Claudin-14在纳米细菌肾结石形成中表达的动态研究

目的本实验通过尾静脉注射用肾结石患者尿液培养的纳米细菌构建肾结石模型检测肾脏组织中Claudin-14(紧密连接蛋白-14)蛋白的表达情况,初步探讨Claudin-14在纳米细菌形成结石中的作用。方法 60只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组和纳米细菌组,每组30只。正常对照组Wistar雄性大鼠一次性给予尾静脉注射0.9%氯化钠注射液1.2mL,纳米细菌组Wistar雄性大鼠一次性给予尾静脉注射等量的纳米细菌悬浊液。两组Wistar雄性大鼠注射后的10周内每周处死3只。每周采用病理组织学方法评估每组3只Wistar雄性大鼠成石情况,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫组化方法连续10周检测紧密连接蛋白-14(Claudin-14)mRNA和蛋白的表达。结果 (1)病理组织学检查结果:第4周以后纳米细菌组Wistar雄性大鼠肾小管内发现晶体颗粒,且主要分布于近、远曲小管,1～10周对照组Wistar雄性大鼠未见晶颗粒。(2)实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和免疫组化结果:3周内Claudin-14mRNA和蛋白在纳米细菌组中几乎未见表达,从第4周起Claudin-14mRNA和蛋白在纳米细菌组中表达水平增高并且对照组明显增高,1～10周间Claudin-14mRNA和蛋白在对照组中几乎未见表达。结论 Claudin-14表达的增加可能在纳米细菌形成结石中起重要作用。     

萝卜硫素对肾病综合征大鼠肾脏损伤保护的机制研究

目的研究萝卜硫素对肾病综合征大鼠肾脏损伤的保护作用及其对一氧化氮合酶表达的影响。方法采用5 mg/kg阿霉素诱导肾病综合征大鼠模型,将大鼠分为对照组、模型组、萝卜硫素组及阳性药物组,30 mg/kg萝卜硫素和6 mg/kg阳性药物贝那普利分别灌胃治疗大鼠6周,HE染色检测肾脏组织病理学变化,BCA法检测24 h尿蛋白量,ELISA法检测了血浆白蛋白水平,分光光度法测定尿液NO含量;Western blot法检测肾组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)的表达。结果相对于对照组大鼠,模型组大鼠24 h尿蛋白量明显升高(P<0.05),血浆白蛋白明显降低(P<0.05),肾脏病理损伤严重,尿液中NO含量显著降低(P<0.05),eNOS、iNOS及nNOS酶表达水平亦显著降低(P<0.05);相比于模型组大鼠,萝卜硫素和阳性药物治疗组大鼠24 h尿蛋白量明显降低(P<0.05),血浆白蛋白明显升高(P<0.05),肾脏病理损伤明显改善,尿液中NO含量显著升高(P<0.05),eNOS、iNOS及nNOS酶表达水平亦显著增高(P<0.05)。结论萝卜硫素能够诱导肾病综合征大鼠eNOS、iNOS及nNOS的表达,提升大鼠体内NO水平,降低尿蛋白含量,改善肾脏损伤程度。     

益肾通淋方对尿路感染大鼠TLRs mRNA表达的影响

目的:研究益肾通淋方对尿路感染大鼠肾盂和膀胱组织TLR2和TLR4 m RNA表达的影响。方法:30只雌性SD大鼠随机分为正常对照组、造模组及益肾通淋方组,后2组给予膀胱注入大肠埃希菌菌液建立尿路感染模型,于造模第1、7、14 d检测血常规、尿白细胞、尿细菌各1次,每日测量体温1次;14 d后取肾盂、膀胱黏膜组织检测TLR2和TLR4表达。结果:与正常对照组对比,造模组第1、7 d血白细胞降低(P<0.05),第1、7、14 d尿白细胞合尿细菌均升高(P<0.05)。造模组与益肾通淋方组比较,第1、7 d血白细胞升高(P<0.05),第1、7、14 d尿白细胞和尿细菌显著增多(P<0.01)。正常对照组大鼠肾脏组织TLR2 m RNA为1.03±0.41、TLR4 m RNA为1.66±1.01;膀胱组织TLR2 m RNA为0.23±0.30L、TLR4 m RNA为0.20±0.30。造模组大鼠肾脏组织TLR2 m RNA为2.83±3.00、TLR4 m RNA为2.97±1.85;膀胱组织TLR2 m RNA为0.43±0.06、TLR4 m RNA为2.97±1.85。益肾通淋方组大鼠肾脏组织TLR2 m RNA为1.20±0.47、TLR4 m RNA 1.66±0.95;膀胱组织TLR2 m RNA为0.29±0.03、TLR4 m RNA为0.22±0.71。与空白组比较,造模组大鼠肾脏和膀胱TLR2/TLR4 m RNA均显著升高(P<0.05);益肾通淋方组大鼠肾脏和膀胱TLR2/TLR4 m RNA则显著降低(P<0.05)。结论:益肾通淋方能下调尿路感染大鼠肾盂和膀胱组织的TLR2、TLR4 m RNA表达。     

