益胃汤对初老大鼠卵巢抑制素α亚基的影响

目的:探讨益胃汤延缓初老大鼠卵巢机能衰老的机制。方法:4~6月龄雌性大鼠为正常对照组;10~12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为:益胃汤高剂量组,益胃汤中剂量组,益胃汤低剂量组,己烯雌酚组,模型对照组,六味地黄丸组。灌药4周后,断头处死,取右侧卵巢用于RT-PCR测卵巢抑制素α亚基mRNA的表达。结果:益胃汤高、中、低剂量组与模型对照组比较,均使卵巢抑制素α亚基mRNA表达增加。结论:益胃汤具有增加卵巢抑制素的分泌的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机制之一。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢细胞色素C表达的影响

目的：探讨“补益阳明津气”延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理。方法：4～6月龄雌性大鼠为正常对照组；10～12月龄，阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为：益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组。灌药4周后检测卵巢细胞色素C。结果：与模型对照组比较，使卵巢细胞色素C表达减少。结论：提示益胃汤具有抑制卵巢细胞凋亡的作用，这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一。     

益胃汤对初老雌性大鼠卵巢细胞凋亡线粒体通路的影响

目的 探讨益胃汤延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理.方法 4~6月龄雌性SD大鼠为正常对照组;10~12月龄、阴道细胞学表现动情期延长的雌性SD大鼠作为初老大鼠模型,随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组.灌药4周后,取左侧卵巢用于检测卵巢Bcl-2、Bax、Caspase3、细胞色素C.结果 与模型对照组比较,益胃汤可使卵巢Bcl-2表达增强,Bax表达减弱,Bcl-2/Bax比例增加(P<0.05),Caspase表达减少,细胞色素C减少,卵巢细胞凋亡减少,但达不到正常对照组水平(P＞0.05),且益胃汤高、中、低剂量组在实验中呈现一定的量效关系.结论 益胃汤通过抑制线粒体通路引起的级联反应抑制初老雌性大鼠卵巢细胞凋亡,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一.     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢流式细胞双标百分比的影响

目的:探讨"补益阳明津气"延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理.为促进绝经前期妇女健康,延缓绝经前期卵巢机能衰老,防治相关病证,提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据.方法:4～6月龄雌性大鼠为正常对照组;10～12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型.模型动物随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组、六味地黄丸组;灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢检测卵巢流式细胞双标百分比.结果:与模型对照组比较,益胃汤可使卵巢流式细胞双标百分比降低.结论:实验研究提示,益胃汤具有抑制卵巢细胞凋亡的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一.     

瓜石汤对初老雌陛大鼠卵巢血管变化的影响

目的：探讨瓜石汤对初老雌性大鼠卵巢血管的影响及机制。方法：筛选10～12月龄初老大鼠随机分组,灌药4周后．取血检测血管内皮生长因子（VEGF）;剖腹取卵巢常规HE染色,光镜观察其组织形态学变化,测量卵巢血管壁厚度、血管腔面积及卵巢直径。结果：在升高初老大鼠血清VEGF方面,各用药组均有效,与模型组比较有统计学意义（P〈0．05）;各用药组大鼠卵巢直径均有所增加．且瓜石汤高剂量组、六味地黄丸组与模型组比较,其差异有统计学意义（P〈0．05）;瓜石汤中、高剂量组与六味地黄丸组可使初老大鼠卵巢血管腔面积增加,降低大鼠卵巢血管壁厚度面积比,与模型组比较均有统计学意义（P〈0．05）。结论：瓜石汤可以升高初老模型大鼠血清VEGF水平,促进初老大鼠卵巢血管再生,增加卵巢门血管腔面积、扩张血管,增加卵巢血液供给．调节血流,改善衰老卵巢组织的缺血、缺氧状况。     

