Myc基因家族在喉癌中的异常扩增及其意义

目的 探讨Ｍｙｃ基因家族在喉癌中的异常扩增及其临床意义。方法 应用ＰＣＲ－非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳－激光扫描技术检测了３２例喉癌组织、１２例癌旁组织和６例正常组织。结果 正常组织细胞Ｍｙｃ基因无扩增，３２例喉癌中４７％（１５／３２）有Ｃ－ｍｙｃ和Ｌ－ｍｙｃ扩增，４１％（１３／３２）有Ｎ－ｍｙｃ基因扩增。Ｍｙｃ基因扩增率与年龄、性别、喉癌临床分期及分化程度无关（Ｐ〉０．０５），但有淋巴结转移的患者的     

喉癌癌变过程中CyclineE的表达及临床病理学意义

目的：研究喉癌癌变过程中ＣｙｃｉｉｎＥ的临床病理学意义。方法：用免疫组化检测２０例正常喉粘膜，４０例喉不典型增生和６０例喉癌组织中ＣｙｃｌｉｎＥ的表达。结果：ＣｙｃｌｉｎＥ阳性表达定位于肿瘤细胞核。在喉癌癌变过程中，喉正常粘膜、不黄型增生病变和喉癌中ＣｙｃｌｉｎＥ阳性表达率分别为：５．０％（１／２０），２０．０％（８／４０）和４５．０％（２７／６０）（Ｐ〈０．００１）。喉癌淋巴结转移组Ｃｙｃｌｉｎ     

喉癌临床N0患者颈淋巴结转移的病理研究

目的探讨喉癌临床Ｎ０患者颈淋巴结转移特点,为颈淋巴结处理方式选择提供根据。方法４０例临床Ｎ０喉癌患者被随机分为选择性根治性颈廓清术（ｒａｄｉｃａｌｎｅｃｋｄｉｓｅｃｔｉｏｎ,ＲＮＤ）及功能性颈廓清术（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｎｅｃｋｄｉｓｅｃｔｉｏｎ,ＦＮＤ）两组,分别完成１３及２７例。将获得淋巴结逐一行病理检查,以确定转移情况。结果ＲＮＤ组平均每侧获淋巴结３４．２枚,ＦＮＤ组为２７．４枚,差异无显著性（ｔ＝０．８６,Ｐ＞０．０５）。两组颈淋巴结转移率分别为３０．８％（４／１３）及３３．３％（９／２７）,总转移率为３２．５％（１３／４０）。１３例颈淋巴结转移阳性病例中１２例（９２．３％）转移淋巴结位于Ⅱ,Ⅲ区。３３枚转移阳性淋巴结中３２枚（９６．９％）位于第Ⅱ和Ⅲ区。两组３年生存率分别为６９．２％（９／１３）及７７．８％（２１／２７）,统计学差异无显著性（χ２＝０．３４１８,Ｐ＞０．５）,总的３年生存率为７５％（３０／４０）。结论对临床Ｎ０喉癌患者行肩胛舌骨肌上或侧颈廓清术较为适宜。     

喉癌Cmyc原癌基因扩增及其临床相关性

本文利用核酸杂交技术，对人原发性喉癌及其转移灶中的Ｃｍｙｃ原癌基因的扩增情况进行了研究，结果发现１１例喉癌和１２例颈转移癌中，分别有８例（７２．７％）和７例（５８．３％）Ｃ－ｍｙｃ基因扩增１．５－１６．０倍。提示Ｃ－ｍｙｃ基因可能参与喉癌的发生及其演进机制。     

c-myc癌基因蛋白在喉癌及癌旁不同距离组织中的表达研究

应用枸橼酸－ＬＳＡＢ－微波免疫组化法，检测ｃ－ｍｙｃ癌基因蛋白在喉癌、边缘区及癌旁０．５、１．０、１．５、２．０ｃｍ处粘膜和４例正常喉粘膜中的表达。结果：ｃ－ｍｙｃ蛋白在喉癌组织中的阳性表达率为９６．７％（２９／３０），与正常组织相比有极显著性差异（Ｐ〈０．０１）；在癌旁２．０ｃｍ处与１．５ｃｍ以内组织的表达存在着显著性差异（Ｐ〈０．０５）。ｃ－ｍｙｃ表达依正常粘膜→癌旁组织→癌呈逐步递增趋势。ｃ     

nm23表达与喉癌颈淋巴结转移及临床分期的关系

应用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法观察了ｎｍ２３基因产物／核苷二磷酸激酶（ｎｍ２３／ＮＤＰＫ）在喉鳞癌中的表达，结果喉鳞癌中ｎｍ２３／ＮＤＰＫ表达的阳性率为６９４％（２５／３６），相应的癌旁正常组织阴性。在与临床病理指标的相关性分析中发现无颈淋巴结转移者ｎｍ２３／ＮＤＰＫ表达的阳性率高于颈淋巴结转移者，差别有显著意义（Ｐ＜０．０５）；Ⅰ～Ⅱ期喉癌高于Ⅲ～Ⅳ期喉癌，差别也有显著意义（Ｐ＜０．０５）。ｎｍ２３／ＮＤＰＫ表达与病理分级无关，结果表明ｎｍ２３基因低表达与肿瘤进展及预后不良有关     