实验性精索静脉曲张对大鼠前列腺组织中睾酮水平及雄激素受体表达的影响

目的探讨实验性精索静脉曲张对大鼠前列腺组织中睾酮水平及雄激素受体表达的影响。方法将36只SD三级雄性大鼠随机分为实验组与对照组,每组18只,实验组建立精索静脉曲张模型,对照组接受假手术,于建模成功后第6、12和18周(各3个阶段,每阶段6只)采用放射免疫法测定血清中睾酮的含量、前列腺组织中睾酮的含量,并进行常规HE染色,观察前列腺组织上皮与基质的形态学变化,同时使用免疫组化法测定前列腺组织中雄激素受体的表达。结果实验组6周组、12周组、18周组血清睾酮、前列腺组织中睾酮水平明显低于同期对照组(P<0.05),且实验组12周组血清睾酮、前列腺组织中睾酮水平明显低于实验组6周组(P<0.05),实验组18周组血清睾酮、前列腺组织中睾酮水平明显低于实验组6周组、实验组12周组(P<0.05)。对照组前列腺组织正常,实验组随着时间的延长前列腺组织损伤越来越严重。实验组6周组前列腺组织中雄激素受体表达较同期对照组明显增强(P<0.05),实验组12周组、实验组18周组前列腺组织中雄激素受体表达较同期对照组与实验组6周组明显减弱(P<0.05)。结论实验性精索静脉曲张可降低大鼠前列腺组织中睾酮水平,导致前列腺组织中雄激素受体表达异常,影响前列腺功能的正常运转,这可能是男性不育或生育能力低下的原因之一。     

金钱草提取物对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及对肾组织Akt/GSK-3β信号通路的影响

目的:探讨金钱草提取物经Akt/GSK-3β信号通路对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用。方法:SD大鼠120只,随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组、金钱草提取物低、中、高剂量组,每组20只,雌雄各半。构建大鼠糖尿病肾病模型,并给予相应药物。检测大鼠血糖浓度和大鼠肾功能;制作HE切片,观察大鼠肾脏病理改变;检测大鼠肾脏Akt、GSK-3βmRNA表达水平; ELISA法检测大鼠肾脏Akt、GSK-3β蛋白水平表达。结果:正常对照组大鼠肾脏细胞结构完整,染色清晰,肾小管结构完整,模型组大鼠肾脏细胞大量坏死和肾小球出血;给予金钱草提取物和α-硫辛酸干预后,肾脏细胞结构完整,未见肾小球肥大及基底膜增厚。与正常对照组比较,模型组大鼠中期和末期血糖、24 h尿蛋白、肾脏指数、GSK-3βmRNA和蛋白表达水平均显著升高(P 0.05),肌酐清除率、Akt mRNA和蛋白表达水平显著降低(P 0.05)。给予金钱草提取物和α-硫辛酸干预后,金钱草提取物各剂量组和阳性对照组大鼠血糖、24 h尿蛋白、肾脏指数、GSK-3βmRNA和蛋白表达水平降低(P 0.05),且高剂量和中剂量组低于低剂量组,高剂量组低于中剂量组(P 0.05),阳性对照组和高剂量组差异无统计学意义(P 0.05);肌酐清除率、Akt mRNA和蛋白表达水平升高(P 0.05),且高剂量和中剂量组高于低剂量组,高剂量组高于中剂量组(P 0.05),阳性对照组和高剂量组差异无统计学意义(P 0.05)。结论:金钱草提取物对糖尿病大鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能是通过抑制GSK-3β、促进Akt蛋白的表达水平,从而扭转糖尿病对大鼠肾脏造成的损伤。     

