羊膜移植对兔角膜碱烧伤基质TGF—β1mRNA表达的影响

目的 观察兔角膜重度碱烧伤后羊膜移植对兔角膜碱烧伤基质TGF-β1mRNA表达的影响。方法 将18只新西兰白兔随机分成3组,每组6只,所有兔眼建立重度碱烧伤模型,左眼羊膜移植,右眼作为对照。分别观察1月、2月、3月。结果 1月时,羊膜移植组中基质TGF-β1mRNA的表达低于对照组。2月、3月时,两组中基质TGF-β1mRNA的表达无明显差异。结论 羊膜移植治疗兔角膜重度碱烧伤,早期可降低基质TGF-β1mRNA的表达,起到部分减轻基质浑浊的作用。     

羊膜移植对兔角膜碱烧伤早期MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的研究羊膜移植在兔角膜碱烧伤早期治疗中的作用机制。方法对60只新西兰白兔随机分为碱烧伤组、羊膜移植组及正常对照组,实验组建立角膜碱烧伤模型,羊膜移植组于烧伤后30min实施羊膜移植手术。术后14、30、60d,观察分析角膜病理组织学改变;并应用计算机图像分析系统对角膜组织中基质金属蛋白酶-2（Matrix metalloproteinase-2,MMP-2）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（Tissue inhibitors of metalloproteinase-2,TIMP-2）的表达进行半定量测定。结果羊膜移植组角膜浸润及角膜基质坏死溃疡程度均较同期碱烧伤组为轻,角膜MMP-2的表达显著降低（P〈0.05）,而TIMP-2表达显著升高（P〉0.05）。结论羊膜移植可提高角膜TIMP-2表达的水平并抑制MMP-2的活性,从而在角膜碱烧伤的早期治疗中起到抑制角膜炎症和溃疡的作用。     

人羊膜作为载体体外培养兔角膜上皮细胞移植治疗碱烧伤动物的实验研究

目的观察培养生长于人羊膜的兔角膜上皮细胞使其扩增并移植治疗角膜碱烧伤的效果。为培养角膜上皮细胞移植技术及应用于临床实践提供最佳的理论和实验依据。方法新西兰白兔30只（30眼）,随机分为3组（n=10）,右眼制成碱烧伤模型。A组：角膜上皮细胞羊膜移植组;B组单纯羊膜移植组;C组为对照组（碱烧伤后不作任何移植）。术后观察角膜透明度、角膜新生血管及上皮修复情况,裂隙灯显微镜照相记录。3组均于术后1周、2周、1个月及3个月时各取1眼角膜标本行病理组织检查。结果A组除1眼移植片在第7天脱落外,所有移植片在术后3d水肿消退,角膜逐渐透明。B组移植片持续水肿,眼前段炎性反应稍重,但较碱烧伤对照组轻。C组角结膜高度水肿浑浊,烧伤后观察3个月未发现角膜恢复透明现象。病理组织检查显示：A组角膜及周边上皮细胞为多层结构,角膜新生血管消失,基质的炎性细胞浸润减退;B组覆盖上皮细胞表现为完整上皮细胞型,C组角膜浑浊,新生血管及肉芽组织形成。结论人羊膜作载体体外培养兔角膜上皮细胞移植重建角膜基底膜和角膜上皮结构治疗兔碱烧伤后的角结膜损伤是一种合理有效的方法。     

羊膜移植抑制兔角膜碱烧伤后新生血管增殖的研究

目的　比较采用保存羊膜和新鲜羊膜移植抑制角膜碱烧伤后新生血管增殖的效果 ;探讨应用保存人羊膜移植防治角膜碱烧伤后新生血管的手术时机。方法　制备角膜碱烧伤后新生血管增殖的动物模型 ;2 2只家兔 ( 2 2眼 )随机分为4组 :A组 ( 4眼 )作为对照组 ;B组 ( 6眼 )在碱烧伤的急性期行新鲜羊膜移植 ;C组 ( 6眼 )在急性期行保存人羊膜移植 ;D组 ( 6眼 )在瘢痕期行保存人羊膜移植。应用计算机彩色图像处理系统测定角膜新生血管面积。结果　 3个移植组和对照组比较 ,角膜新生血管面积的差异均有显著性意义 (P <0 0 1) ;B组与C组比较无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;C组的新生血管面积明显少于D组 (P <0 0 1)。结论　保存羊膜和新鲜羊膜移植均能有效地抑制角膜碱烧伤后新生血管的增殖 ,治疗效果无显著性差异 ;在角膜碱烧伤的急性期施行羊膜移植防治新生血管增殖的效果要优于在瘢痕期手术。     

