罗布麻叶黄酮类化合物的分离提取及对体外皮质酮损伤的保护作用评价

目的:应用高速逆流色谱分离提取罗布麻叶中的黄酮类化合物,并对所分离的成分进行定性和定量检测及抗抑郁活性评价。方法:以溶剂配比为乙酸乙酯-乙腈-水-醋酸(5∶0.8∶5∶0.02)作为制备型逆流色谱分离的溶剂系统,并利用高效液相色谱对所分离的成分进行定性和定量检测,用pc-12细胞进行抗抑郁活性评价。结果:应用高速逆流色谱技术一次性分离得到4个黄酮类单体化合物,分别为白麻苷、乙酰化金丝桃苷、三叶豆苷和紫云英苷,经高效液相色谱检测其纯度均达到95%,同时得到2个混合物组分,分别为金丝桃苷/异槲皮素组和槲皮素/山柰酚组。罗布麻叶单体黄酮及粗提物均具有抗抑郁活性。结论:应用高速逆流色谱分离单体化合物具有方法简单,方便快捷的特点,所分离的单体化合物抗抑郁活性较强,具备进一步开发的价值,且各单体化合物及组分的抗抑郁活性有一定的规律。     

分离青葙子中皂苷的一种新方法

目的:采用连接有蒸发光散射检测器的高速逆流色谱仪制备和分离青葙子中的2个皂苷青葙苷C(celosin C)和青葙苷D(celosin D)。方法:参考溶剂选择软件选择两相溶剂,并对从半制备型高速逆流色谱仪(HSCCC)收集到的组分进行HPLC-ELSD分析,确定其纯度。结果:两相溶剂以正丁醇-乙酸乙酯-甲醇-水(3.5∶3.5∶0.6∶10)+0.5%冰醋酸的分离效果最佳。青葙总皂苷经过一步分离纯化,得到celosin C和celosin D,二者纯度分别为99.4%和98.9%。结论:本文首次报道应用HSCCC法纯化青葙子中的皂苷类化合物,该实验也证实了HSCCC结合ELSD可以用于分离没有紫外吸收的天然化合物。     

高速逆流色谱分离酸枣仁中黄酮类化合物

目的:利用高速逆流色谱法对酸枣仁黄酮类成分进行分离研究。方法:以乙酸乙酯-正丁醇-水(3∶2∶5)为溶剂系统,流动相的流速为1.0 mL.min-1,主机转速为1500 r.min-1,检测波长360 nm,对酸枣仁中黄酮类化合物进行分离;利用HPLC法测定化合物的纯度;利用ESI-MS及参照文献确定了化合物的结构。结果:首次从酸枣仁粗提物中分离得到:酸枣仁黄酮碳苷、6-芥子酰酸枣仁黄酮碳苷及6-阿魏酰酸枣仁黄酮碳苷,应用HPLC检测,纯度均在90%以上。结论:利用高速逆流色谱法分离酸枣仁中黄酮类化合物,快速,简单,重复性好,分离样品纯度高。     

高速逆流色谱法分离纯化长春花中长春新碱

目的采用高速逆流色谱(HSCCC)分离纯化长春花中长春新碱,建立相关工艺条件,为工业生产提供参考数据。方法采用高速逆流色谱仪,氯仿-甲醇-0.3mol.L-1 HCl(4∶3∶2)溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,流动相流速为2.0mL.min-1,紫外检测波长为280nm,主机转速为800r.min-1,恒温循环温度为28℃。结果 HPLC检测HSCCC纯化后长春新碱质量分数为79.7%。结论高速逆流色谱纯化长春花中长春新碱容量大、分离纯度和效率高,避免了有机溶剂的大量使用,适用于工业生产高纯度产品。     

马钱子生物碱组分的提取和分离制备

目的建立马钱子生物碱组分的超声提取方法,研究其分离纯化工艺。方法以马钱子碱和士的宁含量为指标,采用均匀设计筛选马钱子生物碱的最佳超声提取工艺,并采用高速逆流色谱法分离其生物碱组分。结果最佳提取工艺为10倍量50%乙醇溶液(pH=5),在600 W功率下超声60 min;应用高速逆流色谱法,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(3∶5∶3∶5)为溶剂体系,分离得到纯度为94.1%的马钱子碱组分和纯度为92.5%的士的宁组分。结论本实验优选出的提取工艺稳定、经济、可行,高速逆流色谱适用于马钱子生物碱的分离纯化。     