金鸡菊乙醇提取物对2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激水平的影响

目的:研究金鸡菊乙醇提取物对2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激水平的影响,并探讨其可能机制。方法:腹腔注射1%链脲佐菌素制备糖尿病肾病大鼠模型,随机分为正常组、模型组、金鸡菊乙醇提取物给药组(200、400、800 mg/kg)、阳性对照组(盐酸二甲双胍,100 mg/kg)。连续给药4周后,测定大鼠体质量、肾脏指数、空腹血糖、尿白蛋白、血清生化指标、肾组织匀浆液中氧化指标。结果:与正常组相比,模型组大鼠表现为体质量下降、肾脏指数、空腹血糖值、尿白蛋白值、血肌酐、尿素氮、三酰甘油、谷氨酰转移酶、总胆固醇等血清生化指标,均显著升高(P<0.05),肾组织匀浆液中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶水平显著升高(P<0.05),丙二醛以及一氧化氮含量显著下降(P<0.05)。经金鸡菊乙醇提取物给药后,肾脏指数、血糖值、尿白蛋白以及上述血清生化指标、肾脏氧化指标水平均出现显著逆转(P<0.05),以800 mg/kg剂量组效果最佳。结论:金鸡菊乙醇提取物对糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,其机制可能通过抑制体内异常的氧化应激反应和改善纸质代谢异常发挥效应。     

猪苓汤对阿霉素肾病大鼠肾脏AQP2表达的影响

目的:探讨猪苓汤对阿霉素肾病大鼠水通道蛋白2表达的影响。方法:110只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组,尾静脉注射阿霉素14 d后,24 h尿蛋白定量≥100 mg提示模型复制成功,将模型大鼠再次随机分为模型组、猪苓汤组、呋塞米组,分别于灌胃2、4、6、8周处死部分大鼠,留取血液、尿液、肾脏标本,半自动生化仪检测尿蛋白含量、肾功能等生化指标,HE染色观察肾脏病理改变,RT-PCR法检测AQP2 mRNA表达,Western Blot法检测AQP2蛋白表达。结果:(1)生化指标:灌胃8周,猪苓汤组平均尿量高于模型组(P<0.05),其他生化指标比较,各造模组之间差异无统计学意义;(2)AQP2 mRNA:注射后14 d,模型组平均表达量高于空白组,差异具有统计学意义(P<0.05),猪苓汤组在灌胃2、4、6、8周时AQP2 mRNA平均表达量均低于模型组(P<0.05);(3)AQP2蛋白:注射后14 d,模型组平均表达量高于空白组,差异具有统计学意义(P<0.05),猪苓汤组在灌胃4、6、8周时AQP2蛋白平均表达量均低于模型组(P<0.05)。结论:猪苓汤的利尿作用可能通过下调AQP2 mRNA和蛋白表达而实现。     

没食子提取物对IgAN大鼠尿液及肾组织IL-6表达的影响

目的:通过比较观察没食子提取物(turkish galls extract,TGE)对Ig A肾病(Ig A nephropathy,Ig AN)大鼠IL-6水平的影响,探讨其主要的作用机制。方法:成功建立Ig AN大鼠后随机分为TGE高、中、低剂量组(300 mg/kg、150 mg/kg、75 mg/kg),设正常组及Ig AN未干预组作为对照,每组各20只。应用尿沉渣镜检法测定各组大鼠尿红细胞;应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定尿液IL-6含量;免疫组化法测定大鼠肾组织IL-6表达;观察各组大鼠肾脏病理改变。结果:与正常对照组相比,各Ig AN组大鼠尿红细胞、尿液及肾组织IL-6水平明显升高,差异有统计学意义(均P0.05);与Ig AN未干预组相比,高剂量组上述指标下降最显著,差异有统计学意义(均P0.05);各Ig AN组大鼠均出现不同程度肾组织病变,以高剂量组病变最轻微。结论:TGE可以减少尿液及肾组织IL-6的表达,减轻肾组织病理改变,起到保护肾脏作用。     

