不同产地长春花中3种生物碱的含量测定

长春花Catharanthus roseusL.G.Don为夹竹桃科长春花属一种重要的药用植物。长春碱是长春花中百余种生物碱类成分之一,广泛用于治疗急性白血病、何杰金氏病、恶性淋巴肉瘤、绒毛膜上皮癌等[1,2];长春质碱有一定降血糖作用,文多灵有镇痛和利尿的功效,二者是合成长春碱的前体[3]。由于遗传、生态环境、人工栽培等因素的影响,不同产地野生及栽培长春花中长春碱等生物碱的含量有很大差异。前人已对长春花中生物碱的含量测定做了不少....     

土壤条件对长春花生物碱含量的影响

目的:研究不同土壤条件对长春花体内3种生物碱含量的影响。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定不同土壤下长春花中长春碱、长春质碱、文多灵含量。结果:沙质壤土中长春碱、长春质碱、文多灵含量最高,分别为0.0058、0.0317、0.0823mg/mL。结论:以沙质壤土种植长春花可提高其植株体内长春碱、长春质碱、文多灵的含量。     

人工培植长春花中文多灵、长春质碱和长春碱的分布和积累动态

目的:研究田间栽培长春花不同发育阶段各器官文多灵、长春质碱和长春碱的含量动态以及不同器官的生物量动态,以确定人工种植长春花的最佳采收期。方法:以人工培植长春花为实验材料,采用高效液相色谱法对生长季内长春花根、茎、叶、花和果实中的文多灵、长春质碱和长春碱的含量进行动态检测。结果:这些生物碱含量受季节和组织部位的影响,叶片中文多灵和长春质碱含量最高,根中没有文多灵,花中长春碱含量最高;8-9月文多灵和长春质碱含量最高,9月以后长春碱含量最高;生物量9月初最高。结论:9月初为长春花最佳采收期。     

酶解法提取长春花中长春碱、长春质碱、文多林

目的 研究纤维素酶法提取长春花中长春碱、长春质碱和文多林的最佳工艺.方法 采用HPLC法测定长春碱、长春质碱和文多林的含量,通过单因素实验考察酶解温度、pH、酶解时间、加酶量、浸提倍数对长春碱、长春质碱和文多林提取率的影响.结果 实验得出纤维素酶解长春花的最佳工艺为:温度40℃,pH 1.5,时间12 h,浸提倍数20,加酶量2 mg/g长春花.结论 酶解法较酸水浸提法更有利于长春碱、长春质碱、文多林的提取.     

纤维素酶在提取长春花碱中的应用

目的 研究纤维素酶在提取长春花生物碱中的应用.方法 采用酸水浸提法和酶浸提法提取长春花中的长春碱、长春质碱、文多林,高效液相色谱(HPLC)法测定其含量.结果 酸水浸提法和酶浸提法提取的长春碱、长春质碱、文多林含量分别为0.0158和0.0052 mg/ml;0.0456和0.0204 mg/ml;0.0898和0.0421 mg/ml.结论 在单位时间内酶提法可显著提高长春碱、长春质碱、文多林的收率,可考虑将酶解法用于工业上长春花生物碱的提取中.     

080 超临界流体萃取和液相色谱-电喷雾质谱分析长春花中的长春碱

由于长春碱和长春新碱在原植物长春花(Catharanthus roseus)中的含量较低,难以对其进行提取和分析。本次试图采用超临界流体萃取(SFE)方法对长春花中的长春碱和长春新碱进行提取,并通过液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI/MS)对其进行分析。     

共转orca3/g10h双基因长春花毛状根生物碱量及转录差异研究

目的共转orca3/g10h双基因于长春花毛状根,提高抗癌生物碱量。方法通过构建p CAMBIA1304++orca3+g10h表达载体,利用发根农杆菌介导获得双转orca3/g10h基因长春花毛状根。利用RT-q PCR研究共转orca3/g10h基因长春花毛状根萜类吲哚生物碱(TIAs)生物合成途径中相关基因的转录差异。采用HPLC研究共转orca3/g10h基因长春花毛状根TIAs(包括长春碱、长春新碱和阿吗碱)量。结果转基因长春花毛状根中与TIAs生物合成相关基因asα、ggpps、g10h、str、tdc、cpr、sgd和dat转录水平均较非转基因长春花普通根高。HPLC结果表明,转基因长春花毛状根总TIAs量达到58.23 mg/g,是非转基因长春花普通根的27.5倍。长春碱和长春新碱的平均质量分数均较非转基因普通根高。其中,长春碱平均质量分数最高,为51.30 mg/g,是非转基因普通根的197.3倍。结论共转orca3/g10h基因能够有效提高长春花毛状根中TIAs量。     

大孔吸附树脂分离纯化长春花中长春碱和长春新碱

目的 优选分离纯化长春花中长春碱和长春新碱的最佳工艺参数.方法 采用不同型号大孔吸附树脂对长春花中长春碱和长春新碱分离纯化,用不同浓度乙醇水溶液以不同速度洗脱,配合硅胶柱层析,以HPLC跟踪检测.结果 AB-8型树脂分离效果佳,90%乙醇水溶液以1.5 BV/h的速度洗脱,总比吸附量达到74.5 mg/g,经硅胶柱层析后长春新碱纯度达97.26%,长春碱纯度达94.18%.结论 该工艺简便合理,重复性良好,能得到高纯度的长春碱和长春新碱.     

