Kriippel样因子4的研究进展及其在乳腺癌中的意义

Krüppel样因子4（Krüppel-like factor 4,KLF4） 属于KLF家族,是真核生物中广泛存在的一类转录元件结合蛋白,通过羧基端3个连续锌指结构域结合靶基因启动子内GC富含序列以调控其转录[1].KLF4功能多样,与正常组织细胞的生长、分化以及凋亡有关;在肿瘤组织中,KLF4可以通过与不同靶基因的作用,发挥癌基因或抑癌基因两种完全相反的作用[2].乳腺癌现已成为影响女性健康的发病率最高的恶性肿瘤.有关KLF4在乳腺癌中的作用目前仍存在争议.随着KLF4在乳腺癌中研究的不断深入,相信其将来可能成为乳腺癌新的治疗靶点及预后评价指标.     

siRNA下调KLF8对胃癌细胞SGC7901增殖能力的影响

目的:探讨KLF8基因特异性siRNA对胃癌细胞株SGC7901增殖能力的影响.方法:通过免疫组织化学、Western blot法、RT-PCR检测胃癌组织标本和胃癌细胞株KLF8的表达;通过基因重组方法构建KLF8的siRNA慢病毒载体,并感染人SGC7901细胞,通过Western blot验证siRNA干扰效率.通过MTT、平板克隆、流式细胞仪检测细胞增殖、细胞周期和凋亡,观察其对胃癌细胞SGC7901增殖能力的影响.结果:KLF8在胃癌组织和细胞株中的表达高于癌旁组织和正常胃上皮细胞,下调KLF8能能够明显抑制SGC7901细胞的增殖,促进细胞G0/G1期阻滞和诱导细胞凋亡.结论:KLF8在促进胃癌细胞SGC7901增殖中发挥重要作用,为胃癌靶向治疗提供理论依据.     

MicroRNA-145和KLF5在多发性骨髓瘤骨髓液中的表达及其临床意义

目的:分析微小RNA-145(microRNA-145,miR-145）和Krüpple 样因子5(Krüepple-like factor 5,KLF5)在多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）骨髓液中的表达及其临床意义。方法:收集2015年1月至2016年3月住院MM诊治患者65例（疾病组）和体检健康正常者36例（对照组）作为研究对象,采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测骨髓液中miR-145 mRNA和KLF5 mRNA表达水平;采用Western Blot检测KLF5蛋白表达水平;分析miR-145与KLF5 mRNA在MM髓液中表达的相关性。结果:miR-145 mRNA在MM骨髓液中的表达水平显著低于对照组（P<0.05）;KLF5 mRNA及蛋白表达水平显著高于对照组（P<0.05）;与I期、Ⅱ期比较,Ⅲ期MM患者骨髓液中miR-145表达水平显著降低（P<0.05）,KLF5 mRNA表达水平显著升高（P<0.05）;与IgG 型和IgA 型相比,轻链型与非分泌型MM患者骨髓液中miR-145相对表达量明显降低（P<0.05）;KLF5 mRNA在不同免疫分型中的表达水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）;miR-145和KLF5的表达呈负相关（r=-0.452,P<0.05）;死亡MM患者骨髓液中miR-145表达水平显著低于存活患者（P<0.05）,KLF5 mRNA表达水平显著高于存活患者（P<0.05）。结论:miR-145在MM患者骨髓液中低表达,KLF5高表达,二者表达可能与MM的发生和病情发展密切相关。     