新鲜羊膜移植对大鼠角膜碱烧伤后玫炎性细胞因子表达的影响

目的对SD大鼠角膜碱烧伤后行羊膜移植，分别检测碱烧伤及羊膜移植术后角膜上致炎性细胞因子的表达水平，探讨角膜碱烧伤的损伤机制及羊膜的抗炎和免疫调节机制。方法70只SD大鼠，以0．5mol／L的氢氧化钠碱烧伤右眼制作成碱烧伤模型，随机分组，A组（n=32只）为碱烧伤后未行羊膜移植的烧伤对照组，B组为烧伤后立即施行羊膜移植的羊膜移植组（n=32只），另有6只大鼠作为正常对照组即C组（n=6只），术后第1、4、7、10天处死动物，分别在裂隙灯显微镜下对角膜混浊度、角膜新生血管及角膜上皮缺损进行临床评分，取下角膜，酶联免疫吸附实验（ELISA）定量检测致炎性细胞因子IL-1d（interleukin-1α）、IL-6（interleukin-6）和IL-8（in—terleukin-8）的表达水平。结果羊膜移植组角膜上皮缺损、新生血管及角膜混浊度评分第4、7、10天明显低于对照组，在正常角膜中有IL-1α和IL-8的表达，而没有发现IL-6的表达，碱烧伤后IL-1d，IL-6和IL-8均显著表达，IL-1α于烧伤后第4天达到高峰，IL-6和IL-8于第7天达到高峰。羊膜移植组与烧伤对照组比较，羊膜移植组于术后第1、4天能显著降低IL-1α（P〈0．01）的表达水平，第4、7天能显著降低IL-6及IL-8的表达水平（P〈0．01）。结论角膜碱烧伤后早期致炎性细胞因子的过量表达直接关系到急性期角膜炎症，并可能通过激活免疫系统，参与随后的免疫反应，介导免疫损伤。新鲜羊膜移植可以抑制碱烧伤后角膜致炎性细胞因子的过量表达，可能通过调节致炎性细胞1子的表达而发挥抗炎和免疫调节机制。     

新鲜羊膜移植对大鼠角膜碱烧伤后致炎性细胞因子表达的影响

目的对SD大鼠角膜碱烧伤后行羊膜移植，分别检测碱烧伤及羊膜移植术后角膜上致炎性细胞因子的表达水平，探讨角膜碱烧伤的损伤机制及羊膜的抗炎和免疫调节机制。方法70只SD大鼠，以0．5mol／L的氢氧化钠碱烧伤右眼制作成碱烧伤模型，随机分组，A组（n=32只）为碱烧伤后未行羊膜移植的烧伤对照组，B组为烧伤后立即施行羊膜移植的羊膜移植组（n=32只），另有6只大鼠作为正常对照组即C组（n=6只），术后第1、4、7、10天处死动物，分别在裂隙灯显微镜下对角膜混浊度、角膜新生血管及角膜上皮缺损进行临床评分，取下角膜，酶联免疫吸附实验（ELISA）定量检测致炎性细胞因子IL-1d（interleukin-1α）、IL-6（interleukin-6）和IL-8（in—terleukin-8）的表达水平。结果羊膜移植组角膜上皮缺损、新生血管及角膜混浊度评分第4、7、10天明显低于对照组，在正常角膜中有IL-1α和IL-8的表达，而没有发现IL-6的表达，碱烧伤后IL-1d，IL-6和IL-8均显著表达，IL-1α于烧伤后第4天达到高峰，IL-6和IL-8于第7天达到高峰。羊膜移植组与烧伤对照组比较，羊膜移植组于术后第1、4天能显著降低IL-1α（P〈0．01）的表达水平，第4、7天能显著降低IL-6及IL-8的表达水平（P〈0．01）。结论角膜碱烧伤后早期致炎性细胞因子的过量表达直接关系到急性期角膜炎症，并可能通过激活免疫系统，参与随后的免疫反应，介导免疫损伤。新鲜羊膜移植可以抑制碱烧伤后角膜致炎性细胞因子的过量表达，可能通过调节致炎性细胞1子的表达而发挥抗炎和免疫调节机制。     