长春花叶片中吲哚生物碱增产的研究

目的探讨乙烯利、乙酰水杨酸、色氨酸3种试剂对长春花植株中药用成分积累的影响。方法用不同质量浓度的3种试剂溶液分别处理温室盆栽长春花植株,2d后,测定叶片中的总吲哚生物碱含量,并采用RP-HPLC法测定长春碱和长春质碱的含量。结果3种试剂处理后吲哚总碱、长春碱、长春质碱的积累均有明显的提高,并确定了最适的处理质量浓度。结论3种试剂对长春花植物中吲哚生物碱的产生有明显的促进作用。     

长春花毛状根再生植株的获得及抗癌生物碱的产生

目的建立长春花转基因毛状根再生植株快速繁育体系,获得生物碱量提高的长春花再生植株。方法研究外源植物生长调节剂对长春花毛状根愈伤组织诱导、不定芽分化、不定根分化和再生植株移栽的影响,采用HPLC法测定长春花再生植株生物碱量,并采用定量PCR技术分析目的基因的表达情况。结果转基因长春花毛状根愈伤组织诱导和不定芽诱导的最佳培养基均是MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,不定根分化的最适培养基是1/2 MS+NAA 0.3 mg/L。采用炼苗的改进方法可使长春花再生植株的移栽成活率达90%。HPLC分析结果表明,长春花再生植株中长春碱、长春新碱和阿吗碱量分别比对照提高4.0、5.8、1.8倍,其中,优良单株OG30-3的长春新碱和长春碱量比对照提高7倍和10倍。定量PCR分析结果表明,转基因植株orca3基因和g10h基因的表达量比非转基因植株的高。结论转基因长春花毛状根再生植株可促进抗癌生物碱的产生。     

长春花

长春花为夹竹桃科植物长春花的全草。花期近全年。多为栽培，也有野L生，分布在广东、广西、云南以及长江以南各地。从长春花植物中分离出的生物碱，多具抗肿瘤作用，其中以长春碱、长春新碱最有价值，已广泛用于临床。此外，其总碱具有降压功能。另外，国外民间用长春花叶及全植物治疗糖尿病等。     

干旱胁迫及施加氮素对长春花生物碱的调控

目的:为了阐明不同的干旱条件及氮素水平对长春花叶片中4种生物碱(文多灵、长春质碱、长春碱、长春新碱)含量的影响,为提高长春花生物碱含量提供理论指导。方法:实验设置了CK(对照组即自然生长)、CN(对照+施氮素)、LK(轻度干旱)、LN(轻度干旱+施氮素)、HK(重度干旱)、HN(重度干旱+施氮素)6个处理组,探讨各处理组条件下长春花叶片全氮含量、碱性POD活性、TDC活性、4种生物碱含量的变化特性。结果:轻度干旱条件下POD,TDC的酶活性在处理的整个时期均提高,且胁迫的早期(0～21 d),有利于文多灵、长春质碱、长春碱、长春新碱的积累,后期(28～35 d)反而起抑制作用4种生物碱含量降低。施加外源氮素能有效提高各组长春花叶片中全氮含量、POD和TDC酶活性、文多灵和长春质碱的含量,干旱+施加氮素(LN,HN)处理下有利于长春碱和长春新碱的积累。结论:干旱胁迫及施加氮素对长春花叶片中POD,TDC的活性及4种生物碱的含量均能产生影响,轻度干旱条件下施加氮素(LN)对文多灵、长春质碱、长春碱、长春新碱含量的提高最为显著,是通过全氮含量及酶活性提高来调控的。     

