雪莲花醇提物对大鼠组织和红细胞的抗氧化活性

 目的研究雪莲花醇提物(ESLHM)的抗氧化活性。方法用·HO生成系统Fe²⁺维生素C诱导大鼠心、肝、肾组织匀浆脂质过氧化,用TBA比色法测定MDA含量;用NBT还原法测酵母多糖A刺激大鼠中性粒细胞产生的O₂^-;用分光光度法测H₂O₂诱发的大鼠红细胞溶血度。结果对照组大鼠心、肝、肾匀浆经Fe²⁺+维生素C溶液诱发后MDA含量较空白组升高(P<0.01),中性粒细胞受酵母多糖A刺激后O₂^-生成较空白组升高(P<0.01),红细胞经H₂O₂诱发后溶血度较空白组升高(P<0.01)。而6.3,12.5,25,50,100,200μ·L^-1 ESLHM能不同程度抑制Fe²⁺维生素C诱导的大鼠心、肝、肾脂质过氧化产物MDA生成,其抑制心、肝、肾MDA生成的IC₅₀分别为29.4,32.9,31.4 μg·L^-1,其量效关系均呈负相关,相关系数分别为-0.905, -0.912,-0.908,相关性检验P值均<0.01;能不同程度抑制酵母多糖A刺激中性粒细胞生成O₂^-,其抑制中性粒细胞生成O₂-的IC₅₀为24.6 μg·L^-1,其量效关系呈负相关,相关系数为-0.887(P<0 01);能不同程度抑制H₂O₂诱发的红细胞氧化溶血,其抑制红细胞氧化溶血的IC₅₀为57.6μg·L^-1,其量效关系呈负相关,相关系数为-0.905(P<0.01),.结论雪莲花醇提物通过清除·HO,O₂^-及H₂O₂发挥抗氧化活性。     

异丹叶大黄素的体外抗氧化作用

 目的 异丹叶大黄素(isorhapontigenin, ISOR)是从中药射干中提取的化学成分,是与白藜芦醇化学结构相似的芪衍生物。通过多种模型研究ISOR的体外抗氧化作用。方法 采用Fe²⁺-半胱氨酸（Cys）、VitC-ADP-Fe²⁺和H₂O₂等自由基发生系统诱发大鼠肝微粒体、脑线粒体及突触体的氧化损伤,观察ISOR对此过程中MDA生成、GSH降低及超微弱化学发光增强的影响,并观察ISOR对用CuSO₄-Phen-VitC-H₂O₂系统损伤DNA后8-OH-dG的特征性超微弱化学发光增强影响。结果 ISOR能显著抑制Fe²⁺-Cys诱导的大鼠肝微粒体、脑线粒体及突触体膜氧化损伤过程中MDA的生成,并能显著抑制H₂O₂ 诱导的脑线粒体及突触体GSH的降低;显著抑制VitC-ADP-Fe²⁺系统引起的微粒体膜氧化损伤时超微弱化学发光增强,并能显著降低DNA受氧化损伤后微弱化学发光的强度。经典抗氧化剂VitE 10^-4mol·L^-1抑制MDA生成及GSH降低的作用仅相当于ISOR10^-5或10^-6 mol·L^-1的效果。结论 ISOR具有较强的抗氧化作用,且其活性明显强于经典抗氧化剂VitE。     

天麻乙酸乙酯提取物对PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的: 探讨天麻乙酸乙酯提取物对氧化损伤神经细胞的保护作用,并初步探讨其保护机制。 方法: 以过氧化氢（50~100 μmol·L^-1）预孵PC12细胞2 h造成的细胞氧化应激损伤模型,通过观察细胞形态,测定细胞存活率（MTT法）、乳酸脱氢酶（LDH）泄漏率、细胞内活性氧（ROS）水平和总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性探讨了天麻乙酸乙酯提取物对PC12细胞氧化损伤的保护作用。 结果: 天麻乙酸乙酯提取物（20 mg·L^-1）能明显改善H₂O₂氧化损伤PC12模型细胞的形态,提高细胞存活率14.7%（P<0.01）;天麻乙酸乙酯提取物（20,40,80 mg·L^-1）降低模型细胞LDH泄漏率分别为22.0%,29.3%,20.2%（P<0.01）,明显提高细胞内T-SOD的活性（P<0.01）;天麻乙酸乙酯提取物（80 mg·L^-1）还降低细胞内ROS水平（P<0.01）。 结论: 天麻乙酸乙酯提取物在体外具有抗氧化损伤的作用。     