乌萸汤对卵巢不敏感综合征模型小鼠血清INHB、ACT、FS调控作用研究

目的探讨补肾调肝方乌萸汤对卵巢不敏感综合征（ROS）小鼠卵巢抑制素（Inhbibin,INHB）、激活素（activin,ACT）、卯泡抑素（follistatin,FS）系统的影响。方法以小鼠透明带3建立ROS模型。将小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、戊酸雌二醇组、乌萸汤高剂量组、乌萸汤中剂量组、乌萸汤低剂量组6组,每组10只。除空白对照组外,均按预实验方法造模。造模后第6天,各药物组小鼠灌胃给药,每只小鼠每次灌胃量均为0．2mL·（10g）^-1;模型对照组、空白对照组予同量的0．5％羧甲基纤维素纳（CMC）灌胃。连续灌胃4周后摘眼球取血,采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术（Sandwitch ELISA）检测各组小鼠血清INHB、ACT、FS的表达。结果模型对照组血清INHB、FS含量降低,ACT升高,与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;用药各组INHB、FS含量均升高,ACT降低．与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;乌萸汤高剂量组INHB、FS含量高于戊酸雌二醇组,但差异无统计学意义（P〉0．05）;乌萸汤各剂量组ACT含量均高于戊酸雌二醇组,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论乌萸汤可调节ROS模型小鼠血清INHB、ACT、FS水平,说明补肾调肝中药可以通过调控卵巢内部因子,从而间接调节下丘脑-垂体-卵巢轴。改善卵巢生殖内分泌功能。     

乌萸汤对卵巢不敏感综合征模型小鼠血清INHB、 ACT、FS调控作用研究

目的探讨补肾调肝方乌萸汤对卵巢不敏感综合征（ROS）小鼠卵巢抑制素（Inhbibin,INHB）、激活素（activin,ACT）、卯泡抑素（follistatin,FS）系统的影响。方法以小鼠透明带3建立ROS模型。将小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、戊酸雌二醇组、乌萸汤高剂量组、乌萸汤中剂量组、乌萸汤低剂量组6组,每组10只。除空白对照组外,均按预实验方法造模。造模后第6天,各药物组小鼠灌胃给药,每只小鼠每次灌胃量均为0．2mL&#183;（10g）^-1;模型对照组、空白对照组予同量的0．5％羧甲基纤维素纳（CMC）灌胃。连续灌胃4周后摘眼球取血,采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术（Sandwitch ELISA）检测各组小鼠血清INHB、ACT、FS的表达。结果模型对照组血清INHB、FS含量降低,ACT升高,与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;用药各组INHB、FS含量均升高,ACT降低．与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;乌萸汤高剂量组INHB、FS含量高于戊酸雌二醇组,但差异无统计学意义（P〉0．05）;乌萸汤各剂量组ACT含量均高于戊酸雌二醇组,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论乌萸汤可调节ROS模型小鼠血清INHB、ACT、FS水平,说明补肾调肝中药可以通过调控卵巢内部因子,从而间接调节下丘脑-垂体-卵巢轴。改善卵巢生殖内分泌功能。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢微血管密度的影响

目的:探讨"补益阳明津气"延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理,并以此佐证中医传统经典理论"五七,阳明脉衰"在绝经前期生殖轴机能衰老中的重要影响,为促进绝经前期妇女健康、延缓绝经前期卵巢机能衰老、防治相关病症提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据.方法:4～6个月龄雌性大鼠为正常对照组,10～12个月龄、阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型.模型动物随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组、六味地黄丸组.灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢用于检测卵巢血管.结果:与模型对照组比较,补益阳明津气可使卵巢内微血管数目增加,改善卵巢局部微循环,增加卵巢血供.结论:益胃汤具有改善卵巢局部血供的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一.     

补肾复方对初老大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2Bax表达的影响

目的：研究补肾复方对初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞凋亡相关蛋白Bcl-2，Bax表达的影响。方法：采用12月龄的Wistar雌性大鼠，随机分为模型对照组，补肾复方高、中、低剂量组，阳性对照组,另设4月龄青年对照组和18月龄老年对照组。采用免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物（SABC）方法研究各组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2，Bax蛋白表达的影响。结果：与青年组比较。初老组、老年组大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2表达明显降低（P〈0．05），Bax表达明显增高（P〈0．05）。Bcl—2／Bax比例降低：经药物干预后，补肾复方高、中、低剂量组及阳性对照组，均能上调Bcl-2表达（P〈0．05）。下调Bax表达（P〈0．05）。使Bcl-2／Bax比例增高；其中高剂量组的Bcl-2，Bax变化表达明显，达到青年组水平（P〉0．05）。结论：上调初老雌性大鼠卵巢颗粒细胞Bcl-2表达，下调Bax表达，可能是补肾复方延缓卵巢衰老的机制之     