不同长春花中3种生物碱的含量测定

目的:建立快速准确的长春花内生物碱含量测定方法,为寻找高含量品种提供方法和依据。方法:采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),对收集到的10个长春花品种中的文多灵、长春质碱、长春碱含量进行了测定,色谱柱:Dikma Diamonsil-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为A∶0.7%二乙胺(磷酸调整p H至7.2);B:乙腈:甲醇=25:40。A∶B=35∶65;流速1ml/min。柱温35℃。检测波长:280nm。结果:文多灵:Y=2.00×106X+5.46×104,r=0.9999,线性范围:0.2~4μg;长春质碱:Y=2.28×106X+8.31×104,r=0.9999,线性范围:0.2~4μg;长春碱:Y=1.76×106X-7.17×104,r=0.9999,线性范围:0.2~4μg。文多灵含量最高的是1号品种,长春质碱含量最高的是3号品种,长春碱含量最高的是2号品种,三种生物碱总和最高的是3号品种。结论:该方法简便、快速,分析准确,适合对长春花内主要生物碱做高通量的筛选。综合考虑总碱的含量和最重要的长春碱的含量,1号品种适合作为代谢调控的本体。     

长春花不同愈伤组织中吲哚生物碱积累的比较研究

<正>随着人们对天然药物需求量的不断增加,利用植物细胞培养技术生产药用成分的研发工作越来越受到国内外的广泛关注。长春花Catharanthusroseus(L.)G.Don是一种药用植物,它的细胞培养物中含有多种吲哚生物碱,它们大多具有生物活性,比如阿玛碱可用于治疗高血压、心律不齐等疾病;长春质碱不仅具有抗菌、利尿、降血糖等作用,而且还是抗癌药物长春碱、长春新碱等的合成前体。因此,长春花细     

长春花萜类吲哚生物碱生物合成与调控研究

长春花含有多种具有重要药理活性的萜类吲哚生物碱(TIA)。TIA的生物合成与调控及其合成生物学研究受到广泛关注。3α(S)-异胡豆苷是TIA生物合成的重要节点,由裂环马钱子苷和色胺缩合而成。前者通过环烯醚萜途径生成;后者通过吲哚途径生成。由3α(S)-异胡豆苷分别经过多步酶促反应生成文多灵和长春质碱,然后两者缩合生成α-3,4-脱水长春碱,进而生成长春碱和长春新碱。AP2/ERF和WRKY等多种转录因子参与了TIA合成的调控。长春花TIA生物合成途径的逐步解析为其合成生物学研究奠定了基础。目前已在酿酒酵母实现了3α(S)-异胡豆苷和文多灵等的异源合成。长春花TIA生物合成与调控的研究将为TIA类药物的生产和研发提供支撑。     

近紫外光对长春花植株中生物碱产量的影响

在长春花(Catharanthus roseus)栽培的过程中,选用人造的、波峰为370nm的近紫外光或波长范围在290～380nm的自然光照射,能刺激长春花植株中二聚体吲哚生物减的合成(如长春花碱和环氧长春碱的含量增加)。但也观察到单聚体生物碱文多林和泻花碱的减少,是因为人造近紫外光能特异性地刺激文多林和泻花碱的偶合,合成     

植物抗癌的新进展

癌症,是当今世界对人类生命威胁较大的病种,亦是医学科学的重大研究课题之一。自５０年代末期从长春花中发现抗癌成份长春碱以来,国际科学界十分重视对植物药的研究。许多国家的科学家开始运用各种方法从大量的植物中筛选抗癌活性成份,并已取得了不少成就。抗肿瘤活性...     

GC-MS分析长春花中的主要吲哚生物碱

在80年代,大量的研究致力于以细胞和组织培养的方法生产长春花中具有药物作用的吲哚生物碱,研究的主要目标是长春新碱和长春碱,它们被用于癌症化疗并作为一些半合成衍生物的前体。上述双吲哚生物碱是由长春花碱(catharanthine)和文朵灵(vindo-line)生物合成的。此外长春花还含有柯南类生物碱阿吗里新(ajmalicine)。由于商业上提供的熔融石英毛细管气相色谱柱固定相有广泛的选择余地.大大扩展了GC分析包括胺和生物碱类在内的不同药物和天然化合物的应用范围。本文研究了以GC-MS方法,通过简单的纯化步骤,同时直接测定长春花中的文朵灵     

国外植物药产品介绍(9)

9.01 注射用安可平(Oncovin Ampoules)异名硫酸长春新碱(Vincristine Sul-fate),Kyocristine,Vincrisul,Leucid,LCR,VCR,NSC～67574,新长春碱药理本品系由夹竹桃科植物长春花中提取的生物碱。通过干扰增殖细胞纺锤体的形成使有丝分裂停止于中期。小剂量时对 M     

国外植物药产品介绍(10)

10.01 注射用癌备(Velbe Vial)通用名硫酸长春碱,Vinblastine Sul-fate异名长春花碱,Exal,Velban,VLB,NSC-49842药理本品为从夹竹桃科植物长春花中提取的生物碱 vinblastine 的硫酸盐。可干扰增殖细胞纺锤体的形成,使有丝分裂停止于中期。在较高剂量下,可破坏染色体并与微管蛋白结合,使多聚核糖核蛋白凝集。本品为细胞周期特异性药物,作用于 G_1、S 及