连翘酯苷A对溃疡性结肠炎模型大鼠免疫功能的影响

目的:研究连翘酯苷A对溃疡性结肠炎大鼠免疫功能的影响,并探讨其相关作用机制。方法:将健康SD大鼠随机分为5组:对照组(不做任何处理,正常喂养)、模型组(建立溃疡性结肠炎大鼠模型)及连翘酯苷A低、中、高剂量组(分别给予模型大鼠5 mg/kg、20 mg/kg和80 mg/kg连翘酯苷A灌胃)。比色法检测大鼠结肠组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)和IL-4含量;还测定脾脏指数和胸腺指数,外周血单个核细胞(PBMC)中CD3~+、CD4~+和CD8~+T淋巴细胞百分比,血清IgA和IgG水平,以及血清补体C3和C4水平。结果:模型组大鼠结肠组织出现明显炎症和溃疡,提示造模成功;与模型组比较,连翘酯苷A各剂量组大鼠结肠炎症和溃疡明显减轻,其中高剂量组效果最好。与对照组比较,模型组大鼠脾脏指数和胸腺指数降低(P0. 05),结肠组织中MDA含量增多(P0. 05),SOD活性降低(P0. 05),PBMC中CD3~+、CD4~+和CD8~+水平及CD4~+/CD8~+比值降低(P0. 05),血清补体C3和C4水平及IL-4含量降低(P0. 05),血清IgA、IgG、TNF-α和IL-2含量升高(P0. 05);与模型组比较,连翘酯苷A各剂量组大鼠脾脏指数和胸腺指数升高(P0. 05),结肠组织中MDA含量降低(P0. 05),SOD活性增强(P0. 05),PBMC中CD3~+、CD4~+和CD8~+水平及CD4~+/CD8~+比值升高,血清补体C3和C4水平及IL-4含量升高(P0. 05),血清IgA、IgG、TNF-α和IL-2含量降低(P0. 05),均呈剂量依赖性变化。结论:连翘酯苷A能有效减轻溃疡性结肠炎大鼠结肠病变,其作用机制与增强氧自由基清除力、抑制炎症反应和增强免疫功能有关。     

甘肃党参水煎剂对D-半乳糖诱导衰老小鼠免疫功能的影响

目的 研究甘肃党参水煎剂对D-半乳糖诱导衰老小鼠免疫功能的影响.方法 采用D-半乳糖诱导亚急性衰老小鼠模型,测定每组小鼠的体质量,计算脾脏指数和胸腺指数,观察脾脏组织超微结构,采用免疫组化法检测CD138的表达,ELISA检测小鼠血清中IgG、IgM和补体C3、C4含量.结果 与正常对照组相比,衰老模型组小鼠的脾脏指数和胸腺指数显著降低(P＜0.01),与模型组比较,高、低剂量党参组和维生素E组小鼠的脾脏指数和胸腺指数显著升高(P＜o.ol).正常对照组脾小体中淋巴细胞的超微结构均正常,而模型组小鼠的脾脏超微结构有明显的损伤现象.低、高剂量党参组和维生素E组均使已受损伤的脾脏超微结构得以修复,其中高剂量党参组使受损的脾脏超微结构恢复到最接近正常水平.与正常对照组比较,衰老模型组小鼠脾脏组织中CD138的表达率较低(P＜0.01),小鼠血清中IgG、IgM和补体C3、C4含量显著减少(P＜0.01或P ＜0.05);与衰老模型组比较,正常对照组和高剂量党参组小鼠脾脏组织中CD138的表达率较高(P＜0.01),小鼠血清中IgG、IgM和补体C3、C4含量显著增加(P＜0.01或P＜0.05),而党参低剂量组和维生素E组无显著差异(P＞0.05).结论 甘肃党参水煎剂具有增强D-半乳糖诱导衰老小鼠免疫功能的作用.     