采用高速逆流色谱法快速制备枳壳中高纯度柚皮苷和新橙皮苷的研究

目的 建立一种从枳壳中快速分离制备高纯度柚皮苷和新橙皮苷的方法.方法 以高速逆流色谱（High-speed counter-current chromatography,HSCCC）对枳壳大孔吸附树脂纯化物进行分离纯化,以乙酸乙酯∶正丁醇∶水（2：1：3）为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0ml/min,主机转速800r/min,检测波长280 nm.结果 按此分离条件经一步洗脱从500 mg枳壳粗提物中得到210 mg和122 mg纯度高于99%的柚皮苷和新橙皮苷.结论 该法操作简便、产品纯度高、适合于大规模制备.     

高速逆流色谱法分离忍冬叶中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷和忍冬苷

利用高速逆流色谱法(HSCCC),从忍冬叶粗提物(35.2 mg)中一步分离制备木犀草素-7-O-?-D-葡萄糖苷(1,7.9 mg)和忍冬苷(2,5.6 mg)。HPLC峰面积归一化法计算得化合物1和2的纯度为98.0%和92.1%。     

高速逆流色谱技术在丹参指纹图谱中的应用

中药材对后天环境依赖性很强因而质量不稳定,指纹图谱是中药质量控制的重要手段,本文提出用高速逆流色谱(HSCCC)法研究中药指纹图谱.用高速逆流色谱仪分离纯化3个批次的丹参脂溶性成分,选用正己烷-乙醇-水(10:5.5:4.5)体系,进行分步洗脱,固定相保留率达到78.8%,保证了系统的分辨率.3个丹参样品分别分离得到12个洗脱组分,经检测3份洗脱图谱中对应洗脱峰为同一组分,洗脱峰保留时间的相对标准偏差RSD均＜3%;不同批次样品中同一组分的相对含量有较大差异,说明HSCCC法可以体现中药化学成分浓度分布的状况.利用液-质联用仪将洗脱组分与3种主要活性成分的标准对照品进行比对,标定出指纹图谱中的峰7,8和11分别为隐丹参酮(Mw296.33)、丹参酮Ⅰ(Mw276.27)和丹参酮ⅡA(Mw294.19).研究表明HSCCC法作为指纹图谱研究方法具有可行性.     

Cu2+配位逆流色谱分离纯化抗霉素同系物

应用Cu2+配位逆流色谱对抗霉素发酵粗提物进行分离纯化研究,选择正己烷/甲醇/乙酸乙酯/水(5:3:2:2,V/V)为两相体系,以上相为固定相,下相为流动相进行分离纯化,用高效液相色谱仪测定单组份纯度.实验结果表明Cu2+配位逆流色谱可将抗霉素粗品分离纯化,得到9个纯度96％以上的抗霉素单组份,收率达60％以上.     

大孔吸附树脂-高速逆流色谱法分离纯化玄参中哈巴俄苷和斩龙剑苷A

目的 以玄参的干燥根为原料,建立大孔吸附树脂-高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化玄参中哈巴俄苷与斩龙剑苷A的方法。方法 玄参粗提物先经过大孔吸附树脂初步分离,富集目标化合物。然后以正丁醇-乙酸乙酯-水(1∶9∶10)为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,流速1.5 mL·min^-1,检测波长210 nm,利用制备型HSCCC分离纯化哈巴俄苷和斩龙剑苷A。结果 经过大孔吸附树脂-高速逆流色谱法分离后,一次性得到哈巴俄苷和斩龙剑苷A,经HPLC检测其纯度分别为98.1%和97.2%。经¹H-NMR和¹³C-NMR鉴定结构为哈巴俄苷和斩龙剑苷A。结论 该方法能够简便、高效地制备玄参中的哈巴俄苷和斩龙剑苷A。     