钙敏感受体活性改变对大鼠泌尿系草酸钙结石形成的影响

目的探讨钙敏感受体（CaSR）活性改变对草酸钙结石形成的影响。方法在实验期间给予乙二醇和氯化铵诱导雄性SD大鼠产生泌尿系草酸钙结石。在造模期间给予不同剂量的CaSR抑制剂（NPS-2390）。实验结束时检测各组大鼠血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、血磷、血钙、血镁、PTH的含量、24h尿量、尿pH值、尿钙、镁、尿草酸的分泌量,显微镜下观察肾组织切片中草酸钙结晶沉积及病理变化情况及肾脏中CaSR表达情况。从而评价CaSR活性的改变对泌尿系结石形成的影响。结果成石对照组大鼠血BUN、Cr、尿草酸、尿钙较空白组明显升高并且有大量结晶形成,表明建模成功。CaSR抑制剂组较成石对照组甲状旁腺激素（PTH）的分泌增加并且血Ca2＋升高尿钙升高。肾组织病理学检查显示CaSR抑制组的肾脏组织中的草酸钙结晶较成石对照组明显增加,组织病理损伤也较重。结论肾脏中及甲状旁腺中CaSR的表达下降可以导致草酸钙结晶的形成增加。     

糖尿病肾病大鼠肾脏cbfa1表达与钙化的关系

目的:探讨糖尿病肾病大鼠肾脏钙化与骨分化核心结合因子1(cbfa1)表达的关系。方法:用链脲佐菌素诱导糖尿病肾病大鼠模型,并以正常大鼠作为对照组,于第3、6月末分别采用Von Kossa染色观察肾脏钙盐沉积、肾脏免疫组化、RT-PCR、Wester Blot法观察肾脏cbfa1的表达水平。结果:糖尿病肾病大鼠肾脏有cbfa1的表达,且与钙盐沉积程度有关。正常大鼠肾脏没有发现cbfa1的表达。结论:糖尿病肾病晚期时肾脏出现钙盐沉积,肾脏cbfa1的表达水平与钙盐沉积程度呈正相关。     

高血糖在高草酸尿环境下促进肾草酸钙结石形成的机制研究

目的通过细胞及动物实验,探究高血糖促进草酸钙结石形成的机制。方法八周龄Wistar雄性大鼠(共40只)随机分为4组:阴性对照组、高草酸尿模型组,高血糖模型组,高血糖合并高草酸尿模型组;每组10只。采用q RT-PCR检测在含有不同浓度葡萄糖培养基下HK2细胞中OPN、MCP-1、Cbfa1、BMP-2 m RNA的表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测OPN与MCP-1在培养基中的浓度;钙盐染色检测各组大鼠肾组织中草酸钙结石晶体;细胞凋亡试验检测各组大鼠肾组织中肾小管上皮细胞凋亡。免疫组织化学染色法(IHC)检测OPN在各组大鼠肾组织中的表达;ELISA检测MCP-1在各组大鼠24小时尿液中的含量。结果高浓度葡萄糖环境中,HK-2细胞的OPN与MCP-1表达上调。高血糖合并高草酸尿模型组肾组织中有大量草酸钙沉积,大量肾小管上皮细胞凋亡,OPN表达显著增加,其尿液中MCP-1总量明显增加,与其他组相比有统计学差异(P0.05)。结论高血糖能促使肾小管上皮细胞炎症趋化因子OPN、MCP-1表达增加。在高草酸尿环境中,高血糖能促进肾小管上皮细胞凋亡及草酸钙结石形成。高血糖可能是通过炎症趋化因子加重局部炎症反应,促进肾小管上皮细胞凋亡及草酸钙结石形成。     