藏药短管兔耳草醇提物对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

研究藏药短管兔耳草醇提物对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。随机将小鼠分为正常对照组、模型组、兔耳草醇提物组(2.0、4.0、8.0g/kg),均连续灌胃给药15d,模型组为环磷酰胺制备免疫抑制模型,检测胸腺脾脏指数、血清溶血素抗体生成、碳粒廓清指数、迟发型超敏反应,流式检测脾脏T细胞亚群的变化及IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ的水平。与模型组相比,兔耳草醇提物各剂量组均可提高小鼠胸腺指数(P0.05),高、中剂量组可提高小鼠胸腺脾脏指数(P0.05,P0.01),同时各剂量组可增加血清溶血素含量(P0.05)、提升小鼠的廓清指数(P0.05)和DNCB所致迟发型超敏反应(P0.01)。此外,通过流式细胞仪对各组小鼠脾脏中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的检测发现,兔耳草醇提物组可增加小鼠脾脏T细胞的活化与数量,且CD4+/CD8+T细胞比值有差异(P0.01);另外,兔耳草各剂量组可提升小鼠的IL-4、IFN-γ的水平(P0.05),但会抑制IL-2、TNF-α的分泌(P0.05)。以上结果提示藏药短管兔耳草醇提物可从多方面缓解免疫抑制小鼠的免疫功能。     

雪灵芝粗多糖对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的探讨雪灵芝粗多糖(arenaria kansuensis crude polysaccharide,AKCP)对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法将小鼠随机分为5组:空白对照组、环磷酰胺(CTX)模型组、AKCP高、中、低剂量组。除空白对照组外其他4组采用腹腔注射CTX建立小鼠免疫低下模型。各组分别给予蒸馏水、不同剂量AKCP灌胃,10 d后处死小鼠,检测体质量增率、胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞增殖活性和CD3~+/CD4~+/CD8~+亚群、NK细胞杀伤活性、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、血清中IL-2和IFN-γ水平。结果 CTX组除NK细胞杀伤活性外的上述各项指标均较对照组明显降低(P0.05),不同剂量AKCP作用可减轻CTX所致的各项指标下降,其中AKCP高、中剂量组体质量增率、胸腺指数、脾淋巴细胞CD3~+及CD3~+CD8~+亚群、巨噬细胞吞噬率与吞噬指数均较CTX模型组明显升高(P0.05),AKCP低剂量组脾脏指数、脾淋巴细胞增殖指数以及IL-2和IFN-γ水平显著高于CTX模型组(P0.05)。结论 AKCP对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的免疫功能有保护作用。     

富硒板桥党参合剂增强衰老小鼠的免疫功能

目的研究富硒板桥党参(RSBCP)合剂对衰老小鼠免疫功能的影响。方法昆明种小鼠60只,雌雄各半,随机分为RSBCP合剂高剂量组、中剂量组、低剂量组、模型组及对照组,每组12只。对照组按500 mg/(kg·d)腹腔注射生理盐水,其他各组注射等量D-半乳糖。RSBCP合剂高、中、低剂量组在注射D-半乳糖的同时按(100、50、25)g/(kg·d)RSBCP合剂灌胃,模型组、对照组等量蒸馏水灌胃。30 d后,处死小鼠。测定胸腺指数、脾脏指数,ELISA检测各组小鼠血清中IgG、IgM、C3、C4、白细胞介素2(IL-2)、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,采用细胞流式术分析脾细胞主要T细胞亚群。结果与对照组相比,模型组胸腺指数、脾脏指数明显下降,IgG、IgM及C3、C4、IL-2、IL-6含量显著减少、TNF-α含量明显增加;与模型组比较,RSBCP合剂各组胸腺指数、脾脏指数显著增大,IgG、IgM及C3、C4、IL-2、IL-6含量显著增加、TNF-α含量减少;与对照组相比,RSBCP高剂量组胸腺指数、脾脏指数增大显著,IgG、IgM及C3、C4、IL-2、IL-6含量明显增加、TNF-α含量减少;中、低剂量RSBCP组胸腺指数、脾脏指数、IgG、IgM及C3、C4、TNF-α与对照组无显著性差异。与对照组相比,模型组CD3~+T细胞、CD4~+T细胞及CD44~+T细胞有明显减少,CD8~+T细胞明显增加;与模型组相比,RSBCP合剂各组CD3~+T细胞、CD4~+T细胞及高、中剂量RSBCP组CD44~+T细胞显著增加,CD8~+T细胞明显减少。结论 RSBCP合剂对衰老小鼠胸腺、脾脏萎缩有一定的延缓作用,能显著提高衰老小鼠血清中IgG、IgM、C3及C4含量,提升IL-2、IL-6水平,降低TNF-α水平,影响T细胞亚群的比例,对增强免疫功能有作用。     