乌萸汤含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞INHB＼FSHRmRNA及分泌功能的影响

[目的】运用血清药理学方法观察乌萸汤含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞抑制素（INHB）、促卵泡激素受体（FSHR）mRNA的表达及其分泌功能的影响。[方法]在大鼠卵巢颗粒细胞培养体系中加入乌萸汤、尿促卵泡激素（FSH）及正常大鼠含药血清,培养48h后,分别用酶联免疫吸附法（ELISA）,逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）及放免法测定颗粒细胞INHB、FSHR、mRNA及培养液中雌二醇（E2）含量。【结果】各用药血清组E2含量较对照组均明显升高;颗粒细胞INHB、FSHRmRNA表达量明显增多,其中乌萸汤中剂量血清组效果优于西药组。[结论1乌萸汤含药血清能明显促进卵巢颗粒细胞INHB、FSHRmRNA的表达以及E2分泌,说明乌萸汤可以通过调控卵巢局部因子、增强FSHRmRNA的表达从而提高卵巢对促性腺激素的反应性,改善下丘脑-垂体-卵巢轴,促进E2的分泌,以促进卵泡发育成熟及排出。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢门血管影响的实验研究

目的探讨“补益阳明津气”对初老雌性大鼠卵巢门血管的影响,并以此佐证中医传统经典理论“五七,阳明脉衰”在绝经前期生殖轴机能衰老中的重要影响。为促进绝经前期妇女健康、延缓绝经前期卵巢机能衰老、防治相关病症提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据。方法4-6月龄雌性大鼠为正常对照组;10—12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为益胃汤高剂量组、益胃汤中剂量组、益胃汤低剂量组、己烯雌酚组、模型对照组和六味地黄丸组。灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢用于检测卵巢门血管。结果与模型对照组比较,益胃汤高、中剂量组卵巢门血管壁变薄,管腔扩大,卵巢血供增加。结论实验研究提示益胃汤具有改善卵巢局部血供的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机制之一。     

补益阳明津气对初老雌性大鼠卵巢Caspase3表达影响的实验研究

目的:探讨"补益阳明津气"延缓初老雌性大鼠卵巢机能衰老的机理,并以此佐证中医传统经典理论"五七,阳明脉衰"在绝经前期生殖轴机能衰老中的重要影响。为促进绝经前期妇女健康,延缓绝经前期卵巢机能衰老,防治相关病症,提供一种新的研究与论治思路,并为研制相关方药提供药效学依据。方法:4~6个月龄雌性大鼠为正常对照组;10~12个月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性大鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为:(1)益胃汤高剂量组;(2)益胃汤中剂量组;(3)益胃汤低剂量组;(4)己烯雌酚组;(5)模型对照组;(6)六味地黄丸组。灌药4周后,断头处死,取左侧卵巢用于检测卵巢Caspase3。结果:与模型对照组比较,使卵巢Caspase3表达减少。结论:实验研究提示益胃汤具有抑制卵巢细胞凋亡的作用,这可能是其延缓卵巢机能衰老的机理之一。     

“益坤宁”对自然老化大鼠性激素的调节及卵巢修复的研究

目的：研究中药益坤宁对围绝经期大鼠卵巢功能和结构的影响。方法：选用11～13月龄雌性围绝经期wistar大鼠32只。随机将其分为模型组、益坤宁组、西药对照组。另选青年大鼠10只，月龄4个月，作为青年对照组，采用血清性激素分泌水平、血管内皮生长因子（VEGF）、颗粒细胞调亡及细胞形态等指标来观察益坤宁对卵巢结构和功能的影响。结果：益坤宁组与模型组比较，各项指标差异均有显著性或极显著性（P〈0．05或P〈0．01）。结论：研究证实益坤宁可升高围绝经期大鼠血清E2、P水平，降低血清FSH、LH水平；对围绝经期大鼠卵巢VEGF有促进作用；对卵巢颗粒细胞凋亡有抑制作用，提示益坤宁可以阻止卵泡闭锁，从而达到预防和延缓卵巢衰老的作用机制。     

