲜明,但脱钙时间较长;Plank-Rychlo脱钙液脱钙速度相对较快,但染色较EDTA脱钙液稍显模糊。结论在制作牙齿石蜡切片观察牙髓组织学形态时,EDTA脱钙液和Plank-Rychlo脱钙液所制切片均能取得良好的染色效果。     

骨组织制片中改良脱钙液与传统脱钙液的比较

目的探讨改良脱钙液与传统脱钙液脱钙能力的差异和对HE染色的影响。方法选取36例手术切除的新鲜骨标本,分别使用改良的脱钙液和传统的脱钙液脱钙,比较脱钙效果和HE染色效果。结果改良脱钙液组脱钙时间短于传统脱钙液组(P<0.01);改良脱钙液组切片质量良好率高于传统脱钙液组(P<0.05);改良脱钙液组染色效果良好率高于传统脱钙液组(P<0.01)。结论改良脱钙液脱钙彻底,组织清晰结构完整性更好。     

临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较

目的 对两种脱钙方法进行比较,获得简单、便捷、快速适用于临床病理制片的脱钙方法. 方法 观察两种脱钙液:5％硝酸脱钙液(硝酸5ml加入95 ml蒸馏水)和快速脱钙液(含36％-38％盐酸8ml、冰醋酸5ml、水杨酸10 g、蒸馏水87ml),在常温及微波条件下对骨组织脱钙及HE切片染色效果的影响. 结果 常温条件下,5％硝酸使组织结构有些破坏,染色效果不佳.微波条件下,使用快速脱钙液对骨组织结构损伤小,染色效果佳,适合于临床病理的骨组织制片. 结论 标本经快速脱钙液处理后,其切片质量大大提高并远远优于普通脱钙液.     

改良混合脱钙液在骨髓活检组织中的应用

目的 探讨改良混合脱钙液在临床骨髓组织活检中的应用。方法 选取临床骨髓穿刺活检病例188例,分别采用改良混合脱钙液（改良混合脱钙液组,146例）与传统硝酸类脱钙液（硝酸类脱钙液组,42例）在常温下进行脱钙处理,比较两组脱钙的时间、制成切片的质量、HE染色效果及免疫组化表型表达情况。结果 改良混合脱钙液的脱钙时间短于硝酸类脱钙液,改良混合脱钙液的切片质量良好为97.9%（143/146）,HE染色效果良好为98.6%（144/146）;硝酸类脱钙液切片质量良好为61.9%（26/42）,HE染色效果良好为54.8%（23/42）。改良混合脱钙液组标本免疫组化表达效果优于硝酸类脱钙液组。结论 改良混合脱钙液效果良好、脱钙时间短、染色效果佳、组织抗原不丢失、实用性强,能很好地满足临床骨髓组织活检的脱钙需要。     

一种适用于微波内的快速脱钙液—HAS液

为缩短病变骨及钙化标本的切片时间，我们应用盐酸、醋酸和水杨酸制成混合脱钙剂（ＨＡＳ）用于微波内脱钙，并同传统脱钙剂（５％硝酸，Ｊｅｎｋｉｎｓ液）的脱钙作用进行了比较。１材料与方法１．１．１标本采用我院１９９６年１１月～１９９７年１０月手术切除病变骨及...     

骨电镜标本微波快速脱钙终点的测定

骨电镜标本微波快速脱钙终点的测定杨传红，赖晃文，唐庚云，姜秀英广州军区广州总医院医学实验科，广州市，５１００１０关键词骨；脱钙，微波；电子显微镜目前骨常规脱钙方法时间太长，超微结构保存不良，不利于临床病理的快速诊断。我们用微波（Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ，Ｍ...     