红花黄色素抗氧化作用的研究

目的 :观察红花黄色素 (SY)的抗氧化作用。方法 :以邻二氮菲-Fe²⁺ 氧化法检测SY清除H₂O₂ /Fe²⁺ 体系产生的羟自由基 ;硫代巴比妥酸比色法观察小鼠肝匀浆的脂质过氧化 ;比色法观察H₂O₂ /Fe²⁺ 体系产生的羟自由基致红细胞膜的破裂。结果 :1.39～ 3.4 2g·L^-1SY的羟自由基清除率为 27.2 %～ 100 % ,呈明显量效关系 ;77.8～776 .1mg·L^-1SY缓解小鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制率为 10 .5 %～ 92 .8% ,呈明显的量效关系 ;37.1～ 2 97.1mg·L^-1SY抑制羟自由基引发的红细胞破裂呈明显的量效关系。结论 :SY为红花水溶性抗氧化有效部位。     

川芎嗪烟酸酯对神经细胞氧化损伤的保护作用

 目的观察川芎嗪烟酸酯(TMPN)对H₂O₂引起的体外培养大鼠脑皮层神经细胞及人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)氧化性损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法H₂O₂诱导体外培养大鼠脑皮层神经元及SH-SY5Y细胞进入氧化应激状态,观察TMPN对神经细胞氧化损伤的保护作用。结果TMPN能显著升高氧化损伤神经细胞的存活率,减少乳酸脱氢酶(LDH)的漏出,对H₂O₂诱导的神经细胞内游离钙浓度([Ca²⁺]_I)的升高有明显的抑制作用,并能减少胞内脂质过氧化物丙二醛(MDA)的生成,提高谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结论TMPN可以有效保护活性氧对培养大鼠脑皮层神经元及SH-SY5Y细胞的氧化损伤,维持细胞的正常生理功能,其机制可能与TMPN抑制H₂O₂诱导的[Ca²⁺]_I异常升高,减少脂质过氧化物生成,增加抗氧化物质的含量有关。     

马齿苋总黄酮对氧自由基引发人红细胞膜损伤的保护作用

 目的研究马齿苋总黄酮对超氧阴离子(O₂^-)引发的人红细胞膜氧化损伤的保护作用。方法 采用邻苯三酚自氧化产生的O₂^-引发人红细胞膜氧化损伤模型,研究马齿苋总黄酮对红细胞膜氧化损伤的影响。结果O₂^-能引起红细胞膜脂质过氧化,丙二醛(MDA)含量、自氧化速率显著增加,膜脂流动性及膜封闭度下降。而红细胞膜经一定量马齿苋总黄酮(60,120,240,480μg·mL^-1)预先处理后,膜MDA含量明显减少,自氧化速率明显降低,膜脂流动性和膜封闭度显著增高。结论马齿苋对氧自由基引发的人红细胞膜氧化损伤有一定的保护作用。     

红车轴草总黄酮体外抗氧化作用的研究

 目的 探讨红车轴草总黄酮体外抗氧化作用。 方法 采用分光光度法测定 H₂O₂ 诱导红细胞溶血作用，用 2- 硫代巴比妥酸法测定小鼠红细胞膜脂质及肝组织匀浆脂质过氧化产物丙二醛（ MDA ）含量。 结果 红车轴草总黄酮在 0.2~1.6 mg·L^-1 内能抑制 H₂O₂ 诱导红细胞溶血和红细胞膜脂质过氧化作用， IC₅₀ 分别为 0.93 及 0.92 mg·L^-1 ，均呈较好的量效关系；红车轴草总黄酮在 4~32 mg·L^-1 内能抑制肝组织脂质过氧化产物的形成， IC₅₀ 为 17.5 mg·L^-1 。 结论 在一定浓度范围内红车轴草总黄酮体外具有明显的抗氧化作用。     

