具有标记靶作用的固相免疫电镜快速诊断法(SPA—GIEM)

应用金黄色葡萄球菌(Staphglococcal)表面富含具有与人和某些动物IgG的Fc片段结合能力的蛋白质抗原成分——葡萄球菌A蛋白(Staphglococeal protein A简称SpA)的特性,以葡萄球菌为载体,用抗血清致敏后吸附病毒,用于电子显微镜中病毒检测。电镜下,当菌体充分吸附病毒后,即可形成具有花环样的特殊结构,故将本方法定名为SpA—G IEM(Staphglococcal protein A—Gayland Immune electron Miuoscopg)。     

一种用分泌型突变株培养液纯化A蛋白的快速简易方法

大量制备纯化葡萄球菌A蛋白(SpA),通常要用溶葡萄菌素先使菌细胞增溶,然后用IgG-Sepharose亲和层析柱进行纯化.作者从Cowan Ⅰ株金黄色葡萄球菌分得若干株能产生分泌型SpA的突变株,其中一个突变株称作LH-IV株.利用该株释放SpA分子这一特性并结合IgG-Sepharose层析柱的分析法现被认为是大量制备SpA的最有效方法.分泌型SpA分子量为26,000,其生物学特性与其母本株结合型SpA几乎完全相同.方法为用37℃搅拌培养18小时的突变株     

固定的含A蛋白葡萄球菌作为固相免疫吸附剂

福尔马林固定的含 A 蛋白的金黄色葡萄球菌(简称 F 固定菌),作为一种固相试剂,目前常用于 RIA、细胞膜抗原的免疫沉淀、淋巴细胞的检测和分离以及作为特异性 B 淋巴细胞的有丝分裂原。但有人证明此种试验能够非特异地吸附一些蛋白质。本文报导用三氯醋酸(TCA)除掉细胞壁中带阴电荷的     

万古霉素联合利福平对骨髓炎致病菌MRSA的增殖抑制作用及机制

目的:探讨万古霉素联合利福平对骨髓炎致病菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的毒性作用及作用机制。方法:将万古霉素稀释液与利福平稀释液注入MRSA培养液中,运用Western blot法检测金黄色葡萄球菌蛋白A(Protein A,SpA)的表达,Rt-PCR法检测SpA mRNA的表达。结果:万古霉素对MRSA株蛋白的表达有明显抑制作用,对基因的表达无明显抑制作用,与单一用药的作用比较,万古霉素联合利福平对MRSA的蛋白及基因表达的抑制作用无明显增强。结论:万古霉素对MRSA具有明显的毒性作用,此种作用主要是通过抑制其相关蛋白的表达发挥作用。     

RFC—SpA试验检测EHF病人抗体的研究

葡萄球菌 A 蛋白(staphyococcal prot-einA.SpA)具有与人和多种哺乳动物血清中 IgG 的 FC 段结合的能力,据此将血清致敏的SpA 菌体与带有抗原的细胞作用,观察 SpA菌体花环形成细胞(Rosette Formatio(?)Cell-SpA,RFC-SpA)的 Sp(?)花环试验可用于细胞表面标志检测,病原微生物的鉴定和疾病的诊断。本文在过去研究的基础上用RFC—SpA 试验检测病人血清、尿和微量全血标本的流行性出血热(Epidemic Hemorr-     

金黄色葡萄球菌A蛋白的制备和鉴定

许多株金黄色葡萄球菌的细胞壁均含有一种 A蛋白,称为:金黄色葡萄球菌 A 蛋白(以下简称SPA)。它能与人和多种哺乳动物 IgG 的 Fc 段结合。由于 SPA 具有这一重要特性,已广泛应用于     