骨及钙化组织脱钙法的比较

目的：探讨骨及钙化组织的脱钙方法。方法采用三种不同方法处理相同的骨及钙化组织,甲组先将骨及钙化组织切成薄片,用甲酸氯化铝脱钙固定液彻底脱钙,流水冲洗,碳酸铝饱和溶液中和酸;乙组先用甲酸氯化铝脱钙固定液处理大块骨及钙化组织至彻底脱钙,再将骨及钙化组织切成薄片,碳酸铝饱和溶液中和酸;丙组按传统方法脱钙。三组组织脱钙后均常规制作HE切片,并行CD68和TTF-1免疫组化检测,比较三种方法的脱钙时间、HE染色和免疫组化检测结果。结果甲组脱钙时间短、切片完整、组织结构清晰、染色对比鲜明、长期保存不易褪色、免疫组化阳性信号正常,各项结果均优于乙组和丙组。结论甲酸氯化铝脱钙固定液处理骨及钙化组织,脱钙时间短,切片质量、染色质量、免疫组化质量好,切片长期保存不易褪色,值得推广。     

股骨头坏死经手术治疗后再生骨的电镜标本制备方法

在透射电镜生物样品的制作过程中 ,骨组织的制作是较复杂的 ,脱钙过程、切片刀的要求、切片速度、厚度都与其它组织不同 ,特别是人的股骨头坏死经治疗后再生骨的材料更难得。现将实验过程归纳如下。1　材料与方法1 1　材料　标本来源　被诊断为股骨头坏死病人经安装自制的器械后再生骨 4例。1 2　方法1 2 1　取材　取股骨头坏死病人放置治疗器械后生长出的骨组织 2mm3 左右 ,迅速放入 3%戊二醛固定液中 ,室温固定 7～ 10d。入 0 1M磷酸缓冲液两天 ,每天换液一次。1 2 2　脱钙与固定　在 80 %及 95 %酒精内脱脂各 3h后 ,在EDTA脱钙液 (p…     

全喉大切片教学标本的制备及特殊染色

喉以软骨为支架 ,软骨之间借韧带、肌肉或关节相连 ,组织结构复杂 ,要制备教学所需的喉大切片十分困难。我们参考王德田等 [1] 整叶肺组织大切片的制作方法 ,采用 HAS快速脱钙液 [2 ] ,微波脱钙 ,石蜡包埋 ,在普通轮转式切片机上制作全喉大切片 ,特殊染色 ,得到了更加满意的效果。1　材料和方法1.1　取材　把尸检切取的全喉或手术切出的喉癌标本根据需要在水平、冠状和矢状三个方向切开 ,10 %的甲醛溶液固定。1.2　脱钙　应用刀锋锐利的解剖刀取材 ,对已有钙化的甲状软骨用 HAS脱钙液进行脱钙。1HAS液配制 :36 %～ 38%盐酸 8ml,99%醋酸 …     

微波加热对大鼠骨传导性及诱导性的影响

目的:根据骨组织经微波处理后成骨能力的变化,探讨微波对骨传导性及诱导性的影响。方法:实验大鼠10只,取每只鼠左胫骨,锯成相等的移植骨4块,每块约0.5cm,加以标记。然后从每只鼠中各取1块,分成四组。Ⅰ组不加热作为阳性对照组;Ⅱ组用微波加热60℃10min;Ⅲ组用微波加热60℃15min;Ⅳ组水浴加热100℃30min作为阴性对照。然后将加热的骨块经脱脂、脱钙水洗后制成完全脱钙骨基质,再移植于自体腹部肌肉内。21天后将移植物取出并进行组织学分析。观察微波加热后骨传导性及骨诱导性的变化。结果:Ⅱ、Ⅲ组微波加热后组织学改变与阳性对照组的Ⅰ组相似。植入的脱钙骨基质诱导新骨生成,组织切片内见大量新生的软骨细胞、骨细胞及类骨质,部分切片看到明显的骨小梁,但三者间差异无显著性意义;Ⅳ组仅看到形成大量纤维结缔组织,无明显骨及软骨形成。结论:微波加热后,脱钙骨基质的骨生长因子无明显破坏,能诱导新骨产生,因此保存了骨的传导性及诱导性。说明体外微波加热可应用于骨肿瘤的保肢手术。     