总丹酚酸和银杏叶提取物对血管平滑肌细胞保护作用的比较

 目的对丹参水溶液提取物总丹酚酸和银杏叶提取物EGb761对血管平滑肌细胞损伤的保护作用进行了比较研究。方法选用培养的10～20代大鼠血管平滑肌细胞用于实验研究。细胞用H₂O₂2(100μmol·L^-1)处理1h造成细胞氧化损伤模型，采用MTT方法观察总丹酚酸和EGb761对H₂O₂损伤细胞生存率的影响，同时以乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)3种物质变化作为指标，观察了总丹酚酸和EGb761对H₂O₂损伤血管平滑肌细胞的保护作用。结果总丹酚酸100，10 μg·mL^-1能显著提高细胞的存活率，而总丹酚酸1μg·mL^-1和EGb761 100，10，1μg·mL^-1对细胞的存活率没有明显的升高作用；总丹酚酸100 μg·mL^-1，EGb761 100，10，1 μg·mL^-1均能显著降低H₂O₂损伤细胞上清液中LDH 的量，总丹酚酸10，1 μg·mL^-1作用不显著；EGb761 100，10 μg·mL^-1能明显降低细胞上清中MDA的量，EGb761 1 μg·mL^-1及总丹酚酸100，10，1μg·mL^-1作用不明显；总丹酚酸100，10，1 μg·mL^-1和EGb761 100，10 μg·mL^-1明显降低H₂O₂损伤引起NO的释放。结论总丹酚酸和EGb761对H₂O₂损伤的血管平滑肌有保护作用，但作用机制似乎有所不同，需要做进一步研究。     

神经节苷脂对染砷人脑皮层神经元的保护作用

 目的研究神经节苷脂对As2O3体外干预的皮质神经元的保护作用及可能机制。方法将人原代脑皮质神经细胞分为 5组,空白对照组、5 μmol·L^-1 As₂O₃干预组和5μmol·L^-1 As₂O₃加神经节苷脂50,100,200 μg·L^-1组,Fluo-3/AM荧光探针标记皮质神经元胞浆钙([Ca²⁺]i),激光共聚焦显微镜实时测定[Ca²⁺]_i的变化。磷基转移法测定细胞膜和胞浆的蛋白激酶C(PKC) 的活性。流式细胞仪检测细胞凋亡百分比。结果 5 μol·L^-1的As₂O₃,作用3 min,[Ca²⁺]_i开始升高,并随时间延长逐渐明显,As₂O₃加神经节苷脂200 μg·L^-1,作用9 min,[Ca²⁺]i才开始升高,且程度远没有As2O3组明显。5 μmol·L^-1的As₂O₃组的 PKC活化程度明显高于As₂O₃加神经节苷脂组,以细胞膜相明显。24 h凋亡率分别为:As₂O₃组78.5%,As₂O₃加神经节苷脂 200μg·L^-1组13.5%。结论神经节苷脂抑制As₂O₃引起的皮质神经元的[Ca²⁺]i升高和PKC活化,抑制细胞凋亡。并通过对细胞膜靶点的保护来实现对神经细胞的保护作用,这进一步证明砷剂最初的作用靶点是细胞膜。     

肉苁蓉总苷体外清除自由基及对OH·引发的DNA损伤的保护作用

 目的研究肉苁蓉总苷体外清除自由基作用及对OH·引起的DNA损伤的保护作用。方法采用现代生物化学发光技术,检测肉苁蓉总苷对O₂,OH·,H₂O₂等自由基的清除作用。并通过Cu²-Phen-H₂O₂-VitC-DNA发光体系研究肉苁蓉总苷对OH．引起的DNA氧化损伤的保护作用。结果肉苁蓉总苷对O₂,OH·,H₂O₂活性氧自由基均有清除作用。其50%抑制浓度( IC₅₀)分别为0.0731,7.031,0.098,0.1254mg·mL^{-1。对DNA化学发光的IC50为0.4211ug·mL-1。结论实验结果表明,肉苁蓉总苷能有效地清除各种活性氧自由基,能保护OH·引发的DNA氧化损伤。}     

阿魏酸和芍药苷混合剂对PC12细胞损伤的影响

目的观察阿魏酸和芍药苷混合剂对FeSO4和H2O2诱导的PCI2细胞损伤的影响，初步探讨其作用机制。方法采用FeSO4和H2O2作用产生自由基的方法诱导建立PC12细胞损伤模型。倒置相差显微镜进行细胞形态学观察；采用MTT比色分析测定细胞存活率；硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量；黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果与FeSO4和H2O2损伤组进行比较，阿魏酸和芍药苷的混合剂能明显改善PC12细胞的存活数量，降低MDA的含量和提高SOD活性。结论浓度为5～50μmol／L的阿魏酸和浓度为1～10μmol／L的芍药苷混合剂对FeSO4和H2O2诱导PC12细胞损伤有明显的保护作用，其作用机制可能与阿魏酸和芍药苷清除自由基和抑制脂质过氧化有关。     

Inhibition of Corydalis decumbens Alkaloids on Hydrogen Peroxide- induced Apoptosis of PC12 Cells through Down-regulating Caspase-3 Expression