Raf激酶抑制蛋白调控NF-κB信号通路在糖尿病肾脏疾病发病中的作用及药物干预研究

目的 通过检测糖尿病肾脏疾病(DKD)大鼠肾组织Raf激酶抑制蛋白(RKIP)与NF-κB的表达,研究利妥昔单抗(RTX)对DKD大鼠肾组织RKIP表达的影响.方法 SD大鼠按随机数字表法分为正常组、DKD模型组、RTX治疗组(2周组、4周组),各20只.常规法检测血糖及24 h尿蛋白量.Western印迹法检测各组RKIP的表达.免疫组化观察RKIP和NF-κB的表达.结果 DKD模型组血糖及24 h尿蛋白升高(均P＜0.01),大鼠肾小球NF - κB表达显著增高(P＜0.01),RKIP表达降低(P＜0.05).与模型组比较,RTX治疗组大鼠RKIP表达增高(P＜0.05),24 h尿蛋白和肾小球NF-KB表达下降(均P＜0.05).DKD模型组NF-κB与RKIP表达呈负相关.结论 RKIP调节NF-KB途径可能在DKD发生发展中有重要作用.RTX在DKD中可能有一定的治疗作用.     

Sodium thiosulfate attenuates high phosphorous induced vascular calcification in rats with 5/6 nephrectomy

Objective To observe the expression of Klotho and Na+/Pi cotransporter in high phosphorous-induced rats with 5/6 nephrectomy and its relationship with vascular calcification, as well as to investigate the effect of early intervention by sodium thiosulfate (STS) on the progression of vascular calcification. Methods Either 5/6 nephrectomy (n=21) or sham operation (n=14) was conducted on 35 Sprague Dawley rats, who were then fed with high phosphorus (HP) diet or normal phosphorus (NP) diet for 16 weeks respectively. The rats were divided into 5 groups as follows: (1) remnant kidney rats receiving HP diet (NHP, n=7), (2) remnant kidney rats receiving NP diet (NNP, n=7), (3) sham operation rats receiving NP diet (SNP, n=7), (4) sham operation rats receiving HP diet (SHP, n=7), (5) remnant kidney rats receiving HP diet with STS (THP, n=7). The treatment group was given STS intraperitoneally three times a week for 16 weeks. At the end of the 16th week, rats tail artery blood pressures were tested, serum creatinine (Scr), calcium (Ca2+), phosphorus (P3+), FGF23, iPTH and urine protein were examined. Throacic aorta and kidney were then removed. Vascular calcification was confirmed by Von kossa staining. Klotho and Pit-1 expression in aortas were determined by immunohistochemistry. Renal lesion was determined by PASM-Masson staining. Renal Klotho and NaPi-2a mRNA were determined by real time RT-PCR. Results After 16 weeks, Scr, P3+, FGF23, iPTH, uric protein and blood pressure were significantly higher in NHP than those in SNP rats (all P＜0.05). PASM-Masson staining revealed typical renal pathology of chronic renal failure in NHP group. With the treatment of STS, THP rats showed significant decrease in Scr, P3+, FGF23, iPTH, uric protein and blood pressure by comparison with NHP group (all P＜0.05). Significant vascular calcification was found in NHP group while NNP and SHP group occasionally had vascular calcification; THP group had marked alleviation of vascular calcification. The aorta and renal expression of Klotho decreased remarkably while expression of Pit-1 and NaPi-2a increased significantly in NHP compared with SNP group (all P＜0.05). Accordingly, the aorta and renal expression of Klotho increased and Pit-1 and NaPi-2a decreased significantly in THP compared with NHP group (P＜0.05). Conclusions The early intervention of sodium thiosulfate might regulate Klotho and Na+/Pi cotransporter expression in both aorth and kidney, decreasing serum phosphate, delaying progression of vascular calcification and improving renal function.     

Levels of Retinol and Retinyl Esters in Plasma and Urine of Dogs with Urolithiasis

Vitamin A (VA) deficiency and Tamm‐Horsfall glycoprotein (THP), a protein that binds retinol and retinyl esters in canine urine, might be involved in the pathogenesis of urolithiasis in dogs. In the present study, we assessed levels of retinol, retinyl esters, retinol‐binding protein (RBP) and THP in plasma and urine of dogs with a history of urolithiasis (n = 25) compared with clinically healthy controls (n = 18). Plasma retinol concentrations were higher in dogs with uroliths of struvit (P < 0.01), calcium oxalate (P < 0.05), urate (P < 0.01) and cysteine, but there were no differences in the concentrations of plasma RBP and retinyl esters. Excretion of urinary retinol and retinyl esters were tentatively, but not significantly higher in the stone‐forming groups, which was accompanied by increased levels of urinary RBP (P < 0.01) and lower excretions in THP (P < 0.01). The results show that VA deficiency may be excluded as a potential cause for canine urolithiasis. However, the occurrence of RBP and a concomitant reduction of THP in urine indicates a disturbed kidney function as cause or consequence of stone formation in dogs.     