羊膜移植对碱烧伤大鼠角膜缘干细胞的影响

目的观察羊膜移植对碱烧伤大鼠角膜缘干细胞的影响。方法SD大鼠40只制作眼碱烧伤模型,单眼行眼碱烧伤;随机选取20只大鼠（20眼）为实验组,20只大鼠（20眼）为对照组;实验组行新鲜羊膜移植,对照组不处理,观察大鼠眼表情况。并于术后1周、2周、3周、4周取角膜缘组织,采用免疫组化技术观察p63蛋白在角膜缘干细胞的表达情况。结果p63在实验组和对照组的角膜缘干细胞中均有表达,位于角膜缘上皮细胞基底层的细胞核内。但实验组明显高于对照组,两者比较有统计学意义（P〈0．05）。且随着烧伤时间的延长,p63的表达呈线性下降趋势。结论眼碱烧伤后行羊膜移植,能促进角膜缘干细胞的增生、分化,利于角膜上皮的修复。     

羊膜移植和高压氧抑制碱烧伤角膜VEGF表达的比较研究

目的 探讨羊膜移植或高压氧治疗对碱烧伤角膜内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)及角膜新生血管形成的抑制作用。方法 21只兔(42只眼)被建立角膜碱烧伤动物模型后随机分为羊膜移植组、高压氧治疗组和对照组，每组7只兔(14只眼)。羊膜移植组、高压氧治疗组分别行羊膜移植和高压氧治疗。采用免疫组化染色检查VEGF蛋白的表达，宏观测量新生血管长度及生长速度，显微镜下微血管计数方法研究角膜新生血管形成及抑制情况。结果 羊膜移植组和高压氧治疗组VEGF蛋白表达下降，新生血管生长速度变慢，微血管数量减少，3组比较具有统计学意义。VEGF主要表达在角膜受损区的感染细胞胞浆内，其出现时间和位置与角膜新生血管一致。结论 VEGF是一种重要的角膜内新生血管形成因子，其变化与角膜新生血管平行；羊膜移植或高压氧治疗可抑制碱烧伤角膜VEGF的表达及角膜新生血管的形成。     

羊膜移植联合带角膜缘的全板层角膜移植治疗眼部重度碱烧伤

目的 探讨羊膜移植联合带角膜缘的全板层角膜移植对眼部重度碱烧伤的治疗效果.方法 选择住院行羊膜移植联合带角膜缘的全板层角膜移植的眼部重度碱烧伤12例(13眼).术后观察羊膜、角膜植片及视力情况,并随访10-14个月.结果 2眼术后2周时羊膜融解、脱落,出现部分睑球粘连,其余11眼羊膜植片愈合良好;1眼移植角膜发生轻度排斥反应,有少量新生血管长入,其余12眼角膜植片恢复透明;13眼视力均有提高.结论 对于眼部重度碱烧伤,羊膜移植联合带角膜缘的全板层角膜移植是一种安全有效的手术治疗方法.     

重度眼部碱烧伤早期多次羊膜移植治疗疗效分析

目的 探讨重度眼部碱烧伤早期多次羊膜移植的适应证及治疗效果.方法 回顾性分析我院2004年7月至2007年5月20例(24只眼)重度眼部碱烧伤患者早期采用两次及以上羊膜移植治疗效果.术后对眼表稳定情况、上皮愈合情况及新生血管、视力等进行观察随访.进一步探讨重度眼部碱烧伤早期羊膜移植的次数及适应证.结果 20例(24只眼)患者中,9只眼在行2次羊膜移植术后7-14 d之间羊膜开始溶解,拆线后羊膜脱落.眼表炎症基本控制,荧光素钠染色角膜上皮完整.角膜缘缺血基本改善.11只眼2次羊膜术后表现为角膜上皮未愈合,直径大于3 mm以上,角膜缘缺血大于1/4象限,再行第3次移植,3只眼行4次羊膜移植,1只眼行5次羊膜移植.其中2只眼在行2次羊膜移植后,3只眼分别在3、4、5次羊膜移植后上皮仍缺损,且眼睑部分缺损,球结膜缺血明显,故给予永久性睑裂缝合术;各有2只眼在行第3、4、5次羊膜移植时发现角膜基质已出现自溶,故及时改为板层角膜移植术;1只眼行3次羊膜移植时,角膜基质自溶且溃疡在角膜周边,故改为结膜瓣遮盖术.结论 重度眼部碱烧伤早期应积极采取羊膜移植进行治疗,多次羊膜移植对早期眼表的稳定十分有效,但应密切观察,防止盲目多次羊膜移植下的角膜溃疡扩大和穿孔的发生.     