胃癌组织三叶因子家族的表达与细胞增殖和凋亡的相关性

目的探讨三叶因子1（TFF1）、三叶因子2（TFF2）、三叶因子3（TFF3）在胃癌组织中的表达及其与细胞增殖、凋亡的相关性。方法检测40例胃癌组织、20例正常胃黏膜、30例肠上皮化生及24例不典型增生胃黏膜中TFF1、TFF2、TFF3和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达及其细胞凋亡情况。结果 TFF1、TFF2在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜、肠上皮化生胃黏膜及胃癌组织中均有表达,两者表达强度依次均呈递减趋势（均P＜0.05）。TFF3在正常胃黏膜没有表达,而在肠上皮化生胃黏膜、不典型增生胃黏膜和胃癌组织中均有表达,表达强度依次呈递增趋势（P＜0.05）。胃癌组织中 TFF1、TFF2表达与细胞增殖指数呈负相关 （r=-0.55,r=-0.38,均P＜0.05）,与细胞凋亡指数呈正相关（r=0.58,r=0.48,均P＜0.05）;TFF3的表达与细胞增殖指数呈正相关（r=0.55,P＜0.05）,与细胞凋亡指数呈负相关（r=-0.48,P＜0.05）。结论TFF可能通过影响胃癌细胞的增殖和凋亡,在胃癌发生、发展中起不同的作用。     

转录因子Klfs 家族影响肝细胞癌发生发展的机制研究进展*

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma ,HCC ）是我国常见的恶性肿瘤之一,死亡率高,其发生与发展的具体分子机制尚不明确。Krüppel样因子家族（Klfs）是具有锌指结构的高度保守的转录因子家族,共包括17个家族成员。近年来,关于Klfs 与肝癌发病机制的研究不断深入,发现Klf2、Klf4、Klf5 等家族成员参与肝癌细胞的增殖、分化和浸润转移等过程。本文就Klfs 家族成员的功能以及在肝癌发生发展中的作用机制进行综述。      

胃癌组织转录调节因子DEC1表达及其临床意义的研究

目的:探讨转录调节因子DEC1在人胃癌组织中的表达以及临床意义.方法:应用RT-PCR和蛋白质印迹法技术检测多种胃癌细胞株中DEC1的表达.运用免疫组化技术检测52例胃癌组织及10例癌旁胃黏膜组织中DEC1的表达.结果:在正常的胃黏膜上皮细胞株GES1及多种胃癌细胞株中均能检测到DEC1 mRNA的表达,但胃癌细胞株中(MKN28、SGC 7901、MGC 803和HGC27)的表达显著高于胃黏膜上皮细胞株GES1.蛋白质印迹法显示DEC1在蛋白水平的结果与前一致.DEC1在胃癌组织、癌旁胃黏膜组织中表达阳性率分别为55.77%、10.00%,DEC1蛋白的表达水平与胃癌的分化程度相关,P<0.05.与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤类型、TNM分期和有无淋巴结转移均无关,P>0.05.结论:DEC1在各种类型的人胃癌细胞和胃癌组织中都有较高的表达,可能在胃癌的发生、发展中起重要的作用.     

转录因子KLF 5在肿瘤中的研究进展

Krüppel样因子5(KLF 5)属于含锌指的转录因子家族，参与调控多种基因的表达，从而影响细胞的多种功能。如干细胞自我更新、细胞增殖、分化和凋亡。KLF 5作为一种重要的转录因子和潜在的药物靶点受到了越来越多的关注。在这篇综述中，我们阐述了KLF 5和KLF家族的特点及其在相关肿瘤中的研究进展。     

胃癌细胞株中GnT-V表达水平的检测

目的检测正常胃黏膜细胞株GES-1和胃癌细胞株GnT-V的mRNA和蛋白质的表达水平。方法体外培养胃癌细胞株BGC823、SGC7901、MKN45和正常胃黏膜细胞株GES-1,应用RT-PCR、Real-time PCR、Westem blot等技术检测胃癌细胞株及正常胃黏膜细胞GnT-V mRNA和蛋白质表达的水平。结果检测显示3株胃癌细胞（BGC823、SGC7901、MKN45）均表达CmT-V mRNA,其中BGC823、SGC7901呈高表达,MKN45则低表达GnT-V（P〈0．05）。各细胞相对正常对照组GnT-V的相对表达倍数分别为18．25,13．36,9．25。Western blot结果显示3株胃癌细胞均不同程度的GnT-V蛋白表达,而正常对照组不表达GnT-V蛋白。结论胃癌细胞不同程度表达GnT-V,各细胞中以BGC823表达量最高,SGC7901表达量居中,MKN45呈低表达,提示GnT-V可能对于胃癌的发生发展有一定的影响。     