益肾调经方防治雷公藤多苷致雌性肾病大鼠性腺抑制的实验研究

目的：研究益肾调经方对雷公藤多苷致雌性肾病大鼠性腺组织的结构和功能的影响。方法：大鼠随机分为7组。正常对照组、肾病模型组、性腺抑制组、益肾调经方水煎液高、中、低剂量组和阳性对照组。8周用药结束后摘眼球取血，颈椎脱臼处死大鼠，分离大鼠子宫、卵巢。计算子宫、卵巢重量指数，血清性激素测定，子宫、卵巢形态学变化观察及图像分析。结果：性腺抑制组子宫、卵巢的重量指数明显下降，子宫内膜厚度变薄，卵泡数量减少，血清中雌二醇（E2）、孕酮（P）含量下降。加用益肾调经方的高、中、低剂量中药治疗组治疗后子宫、重量指数，子宫内膜厚度，卵泡数量，E2、P含量的变化，与性腺抑制模型组比较具有统计学差异，与正常对照组、肾病模型组比较变化不大。结论：益肾调经方具有对抗雷公藤多苷所致大鼠子宫、卵巢重量下降，子宫内膜厚度变薄，卵泡数量减少，E2、P的含量减少等作用，能防治雷公藤多苷所致的性腺抑制。     

护卵汤对卵巢储备功能减退大鼠血清性激素及抗苗勒管激素、抑制素B的影响

目的观察中药护卵汤对卵巢储备功能减退(DOR)大鼠血清性激素及抗苗勒激素(AMH)、抑制素B(INHB)的影响。方法选取动情周期为4～5 d的雌性大鼠48只为实验动物,采用环磷酰胺(CTX)单次腹腔注射的方法制备DOR大鼠模型,以护卵汤为实验药物,以戊酸雌二醇为阳性对照药物,给药4周结束后检测各组大鼠血清性激素及AMH、INHB的变化。结果与空白组相比,模型组大鼠血清中E2、P、AMH、INHB的含量均降低(P0.01),FSH、LH、T的含量均增高(P0.01);与模型组相比,护卵汤组和补佳乐组大鼠血清中E2、P、AMH、INHB的含量均增高(P0.05),FSH、LH、T的含量均降低(P0.01)。结论护卵汤对CTX所引起的DOR大鼠模型的卵巢功能具有保护作用。     

补益阳明津气方药对雌性初老大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

目的:经实验研究探讨“补益阳明津气”方药对雌性初老大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响。方法:4月龄～6月龄雌性大鼠为正常对照组;10月龄～12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的雌性犬鼠作为初老大鼠模型。模型动物随机分为:(1)益胃汤高剂量组、(2)益胃汤中剂量组、(3)益胃汤低剂量组、(4)己烯雌酚组、(5)模型对照组。各模型组灌药4周后,下丘脑制成匀浆,荧光分光分析法测定5-HT、NE、DA。结果:与模型对照组比较,“补益阳明津气”方药益胃汤能明显升高下丘脑5-HT水平及5-HT/NE比值,降低下丘脑DA水平及DA/NE比值。结论:“补益阳明津气”方药益胃汤能调节雌性初老大鼠下丘脑神经递质的紊乱,进而起到延缓生殖轴机能衰老的作用。     

加减益经汤对卵巢功能减退大鼠转化生长因子β超家族相关成员的影响

【目的】 观察加减益经汤对环磷酰胺所致卵巢功能减退大鼠卵巢转化生长因子 β（TGF-β）超家族相关成员的影响。【方法】 将60只成年雌性SD大鼠随机分为空白组，模型组，加减益经汤高、中、低剂量组，补佳乐组，每组10只。除空白组，其余各组大鼠采用环磷酰胺 75 mg/kg腹腔单次注射法构建卵巢功能减退模型。造模后2 h，加减益经汤高、中、低剂量组分别给予加减益经汤23.58、11.79、5.895 g·kg-1·d-（1 生药剂量）灌胃，补佳乐组给予补佳乐混悬液0.09 mg·kg-1·d-1灌胃，模型组与空白组灌胃等体积蒸馏水，1次/日，连续28 d。模型组在造模后2周，其他治疗组在给药结束后，于动情间期处死。酶联免疫吸附分析（ELISA）检测血清抗苗勒氏管激素（AMH）、抑制素 B（INHB）水平，免疫组织化学法检测卵巢中AMH、TGF-β1、转化生长因子β1受体（TGF-β1R）、骨形态发生蛋白15（BMP-15）的表达。【结果】 与空白组比较，模型组大鼠血清AMH、INHB水平，卵巢组织中AMH、TGF-β1、TGF-β1R、BMP-15表达水平均降低（P < 0.01）；与模型组比较，加减益经汤高、中、低剂量组及补佳乐组大鼠血清AMH水平，卵巢组织中AMH、TGF-β1、TGF-β1R、BMP-15的表达水平均升高（P < 0.05 或 P < 0.01），加减益经汤高、中剂量组血清 INHB 水平明显升高（P＜0.01）。【结论】 加减益经汤可通过上调TGF-β超家族中AMH、INHB、TGF-β1、TGF-β1R、BMP-15的表达来改善环磷酰胺诱导的卵巢功能减退大鼠卵巢储备功能。     