补肾益髓中药复方对去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达的影响

目的观察去卵巢骨质疏松症大鼠骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达,探讨绝经后骨质疏松症(Postmenopausal Osteoporosis,PMOP)的发病机制以及补肾益髓中药复方的疗效机理。方法去卵巢复制骨质疏松症大鼠模型,实验设正常组、模型组、假手术组、补肾益髓中药复方组、钙尔奇D组、骨疏康组。术后7d开始灌胃给药12周。应用XR-36型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,应用OLYMPUS BX51显微镜观察股骨头石蜡切片HE染色显微形态结构,实时定量RT-PCR及Western Blot检测骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达。结果 (1)与正常组、假手术组比较,模型组股骨骨密度明显降低(P0.001、P0.05),骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达明显降低(P0.001)。(2)与模型组比较,补肾益髓中药复方组、骨疏康组股骨骨密度明显升高(P0.05),补肾益髓中药复方组(P0.001)、钙尔奇D组(P0.05)、骨疏康组(P0.01)骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达明显上调。(3)与钙尔奇D组、骨疏康组比较,补肾益髓中药复方组骨组织Runx2 mRNA(P0.01、P0.05)及蛋白(P0.001)表达均明显升高。(4)股骨头石蜡切片HE染色显微形态结构:与正常组、假手术组比较,模型组骨小梁形态结构完整性差,有些部位破坏、断裂,余留骨重建空间较多;各给药组骨小梁形态结构均改善,结构较紧密,余留骨重建空间减少,其中以补肾益髓中药复方组改善最明显。结论骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达降低可能是PMOP的发病机制之一;补肾益髓中药复方可能通过上调骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达有效防治PMOP,其作用优于钙尔奇D、骨疏康。     

雌激素对去势骨质疏松症大鼠骨密度和骨代谢影响的实验研究

目的研究雌激素对去势骨质疏松症模型大鼠骨密度(bone mineral density,BMD)和骨代谢的影响,并探讨其治疗骨质疏松症的机制。方法将48只雌性SD大鼠随机分配成对照组、模型组、雌激素组和雌激素+三苯氧胺组,每组12只。除对照组外,其他各组大鼠采用双侧卵巢摘除法制备骨质疏松症模型。雌激素组给予尼尔雌醇(1 mg/kg)灌胃,1次/周;雌激素+三苯氧胺组给予尼尔雌醇(1 mg/kg)和三苯氧胺(3 mg/kg)灌胃,1次/周;对照组和模型组分别使用等量生理盐水灌胃,均持续3个月。3个月后取材,检测大鼠左侧股骨BMD和股骨骨矿物盐含量、血清钙含量以及胫骨中骨骼钙含量;酶联免疫法检测大鼠血清碱性磷酸酶(alkaline phosphates,ALP)、血清抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(tartrate resistant acid phosphatase-5b,TRAP-5b)的含量;免疫组化检测大鼠胫骨中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)蛋白的表达情况。结果治疗前,与对照组比较其他各组血清钙含量和血清TRAP-5b含量均显著升高(P0.05),骨钙含量、BMD和骨矿物盐含量显著降低(P0.05),血清ALP含量无显著性变化(P0.05);治疗后,与模型组比较雌激素组血清钙含量、血清TRAP-5b含量以及胫骨组织RANKL蛋白表达均显著降低(P0.05),骨钙含量、血清ALP含量、BMD、骨矿物盐含量以及胫骨组织OPG蛋白表达均显著升高(P0.05),而治疗后,与模型组比较雌激素+三苯氧胺组各项指标变化差异无统计学意义(P0.05)。结论雌激素通过显著性提高去卵巢骨质疏松模型大鼠骨骼钙、ALP、股骨骨密度、骨矿物盐以及OPG的含量,抑制骨钙流失、TRAP-5b及RANKL蛋白表达,达到改善骨质疏松的作用。     