藏药兔耳草醇提物对小鼠免疫功能的影响

为研究藏药兔耳草醇提物对小鼠免疫功能的影响,随机将小鼠分为正常对照组、模型组、兔耳草醇提物组,模型组用醋酸泼尼松,均连续灌胃给药15d,检测胸腺脾脏指数、血清溶血素抗体生成、迟发型超敏反应和脾脏T细胞亚群变化。后进行小鼠廓清指数的测定及IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ的检测。与模型组相比,兔耳草醇提物组中剂量组(4.0g/kg)和高剂量组(8.0g/kg)可显著提高小鼠胸腺脾脏指数(P0.01),同时增强血清溶血素含量(P0.01)和DNFB所致迟发型超敏反应。此外,通过流式细胞仪对各组小鼠脾脏中CD3~+T、CD4~+T、CD8~+T的检测发现,各剂量兔耳草醇提物组可增加小鼠脾脏T细胞的活化与数量。在廓清实验中,各剂量组均可提升小鼠的廓清指数,但只有高剂量组有差异性(P0.05)。此外,兔耳草醇提物各剂量组可提升小鼠的IL-2水平,且有一定的剂量关系;高、中剂量组能够增加IL-4的含量,高、低剂量组能够提升IFN-γ的水平(P0.05,P0.01);中剂量组能够增加IL-6的含量(P0.05)。由此提示藏药兔耳草醇提物可以从多方面调节小鼠的免疫功能。     

不同剂量桃仁提取物对急性胰腺炎大鼠肠道黏膜屏障功能及免疫功能的作用

目的:研究不同剂量桃仁提取物对急性胰腺炎大鼠肠道黏膜屏障功能及免疫功能的作用。方法:48只大鼠制备SAP模型后随机分为模型对照组、桃仁提取物低剂量、中剂量和高剂量组,每组12只。另取12只大鼠作为假手术组,造模麻醉苏醒即开始干预,桃仁提取物低剂量组、中剂量组和高剂量组分别灌胃给予桃仁提取物0.12、0.248和0.36 g/kg,假手术组及模型组给予等体积蒸馏水灌胃,各组灌胃均1次/6 h,连续4次。给药后24 h应用10%水合氯醛麻醉各组大鼠,打开胸腔和腹腔,腹主动脉分别抽取5 ml血样于EDTA抗凝管和非抗凝管内,分别应用荧光直接标记法和流式细胞仪进行CD4+、CD8+和Treg细胞测定,采用免疫比浊法测定Ig A、Ig G和Ig M,采用EPS-G7底物法测定血清淀粉酶水平,采用酶学分光光度法检测血清D-乳酸水平,采用活性比色法测定血清二胺氧化酶;取小肠组织HE染色后采用光学显微镜进行病理学检查;取小肠组织采用放射免疫法进行s Ig A测定以及采用RT-PCR法进行TLR4和NF-κBp65 mRNA测定。结果:(1)中剂量和高剂量组大鼠血清淀粉酶、D-乳酸和二胺氧化酶水平均较低剂量组大鼠显著降低(P0.01),小肠黏膜s Ig A较低剂量组显著升高(P0.01),并且高剂量组和中剂量组差异具有统计学意义(P0.01);(2)桃仁提取物中剂量和高剂量组血液CD4+、CD4+/CD8+较低剂量组大鼠显著升高(P0.01),CD8+、Treg细胞较低剂量组大鼠显著降低(P0.01),并且高剂量组和中剂量组差异均具有统计学意义(P0.01);(3)桃仁提取物中剂量和高剂量组血清Ig A、Ig G、Ig M较低剂量组大鼠显著升高(P0.01),并且高剂量组和中剂量组差异均具有统计学意义(P0.01);(4)假手术组大鼠小肠黏膜无显著损伤,模型对照组大鼠小肠黏膜显著损伤,低剂量组大鼠小肠黏膜病理情况与模型组基本相似,中剂量和大剂量组大鼠小肠黏膜损伤显著降低;(5)桃仁提取物中剂量和高剂量组小肠组织TLR4和NF-κBp65 mRNA较低剂量组大鼠显著降低(P0.01),并且高剂量组和中剂量组差异均具有统计学意义(P0.01)。结论:桃仁提取物对急性胰腺炎大鼠肠道屏障功能具有保护作用,并且显著改善急性胰腺炎大鼠的免疫功能。     