麻疹活疫苗免疫后的儿童发生麻疹的原因的探讨

人体初次感染麻疹后主要产生两类不同的抗体,即IgM和IgG。为了观察麻疹急性期和恢复期抗体的类型,探讨麻疹活疫苗免疫后的儿童发生麻疹的原因,我们使用金黄色葡萄球菌A蛋白(简称SPA)吸收血清中的IgG;用二巯基乙醇(简称2ME)吸收血清中的IgM,对部份麻疹病人急性期和恢复期及有接触史的健康儿童血清进行了实验观察。现将结果报告如下: 材料与方法一、SPA试验 SPA系上海生物制品研究所生产的“冻干葡萄球菌A蛋白(SPA)菌体试剂”。每支含量为10％(W/V)悬液,经冻干后制成。临用前于本品中加入蒸馏水1ml,试剂溶解后,离心去上清,于沉淀中加入经生理盐水1:2稀释的待检血清0.05ml,用细玻棒搅     

什么是协同凝集试验?

协同凝集试验Co-agglutination test(缩写COA试验)就是以特异性抗血清致敏含丰富A蛋白的金黄色葡萄球菌(缩写SPA)后用于检查相应可溶性抗原的试验。由于SPA能与许多哺乳动物抗血清中IgC的Fe段发生非特异性结合,从而暴露出IgG特异的Fab     

金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药谱分析

目的了解金黄色葡萄球菌的临床分布,分析其耐药性,为临床治疗金黄色葡萄球菌引起的感染提供依据。方法收集2014年1月至2014年12月临床分离的312株金黄色葡萄球菌,对其临床分布和药敏试验(K-B法)结果进行统计并分析。结果共检出金黄色葡萄球菌312株,主要来自痰液(63.78%),呼吸内科的分离率最高(35.25%),其次是神经外科(16.03%)。其中MRSA213株,MSSA99株。结论在金黄色葡萄球菌对15种抗菌药物的药敏试验结果中,MRSA对药物分子的耐药率远高于MSSA,且对大多数抗菌药物呈现出多重耐药。     

葡萄球菌A蛋白协同凝集试验在布氏杆菌鉴定上的应用

<正> 我们试图用布氏菌作协同凝集试验,观察凝集现象是否能出现加快,变得明显,易于判定结果,特异性如何等。经过一段摸索,结果较满意,现报告如下: 材料与方法一、材料 (一)葡萄球菌标准菌株:CowanⅠ株(富含A蛋白的金黄色葡萄球菌);Wood46(不含A蛋     

147株金黄色葡萄球菌临床分离及耐药分析

目的监测本地区儿童感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)情况,掌握儿童感染金黄色葡萄球菌(SAU)耐药情况,指导临床合理应用抗生素,为提高治疗效果提供依据。方法对各类感染标本分离的147株金黄色葡萄球菌应用VITEK-32微生物全自动分析系统进行鉴定,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验;采用头孢西丁纸片扩散法筛选MRSA菌株,同时进行D-试验研究红霉素诱导克林霉素耐药情况。使用WHONET5.4软件对原始数据进行分析和统计学处理。结果小儿金黄色葡萄球菌感染标本主要来自于痰液,共分离到金黄色葡萄球菌121株,占阳性菌株的82.3%(121/147),其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)42株。头孢西丁纸片扩散法结果显示147株金黄色葡萄球菌检出MRSA 47株(31.9%)。药物敏感试验结果显示147株金黄色葡萄球菌对青霉素全部耐药,而对万古霉素全部敏感,对苯唑西林、头孢唑啉、红霉素、克林霉素敏感率分别为64.6%、98.0%、44.2%、52.4%。药敏结果显示SAU存在多重耐药情况,有10株对红霉素和克林霉素同时耐药;D-试验结果显示诱导试验阳性率为54.5%。结论本文多数分离出金黄色葡萄球菌(SAU)菌株标本取自于呼吸道感染的痰液。通过药敏分析发现SAU对青霉素耐药率为100%,提示该种药物已不适合应用本地区SAU感染患儿的治疗。147株金黄色葡萄球菌中存在多重耐药情况并检出MRSA 47株(31.9%),提示本地区儿童感染SAU,特别是MRSA耐药形势不容乐观,仍需加强对MRSA的日常监测工作。     