Objective To extract alkaloids from Corydalis decumbens(AsCD) by supercritical CO2 fluid extraction(SFE) and to evaluate protective effects of AsCD against hydrogen peroxide(H2O2)-induced apoptosis in rat PC12 cells. Methods AsCD were extracted by SFE and oxidative damage PC12 cells model was induced by H2O2.The survival rate of the cells was determined by MTT assay;Lactate dehydrogenase release was determined by ultraviolet spectrophotometry;Flow cytometry was used to detect apoptosis;Caspase-3 mRNA and protein were determined by real-time PCR and Western blotting assay,respectively.Results AsCD remarkably reduced the cytotoxicity, prevented membrane damage,and inhibited cell apoptosis.AsCD inhibited Caspase-3 mRNA and protein expression induced by H2O2 in PC12 cells.Conclusion AsCD possess protective effects against H2O2-induced apoptosis in PC12 cells,and the mechanism of AsCD responsible to the inhibition of apoptosis is possibly attributed to the down-regulating Caspase-3 expression.AsCD might be useful in the treatment of oxidative stress-related neurodegenerative diseases.     

Neuroprotective effects of Hypericum perforatum on trauma induced by hydrogen peroxide in PC12 cells

The standard extracts of Hypericum perforatum L. (SEHP), a well-known medicinal plant, are used for the treatment of depression, exhibited upgrading and significant protective effects on the trauma of PC12 cells induced by 200 microM H2O2 in a dose-dependent manner within 24-hour treatment. Cell viability was assessed by the MTT method, and in situ cellular hydrogen peroxide (H2O2)-induced oxidative stress was examined by measurement of reactive oxygen species (ROS) formation using CDCFH procedures. Intra- and extra-cellular ROS levels decreased significantly to 71.9% and 50.0% of the control at a moderate concentration of 20 microg/ml, respectively, suggesting that SEHP could easily enter the cells and play important roles in reducing ROS levels. Our results were proved by detection of DNA fragmentation and inspection of cell morphology of PC12 cells. SEHP can obviously block DNA fragmentation and prevent the cells from shrinking and turning round of H2O2-induced apoptosis in PC12 cells at concentrations of 10 approximately 100 microg/ml. This data suggests SEHP may be a candidate for application in neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease or Parkinson's disease.     

远志皂苷对H2O2诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的：观察远志皂苷（Tenuigenin TEN）对过氧化氢（H202）所致PCI2细胞损伤的保护作用。方法：以H2O2损伤PCI2细胞为氧化应激损伤模型，MTT法检测细胞存活率；采用紫外分光光度法测定LDH漏出量，观察细胞的损伤程度；硫代巴比妥酸法测定MDA含量，黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性。结果：TEN能明显改善H：0：导致的细胞损伤，与H2O2处理组相比，20、10mg／L组可使细胞存活率升高，LDH漏出量明显降低，降低MDA含量，提高SOD活性。结论：TEN对H2O2诱导的PCI2细胞损伤具有明显的保护作用。     

鹿茸提取物体外抗氧化作用

目的：研究鹿茸提取物的体外抗氧化作用。方法：测定鹿茸提取物对NADPH-维生素c和Fe^2 -半胱氨酸系统诱发的微粒体脂质过氧化反应(MDA形成)的影响，及对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统超氧阴离子自由基(O2^-.)产生(还原型细胞色素C形成)的影响。结果：鹿茸提取物在体外能明显抑制NADPH-维生素C和Fe^2 -半胱氨酸系统诱发的大鼠脑、肝、肾微粒体脂质过氧化反应(MDA形成)，及黄嘌呤黄嘌呤氧化酶系统O2^-.的产生(还原型细胞色素C形成)。结论：鹿茸提取物具有抗氧化作用。     

13种巴基斯坦草药对PC12细胞保护作用的研究

目的:选择13种巴基斯坦传统草药,观察其对PC12细胞增殖的影响,并探讨其对H2O2、谷氨酸诱导PC12细胞损伤的保护作用,为寻找神经细胞保护作用新药提供实验依据。方法:体外培养PC12细胞,应用不同浓度的H2O2、GLU,分别建立神经细胞损伤模型,采用MTT法检测细胞存活率。结果:虎爪豆、诃子等能明显促进PC12细胞增殖作用(P<0.05);在H2O2 150μmol.L-1损伤模型中,药物组和模型组相比,罗勒、仙人掌、芦笋、灯油藤、诃子等能显著减轻H2O2的细胞损伤作用(P<0.05);在GLU 30mmol.L-1诱导PC12细胞损伤,与模型组比较,凤仙花、仙人掌、虎爪豆、诃子等均显示出损伤保护作用(P<0.05)。其中,诃子不仅能促进PC12细胞增殖,且在两种PC12细胞损伤模型中均具有较强的损伤保护作用。结论:具有促进PC12细胞增殖的药物为诃子、罗勒、虎爪豆;具有对抗H2O2损伤作用的药物有:诃子、凤仙花、仙人掌、芦笋、灯油藤、罗勒;具有减弱GLU诱导PC12细胞损伤的药物为:虎爪豆、诃子、凤仙花、仙人掌、芦笋、甘草;诃子在3种模型中均表现出较强的细胞损伤保护作用。本研究结果为神经退行性疾病药物的开发和选择提供了初步的实验依据。     