腹腔注射胶原蛋白肽增强糖皮质激素免疫抑制模型小鼠的免疫功能

目的观察腹腔注射胶原蛋白肽对糖皮质激素诱导的免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法采用糖皮质激素诱导的免疫抑制小鼠模型,连续7 d腹腔注射给予100、300、600 mg胶原蛋白肽/kg体质量。分别测量小鼠体质量、胸腺和脾脏质量,计算胸腺和脾脏指数;采用全自动血球计数仪检测外周血白细胞总数、中性粒细胞和淋巴细胞数、中性粒细胞和淋巴细胞百分比,采用流式细胞术检测CD4+/CD8+比值;采用MTT法检测刀豆蛋白A(ConA)诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力。结果与对照组相比,模型组小鼠中性粒细胞数及其百分比显著升高(P0.05),体质量、胸腺指数、脾脏指数、淋巴细胞数及其百分比、CD4+/CD8+比值、脾脏T淋巴细胞增殖能力显著降低(P0.05);腹腔注射胶原蛋白肽后,这些指标均向对照组水平恢复,并呈剂量依赖性关系;其中剂量最高600 mg/kg组的小鼠体质量、脾脏指数、淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+比值显著高于模型组,中性粒细胞百分比显著低于模型组(P0.05),与对照组相比无显著差异。结论腹腔注射胶原蛋白肽能够增强小鼠的免疫功能。     

益生菌缓解环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下

目的:探索益生菌对环磷酰胺(CTX)所致小鼠免疫功能低下的影响。方法:24只C57BL/6小鼠随机分为对照组、CTX组和益生菌+CTX组,每组8只。对照组和CTX组小鼠灌胃给予生理盐水[0.2 ml/(只·d)],益生菌+CTX组[灌胃益生菌(0.75 g,0.2 ml,75亿菌落形成单位活菌/(只·d)],连续给药20 d,第15天开始除正常组外其余2组小鼠连续3 d腹腔注射CTX 50 mg/(kg·d)。第21天处死小鼠,检测血常规,计算胸腺及脾脏指数;MTT法检测T细胞及B细胞增殖指数;流式细胞术检测脾细胞中CD4~+、CD8~+T细胞百分率及CD4/CD8,脾细胞凋亡率。结果:CTX组各检测指标均显著低于正常组(P0.05),脾细胞凋亡增多(P0.05);益生菌+CTX组的白细胞数、血小板数、胸腺指数、T细胞增殖指数、CD4~+ T细胞、CD8~+ T细胞百分率及CD4/CD8均高于CTX组(P0.05),脾细胞凋亡率降低(P0.05);与对照组相比,益生菌+CTX组的血小板数、脾脏指数、T淋巴细胞增殖指数、CD4~+ T细胞、CD8~+ T细胞百分率及CD4/CD8和脾淋巴细胞凋亡率差异无统计学意义(P0.05)。结论:益生菌可以显著增强CTX所致免疫低下小鼠的免疫功能。     

