p53基因状态与辐射诱导的G1期阻滞

Ｇ１期阻滞是细胞对ＤＮＡ损伤作出的一种保护性反应，它与ｐ５３基因状态密切相关，本文对Ｇ１期阻滞的发生机制，生物学意义及ｐ５３突变对辐射诱导Ｇ１期阻滞的影响进行综述。     

照射后不同p53基因状态胃癌细胞的G1期阻滞和凋亡

目的　评价抑癌基因ｐ５３（ 野生型ｐ５３） 对照射后人胃癌细胞系（ＢＧＣ８２３） 的Ｇ１ 期阻滞和凋亡的控制作用。方法　３ 种具有不同ｐ５３ 状态的人胃癌细胞系,即转染人野生型ｐ５３ 基因的ＢＧＣ８２３ｗｔｐ５３ 细胞、转染人突变型ｐ５３ 基因的ＢＧＣ８２３ｍｕｔｐ５３ 细胞和转染无ｐ５３ 基因的空载质粒的ＢＧＣ８２３ｖｅｃｔ 细胞,用流式细胞计分析细胞,４Ｇｙ 照射后０、８ 和２４ 小时后各细胞时相分布和凋亡的反应。结果　照射４Ｇｙ 后８ 小时和２４ 小时后的ＢＧＣ８２３ｗｔｐ５３ 细胞出现强烈的Ｇ１ 期阻滞（分别占原细胞总数的６７－９％ 和６１－１ ％） ,而ＢＧＣ８２３ｍｕｔｐ５３ 、ＢＧＣ８２３ｖｅｃｔ 细胞几乎没有Ｇ１ 期阻滞;照射４Ｇｙ 后８ 小时和２４ 小时后的ＢＧＣ８２３ｗｔｐ５３ 细胞出现明显的预示凋亡的亚Ｇ１ 峰,凋亡细胞比例分别达１３－０ ％ 和１５－３ ％ ;而ＢＧＣ８２３ｍｕｔｐ５３ 和ＢＧＣ８２３ｖｅｃｔ 细胞几乎没有出现亚Ｇ１ 峰和凋亡细胞比例都为零。结论　野生型ｐ５３ 基因具有促进照射后肿瘤细胞的Ｇ１ 期阻滞和凋亡作用,而ｐ５３ 变异和缺失则减低了肿瘤细胞对放射线的反应。     

电离辐射诱导小鼠胸腺细胞G1期阻滞的分子调控初探

目的研究电离辐射诱导小鼠胸腺细胞Ｇ１期阻滞的分子通路。方法ＰＩ染色,流式细胞术检测细胞周期。单克隆抗体免疫荧光标记,流式细胞术检测蛋白表达。结果０５、１．０及２．０ＧｙＸ射线全身照射后１２小时及２．０Ｇｙ照射后２４小时小鼠胸腺细胞Ｇ１期细胞数明显增高。２．０Ｇｙ照射后ｐ５３蛋白表达在照射后１～８小时明显增高;ｐ２１蛋白表达在照射后４～４８小时明显增高;ＭＤＭ２蛋白表达在照射后４小时及８小时明显增高;而ＧＡＤＤ４５蛋白表达未见明显变化。结论０５～２．０ＧｙＸ射线全身照射可诱导小鼠胸腺细胞Ｇ１期阻滞。其分子通路主要是ｐ５３－ｐ２１通路。     

p53基因状态与电离辐射效应

抑癌基因ｐ５３在细胞周期调控、ＤＮＡ修复和复制、细胞分化、基因组的稳定以及细胞凋亡过程中起着重要作用。本文就ｐ５３诱导细胞周期Ｇ１期阻滞和细胞凋亡两大生物功能与电离辐射效应作一概述     

p53基因状态与电脑辐射效应

抑癌基因ｐ５３在细胞周期调控、ＤＮＡ修复和复制、细胞分化、基因组的稳定以及细胞凋亡过程中起着重要作用。本文就ｐ５３诱导细胞周期Ｇ１期阻滞和细胞凋亡两大生物功能与电离辐射效应作一概述。     