六味地黄方对去卵巢雌性大鼠动脉粥样硬化模型的影响

目的 研究六味地黄方对去卵巢雌性大鼠(OVX)动脉粥样硬化(AS)模型的影响.方法 雌性大鼠陈假手术组外,其他组均切除两侧卵巢并饲以高脂饲料及维生素D3复制更年期动脉粥样硬化模型.将模型大鼠随机分为模型组、苯甲酸雌二醇(E2)组、六味地黄方组.观察给药后大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、子宫脏器指数、雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)水平的变化.结果 六味地黄方可以显著降低去卵巢雌性大鼠血清中TC,TG,LDLC水平,升高HDL-C水平,还可显著降低血浆中AngⅡ水平,与模型组比较差异均有显著性(P＜0.05或P＜0.01);六味地黄方还有升高模型大鼠血清E2和子宫指数的趋势,但与模型组比较没有显著性差异.结论 六味地黄方可通过降低血清TC、TG及LDL-C、AngⅡ水平和升高HDL-C水平减轻更年期动脉粥样硬化病变的程度.六味地黄方调节雌激素水平的作用不是改善更年期动脉粥样硬化的主要途径.     

乌萸汤含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞INHB、FSHR mRNA及分泌功能的影响

[目的]运用血清药理学方法观察乌萸汤含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞抑制素(INHB)、促卵泡激素受体(FSHR)mRNA的表达及其分泌功能的影响。[方法]在大鼠卵巢颗粒细胞培养体系中加入乌萸汤、尿促卵泡激素(FSH)及正常大鼠含药血清,培养48h后,分别用酶联免疫吸附法(ELISA),逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及放免法测定颗粒细胞INHB、FSHR、mRNA及培养液中雌二醇(E2)含量。[结果]各用药血清组E2含量较对照组均明显升高;颗粒细胞INHB、FSHRmRNA表达量明显增多,其中乌萸汤中剂量血清组效果优于西药组。[结论]乌萸汤含药血清能明显促进卵巢颗粒细胞INHB、FSHRmRNA的表达以及E2分泌,说明乌萸汤可以通过调控卵巢局部因子、增强FSHRmRNA的表达从而提高卵巢对促性腺激素的反应性,改善下丘脑-垂体-卵巢轴,促进E2的分泌,以促进卵泡发育成熟及排出。     

调经助孕胶囊对环磷酰胺化疗大鼠性激素及AMH、INHB的影响

目的:探讨调经助孕胶囊对环磷酰胺诱导的大鼠卵巢功能损伤的修复保护作用。方法:SD成熟雌性大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组(亮丙瑞林0.25mg/只)、调经助孕胶囊低、中、高剂量组(分别为成人等效剂量的1倍、2倍、4倍),除空白组每天注射生理盐水外,其余各组大鼠腹腔注射环磷酰胺复制卵巢早衰模型,并同时灌胃给予相应药物。ELISA法测定外周血清雌二醇(Estradiol,E_2)、促卵泡激素(Follicle Stimulaling Hormone,FSH)、抑制素B(Inhibin B,INHB)、抗苗勒氏管激素(Auti-Mullerian Hormone,AMH)含量,比较各组大鼠间体重、卵巢等脏器重量,并进行大鼠卵巢组织形态学观察。结果:与模型组相比,调经助孕胶囊高剂量组均能显著增加大鼠的体重、卵巢脏器重量(P0.05),改善卵巢组织病理学改变,有效提高E_2、AMH、INHB含量、降低FSH含量(P0.05)。结论:调经助孕胶囊对化疗所致的卵巢功能损害发挥防治作用,对雌性大鼠生殖系统有一定的保护作用。