羧胺三唑增强小鼠脾脏淋巴细胞促进结肠癌细胞系MC38和C26凋亡

目的探讨羧胺三唑(CAI)直接或通过小鼠脾脏淋巴细胞间接对小鼠结肠癌细胞系(MC38和C26)存活和凋亡的影响。方法体外培养结肠癌细胞系MC38和C26细胞,分离小鼠脾脏淋巴细胞,MC38和C26细胞分别与小鼠脾脏淋巴细胞共培养,不同浓度CAI处理细胞。CCK-8法检测细胞存活,流式细胞测量术检测细胞凋亡以及小鼠脾脏淋巴细胞中CD4~+CD3~+ T细胞和CD8~+CD3~+ T细胞的比例。结果不同浓度CAI处理MC38和C26细胞后,活细胞数目减少(P0.05、P0.01和P0.001),凋亡率升高(P0.01和P0.001);MC38和C26细胞分别与小鼠脾脏淋巴细胞共培养48 h后,MC38和C26细胞数目减少(P0.001),凋亡率升高(P0.001);不同浓度CAI处理小鼠脾脏淋巴细胞共培养条件下的MC38和C26细胞48 h,与单独小鼠脾脏淋巴细胞处理相比,MC38和C26细胞数目进一步减少(P0.001),凋亡率进一步升高(P0.05和P0.001);不同浓度CAI处理小鼠脾脏淋巴细胞48 h后,小鼠脾脏淋巴细胞中CD4~+CD3~+ T细胞和CD8~+CD3~+ T细胞的比例显著升高(P0.05和P0.01)。结论 CAI抑制MC38和C26细胞存活、促进细胞凋亡,并可能通过升高小鼠脾脏淋巴细胞中CD4~+CD3~+ T细胞和CD8~+CD3~+ T细胞的比例增强小鼠脾脏淋巴细胞抑制MC38和C26细胞存活、促进细胞凋亡。     

水母雪莲乙醇提取物对Lewis肺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫的影响

目的：初步探讨藏药水母雪莲(SMM)的体内外抗肿瘤免疫功能。方法：C57BL/6野生小鼠接种3LL细胞建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为生理盐水组、SMM1低剂量组、SMM2中剂量组、SMM3高剂量组和环磷酰胺(CTX)组,体内连续治疗21 d。检测Lewis肺癌荷瘤小鼠实体瘤体积、质量和体质量;计算胸腺、脾脏指数;流式细胞仪检测肿瘤浸润组织淋巴细胞(TIL)的CD4⁺T、CD8⁺T百分比和CD4⁺T/CD8⁺T比例。体内MTT法检测80、100μg/ml SMM乙醇提取物对Lewis肺癌荷瘤小鼠脾CTL杀伤活性的影响;El ISA法检测CTL分泌IFN-γ的水平。结果：与生理盐水组比较,SMM乙醇提取物可显著抑制肿瘤生长并维持荷瘤小鼠体质量增长;胸腺和脾脏指数均显著升高(P<0.05);TIL中CD4⁺T和CD4⁺T/CD8⁺T水平显著升高(P<0.05),SMM1和SMM3组CD8⁺T显著降...     

痰热清注射液对Lewis肺癌化疗模型小鼠免疫功能的影响

目的研究痰热清注射液对Lewis肺癌化疗模型小鼠免疫功能的影响探讨该药对肺癌机体的免疫调节作用。方法构建小鼠Lewis肺癌模型,分为模型对照组、单独化疗组、联合痰热清化疗组及正常对照组。每组均为8只小鼠。各组治疗后,摘眼球取血、脾脏和胸腺观察各组小鼠脾脏和胸腺指数及外周血淋巴细胞计数、外周血淋巴细胞亚群比例、脾淋巴细胞增殖活性、外周血血清中IFN-γ、TNF-α、IL-4的水平及小鼠脾NK细胞杀伤活性。结果化疗后,联合痰热清化疗组小鼠脾指数、胸腺指数及外周血淋巴细胞计数明显高于单独化疗组(P0.05);联合痰热清组小鼠外周血CD4+T细胞比例明显高于单独化疗组而CD4+CD25+T细胞比例明显低于单独化疗组(P0.01);痰热清组小鼠外周血IFN-γ、TNF-α含量明显高于单独化疗组(P0.01),同时脾淋巴细胞增殖活性和NK细胞杀伤活性明显高于单独化疗组(P0.01)。结论痰热清注射液对肺癌化疗机体的免疫系统有明显保护作用,并对抗肿瘤免疫力有明显的促进作用。     