肺腺癌中Krüppel样因子7的表达及与患者临床特征和预后的相关性

目的 探讨肺腺癌中Krüppel样因子7(KLF7)的表达及与患者临床特征和预后的相关性。方法 分析80例肺腺癌患者肺腺癌组织中的KLF7表达情况,根据KLF7表达情况分为KLF7高表达组（54例）和KLF7低表达组（26例）,比较KLF7高表达组与KLF7低表达组患者的临床特征,分析KLF7表达与临床特征及预后的相关性。结果 80例肺腺癌患者无病生存率为70.00%(56/80),总生存率为77.50%(62/80)。KLF7高表达组与KLF7低表达组患者年龄、分化程度、胸膜侵犯情况、组织学亚型、大体类型比较,差异均无统计学意义（P﹥0.05）;KLF7高表达组与KLF7低表达组患者吸烟情况、肿瘤体积、淋巴结转移情况、TNM分期比较,差异均有统计学意义（P﹤0.01）。Spearman相关分析结果显示,KLF7表达与吸烟、肿瘤体积、淋巴结转移、TNM分期均呈正相关,与无病生存率和总生存率均呈负相关（P﹤0.01）。结论 KLF7表达与肺腺癌的发生、发展及预后存在一定关联,临床可根据肺腺癌患者的KLF7表达情况,判断其病情进展情况,并预测其预后,以便临床及时帮助患者制订针对性的治疗方案...     

Krüppel样因子4在肺癌中的研究进展

摘 要：Krüppel样因子4（Krüppel-like factor 4，KLF4）是一种进化保守的能够通过结合特异蛋白进行转录调控的Krüppel样因子（Krüppel-like factors，KLFs），其在组织细胞生长、分化进程中发挥重要作用。KLF4不仅在多种肿瘤细胞与组织中表现出不同程度的差异表达，而且在肿瘤发生发展的进程中起着重要的作用。对KLF4在肺癌中的差异表达和作用机制进行总结梳理，并探寻其作为诊断标志物或治疗靶点的可能性具有重大临床意义。全文综述KLF4在肺癌中的差异表达及潜在的分子机制，为进一步揭示肺癌的发生发展机制提供参考。     

SNAT1和EMP1在胃癌组织和细胞株中的表达及临床意义

目的 探讨人钠耦合中性氨基酸转运蛋白1（SNAT1）和上皮膜蛋白1（EMP1）在胃癌组织及胃癌细胞株中的表达水平,分析两者在胃癌组织中表达与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组化SP法检测82例胃癌组织和67例对应癌旁组织样本中SNAT1和EMP1的蛋白表达情况,根据二级计分法分为低表达（＜5分）和高表达（≥5分）,分析两者不同表达水平与胃癌临床病理特征的关系。同时采用Western blotting检测20例胃癌组织及其癌旁组织、正常胃黏膜上皮细胞株GES 1和胃癌不同分化细胞株（未分化BGC823、低分化AGS、中分化SGC7901和高分化MKN28）中SNAT1和EMP1的蛋白水平。结果 胃癌组织的SNAT1高表达率高于癌旁组织（67.1％ vs. 34.3％, P＜0.05）,而EMP1高表达率则低于癌旁组织（40.2％ vs. 62.7％, P＜0.05）。胃癌组织中SNAT1与EMP1表达呈负相关（r=-0.272, P=0.014）,且两者表达与临床分期和分化程度均有关;另外,SNAT1与年龄、淋巴结转移有关,EMP1与浸润深度有关。胃癌细胞株中的SNAT1蛋白水平均高于癌旁组织和CES-1细胞,而EMP1蛋白水平则相反,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论SNAT1表达在胃癌组织及细胞株中分别较癌旁组织和正常胃黏膜细胞株高,EMP1则相反,胃癌组织中两种蛋白均与临床分期和分化程度有关,提示两者可能在胃癌的发生发展中起重要作用,可用于辅助胃癌的诊断和病情评估。     