角膜碱烧伤新鲜羊膜移植治疗对自由基反应的影响

目的 探讨新鲜羊膜移植在早期角膜碱烧伤治疗中与自由基反应的关系。方法 48只兔制作角膜碱烧伤模型,分为新鲜羊膜移植组、保存羊膜移植及对照组,烧伤后24小时分别实施手术。术后14天及30天处死实验兔取材房水及角膜组织,检测其超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量。结果 新鲜羊膜移植组及保存羊膜移植组的丙二醛含量均低于对照组,超氧化物歧化酶活力均高于对照组。术后14天新鲜羊膜移植组角膜超氧化物歧化酶活力高于保存羊膜组。术后30天新鲜羊膜组角膜及房水丙二醛含量均低于保存羊膜组。结论 新鲜羊膜移植在早期角膜碱烧伤治疗中能减轻自由基质应对照组织的损伤,其效果优于保存羊膜移植。     

羊膜移植在早期重度眼碱烧伤中的应用

目的 探讨羊膜移植在早期重度眼碱烧伤中的应用。方法 采用保存入羊膜移植治疗碱烧伤22例(22眼)，随访观察3—12月。结果 术后7天炎症控制。14眼形成角膜斑翳，4眼角膜恢复透明，4眼角膜水肿浑浊。全部患者保存了眼球，2例发生睑球粘连。结论 采用保存人羊膜移植治疗早期重度眼碱烧伤是一种有价值的方法。     

吡非尼酮浸泡生物羊膜对兔青光眼模型滤过术后瘢痕形成的作用

目的:探讨吡非尼酮(PFD)浸泡生物羊膜在兔青光眼模型中的应用,评价其对兔青光眼模型的抗瘢痕效果及毒副作用。方法:健康新西兰白兔72只右眼采用前房注射复方卡波姆溶液的方法建立青光眼模型后随机分为0.5%PFD+生物羊膜组、单纯生物羊膜组、丝裂霉素C(MMC)组和空白对照组,每组18只,均行小梁切除术,其中0.5%PFD+生物羊膜组在巩膜瓣下放置0.5%PFD溶液浸泡的生物羊膜,单纯生物羊膜组在巩膜瓣下放置生理盐水浸泡的复水生物羊膜,MMC组在巩膜瓣下放置浸有MMC的棉片3 min后立即采用生理盐水冲洗,空白对照组制作巩膜瓣后不放入任何植入物。评估眼压、滤过泡及毒副作用和并发症情况,并采用苏木精-伊红(HE)、Masson染色及免疫组织化学染色法观察滤过区组织病理变化。结果:小梁切除术后14、21、28 d各组眼压比较,0.5%PFD+生物羊膜组相似文献   

重度眼表碱烧伤早期羊膜移植治疗的研究

目的 探讨新鲜羊膜早期移植在重度眼表碱烧伤的治疗效果.方法 采用新鲜羊膜早期移植治疗重度眼表碱烧伤35例38眼.结果 术后所有患眼眼表迅速稳定,20眼角膜恢复透明,10眼形成角膜白斑,4眼全角膜浑浊,3个月后24眼脱盲,视力≥0.2者11眼.结论 重度眼表碱烧伤早期进行新鲜羊膜移植可促进角膜上皮修复、抑制角膜新生血管侵入,防止睑球粘连.     

早期多次新鲜羊膜移植治疗重度眼表烧伤的疗效

目的:探讨早期多次新鲜羊膜移植治疗重度眼表烧伤的治疗效果。方法:回顾性分析我院2007-01/2011-12收治的25例25眼重度眼表烧伤患者早期采用两次及以上羊膜移植的治疗效果。术后对眼表稳定情况、角膜上皮愈合情况及新生血管、视力等进行观察随访。结果:患者25例25眼中,20眼在行2次羊膜移植术后6～14d羊膜开始溶解,拆线后羊膜脱落。眼表炎症控制,荧光素钠染色角膜上皮完整;角膜缘缺血改善。4眼2次羊膜移植术后,羊膜溶解脱落后表现为角膜上皮未愈合,直径大于2mm以上,角膜缘缺血大于1/4象限,再行第3次移植。最终眼球保存完整,眼表稳定。1眼2次术后3d出院,未能继续跟踪观察。结论:重度眼表烧伤采取早期多次新鲜羊膜移植治疗,对稳定眼表十分有效。     