猪苓及猪苓多糖对BBN诱导的膀胱癌大鼠胸腺、脾指数及CD86表达的影响

目的观察猪苓及猪苓多糖(PPS)对BBN诱导膀胱癌过程中对大鼠胸腺、脾指数和膀胱组织免疫细胞浸润及CD86表达的影响,从而探讨其抗肿瘤作用中的免疫学机理。方法用N-丁基-N-4-羟丁基亚硝胺(BBN)和糖精水诱导建立Fisher344大鼠膀胱肿瘤模型,实验分6组即对照组、模型组、PPS组(130 mg.kg-1)及猪苓低、中、高剂量组(剂量分别为50、250、500 mg.kg-1)。用称重法测定大鼠的体质量和胸腺、脾脏质量,计算胸腺指数和脾指数;苏木素-伊红(HE)染色观察各组间质淋巴细胞浸润情况,免疫组化法观察各组大鼠膀胱组织CD86的表达情况。结果模型组大鼠胸腺指数显著降低(P<0.05);PPS组的胸腺指数明显高于模型组(P<0.05),猪苓各组脾指数与模型组比较差异无统计学意义。PPS组、猪苓低剂量和中剂量组淋巴细胞浸润较明显,可见淋巴滤泡形成;PPS组与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。模型组膀胱肿瘤组织中CD86弱表达或几乎不表达;PPS组膀胱癌上皮CD86表达明显增强,且癌旁上皮CD86有表达。结论猪苓和PPS可通过影响膀胱癌模型大鼠胸腺、脾指数和膀胱组织及癌旁组织淋巴细胞浸润及CD86表达,PPS的作用更显著,猪苓和PPS参与了抑制肿瘤的发生发展过程。     

小鼠NASP基因突变对脾脏淋巴细胞亚群的影响

目的制备NASP基因突变小鼠,探讨NASP基因突变对小鼠脾脏淋巴细胞亚群的影响。方法通过ES打靶技术定点突变小鼠NASP基因,提取鼠尾DNA,通过PCR和DNA测序技术鉴定突变阳性小鼠B6-NASP~M,通过RT-PCR和Western blot检测NASP的mRNA和蛋白表达水平。取6月龄B6-WT小鼠和B6-NASP~M小鼠脾脏,计算脾脏指数并用流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞亚群的比例和细胞周期。结果 PCR和DNA测序检测显示,成功制备了B6-NASP~M小鼠;NASP基因突变后不影响NASP蛋白在皮肤、脾脏、胸腺的表达。NASP基因突变对小鼠脾脏指数无显著影响(P0.05)。流式细胞术检测结果表明,B6-NASPM小鼠与B6-WT小鼠相比,其脾脏CD3~+T细胞比例下降(P0.01),CD19~+B细胞比例上升(P0.01);CD3~+CD4~+T细胞比例下降(P0.05),CD3~+CD8~+T细胞比例上升(P0.01),CD4/CD8比值下降(P0.01);NK细胞比例下降(P0.05)。B6-NASPM小鼠脾脏淋巴细胞S期细胞略高于B6-WT小鼠(P0.05)。结论 NASP基因突变不影响NASP蛋白的表达,但可以改变小鼠脾脏的淋巴细胞的比例,造成B细胞比例升高,T细胞比例降低,降低CD4/CD8比值,从而造成小鼠免疫功能紊乱。     

酸枣仁提取物对睡眠剥夺大鼠免疫功能的影响

目的:探讨酸枣仁提取物对睡眠剥夺大鼠免疫功能的影响。方法:30只SD大鼠随机分为对照组、模型组、实验组,每组各10只。除对照组外,其余两组采用多平台水环境法建立睡眠剥夺动物模型,建模同时实验组给予酸枣仁提取物,模型组与对照组给予等量生理盐水。计算大鼠脾脏指数、胸腺指数,采用MMT法评价脾淋巴细胞活性和NK细胞活性。通过旷场实验测定大鼠行为学。测定外周血CD4~+、CD8~+ T淋巴细胞比例、CD4~+/CD8~+。采用ELISA测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-2、IL-6水平。结果:与模型组相比,实验组大鼠旷场实验水平和垂直得分、脾脏指数、胸腺指数、T淋巴细胞活性显著升高;CD4~+T淋巴细胞比例和CD4~+/CD8~+T淋巴细胞比值显著升高,CD8~+T淋巴细胞比例显著降低,TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-6水平均显著下降(P0.05)。结论:酸枣仁提取物能够缓解睡眠剥夺引起的焦虑行为,通过调节T淋巴细胞亚群平衡,抑制血清TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-6炎症因子释放,改善免疫功能。     