MCM2和Rb蛋白在胃癌中的表达及临床意义

目的：探讨微小染色体维持蛋白2（MCM2）和视网膜母细胞瘤易感基因（Rb）在胃癌组织中的表达及其意义。方法：采用免疫组化法检测MCM2和Rb蛋白在20例正常胃黏膜、30例非典型增生、80例胃癌组织中的表达,并以标记指数（labellingindex,LI）量化其表达。结果：MCM2和Rb蛋白在正常胃黏膜、非典型增生和胃癌组织中的表达之间均有显著性差异（P〈0.05）;两者的LI在胃癌组织中表达与临床分期、浆膜浸润、术后复发、肝转移及淋巴结转移密切相关（P〈0.05）,与肿瘤大小及组织学类型无关（P〉0.05）。胃癌组织中MCM2和Rb的LI表达呈显著负相关（r=-0.321,P=0.004）。结论：MCM2表达升高和Rb蛋白表达下降与胃癌的发生及发展密切相关,检测MCM2和Rb有助于判断胃癌恶性程度及预后。     

不同肺癌细胞株中VEGFR-2 mRNA表达的实验研究

目的 研究不同非小细胞肺癌（NSCLC）细胞株中血管内皮生长因子受体-2（VEGFR-2） mRNA的表达情况。方法 采用实时荧光定量PCR法检测人肺黏液表皮样癌NCI-H292细胞株、人肺腺癌NCI-H1299细胞株、人肺腺癌A549细胞株、人肺巨细胞癌95D细胞株和人肺鳞癌Calu-1细胞株中VEGFR-2 mRNA的表达。结果 Calu-1、NCI-H292、95D、NCI-H1299和A549细胞株中VEGFR-2 mRNA表达依次为1.213±0.134、1.008±0.164、0.754±0.088、0.582±0.171和0.121±0.026,差异有统计学意义（F=31.875, P=0.000）。Calu-1与NCI-H292细胞株间VEGFR-2 mRNA表达无统计学差异（P=0.080）,NCI-H1299与95D细胞株间VEGFR-2 mRNA表达亦无统计学差异（P=0.137）,其余细胞株间差异均有统计学意义（P均＜0.05）。结论 不同NSCLC细胞株中VEGFR 2 mRNA表达量不同,可能与不同肿瘤细胞的生物学行为有关。     

胃癌组织中Ａｎｇ ２和ＶＥＧＦ的表达与血管生成的关系

目的：研究胃癌组织中血管生成素-２（Ａｎｇ-２）和血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达与临床病理学特征和肿瘤血管生成的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测５５例胃癌组织以及１２例胃癌癌旁组织和正常胃组织中Ａｎｇ-２、ＶＥＧＦ表达及微血管密度（ＭＶＤ）。结果：Ａｎｇ-２、ＶＥＧＦ表达及ＭＶＤ在胃癌组织中均显著高于癌旁组织及正常胃组织（Ｐ＜０.０５）;胃癌组织Ａｎｇ-２、ＶＥＧＦ表达与浸润深度、淋巴结转移、病理分期、肿瘤分化程度密切相关（Ｐ＜０.０５）;Ａｎｇ-２与ＶＥＧＦ表达呈正相关性（Ｐ＜０.０５）。结论：Ａｎｇ-２、ＶＥＧＦ在胃癌组织中高表达,两者在胃癌的肿瘤血管生成和进展中起重要作用。     