一种对乙型肝炎病毒的肝细胞受体结合位点的特异性单克隆抗体

作者用乙型肝炎病毒(HBV)ad亚型制备了1株新的单克隆抗体(McAb)F_(35.25)(McAbF_(35.25)),该McAb能特异性识别主要作用于肝细胞受体结合位点的HBV外壳蛋白的前S1区。作者用免疫扩散试验检测McAb的IgG亚类。用免疫印迹法检测McAb F_(35.25)对多肽的特异性,被测的多肽包括有未经处理或消化的HBV抗原,由金黄色葡萄球菌V8蛋白酶和胰蛋白酶消化的HBV外壳蛋白、前S2抗原、     

东莞塘厦地区530例儿童脓疱疮病原菌培养及药敏分析

目的 了解东莞塘厦地区儿童脓疱疮的病原菌分布及药物敏感性结果.方法 对530例脓疱疮患儿的脓疱液做细菌培养,并对分离出的528株病原菌进行耐药性分析.结果 分离出金黄色葡萄球菌504株(95.09％)、A群溶血性链球菌14株(2.64％)、肠球菌3株(0.56％)、鲍曼不动杆菌2株(0.38％)、肺炎克雷白杆菌2株(0.38％)、奇异变形杆菌2株(0.38％)、表皮葡萄球菌1株(0.18％).对504株金黄色葡萄球菌进行药敏试验结果显示,金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、克林霉素耐药率较高,分别为96.8％、89.1％、53.5％,对其他抗生素耐药率较低.其他病原菌耐药率都不高.结论 东莞塘厦地区儿童脓疱疮的主要致病菌为金黄色葡萄球菌,对青霉素、红霉素、克林霉素的耐药性较高,已不适于治疗本地区由金黄色葡萄球菌感染引起的脓疱疮.     

左氧沙星单用及与磷霉素联用对金黄色葡萄球菌的防耐药突变浓度研究

目的 左氧沙星(喹诺酮类抗菌药)单用及其与磷霉素(抗生素)联用对金黄色葡萄球菌的防耐药突变浓度(MPC)的变化.方法 采用琼脂二倍稀释法,测定左氧沙星、磷霉素单用及联用时,对10株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)和10株甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)的最低抑菌浓度(MIC)和MPC,计算耐药突变频率和选择指数(SI=MPC/MIC).结果 左氧沙星单用,对10株MSSA和10株MRSA的SI分别是4-64,4-16;而其与磷霉素联用对2种茵的S1分别是2～8,1～8.联用后,SI下降到单用药物的1/2～1/8.结论 对金黄色葡萄球菌联用较单用可缩小突变选择窗(MSW),减少耐药菌产生.     

ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌生长及生物膜形成的影响#br#

目的 研究ε-聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine, ε-PL)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, S. aureus)生长及生物膜形成的影响。方法 以金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC25923及社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)USA300为试验菌株,常量肉汤稀释法(试管)测定最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC),酶标仪检测吸光度法观察各株金黄色葡萄球菌的生长曲线,96孔板结晶紫染色法检测各株菌生物膜的形成并用扫描电子显微镜(SEM)观察生物膜的形成情况。结果 ε-PL对ATCC25923和USA300的MIC均为31.25mg/mL。ε-PL浓度升高时对两株菌生长的抑制作用随之增强。1/2MIC ε-PL能显著降低ATCC25923和USA300生物膜的形成能力。 结论 ε-PL作为一种安全、高效的天然防腐剂,能有效抑制金黄色葡萄球菌细菌的生长及生物膜的形成,为新型药物的研发提供了理论依据。     