羊膜移植治疗眼重度碱烧伤的护理

目的探讨新鲜羊膜移植治疗眼表急性重度碱烧伤的护理方法。方法术前采取有效的护理措施和针对性心理护理,术后严密观察植片生长和角膜创面愈合情况,保护眼部,加强点眼护理,去除引起泪膜异常的因素,做好出院指导等措施。结果采取以上护理措施,35例38眼均保全了眼球,眼表损伤迅速稳定,角膜不再继续融解,无穿孔发生,无新生血管长入,无睑球粘连并发症发生。结论系统的术前、术后护理以及针对性心理护理是提高手术成功率和减少术后并发症的重要保证。     

Immunohistochemical Observation of Amniotic Membrane Patching on a Corneal Alkali Burn In Vivo

Purpose

To investigate by immunohistochemical observation the effects of amniotic membrane (AM) patching on myofibroblastic differentiation and matrix metalloproteinase (MMP) expression in the corneal stroma after an alkali burn in vivo.

Methods

A corneal alkali burn was made by placing a circular piece of filter paper containing 1?N NaOH on the central cornea of rabbits. Burning was done unilaterally in each rabbit. Immediately after the wounding, in the AM group, AM was sutured onto the cornea and removed on day 1. Rabbits with no AM patching were controls. On day 14, corneas were excised and immunohistochemical observation was carried out using antibodies against α-smooth muscle actin (α-SMA), vimentin, MMP-1, MMP-2, MMP-9, and membrane-type1 (MT1)-MMP. Observation after Masson trichrome staining was also performed.

Results

In the AM group, α-SMA positive cells were noticeably fewer, and MMP-2, MMP-9, and MT1-MMP expression was clearly inhibited. Also, collagen fibers were more regularly arranged than in control eyes. The more proximate the cells were to the epithelial side, the fewer α-SMA-positive cells were observed in the AM group.

Conclusions

AM patching suppressed myofibroblastic differentiation and MMP expression in the stroma after an alkali burn. An inhibition gradient suggests that AM may release unknown soluble factors possessing some antiscarring capability.?Jpn J Ophthalmol 2007;51:3–9 © Japanese Ophthalmological Society 2007     

共聚焦显微镜观察人羊膜匀浆提取液对大鼠碱烧伤后角膜超微结构的影响

目的：通过角膜共聚焦显微镜活体动态观察人羊膜匀浆提取液对大鼠角膜碱烧伤后角膜超微结构的影响,探讨羊膜匀浆提取液应用于角膜碱烧伤后的临床价值及作用机理。方法 SD大鼠40只（40只眼）,通过1 mol/L的氢氧化钠（ NaOH）溶液建立右眼角膜碱烧伤模型。随机分为实验组和对照组,实验组行人羊膜匀浆提取液（ AM）点眼,每日4次,对照组用PBS液点眼,每日4次。碱烧伤后行共聚焦显微镜动态观察大鼠角膜各层细胞数量以及形态的变化。结果实验组角膜上皮层炎症细胞形成晚,数量较少;基质层纤维结构排列较为规则,肌成纤维细胞的增殖和激活较少、角膜新生血管数量少,管径细。结论新鲜人羊膜匀浆提取液可以有效促进大鼠碱烧伤后角膜上皮细胞的增殖,抑制炎症细胞浸润,减少角膜新生血管的形成,抑制成纤维细胞的激活和增殖,减少角膜瘢痕的形成,有利于碱烧伤后大鼠角膜的透明愈合。     

Temporary amniotic membrane patch for the treatment of primary pterygium: mechanisms of reducing the recurrence rate

Purpose The purpose of the study was to evaluate the outcome of the use of the temporary amniotic membrane patch (TAMP) for the treatment of primary pterygium and to investigate the mechanisms of reducing the recurrence rate.Methods Twenty eyes in 20 patients with primary pterygium underwent pterygium excision followed by TAMP for 5 days. Removed amniotic membrane (AM) was immunostained with primary antibodies CD34, c-Kit, STRO-1 and AC133.Results Within the period of follow-up (53.3±13.8 months), all the eyes showed a smooth ocular surface without recurrence of pterygium. Different grades of CD34, c-Kit, STRO-1and AC133 positive stem and progenitor cells infiltrated or attached to the stroma of patched AM, with more spindle-shaped c-Kit cells than ovoid-shaped CD34 and AC133 cells.Conclusion The temporary amniotic membrane patch is an effective and safe procedure for the treatment of primary pterygium. Absorbing excessive stem and progenitor cells may be one of the mechanisms of reducing the recurrence rate using AM.