KLF4和KLF5在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的 探讨转录因子Kruppel 样因子（KLF）4和KLF5在乳腺浸润性导管癌中的表达,分析其表达与乳腺浸润性导管癌的发生、发展及临床病理因素之间的关系。方法 采用免疫组化SP法检测30例乳腺浸润性导管癌组织及10例对应癌旁正常组织中KLF4和KLF5蛋白的表达,分析其表达与乳腺癌临床病理特征的关系。结果 KLF4和KLF5均主要表达于细胞核。乳腺浸润性导管癌组织中KLF4低表达,阳性表达率为6.7％,低于癌旁正常乳腺组织（70.0%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;KLF5在乳腺癌组织中高表达,阳性表达率为90.0％,高于癌旁正常乳腺组织（30.0%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。乳腺浸润性导管癌组织中KLF4和KLF5的表达与年龄、绝经情况、组织学分级、淋巴结转移、ER及PR表达无关（P＞0.05）,而KLF5与HER-2表达水平有关（P＜0.05）。KLF4和KLF5在乳腺浸润性导管癌中的表达无相关性（r=-0.356,P=0.053）。结论 KLF4和KLF5表达与乳腺浸润性导管癌的发生密切相关,可以作为预测乳腺浸润性导管癌发生、发展及转移的评价指标之一。     

MTDH和VEGF在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的 探讨异黏蛋白（MTDH）及血管内皮生长因子（VEGF）在上皮性卵巢癌中的表达及其与上皮性卵巢癌临床病理特征的关系。方法 采用逆转录 聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫组化SP法检测42例上皮性卵巢癌组（恶性组）、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织（良性组）及15例正常卵巢上皮组织（正常组）中MTDH和VEGF mRNA及蛋白的表达,分析两者表达与上皮性卵巢癌临床病理特征的关系。结果 MTDH和VEGF mRNA在恶性组中的相对表达量分别为0.672±0.115和0.714±0.129,显著高于良性组（0.324±0.041、0.251±0.039）和正常组（0.317±0.035、0.243±0.031）,差异均有统计学意义（P＜0.01）。MTDH及VEGF蛋白在恶性组中的阳性表达率分别为69.0％、80.9％,显著高于良性组（20.0％、35.0％）和正常组（13.3％、20.0％）,差异均有统计学意义（P＜0.01）。MTDH和VEGF mRNA及蛋白的表达与上皮性卵巢癌的临床分期、淋巴结转移有关（P＜0.05）,而与病理类型及分化程度无关（P＞0.05）。在上皮性卵巢癌中MTDH与VEGF蛋白的表达呈正相关（r=0.420,P＜0.01）。 结论 MTDH和VEGF表达与上皮性卵巢癌的发生、发展有关。     

siRNA干扰FLOT2基因表达对肾细胞癌细胞增殖的影响

目的:探讨FLOT2在肾细胞癌细胞株中的表达,并观察小干扰RNA沉默FLOT2基因对肾细胞癌786-O细胞增殖能力的影响。方法:将化学合成的FLOT2的小干扰siRNA用脂质体 Lipofectamine2000转染至肾细胞癌786-O细胞;分别用RT-PCR、Western blot方法检测细胞转染前后FLOT2以及细胞增殖相关因子CCND1的表达。CCK-8与克隆形成实验检测其增殖情况。结果:转染FLOT2-siRNA的肾细胞癌786-O细胞,RT-PCR、Western blot检测显示FLOT2在基因及蛋白水平明显下调（P<0.05）;与对照组比较786-O细胞增殖能力明显下降（P<0.05）,细胞增殖相关因子CCND1明显下调（P<0.05）。结论:FLOT2在肾细胞癌细胞系中高表达,采用特异性FLOT2-siRNA 能够显著降低FLOT2和CCND1表达。干扰FLOT2表达能显著抑制786-O细胞的增殖,FLOT2基因可能参与了肾细胞癌的生物学行为。     