015 细胞周期调控在小鼠精原干细胞辐射增敏中的作用

目的 :研究细胞周期阻滞在小剂量Ｘ射线照射诱导小鼠精原干细胞辐射增敏中的可能作用及与ｐ５３基因的关系。方法 :①动物 :选用Ｓｗｉｓｓ小鼠 (８～１０周龄 )和三种 ｐ５３不同基因型 ( ｐ５３-／ - ,ｐ５３+/ - ，ｐ５３+/ +)Ｃ５７ＢＬ/６小鼠 (８～１４周龄 )。②照射 :单次１～１０Ｇｙ或分次１ＧｙＸ射线预照射后２４ｈ给予８～１０Ｇｙ攻击剂量照射。③分组 :分别应用细胞周期阻滞逃逸因子３＿氨基苯甲酰胺 (３＿ＡＢ)和咖啡因检测细胞周期调控在精原干细胞辐射增敏中的作用 ,用 ｐ５３不同基因型Ｃ５７ＢＬ／６小鼠分析辐射增敏中…     

细胞周期与凋亡

增殖细胞和凋亡细胞在形态和生化方面有某些相似，在发生上密切相关。细胞周期Ｇ１停滞和其相关的凋亡依赖于ｐ５３基因的存在，是ｐ５３不同功能的表现；Ｇ２／Ｍ阻滞的快速退出与许多细胞的凋亡有关，用药物缩短Ｇ２／Ｍ阻滞可增加凋亡比例。提示将细胞周期阻滞和凋亡结合起来，有可能开辟肿瘤治疗的新领域     

细胞周期与凋亡

增殖细胞和凋亡细胞在形态和生化方面有某些相似，在发生上密切相关。细胞周期Ｇ１停滞和其相关的凋亡依赖于ｐ５３基因的存在，是ｐ５３不同功能的表现；Ｇ２／Ｍ阻滞的快速退出与许多细胞的凋亡有关，用药物缩短Ｇ２／Ｍ阻滞可增加凋亡比较。提示将细胞周期阻滞和凋亡结合起来，有可能开辟肿瘤治疗的新领域。     

p21在电离辐射诱导EL-4细胞G1期阻滞中的作用

目的 探讨ｐ２１在电离辐射诱导ＥＬ－４细胞Ｇ１期阻滞中的作用。方法 采用Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ｐ２１ＷＡＦ１ ｍＲＮＡ水平的变化;采用流式细胞术检测ｐ ２１蛋白表达及细胞周期的变化。结果 ４．０ＧｙＸ射线照射后１２ｈ、２４ｈ、４８ｈＧ１期ＥＬ－４细胞百分数明显高于假照射组：ｐ２１ＷＡＦ１ｍＲＮＡ水平从照射后１ｈ开始升高,４ｈ达峰值,持续至照后１２ｈ;ｐ２１ｘ蛋白表达在照射后２～４８ｈ明显增高。结论 ４．０ＧｙＸ射线照射可诱导ＥＬ－４细胞Ｇ１期阻滞,ｐ２１在电离辐射诱导ＥＬ－４细胞Ｇ１期阻滞中起重要作用。     

辐射敏感性与p53基因突变关系的研究进展

：ｐ５３基因具有Ｇ１期检查站功能，该功能使受损伤的ＤＮＡ获得充裕的时间进行修复。ｐ５３基因突变则丧失了检查站的功能，从而导致细胞对电离辐射的敏感性发生变化。研究ｐ５３基因突变与辐射敏感性变化的关系对肿瘤的发生、发展、治疗及预后具有重要意义     

p53蛋白调节射线所致细胞凋亡

细胞凋亡的形态学特征明确，但具体生化过程尚不很清楚。抑癌基因ｐ５３的蛋白产物在射线所致的凋亡中起重要作用，它的作用机制可能与ｐ５３蛋白的（１）同特异的ＤＮＡ一致顺序结合，激活或抑制某些基因的表达；（２）使射线损伤的细胞停滞在Ｇ１期和Ｇ２期；（３）同其它原癌基因的蛋白相互作用，影响细胞寿命等功能相关。     

p53蛋白调节射线所致细胞凋亡

细胞凋亡的形态学特证明确，但具体生化过程尚不很清楚。抑癌基因ｐ５３的蛋白产物在射线所致的凋亡中起重要作用，它的作用机制可能与ｐ５３蛋白的①同特异的ＤＮＡ一致顺序结合，激活或抑制某些基因的表达；②使射线损伤的细胞停滞在Ｇ１期和Ｇ２期；③同其它原癌基因的蛋白相互作用，影响细胞寿命等功能相关。     

