人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的改良

目的探讨通过Matrigel与高浓度Ishikawa肿瘤细胞混合接种的方法优化改良人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的可行性。方法培养Ishikawa人子宫内膜癌细胞系,制备高浓度肿瘤细胞与Matrigel等体积悬液,裸鼠右侧肩胛部皮下注射。观察接种后裸鼠的存活状况及成瘤情况。石蜡包埋肿瘤组织切片,HE染色观察肿瘤组织病理学特征。结果 10只裸鼠均成功建立肿瘤模型,建模成功率100%。接种28 d内出现1例裸鼠瘤体破溃,9只裸鼠均存活,移植瘤瘤体表面皮肤完整。肿瘤最长径可达15. 1~17. 9 mm,瘤重0. 83~1. 59 g。所有移植瘤组织经病理学证实均符合人子宫内膜癌的特点。结论采用将高浓度Ishikawa细胞与Matrigel混悬法可在短时间内成功构建人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,且移植瘤组织和细胞保留了人子宫内膜癌的病理特征,适用于实验研究的开展。     

siRNA-STAT3对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用

目的:探讨pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒抑制人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长及诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法:应用人卵巢癌细胞株SKOV3对15只裸鼠构建卵巢癌移植瘤模型,随机分为生理盐水对照组、空质粒对照组、重组质粒组。联合电转染技术向裸鼠移植瘤内注射重组质粒,每隔5天重复注射1次,每4天测量各组裸鼠皮下移植瘤体积。采用TUNEL法检测肿瘤组织细胞的凋亡情况。结果:重组质粒瘤内注射对卵巢癌移植瘤生长有明显的抑制作用,与两个对照组比较重组质粒组裸鼠移植瘤生长速度明显减慢(P<0.01)。TUNEL染色显示重组质粒组癌组织有大量细胞凋亡。结论:pSilencer1.0-U6-siRNA-STAT3重组质粒能有效诱导人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤组织中细胞凋亡,抑制肿瘤生长。     

人宫颈鳞状细胞癌裸鼠移植模型的建立及分析

目的:采用裸鼠腹部皮下移植感染高危型HPV人宫颈鳞癌组织的方法,建立宫颈癌动物模型,研究其在裸鼠体内的成瘤性,并探讨其生物学特性。方法:取中分化及高分化人宫颈鳞状细胞癌癌组织两块分别接种于裸鼠腹部皮下,以建立人宫颈癌裸鼠模型,比较两组荷瘤鼠成瘤率、一般特性和移植瘤生长情况,85天后处死裸鼠,切除肿块做病理切片;PCR(聚合酶链式反应)检测肿瘤组织、外周血和肝等脏器HPV DNA表达情况。结果:接种后两组小鼠分别于第42天及第49天在接种部位可见结节,第80天后肿瘤块平均体积分别为(38.0±5.1)mm3、(30.2±4.6)mm3,肿瘤移植成功率分别为80%及60%,移植瘤生长以局部浸润为主,未见转移瘤。组织学检查所有移植瘤与种植前肿瘤组织病理检查结果一致,HPV DNA呈阳性,且为高危型人乳头瘤病毒HPV16、18型阳性,亦与原宫颈癌病人HPV16、HPV18感染一致;外周血与肝等脏器HPV DNA呈阴性。结论:裸鼠人宫颈癌组织模型成瘤率较高,且分化程度越低其成瘤率越高,操作简便,成本低,且保留了HPV感染生物学特性,为探索宫颈癌的发病机制和临床治疗提供了重要的科研工具。     

生酮饮食对裸鼠人结肠癌皮下瘤生长的影响

目的 构建结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,观察生酮饮食(KD)对移植瘤生长的影响.方法 选取10只雄性SPF裸鼠,对其予以皮下接种HCT116结肠癌细胞构建裸鼠结肠癌移植瘤模型,接种当天将裸鼠随机分为正常饮食组(对照组)及KD饮食组(KD组),每组5只,成瘤前两组均自由进食,成瘤5 mm开始对照组自由进食标准饲料,KD组进食...     