食源性金黄色葡萄球菌分离株肠毒素及耐药性分析

目的 ：对92株食源性金黄色葡萄球菌分离株进行肠毒素及耐药性检测,以了解其致病性和耐药性。方法 ：采用酶联免疫吸附试验测定食源性金黄色葡萄球菌分离株肠毒素携带情况,利用VITEK^?2 Compact全自动微生物分析系统对菌株进行药敏试验,采用聚合酶链式反应对菌株mecA耐药基因进行检测。结果 ：92株食源性金黄色葡萄球菌分离株肠毒素检出率为5.43%(5株),对青霉素、四环素、红霉素、克林霉素4种抗生素的耐药率较高,分别为100%、 30.43%、19.57%、14.13%,检出3株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。结论 ：食源性金黄色葡萄球菌分离株产生的肠毒素不容忽视,多重耐药及MRSA的检出提示耐药形势比较严峻,加强对食源性金黄色葡萄球菌致病性和耐药性的监测,对降低食品安全风险有重要意义。     

骨折内固定术后感染金黄色葡萄球菌患者的耐药监测及临床分析

目的 分析金黄色葡萄球菌在骨折内固定术后感染患者中的耐药情况。方法 回顾性分析四川省骨科医院2016年1月至2020年12月骨折内固定术后确诊为金黄色葡萄球菌感染的临床病例,共收集金黄色葡萄球菌467株。根据药物敏感性实验分为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)组(145株)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)组(322株),分析比较2组对常见抗菌药物的耐药情况。统计2016—2020年万古霉素对MRSA最低抑菌浓度(MIC)。结果 金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率达94.9%(443/467),对红霉素、克林霉素、苯唑西林、四环素耐药率较高,对左氧氟沙星、利福平、复方磺胺甲噁唑片、莫西沙星的耐药率较低[8.4%(39/467)、5.8%(27/467)、3.6%(17/467)、3.0%(14/467)],未发现对万古霉素、利奈唑胺、达托霉素耐药的菌株,万古霉素中介3株。MRSA组和MSSA组对克林霉素、苯唑西林、红霉素、左氧氟沙星、莫西沙星、青霉素、利福平、复方磺胺甲噁唑片、四环素的耐药率比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。万古霉素对MRSA的MIC为2 mg/L的比...     

肿痛安胶囊水提物对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的体外抗菌活性

目的考察肿痛安胶囊水提物对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的体外抗菌活性。方法采用琼脂二倍稀释法,以万古霉素为阳性对照品、以金黄色葡萄球菌ATCC29213为质控菌,测定了2个批次的肿痛安提取物对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、甲氧西林敏感表皮葡萄球菌(MSSE)、耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)共123株临床分离致病菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果结果表明:肿痛安胶囊水提物对51株MRSA、25株MSSA、33株MRSE的MICrange为12.5 mg/ml~>50 mg/ml,MIC50分别为12.5 mg/ml、25 mg/ml、12.5 mg/ml;对受试的14株MSSE的MICrange为12.5~50 mg/ml,MIC50为25 mg/ml。结论肿痛安胶囊水提物对MRSA、MSSA、MRSE、MSSE均有较好的体外抗菌活性。     

呼吸道感染常见细菌分泌MPT64蛋白或其抗原类似物情况分析

目的:进一步确证呼吸道感染常见细菌分泌结核分枝杆菌MPT64蛋白或抗原类似物的情况,为结核病试验诊断研究提供循证依据。方法:选取2019年3月至2020年12月清远市清新区人民医院送检的合格痰标本80株培养分离株,依细菌分离时间先后将样本分为训练集样本组50株和测试集样本组30株。取ATCC25923金黄色葡萄球菌、A...     

比浊法自动测定可利霉素片的效价

目的:建立比浊法测定可利霉素片效价的方法。方法:以金黄色葡萄球菌为试验菌,加菌量为0.5%(V/V),温度为(37±0.5)℃,培养时间3.5～4.0h测定。结果:抗生素线性最佳浓度范围为6.4～15.7 u.mL-1,平均回收率为100.7%(n=9),RSD=1.7%。结论:本方法灵敏、快速、实用,可作为测定可利霉素片效价的方法。