葡萄籽原花青素对原代培养海马细胞氧化应激的影响

目的:研究葡萄籽原花青素(GSP)对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠原代培养海马细胞氧化应激损伤的影响。方法:采用原代培养的方法,建立H2O2致海马细胞氧化损伤模型,观察细胞形态学变化;MTT法测定细胞活力;化学比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,以及活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量。结果:1 mmol/L的H2O2诱导海马细胞24 h,细胞活力下降(均P<0.01),细胞内ROS和MDA含量增加,SOD、CAT及GSH-Px活性下降。而GSP可明显减少细胞损伤,使细胞内SOD、CAT及GSH-Px活性增加,并减少细胞内ROS和MDA含量。结论:GSP对H2O2诱导的海马神经细胞氧化应激损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高海马细胞的抗氧化能力有关。     

Antioxidant and prooxidant properties of a polyphenol-rich extract from Geranium sanguineum L. in vitro and in vivo

A polyphenol-rich extract from Geranium sanguineum L. (PC) protected biological membranes due to its antioxidant capacity. PC caused a dose-dependent decrease of the osmotic hemolysis of human erythrocytes and increased their resistance against the toxic effect of H(2)O(2); no effect on catalase activity was observed. While PC reduced the accumulation of TBA-reactive products in rat liver microsomes in inducible lipid peroxidation (LPO), the non-induced LPO was not affected. Further the effect of PC on the products of LPO was investigated in the lungs, livers and sera of intact and influenza virus-infected mice (VIM). The infection enhanced LPO in the lungs and livers. In the group of PC-treated VIM, malondialdehyde (MDA) in the lungs and livers was brought to control levels. PC-treatment caused a significant increase of MDA in the lungs of intact mice, a slight one in the livers and did not affect MDA in the sera. Thus the extract exhibited prooxidant characteristics in intact animals as well as antioxidant properties in VIM. The reducing ability of PC on LPO could be an alternative mechanism of its protective effect in experimental influenza infection.     

菟丝子黄酮类组分对H2O2损伤PC12细胞的保护作用

目的：探讨菟丝子中黄酮类组分（CF）对氧化损伤的肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞（Pheochromocytoma，PC12）的保护作用及其可能的作用机制。方法：从菟丝子中提取纯化黄酮类活性成分（CF），采用MTT法检测细胞活力，DPPH测定CF在无细胞体系中对自由基的清除能力，利用Hoechst 33258染色和流式细胞仪技术对凋亡细胞进行形态观测和比例测定。结果：0．3～0．5mmol／L H2O2能够剂量与时间依赖性降低PC12细胞的存活率，诱导细胞凋亡。不同剂量CF预处理可提高PC12细胞存活率，明显抑制细胞的凋亡，降低细胞的凋亡比率；CF对DPPH自由基的清除率呈剂量依赖性增强。结论：CF对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用，其机制可能是通过清除自由基、提高抗氧化酶活性从而抑制细胞的凋亡。     

天然抗氧化剂对抗PC12细胞氧化损伤的实验研究

目的:研究五味子乙素(SchB)对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用及作用机制。方法:SchB与PC12细胞预培养24h后,加入H2O2处理,在倒置显微镜下观察细胞的形态改变,采用MTT法测定细胞生存率,采用单细胞凝胶电泳法测定DNA单链损伤,采用荧光法测定细胞内的谷胱甘肽(GSH)含量。结果:H2O2处理后细胞生存率明显降低,细胞内DNA单链损伤明显升高,而GSH含量明显降低。经SchB预培养的细胞生存率明显升高,细胞内DNA单链损伤明显减轻,GSH含量明显升高,其作用呈剂量依赖关系。结论:SchB对PC12细胞有明显的保护作用,其作用机制可能与提高GSH抗氧化系统的能力有关。