腺苷酸环化激酶-雷帕霉素靶蛋白信号通路参与小鼠急性肾损伤的机制研究

目的 探讨腺苷酸环化激酶(AMPK) 雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路参与小鼠急性肾损伤的机制。方法 将健康雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组及SB2111组,每组各10只。模型组与SB2111组小鼠采用脂多糖(LPS)建立急性肾损伤模型,对照组以等剂量的生理盐水代替。SB2111组另外给予经腹腔右侧注射2 mL AMPK阻断剂SB2111治疗。观察与记录三组小鼠的一般状况、病理特征并检测肾功能情况。结果 模型组与SB2111组的体重都显著少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组的肾脏重量大于对照组(P<0.05),而SB2111组的肾脏重量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。模型组与SB2111组的24 h尿蛋白、血肌酐、血尿素氮均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而SB2111组的24 h尿蛋白、血肌酐、血尿素氮均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组肾小管上皮细胞胞质丰富,肾组织的肾小球和肾小管结构正常;模型组肾小球充血肿胀、肾小管腔有管型形成;SB2111组部分肾小球充血,近端肾小管上皮细胞轻度肿胀,出现少量炎症细胞浸润。模型组与SB2111组的肾组织TNF-α、TGF-β1水平与AMPK、mTOR相对表达水平都显著高于对照组,而SB2111组的肾组织TNF-α、TGF-β1水平与AMPK、mTOR相对表达水平均低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 AMPK-mTOR信号通路在小鼠急性肾损伤中呈现激活状况,抑制AMPK-mTOR信号通路的表达能抑制TNF-α和TGF-β1的表达水平,促进小鼠肾功能的恢复。     

狼疮性肾炎患者血浆与肾组织抗中性粒细胞胞浆抗体的表达

目的探讨抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）在狼疮性肾炎（LN）患者血浆及肾组织中的表达及其意义。方法回顾性分析40例LN患者的临床资料及ANCA检测结果,按。肾脏病变活动性评分、系统性红斑狼疮疾病活动性指数（SLEDAI）评分、尿蛋白含量进行分类统计。结果血浆ANCA阳性率为37.5％,肾组织ANCA阳性率为42.5％,两者呈正相关性（r=0.765,P=0.013）,但无统计学差异。肾脏活动性病变组的血浆ANCA和肾组织ANCA阳性率均高于肾脏慢性化病变组（P〈0.05,P〈0.01）,高尿蛋白组肾组织ANCA阳性率明显高于低尿蛋白组（P〈0.01）。结论ANCA可作为判断狼疮性肾炎（LN）肾脏病变及临床活动性的重要参考指标。     

补肾化痰方对去势骨质疏松大鼠钙沉积的影响

目的观察补肾化痰方对去势骨质疏松大鼠钙沉积的影响。方法 6月龄SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只,即假手术组、模型组、补肾化痰组和补肾组。采用micro CT检测大鼠的骨密度((bone mineral density,BMD),酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清胎球蛋白(fetuin-A)、基质gla蛋白(matrix gla protein,MGP)水平,蛋白质印迹法(Western blot,WB)检测骨组织Fetuin-A、MGP蛋白的表达,免疫组化(immunohistochemical,IHC)检测其定位。结果与假手术组相比,模型组、补肾化痰组及补肾组的BMD均降低,血清Fetuin-A、MGP水平及骨组织Fetuin-A水平均降低,骨组织MGP水平升高,差异有统计学意义(P0.001);与模型组相比,补肾化痰组及补肾组的BMD均升高,血清Fetuin-A、MGP水平及骨组织Fetuin-A水平均升高,而骨组织MGP水平降低,差异有统计学意义(P0.001);补肾化痰组与补肾组相比较,补肾化痰组血清Fetuin-A、MGP水平升高明显,差异有统计学意义(P0.001),而两组的BMD、骨组织Fetuin-A、MGP含量则没有明显的差异(P0.05)。结论补肾化痰方能够影响血清胎球蛋白-基质gla蛋白-钙磷矿化复合物的形成,从而改善钙沉积,促进骨矿化,起到防治骨质疏松的作用。