喉癌C─myc原癌基因扩增及其临床相关性

本文利用核酸杂交技术，对人原发性喉癌及其转移灶中的Ｃ－ｍｙｃ原癌基因的扩增情况进行了研究，结果发现１１例喉癌和１２例颈转移癌中，分别有８例（７２．７％）和７例（５８．３％）Ｃ－ｍｙｃ基因扩增１．５～１６．０倍。提示Ｃ－ｍｙｃ基因可能参与喉癌的发生及其演进机制。     

基因MTA1在喉癌中的表达和意义

目的：研究肿瘤转移相关基因Mtal（metastasis-associated gene）表达与喉癌淋巴结转移的关系。方法：应用RT-PCR技术，对30例喉癌组织、12例喉癌颈部淋巴结和10例正常喉部组织，进行了Mtal mRNA表达的检测。结果：有转移喉癌原发灶Mtal mRNA高表达率为100％（8／8），无转移为22．7％（5／22），P〈0．01；有癌转移淋巴结高表达率为87．5％（7／8），无癌转移为0（0／4），P〈0．05。30例喉癌有13例Mtal mRNA高表达，高表达率为43．3％。结论：Mtal mRNA表达与喉癌淋巴结转移呈相关关系。基因Mtal可成为判断喉癌转移有价值的指标。     

喉癌中P_53基因突变

本文采用ＰＣＲ技术对４例正常喉组织、１０例正常白细胞、３３例喉癌组织，进行Ｐ５３基因的５－６和７－８外显子检测，结果发现喉癌中Ｐ５３基因突变率为６９．６９％（２３／３３）（Ｐ＜０．０１），其中５－６外显子突变率为２４．２４％（８１３３），７８外显子突变率为４５．４５％（１５／３３）。各期喉癌Ｐ５３基因突变率无明显差异（Ｐ＞０．０５）。研究表明Ｐ５３基因的突变是喉癌发生发展过程中的一个重要机制。     

喉癌患者多药耐药相关蛋白基因的表达及其临床意义

目的：研究多药耐药相关蛋白基因（ＭＲＰ ｍＲＮＡ）的表达与喉癌患者临床病理特征之间的关系。方法：应用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，检测了３５例喉癌患者ＭＲＰ ｍＲＮＡ的表达。结果：喉癌组织中ＭＲＰ ｍＲＮＡ阳性表达率为４５．７％（１６／３５），其阳性表达强度在晚期肿瘤中明显增高（Ｐ〈０．０５），且与肿瘤颈淋巴结转移明显相关（Ｐ〈０．０１），结论：ＭＲＰ ｍＲＮＡ在喉癌中的表达，不仅提示     

基质金属蛋白酶14基因在人喉鳞状细胞癌中表达差异的分析

OBJECTIVE: To investigate the role of expression of matrix mettallo-proteinase 14 (MMP14) in laryngeal carcinomas and the relationship between MMP14 expression and the laryngeal biological behavior. METHODS: The gene expression differences of MMP14 between fresh laryngeal cancer tissues and their surrounding normal mucosa was analyzed by RT-PCR. The expression of MMP14 protein in paraffin-embedded tissues was determined immunohistochemically. All statistical analyses were performed by SPSS version 10.0. RESULTS: In the 33 cases of matched specimens, MMP14 gene expression was much higher in tumor tissues than that in surrounding ing normal tissues in 26 cases and lower in 2 cases, whereas in other 5 cases, no significant difference was observed between the cancer tissue and the surrounding normal tissue. MMP14 gene expression was not different in different stages in laryngeal glottic cancers, but correlated to the differentiation and lymph node metastasis (P < 0.05). There was correlation between MMP14 gene expression and the stage, differentiation and lymph node metastasis in the laryngeal supraglottic cancers (P < .05). MMP14 protein was localized predominantly in the carcinoma cell cytoplasm and in the stromal fibroblasct cytoplasm, and weakly or not expressed in surrounding normal tissue. MMP14 protein expression was much higher in tumor tissue than that in surrounding normal tissue in most of the cases. In general, MMP14 protein expression was the same as MMP14 gene expression and related to the stage, differentiation and lymph node metastasis in the laryngeal cancers. There was no survival difference at 3, 5 and 7-year between the group with higher MMP14 protein expression in tumor tissues than surrounding normal tissues and the group with no difference of MMP14 protein expression (Log Rank, P=0.5535). CONCLUSIONS: The protein MMP14 may play role in laryngeal cancer invasion in a certain extent, but important role in lymph node metastasis of laryngeal cancer. The over-expression of MMP14 protein may be a marker for lymph node metastasis of laryngeal cancer.     