NOK与FGFR2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 检测含激酶结构域新原癌基因（NOK）与成纤维细胞生长因子受体2（FGFR2）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达,分析其在不同病理类型、病理分级及临床TNM分期之间的表达差异及相关性。方法 应用免疫组化En Vision法检测NOK与FGFR2在163例NSCLC组织中的表达,分析其表达与病理类型、临床TNM分期、病理分级之间的关系,以及NOK与FGFR2表达的相关性。结果 NOK、FGFR2在163例NSCLC组织中的阳性表达率分别为66.7％和85.2％。NOK在肺鳞癌和肺腺癌中的阳性表达率分别为64.5％和72.6％,差异无统计学意义（P＞0.05）;NOK在不同TNM分期之间及在不同病理分级之间的表达差异均有统计学意义（P=0.000）。FGFR2在肺鳞癌和肺腺癌中的阳性表达率分别为88.6％和85.7％,差异无统计学意义（P＞0.05）;FGFR2在不同TNM分期之间及在不同病理分级之间的表达差异均有统计学意义（P＜0.05）。NOK与FGFR2蛋白表达在NSCLC（r=0.640,P=0.000）、肺鳞癌（r=0.684,P=0.000）、肺腺癌（r=0.597,P=0.000）组织中均呈正相关。结论NOK与FGFR2在NSCLC中高表达,其表达与病理类型、病理分级及TNM分期有关,提示二者可能与NSCLC的发生和发展有关。     

皮肤瘢痕和瘢痕鳞状细胞癌中Cx26基因表达及突变的意义

目的探讨Cx26基因表达及突变在皮肤瘢痕及瘢痕鳞状细胞癌（以下简称瘢痕鳞癌）中的意义。方法采用免疫组织化学SP法及原位杂交技术检测15例皮肤瘢痕和22例瘢痕鳞癌中Cx26蛋白及mRNA的表达。分别从14例皮肤瘢痕和瘢痕鳞癌石蜡包埋组织中提取DNA,运用PCR扩增及测序的方法进行突变筛查。利用计算机图像分析系统采集、分析图像,并对数据进行统计学处理。结果（1） Cx26蛋白、Cx26mRNA在正常皮肤表皮中阳性,在皮肤瘢痕上皮呈强阳性表达,在瘢痕鳞癌组织中呈弱阳性或阴性表达。正常皮肤组、皮肤瘢痕组及瘢痕鳞癌组两两比较,其表达（阳性面积和平均吸光度）差异均有统计学意义（P＜0.05）。（2）测序后未发现瘢痕鳞癌中有Cx26基因突变。结论Cx26蛋白及其mRNA的高表达,对瘢痕上皮增生具有促进作用;其表达下降与瘢痕鳞癌的发生有关;基因突变位点有待进一步探讨。     

Expression of Amphiregulin, a Novel Gene of the Epidermal Growth Factor Family, in Human Gastric Carcinomas

The expression of mRNA for amphiregulin (AR), a novel gene of the epidermal growth factor family, was examined in 8 human gastric carcinoma cell lines and 32 gastric carcinoma tissues as well as corresponding normal mucosa. Of the 8 gastric carcinoma cell lines, 7 expressed 1.4 kb AR mRNA at various levels. The expression of AR mRNA by TMK-1 and MKN-28 cells was increased by treatment with epidermal growth factor or transforming growth factor α. In surgical cases, all the gastric carcinoma tissues and their adjacent normal mucosa expressed AR mRNA. Interestingly, 20 (62.5%) out of 32 tumors expressed AR mRNA at higher levels than their corresponding normal mucosas (tumor/normal ≥1.2). No obvious correlation was observed between the AR mRNA levels and the histological types or tumor staging of gastric carcinoma. Immunohistochemically, AR protein was localized to the cytoplasm and/or nucleus in tumor cells. These results suggest that AR produced by tumor cells may be involved in the pathogenesis and/or progression of human gastric carcinoma.