央芪汤流浸膏敷贴制剂对胃癌动物模型的干预作用研究

目的：通过将央芪汤制作成流浸膏制剂,检测央芪汤流浸膏制剂对胃癌动物模型中瘤体的抑制作用.方法：将人胃癌 SGC-7901 细胞悬液皮下接种于裸鼠背部皮下,当接种部位肿瘤长至最大径 4～5 mm 时,将裸鼠随机分为四组 （10 只 / 组 ）：A 组 （ 央芪汤敷贴剂 ）;B 组 （ 氟尿嘧啶注射液 ） ;C 组 （ 央芪汤敷贴剂 ＋ 氟尿嘧啶注射液 ） ;D 组 （ 生理盐水对照组 ）.给药期间观察裸鼠的一般情况及移植瘤的生长状况,连续用药 24 d,并继续观察 4 d 后,颈椎脱位处死裸鼠,采用链霉素抗生物素蛋白 - 过氧化物酶法检测 bcl-2 及 caspase-3 蛋白.结果：央芪汤流浸膏可明显提高胃癌细胞株 SGC-7901 在裸鼠皮下移植瘤的 caspase-3 蛋白表达,显著抑制 SGC-7901 在裸鼠皮下移植瘤抗凋亡蛋白bcl-2 的表达.结论：央芪汤流浸膏可以明显增加荷瘤裸鼠肿瘤细胞凋亡,有明显差异,表明央芪汤流浸膏可以通过促进胃癌细胞的凋亡达到抗肿瘤的目的.     

GANT61靶向抑制卵巢上皮癌血管生成减少肿瘤生长

目的探讨GANT61是否可以抑制卵巢上皮癌的血管生成,从而减少肿瘤的生长。方法饲养裸鼠,随机分为实验组和对照组,每组各10只,两组裸鼠体重,年龄无统计学差异(P>0.05)。将人卵巢癌组织块接种到裸鼠肩胛区皮下,实验组中每只裸鼠皮下注射GANT61(10 mg/ml),0.2 ml/只,对照组中每只裸鼠皮下注射溶剂,0.2 ml/只,(溶剂成分∶无水乙醇∶玉米油=1∶4),观察皮下移植瘤生长情况,比较两组肿瘤的生长曲线。适时剥出肿瘤,利用Western印迹检测,比较两组裸鼠皮下移植瘤组织中Gli1和Gli2蛋白表达水平及VEGF和CD31蛋白表达水平。结果实验组(GANT61组)比对照组(Solvent组)裸鼠肿瘤生长速度明显下降(P<0.01),实验组瘤体重量明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);4只对照组裸鼠皮下移植瘤中Gli1和Gli2蛋白表达水平明显高于4只实验组裸鼠(P<0.01);4只对照组裸鼠皮下移植瘤中VEGF和CD31蛋白表达水平明显高于4只实验组裸鼠(P<0.01)。结论 GANT61通过靶向抑制卵巢上皮癌血管生成,从而减少肿瘤生长。     

人恶性黑色素瘤多发转移裸鼠动物模型的建立

目的探讨建立人恶性黑色素瘤多发转移裸鼠动物模型的方法,为进一步研究恶性黑色素瘤的发病机制提供动物模型。方法将MV3人黑色素瘤细胞注射于裸鼠背部皮下,待裸鼠背部皮下出现肿瘤后,通过病理学检查及免疫组化技术对动物模型进行鉴定。结果裸鼠皮下接种人黑色素瘤细胞28d后背部皮下相继出现肿瘤,肿瘤组织免疫组化结果显示S-100及HMB45阳性,肿瘤组织HE染色及肺、脾、肝、脑、肾各组织免疫组化结果显示各组织均出现不同程度转移灶,表明成功建立人黑色素瘤多发转移裸鼠模型。结论该研究选择来源于人的恶性黑色素瘤细胞MV3接种于裸鼠背部皮下,28d后成功建立了人黑色素瘤多发转移裸鼠动物模型,该模型为进一步研究黑色素瘤的生物学特性及新药开发提供了实验依据。     