抑癌基因p14ARF与p32在喉鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的 观察p14ARF与p32在喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）组织中的表达情况及其与临床病理特征的关系,探讨其对LSCC发 生发展过程中的影响。方法 分别用荧光定量PCR和免疫组化法检测了50例LSCC组织及对应的癌旁组织中p14ARF与p32的mRNA和蛋白质的表达。采用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果 p14ARF mRNA在LSCC组织中的表达水平与肿瘤临床分期相关（χ 2=20.704,P <0.05）,并呈现早期相对上升,晚期相对下降的趋势。p32 mRNA在LSCC组织与癌旁组织中的表达无明显的相关性（t =-0.684,P >0.05）p14ARF蛋白定位肿瘤细胞的细胞质和细胞核,p32蛋白主要定位于细胞浆,两者在蛋白水平上的表达结果与PCR基本一致。p14ARF与p32在LSCC组织中的表达无关联性（r =0.157,P >0.05）。结论 p14ARF在LSCC中的异常表达提示其可能参与了肿瘤的早期发生发展过程,并有可能成为LSCC早期诊断的一个分子标志物,而p32可能在LSCC的发生发展过程中并未起到关键的作用。     

基质金属蛋白酶14基因在人喉鳞状细胞癌中表达差异的分析

目的 探讨基质金属蛋白酶14(matrix mettallo-proteinase 14,MMP14)即膜性基质金属蛋白酶(membrane type-1 matrix metalloproteinase,MT1-MMP)基因在喉癌中表达与喉癌临床病理生物学行为的关系。方法 从分子和蛋白质水平,研究MMP14在喉癌组织和其相邻的正常黏膜组织的表达差异,分析MMP14基因及其蛋白表达与喉癌临床病理生物学行为的关系。结果 33例配对喉癌标本中MMP14基因在26例喉癌组织中的表达明显高于其相应的正常黏膜组织,2例喉癌低表达,5例表达差异不明显。MMP14基因在不同分期的声门型喉癌中的表达差异无显著性(P>0.05),但在不同分化程度、有无淋巴结转移的声门型喉癌中,表达差异有显著性(P<0.05);在不同分期、不同分化程度及有无淋巴结转移的声门上型喉癌中,表达差异有显著性(P<0.05)。MMP14蛋白绝大多数位于癌巢细胞质内及癌巢间质内的成纤维细胞质内,在部分病例中有的正常黏膜细胞内不表达,有的表达;MMP14蛋白在绝大多数喉癌组织中的表达明显高于其相邻的正常黏膜组织。MMP14蛋白表达与MMP14基因表达基本是一致的。MMP14蛋白表达差异有显著性组患者的术后生存率与表达差异无显著性组的术后生存率无统计学差异(P>0.05)。结论 MMP14蛋白在喉癌的侵袭中可能只起一定的作用,但在喉癌的淋巴结转移     

凋亡抑制基因Livin在喉癌组织中的表达及其与p53、Bcl-2表达的相关性研究

目的　探讨凋亡抑制基因Livin在喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）组织中的表达及其与p53和Bcl-2表达的关系,探讨Livin在LSCC 中的作用机制。方法　收集LSCC标本42例,声带息肉组织20例,采用免疫组织化学SP法检测LSCC组织和声带息肉组织中Livin、p53和Bcl-2蛋白的表达。结果　LSCC中Livin表达阳性率为71.4%（30/42）,显著高于声带息肉组织（χ 2=27.679,P <0.01）。临床分期Ⅲ+Ⅳ期Livin阳性表达率显著高于Ⅰ+Ⅱ期（χ 2=7.087,P <0.01）;有淋巴结转移者的Livin阳性表达率高于无淋巴结转移者（χ 2=5.458,P <0.05）。Livin蛋白的表达与p53蛋白表达呈正相关（r =0.665,P <0.05）,与Bcl-2蛋白表达呈正相关（r =0.657,P <0.05）。结论　Livin在LSCC组织中异常表达,有望成为LSCC诊断和基因治疗的新靶点。凋亡相关基因p53与Bcl-2基因的异常表达在喉癌癌变中起协调作用。     