CyclinB1、p34cdc2在X射线诱导的K562细胞G2期阻滞中的作用

细胞周期调控是机体维持细胞增殖有序性及基因组稳定性的关键 ,它的失控是肿瘤发生的重要原因之一 ,故细胞周期调控已成为近年来生命科学研究的热点课题。在包括理化因素在内的各种ＤＮＡ损伤因素作用下 ,ＤＮＡ受损伤的细胞通常通过细胞周期阻滞来赢得足够的修复时间 ,不能修复的则通过凋亡去除。细胞周期阻滞包括Ｇ1 、Ｇ2 期阻滞 ,Ｇ1期阻滞受ｐ5 3、ＷＡＦ1等基因的调控 ,而在缺失ｐ5 3基因的Ｋ5 6 2细胞中[1 ] ,Ｇ2 期阻滞则占有主导地位。笔者在采用中等剂量电离辐射作用于Ｋ5 6 2细胞时发现 ,Ｋ5 6 2细胞被诱导发生Ｇ2 期阻滞 ,因Ｇ2…     

受电离辐射的细胞中p53介导增殖细胞核抗原表达的调控

增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）是一种高度保守的细胞蛋白,在ＤＮＡ复制和修复中起作用。本实验用γ射线照射大鼠胚胎成纤维细胞（ＣＲＥＦ）诱导ｐ５３,研究照射后ＰＣＮＡ表达的机制。方法：实验用ｐＢＡＣＡＴ（其ＰＣＮＡ－氯霉素转移酶报告基因区域内含有人ＰＣＮＡ启动子序列）和ｐＣＭＶ－ＤＭｐ５３（表达突变型ｐ５３蛋白）两种质粒,照前２４小时用磷酸钙介导法将报告质粒转染细胞,６小时后实行甘油休克;转染２４小时后用１３７　Ｃｓγ射线照射ＣＲＥＦ１２Ｇｙ,剂量率为１．２５Ｇｙ·ｍｉｎ－１。照后在４８小时内进行细胞瞬…     

低剂量X射线照射诱导G1期阻滞的适应性反应

目的观察低剂量Ｘ射线照射能否诱导Ｇ１期细胞阻滞。方法采用碘化丙啶（ＰＩ）荧光探针标记细胞，流式细胞术（ＦＣＭ）检测并分析细胞周期。结果证实１．５ＧｙＸ射线全身照射后１２小时，小鼠胸腺细胞发生明显Ｇ１期阻滞。而０．０７５Ｇｙ低剂量预照射可明显减轻其后１．５Ｇｙ攻击剂量所致Ｇ１期阻滞。离体照射ＥＬ－４淋巴瘤细胞也得到类似结果。结论０．０７５ＧｙＸ射线照射能诱导胸腺淋巴细胞及ＥＬ－４细胞Ｇ１期阻滞的适应性反应。     

文摘

文摘０１２γ射线照射后多种野生型ｐ５３人类黑色素瘤系呈现非正常ｐ５３通路［英］／ＢａｅＩ…∥ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．－１９９６，５６（２）．－８４０～８７０经研究证明，ＧＡＤＤ４５蛋白与ｐ２１ＣＩＰ１／ＷＡＦ１结合，抑制ｃｄｋ（周期素依赖激酶）活性，从而...     

不同持续高＋Gz作用下大鼠脑细胞凋亡及bcl,p53的表达

目的 了解不同＋Ｇｚ作用下大鼠脑细胞凋亡的发生和凋亡相关基因ｂｃｌ－２、ｐ５３基因表达的变化,探讨细胞凋亡在反复高＋Ｇｚ暴露所致脑损伤中的病理作用。方法４８只ＳＤ大鼠随机分成对照组、＋７Ｇｚ暴露组、＋１０Ｇｚ暴露组和＋１４Ｇｚ暴露组,各组分别于暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ、２４ｈ和４８ｈ处死大鼠取脑。用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测大鼠脑细胞凋亡及用半定量聚合酶链反应检测凋亡相关基因ｂｃｌ－２和ｐ５３ｍＲＮＡ表达的变化。结果 ＋１０Ｇｚ暴露组和＋１４Ｇｚ暴露组在６ｈ和２４ｈ时在大脑皮层、海马ＣＡ１区和纹状体可见部分神经细胞发生凋亡和ｂｃｌ－２和ｐ５３ｍＲＮＡ表达变化。结论 反复高＋Ｇｚ暴露可引起大鼠脑内部分神经细胞凋亡及ｂｃｌ－２和ｐ５３的表达变化,细胞凋亡可能是反复高＋Ｇｚ暴露致脑损伤的机理之一。     