高速逆流色谱法分离纯化延胡索乙素和原阿片碱

目的确定高速逆流色谱法分离纯化延胡索乙素和原阿片碱的条件。方法采用TBE300A型高速逆流色谱仪,以分配系数和分相时间为依据设计一组溶剂体系,初步确定适宜的溶剂体系;根据高速逆流色谱出峰数目及分离度确定较佳的溶剂体系和工作条件,并测定所收集峰的各组分的纯度。结果石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(22∶25∶23∶17)为溶剂体系,流速为2.0 mL/min,仪器转速800 r/min,温度25℃,从延胡索总碱中可一步纯化得到原阿片碱和延胡索乙素,得率分别为16.9%和14.7%,纯度分别为99.3%和98.8%。结论该溶剂体系分离结果可靠,可作为延胡索乙素、原阿片碱化学对照品的制备分离方法。     

高速逆流色谱的原理及活性成份提取的进展

综述HSCCC的原理及从天然产物中提取活性成份的应用及进展:高速逆流色谱(high-speed countercurrent chroma-tography,HSCCC)是新型的液-液分配色谱技术。HSCCC利用多层螺旋管同步行星式离心运动,在短时间内实现样品在互不相溶的两相溶剂系统中的高效分配,从而实现样品分离。HSCCC在天然产物的分离方面具有很大的优势,此项技术已被应用于生化、生物工程、医药、天然产物化学、有机合成、环境分析、食品、地质、材料等领域。     

高速逆流色谱法分离制备化橘红中的柚皮苷、橙皮内酯水合物和异橙皮内酯

目的:建立高速逆流色谱法高效、快速分离制备化橘红中3个主要成分柚皮苷、橙皮内酯水合物、异橙皮内酯的新方法。方法:化橘红用9 5%乙醇超声提取,经石油醚(6 0~9 0℃)、二氯甲烷、正丁醇分级萃取初步分离,再进行高速逆流色谱分离。石油醚层所用的溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶1∶1∶1),二氯甲烷层所用的溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶2∶1∶2.5),正丁醇层所用两相溶剂体系为乙酸乙酯-正丁醇-水(4∶1∶5),高速逆流色谱仪转速8 5 7 r.min-1,所得产物的纯度经HPLC检测,结构经NMR和M S鉴定。结果:从化橘红粗提物中分离得到纯度高于9 8.0%的柚皮苷、橙皮内酯水合物,纯度高于9 5.0%的异橙皮内酯,得率均高于2 5%。结论:由该法从化橘红中制备柚皮苷、橙皮内酯水合物、异橙皮内酯简便、快速,所得产物纯度高,适合于其对照品的大规模制备。     

高速逆流色谱法分离纯化楤木总皂苷中的楤木皂苷A及活性研究

目的： 采用高速逆流色谱法（HSCCC）对楤木大孔树脂纯化所得总皂苷中的楤木皂苷A进行分离纯化并做体外抗血小板研究。方法： 采用75%乙醇渗滤提取楤木原药材，渗滤液经过大孔树脂纯化，所得总皂苷粉末作为高速逆流色谱分离的样品。采用TBE-300B型高速逆流色谱仪，以氯仿：甲醇：正丁醇：水（4：4：1：3.5）为溶剂体系进行分离纯化，采用两种逆流色谱操作模式（0~130 min为正接正转，体系下相流动；130~180 min为正接反转，体系上相流动，流动相流速为5.0 mL·min^-1，仪器转速为850 r· min^-1，温度为25℃）进行分离。采用二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）诱导小鼠体外血小板聚集，分别采用不同浓度HSCCC分离后的四号馏分处理，检测空白对照管与不同浓度的4号馏分给药管富血小板血浆在5 min内的最大聚集率，计算血小板聚集的抑制率。结果： 楤木大孔树脂提取物经过HSCCC一步纯化，得到的楤木皂苷A纯度为95.81%；分离所得楤木皂苷A呈浓度依赖的抑制ADP诱导的血小板聚集，最大抑制率达80%。结论： 利用大孔树脂富集总皂苷，HSCCC分离纯化总皂苷中的楤木皂苷A，为楤木皂苷A的分离纯化提供了一种新的简便、高效的途径。抗血小板活性研究表明HSCCC法分离得到的楤木皂苷A具有初步的抗血小板凝聚作用。     