喉癌微血管生成中P53 nm23蛋白和血管内皮生长因子的作用

目的　探讨P5 3、nm2 3蛋白和血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfacor,VEGF)在喉癌微血管生成及转移中的作用。方法　通过免疫组化SP法对 42例喉癌标本中P5 3、nm2 3蛋白、VEGF及微血管密度 (microvesseldensity,MVD)进行了检测。结果　喉癌中P5 3、nm2 3蛋白及VEGF的阳性表达率分别占 47 6 %、5 7 1%和 71 4%。P5 3基因和VEGF呈正相关 (P <0 0 5 ) ,在有淋巴结转移的喉癌标本中P5 3、VEGF阳性表达率及MVD明显高于非转移组 (P <0 0 5 )。而nm2 3基因和VEGF在喉癌标本中无直接相关性 ,在nm2 3蛋白表达阴性和VEGF阳性标本中MVD较高 ,这种现象多见于有淋巴结转移的喉癌中。结论　突变型P5 3基因通过调控VEGF的表达影响肿瘤内MVD ,促使喉癌发生转移 ;而nm2 3基因可能不是通过调控VEGF的表达 ,而是通过其它途径影响喉癌转移。     

Survivin基因在喉癌中的表达及意义

目的 研究凋亡抑制蛋白Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的表达,探讨其在喉癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组织化学技术,研究42例喉癌标本、20例癌旁组织、20例喉角化症、10例正常喉黏膜中Survivin 蛋白的表达情况;并用RT-PCR技术检测喉癌细胞株Hep-2中Survivin mRNA的表达。结果 正常喉黏膜中无Survivin表达, 喉癌组织中Survivin 蛋白的表达 (66.6 %) 明显高于癌旁组织 (40.0 %)和喉角化症(35.0 %)(P<0.001),喉癌组织中Survivin表达与临床分期、病理分级及有无颈淋巴结转移无明显相关性(P > 0.05)。喉癌细胞株Hep - 2中有较强Survivin mRNA的表达。结论 Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的高表达可能与喉癌的发生关系密切,具体机制有待于进一步研究。     

抑癌基因PTEN在喉癌中的表达及临床意义

目的：研究抑癌基因PTEN在喉癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法，检测PTEN在68例喉鳞状细胞癌组织（喉癌组）及33例癌旁正常黏膜组织（对照组）中的表达。结果：①喉癌组PTEN蛋白阳性表达率为61．8％（42／68），对照组为100．0％（33／33），喉癌组PTEN蛋白阳性表达率显著低于对照组（P＜0．01）。②PTEN蛋白阳性表达与喉癌临床病理特征的关系：高、中分化组与低分化组之间PTEN蛋白阳性表达率比较（79．3％：48．7％）差异有统计学意义（P〈0．01）；淋巴结转移者PTEN蛋白阳性表达率（55．0％）显著低于无淋巴转移者（71．4％）（P＜0．05）；根据临床病理分期，Ⅰ加Ⅱ期与Ⅲ加Ⅳ期之间PTEN蛋白阳性表达率（76．0％：53．5％）差异有统计学意义（P＜0．05）；随临床分期增加、喉癌分化程度降低及淋巴结的转移，PTEN蛋白阳性表达率逐渐降低。另外，PTEN蛋白阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤组织大小及部位无关（P〉0．05）。结论：抑癌基因PTEN在喉癌的发生及发展中起重要作用，对其蛋白的检测可作为判定喉癌发生及侵袭转移能力的一项客观指标。     

肿瘤异常蛋白在喉癌临床诊断中的价值研究

目的 对喉癌患者和健康者进行肿瘤异常蛋白检测,分析肿瘤异常蛋白在喉癌诊疗中的价值。 方法 选取耳鼻咽喉头颈外科2017年9月至2019年9月经病理科确诊的95例喉癌病人为实验组,同期选取95例健康者为对照组,对所有研究对象进行外周血肿瘤异常蛋白检测,探究其在喉癌患者临床诊断中的应用价值。 结果 喉癌患者中肿瘤异常蛋白阳性率为83.16%,高于健康人群(15.79%),差异具有统计学意义(P<0.001)。有淋巴结转移、Ⅲ+Ⅳ期喉癌患者外周血TAP阳性表达率较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。不同性别、不同年龄喉癌患者的外周血清肿瘤异常蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 在喉癌患者外周血中肿瘤异常蛋白表达具有较高的灵敏性,肿瘤异常蛋白对喉癌的临床诊断有较高的应用价值。     

喉癌组织Rb、P53、C-myc和HPV基因测定及意义

采用PCR技术检测了33例喉癌及4例正常喉组织Rb、P53、C-myc、HPV基因的异常状况，结果：P53基因突变率为69.69%(23/33)(P＜0.01)，Rb基因突变率为48.48%(16/33)(P＜0.01)，C-myc基因扩增率为58.62%(17/29)(P＜0.01)，HPV阳性率为72.72%(24/33)(P＜0.01)。结合病毒感染和重度吸烟探讨发生喉癌因素的相互关系，研究表明：HPV感染和吸烟与C-myc基因激活和Rb、P53基因突变失活有关，是导致喉癌发生发展的多因素、多基因、多阶段的相互作用。