松果菊苷改善脓毒症大鼠的肝损伤和炎症反应与激活Nrf 通路相关

目的:研究松果菊苷对脓毒症大鼠的肝损伤和炎症反应的作用及机制。方法:实验设置假手术组(Sham)、模型组(Model)、松果菊苷低剂量组(ECH-L)、松果菊苷中剂量组(ECH-M)、松果菊苷高剂量组(ECH-H)、阳性对照组(DEX),每组20只大鼠。在造模之前1 h,通过尾静脉分别注射生理盐水、松果菊苷25、50、100 mg/kg、地塞米松10 mg/kg。通过盲肠结扎和穿刺(CLP)模式诱导脓毒症大鼠模型。HE染色观察肝损伤,试剂盒检测肝功能相关指标及氧化应激相关指标,ELISA检测炎症因子,通过流式分选CD4~+和CD8~+,蛋白印迹法检测Nrf2通路相关蛋白。结果:与模型组相比,松果菊苷高剂量组肝脏组织的水肿和炎症细胞浸润程度减轻,丙氨酸氨基转移酶和碱性磷酸酶活性、总胆红素含量明显减少(P0.05),丙二醛含量明显减少(P0.01),过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性明显增加(P0.01),炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、HMGB1含量减少(P0.01),而CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+所占百分比明显增加(P0.01),NQO1、HO-1、Nrf2蛋白表达明显上调(P0.01)。结论:松果菊苷改善脓毒症大鼠的肝损伤和炎症反应,并激活Nrf通路。     

人参皂甙Rg3抗小鼠Lewis肺癌的机制研究

目的以小鼠Lewis肺癌为肿瘤模型探讨人参皂甙Rg3抗肿瘤机制。方法以肺癌细胞系LLC荷瘤C57/BL小鼠建立小鼠肺癌模型,随机分为人参皂甙Rg3组、阳性药顺铂组和模型组,分别给予人参皂甙Rg3、顺铂和生理盐水;同时设立空白对照组。以肿瘤质量、抑瘤率观察人参皂甙Rg3的抗肿瘤效果;以流式细胞术测定脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞数量及比值;以Elispot技术检测机体肿瘤抗原特异性CTL的诱生情况;以肝脏指数、脾脏指数、胸腺指数判定人参皂甙Rg3的毒副作用。结果人参皂甙Rg3组抑瘤率高于顺铂组,差异具有统计学意义(P<0.05)。生理盐水组小鼠脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞百分率比正常小鼠低,而人参皂甙Rg3组和顺铂组高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P<0.05)。人参皂甙Rg3组肿瘤特异性IFN-γ斑点数明显增多,与生理盐水组相比具有统计学差异(P<0.05),顺铂组脾脏无肿瘤特异性IFN-γ斑点出现。和模型组相比较,人参皂甙Rg3组小鼠肝脏、脾脏、胸腺指数无明显差异,而顺铂组的肝脏、脾脏、胸腺指数低于人参皂甙Rg3组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 LLC细胞荷瘤小鼠具有明显的免疫抑制现象,人参皂甙Rg3可显著增加脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞阳性率并促进肿瘤特异性CTL细胞诱生,人参皂甙Rg3无肝脏、胸腺、脾脏毒性。     