高速逆流色谱分离纯化紫苏叶中迷迭香酸

目的:建立高速逆流色谱分离纯化紫苏叶中迷迭香酸的方法。方法:采用高速逆流色谱分离纯化紫苏叶乙酸乙酯萃取部分中迷迭香酸,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-0.5%醋酸水溶液(2∶5∶2∶5)为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0 mL.min-1,主机转速800 r.min-1,温度25℃。结果:每0.20 g紫苏叶乙酸乙酯萃取物经1次纯化,纯度为98.6%的迷迭香酸的得率约13%。结论:高速逆流色谱可高效分离纯化紫苏叶中的迷迭香酸。     

逆流色谱技术在抗生素分离纯化中的应用

本文对逆流色谱技术的起源、发展、应用和现状,特别对离心分配色谱(CPC)和高速逆流色谱(HSCCC)的原理以及它们在抗生素分离纯化等方面的应用作了比较全面的综述。介绍了溶剂系统在逆流色谱中的重要性以及如何选择溶剂系统。对梯度洗脱逆流色谱、pH区带逆流色谱、离子交换顶替离心分配色谱、手性分离逆流色谱和手性CCC&CPC反应器这些逆流色谱的新技术和新进展也进行比较详细的综述。     

高速逆流色谱法分离白葡萄皮中多酚类化合物

目的建立分离白葡萄皮中多酚类化合物的高速逆流色谱(high speed counter-current chromatography,HSCCC)方法。方法采用正己烷-乙酸乙酯-水(体积比为1:50:50)的溶剂系统对白葡萄皮多酚粗提物进行HSCCC分离,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(ultra performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight-mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS)对所得馏分进行定性分析,进一步采用制备液相分离制备多酚化合物单体。结果高速逆流分离得到3个馏分,经制备液相分离得到6个多酚化合物单体,经质谱鉴定和对照品对照鉴别为儿茶素(catechin,1)、表儿茶素(epicatechin,2)、山奈酚-3-O-葡萄糖苷(kaempferol 3-O-glucoside,3)、异槲皮苷(quercetin 3-O-glucoside,4)、fertaric acid(5)和槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷(quercetin 3-O-glucuronide,6),其中化合物6为首次采用HSCCC分离得到。结论所建立的高速逆流色谱方法适用于分离白葡萄皮中的多酚化合物。     

高速逆流色谱法分离纯化环孢菌素

应用高速逆流色谱法对环孢菌素的分离纯化进行研究，选择石油醚-丙酮-水(3：3：2，V／V)为两相体系，计算环孢菌素A、B、C、D在两相体系中的分配系数，以上相为固定相，下相为流动相进行高速逆流色谱分离纯化，高效液相色谱法测定单组分纯度。实验结果表明一次高速逆流色谱即可将环孢菌素粗品分离纯化，得到纯度98.5％以上的环孢菌素A,B,C,D单组分，收率达85％以上。     

黄酮类化合物的提取、分离、纯化研究进展

综述了黄酮类化合物提取方法（溶剂萃取法、超滤法、双水相萃取法、酶解法、超声波提取法、微波辅助萃取法、超临界流体萃取法）,分离纯化方法（柱层析法、大孔树脂吸附法、膜分离法、高效毛细管电泳法、高速逆流色谱分离法、高速离心分离法）,为研究黄酮类化合物提供参考。     

高速逆流色谱法结合高效液相色谱法制备紫锥菊根中烷基酰胺类化合物

目的建立紫锥菊中多种烷基酰胺类化合物高效稳定的制备分离方法。方法以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(2∶5∶5∶3)为溶剂体系,利用高速逆流色谱对紫锥菊根石油醚萃取物进行纯化,再经制备液相分离获得各单体化合物,根据MS、1H NMR、13C NMR波谱信息确定化学结构。结果获得纯度分别为94.43%,96.80%,98.89%,98.22%,96.42%,98.70%,93.28%和95.30%的8个烷基酰胺类化合物。结论高速逆流色谱和制备液相色谱联用技术可高效制备分离紫锥菊中多种烷基酰胺类化合物,为紫锥菊的药理研究及质量控制奠定基础。