脱钙液的组分与处理时间对骨髓活检组织HE和免疫组化染色的影响

目的：探讨不同组分的脱钙液及脱钙时间对骨髓活检组织HE染色和免疫组化染色效果的影响。方法：收集36例骨髓活检穿刺组织，分为10%硝酸甲醛液(A液)、10%盐酸甲醛液(B液)和30%甲酸甲醛液(C液)3组，每组12例，分别观察各组的脱钙时间。另收集5例骨髓活检穿刺组织，将同一例标本分成两份，观察不同组分的脱钙液和脱钙处理时间对HE染色和免疫组化染色效果的影响。结果：A液、B液的脱钙时间比C液短；3种方法的HE染色效果均较好；而C液脱钙2 h的Ki67免疫组化染色效果好，但其他方法的Ki67免疫组化染色效果欠佳。结论：采用30%甲酸甲醛液处理2 h的脱钙法，实验操作简便，HE染色和免疫组化染色效果较为满意。     

不同浓度氟保护漆抑制人牙釉质脱矿能力的体外研究

目的:观察和比较两种浓度氟保护漆在体外抑制人牙釉质脱矿的能力.方法:将预备好的40个无龋的牙釉质块随机分为4组,每组10个标本,5个用作实验,5个备用;0.5%氟保护漆组、0.1%氟保护漆组为实验组,0.02%氟化钠为阳性对照组,去离子水为空白对照组,经过人工酸蚀48h后,分别采用原子吸收分光光度计和紫外分光光度计测量酸蚀液中的钙、磷溶出量.结果:实验组抑制钙、磷溶出效果明显好于对照组.实验组和对照组之间有高度的显著性差异(P＜0.0001);实验组之间没有显著性差异(P＞0.05);对照组之间有显著性差异(P＜0.05).结论:两种浓度的氟保护漆都能够有效的抑制离体人牙釉质的脱矿反应;两者之间抑制牙釉质脱矿能力没有显著性差异.     

3种脱钙液对牙体牙周联合切片H-E染色效果的对比

目的对不同脱钙液在牙体牙周联合组织HE染色切片的效果进行比较，并初步探讨了乙二胺四乙酸二钠（EDTA）-微波技术在牙体牙周联合组织切片脱钙过程中的应用。方法取成年健康Beagle犬下颌骨牙体牙周联合组织做为标本，采用10％硝酸溶液、Krinstensen’S液、EDTA-微波辐射3种不同的脱钙方法进行脱钙，在完成组织脱钙后进行H—E染色，并在显微镜下观察组织结构及染色效果。结果EDTA-微波辐射完成组织脱钙约需53h，H—E染色效果良好，牙髓细胞、成牙本质细胞、牙周膜细胞和牙本质小管组织结构清晰；Krinstens—en’s液完成组织脱钙约需1500h，H—E染色效果较好，组织结构较清晰；10％硝酸溶液完成组织脱钙约需360h，H—E染色对比度差，组织结构模糊不清。结论应用EDTA-微波辐射技术能在相对较短的时间内完成牙体牙周联合组织的脱钙，并在H—E染色切片中较好地保存了牙体牙周组织的结构。     

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。方法选择12例骨组织,随机分为3组。A组用14%硝酸脱钙液进行处理,B、C组分别用EDTA脱钙液、PLANK脱钙液进行处理,同时对CD3、CD68、Ki-67和TTF-1染色。结果室温条件下,硝酸脱钙液的脱钙时间最短,但对组织损伤最大。PLANK脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好,组织结构完整,形态清晰,免疫组化染色较好。结论室温条件下,三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长,PLANK脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合用于临床病理检查。硝酸脱钙液脱钙最快,但是免疫组化染色效果较差。