PD-L1阻断对脓毒症小鼠T淋巴细胞凋亡及单核细胞功能的影响北大核心CSCD

目的:探讨程序性死亡受体-1配体(PD-L1)阻断对脓毒症小鼠T淋巴细胞凋亡及单核细胞功能的影响。方法:30只8~10周龄清洁级C57BL/6雄性小鼠随机分为3组:sham组、模型组、PD-L1拮抗组,每组10只,模型组、PD-L1拮抗组小鼠采用盲肠结扎穿孔手术(CLP)构建脓毒症小鼠模型,sham组小鼠暴露盲肠后即进行伤口缝合,不结扎。PD-L1拮抗组小鼠术后腹腔注射抗PD-L1抗体(50μg/只),每6 h注射1次,连续4次,sham组和模型组小鼠腹腔注射等剂量生理盐水。流式标记法检测各组小鼠CD3+T细胞表面PD-1和单核细胞CD11b+表面PD-L1表达,HE染色观察组织病理学改变,电镜下观察脾脏和胸腺超微病理结构改变,TUNEL染色检测脾脏和胸腺组织细胞凋亡、流式细胞术检测胸腺组织T淋巴细胞凋亡,ELISA检测Caspase-3和TNF-α、IL-6及IL-10表达。结果:与sham组相比,模型组小鼠CD3^(+)、CD11b^(+)表面PD-1和PD-L1表达、脾脏和胸腺组织细胞凋亡率、T淋巴细胞凋亡率、Caspase-3、TNF-α、IL-6、IL-10蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,PD-L1拮抗组小鼠CD3^(+)、CD11b^(+)表面PD-1和PD-L1表达、脾脏和胸腺组织细胞凋亡率、T淋巴细胞凋亡率、Caspase-3、TNF-α、IL-6蛋白表达明显降低,IL-10表达明显升高(P<0.05)。结论:PD-L1阻断可有效降低脓毒症小鼠T细胞凋亡率,改善其单核细胞功能。     

骨髓源间充质干细胞注射疗法对肝硬化大鼠模型免疫系统的调节作用及其相关机制研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞移植治疗对肝硬化大鼠自身免疫功能的影响,为临床治疗方法提供理论依据。方法选取150只健康雄性Wistar大鼠,随机分为3组,即对照组(不采取任何干预措施)、肝硬化组(行大鼠肝硬化模型制备)、治疗组(行大鼠肝硬化模型制备后给予骨髓间充质干细胞移植治疗)。检测各组大鼠脾脏T、B淋巴细胞增殖情况,CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的水平,Foxp3 mRNA表达水平。结果 对照组大鼠肝细胞结构完整,没有纤维增生及假小叶存在;肝硬化组大鼠肝小叶结构破坏,假小叶出现,肝细胞水肿变性坏死,可见炎性细胞浸润;实验组大鼠肝细胞水肿变性坏死程度较肝硬化组显著降低,但仍可见增生的纤维组织。肝硬化组大鼠脾脏T、B淋巴细胞体外增殖情况明显高于对照组(P0.05),经BMSCs治疗后,治疗组大鼠脾脏T、B淋巴细胞体外增殖情况显著低于肝硬化组(P0.05);肝硬化组大鼠脾脏Foxp3 mRNA的表达水平明显低于对照组(P0.05),经BMSCs治疗后,治疗组脾脏Foxp3 mRNA的表达水平高于肝硬化组(P0.05);肝硬化组大鼠脾脏CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞百分比明显低于正常组(P0.05),经BMSCs治疗后,治疗组脾脏CD4~+CD25~+调节性T细胞百分比高于肝硬化组(P0.05)。结论 骨髓间充质干细胞移植治疗可通过抑制脾脏T、B淋巴细胞增殖,升高CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞及Foxp3 mRNA表达水平,影响自身免疫功能,从而影响疾病的转归。     

戴氏绿僵菌多糖对糖尿病模型小鼠血糖和免疫功能的影响

目的:探讨戴氏绿僵菌多糖对糖尿病模型小鼠血糖和免疫功能的影响。方法:采用连续多次小剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立玉型糖尿病模型,观察模型小鼠体重变化,检测空腹血清葡萄糖,免疫器(脾脏、胸腺)指数,腹腔巨噬细胞吞噬能力,脾淋巴细胞增殖及血清中免疫球蛋白IgG、补体C3、C4 的含量等。结果:戴氏绿僵菌多糖能够改善模型小鼠体重;降低模型小鼠血糖含量,中、高剂量的多糖均能显著提高模型小鼠T、B 淋巴细胞的增殖能力(P<0.01);高剂量能显著提高模型小鼠脾脏指数和血清中IgG、C3、C4 的含量(P<0.01);中、高剂量能显著提高模型小鼠胸腺指数及腹腔巨噬细胞吞噬能力(P<0.01)。结论:戴氏绿僵菌多糖可增强STZ 诱导的玉型糖尿病模型小鼠的免疫功能和降低玉型糖尿病模型小鼠血糖含量。