TGF—β1对细胞周期的调控作用

β１－型转化生长因子（ＴＧＦ－β１）对细胞的抑制作用通过细胞周期中多种非独立的、具有协同作用的通道来完成。Ｃｄｋ家族可能是ＴＧＦ－β１抑制信号的最终靶蛋白。ＴＧＦ－β１对Ｃｄｋ的负调节作用，可能是通过激活或增加Ｃｄｋ抑制物如ｐ１６＾ＩＮＫ４Ａ、ｐ１５＾ＩＮＫ４Ｂ、ｐ２１＾Ｗａｆｌ／Ｃｉｐｌ或ｐ２７＾Ｋｉｐｌ的表达。另外，ＴＧＦ－β１还可抑制Ｇ１期ｃ－ｍｙｃ基因的表达。     

不同剂量X射线对同步化HeLaS3细胞周期的影响

目的　研究不同剂量Ｘ射线对同步化ＨｅＬａＳ３ 细胞周期的影响,为进一步探讨其分子调控机理和临床肿瘤放疗提供基础资料。方法　采用胸苷（ＴｄＲ） 双阻断法和流式细胞术（ＦＣＭ） 检测了ＨｅＬａＳ３ 细胞同步化后分别于其细胞周期各时相进行７５ ｍ Ｇｙ 和２－０ Ｇｙ Ｘ 射线照射以及于Ｇ２＋ Ｍ 期进行０－０２５～２－０ Ｇｙ 照射后其细胞周期进程的变化。结果　２－０ Ｇｙ 照射时细胞无论处于Ｇ０／Ｇ１ 、Ｓ期还是Ｇ２ ＋ Ｍ 期,从释放点后９～１５ 小时内均发生明显的Ｓ期延迟和Ｇ２ 阻滞,但其中以Ｇ２ 期照射者阻滞最显著;于Ｇ０／Ｇ１ 和Ｇ２ ＋ Ｍ 期进行７５ ｍ Ｇｙ 照射,分别在９ 和１２ ｈ 时发生一过性的明显的Ｇ２ 阻滞,至１１ 和１５ｈ 时完全从这一阻滞中脱离,甚至促进了其细胞周期的进程;而在Ｓ期进行７５ ｍ Ｇｙ 照射时,并没有发生这种阻滞,反而加速了其细胞周期由Ｇ２ ＋ Ｍ→Ｇ０／Ｇ１ 的移行,其中尤以９ｈ 时最为显著。剂量效应关系研究表明,于Ｇ２ ＋ Ｍ 期进行０－０２５ ～２－０ Ｇｙ 照射后,在释放点后１１ ｈ 时均发生Ｇ０／Ｇ１ 期细胞数减少,Ｇ２ 阻滞,且有剂量依赖性,而Ｓ期细胞数的变化在０－０２５ ～０－１ Ｇｙ 和０－５ ～２－０ Ｇｙ     

PCR-SSCP技术检测辐射诱发的恶转细胞p53突变

目的确定α粒子诱发的恶性转化大鼠气管上皮（ｒａｔｔｒａｃｈｅａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ，ＲＴＥ）细胞中是否存在ｐ５３基因突变。方法根据大鼠ｐ５３ｃＤＮＡ序列，合成４对引物分别覆盖大鼠ｐ５３基因外显子５，６，７和８，利用聚合酶链反应－单链构象多态方法分析转化细胞中的ｐ５３突变情况。结果在转化细胞，ｐ５３基因外显子８的单链条带与正常细胞相比出现泳动变位，经测序证实为２６５密码子Ｇ→Ｃ突变，使其编码氨基酸由精氨酸→脯氨酸。结论在α粒子诱发的恶性转化ＲＴＥ细胞中存在ｐ５３基因突变，提示ｐ５３基因变异在辐射致癌过程中可能起重要作用