CCNG2基因过表达对甲状腺癌裸鼠移植瘤实验研究

目的利用人K1甲状腺癌移植型裸鼠模型,探讨细胞周期蛋白G2(cyclin G2)的体内抑制肿瘤效应。方法将18只4周龄SPF级BALB/C雌性裸鼠编号,随机数字表法分为空白对照组、阴性转染对照组和CCNG2基因转染组,每组6只。常规扩大培养三种细胞,将生长状态良好的细胞消化后重悬于无血清培养基中,0.2ml/只(终浓度为5×107)于裸鼠右侧腋窝皮下按组别接种建立甲状腺癌动物模型,同时游标卡尺测量瘤体的长轴、短轴计算移植瘤体积,绘制生长曲线。30天后断颈处死所有组别的裸鼠,摘取瘤组织,免疫组织化学检测CCNG2蛋白的表达。结果所有组别裸鼠全部成瘤,成瘤率100%(18/18)。CCNG2基因转染组细胞组裸鼠成瘤时间延迟、瘤组织体积及生长速度缓慢,平均体积明显小于空白对照组和阴性转染对照组(F=54.983,P0.001),体积抑瘤率分为67.07%、62.32%。免疫组织化学检测结果示:LV-CCNG2转染组染色阳性指数分别为9.79±0.658,与空白对照组和阴性转染对照组染色指数4.659±0.371和4.719±0.367相比,差异具有统计学意义(P0.05)。结论慢病毒介导CCNG2过表达于人K1甲状腺癌细胞在裸鼠体内的生长受到了明显的抑制。     

扶正抑瘤汤对卵巢癌的抑制作用及其机制的实验研究

目的探讨扶正抑瘤汤对裸鼠卵巢癌移植瘤的抑制作用并探讨及作用机制。方法 40只裸鼠接种人卵巢癌细胞A2780,复制荷瘤模型后,随机分为4组,每组10只:分别为对照组和扶正抑瘤汤大、中、小剂量组;分别给予生理盐水、和不同剂量扶正抑瘤汤(30 g/kg、20 g/kg、10 g/kg)灌胃,连续3W。停药第2天测量各组裸鼠肿瘤体积后,处死裸鼠,剥离肿瘤称重。流式细胞仪检测肿瘤组织的细胞周期、Western Blot法检测肿瘤组织的PCNA和VEGF蛋白表达、ELISA法检测裸鼠外周血IL-2和INF-γ水平。结果与对照组相比,各剂量组裸鼠的肿瘤体积和重量均明显降低(P0.05);随着扶正抑瘤汤剂量的增大,抑制肿瘤生长的作用更明显(P0.01)。随着药物剂量加大,肿瘤组织G1期细胞随之增多,而S期+G2细胞则随之减少(P0.01)。扶正抑瘤汤可明显下调肿瘤组织的PCNA和VEGF蛋白表达、上调外周血IL-2和INF-γ的水平,其作用呈剂量依赖性(P0.01)。结论扶正抑瘤汤能抑制卵巢癌荷瘤鼠瘤组织的生长,作用呈剂量依赖性;作用机制可能与扶正抑瘤汤对瘤组织细胞周期的调控、下调瘤组织PCNA、VEGF表达以及提高免疫功能等途径有关。     

他莫昔芬对裸鼠移植性人肝癌细胞生长的影响

目的观察他莫昔芬对裸鼠移植性人肝癌细胞生长的影响及应用他莫昔芬后裸鼠肿瘤组织内雌激素受体指标的变化,为他莫昔芬用于肝癌治疗提供实验依据。方法BALB/cA-nu雄性裸鼠26只,背部皮下接种HepG2人肝癌细胞建立裸鼠肝癌模型,14天后成瘤裸鼠随机分成对照组和他莫昔芬治疗组;给药30天后检测各组移植瘤的体积和重量;病理学常规检查,并采用免疫组化检测肿瘤组织内雌激素受体的表达。结果与对照组相比,他莫昔芬治疗组裸鼠肿瘤的体积、重量明显减少(P<0.05),肿瘤内雌激素受体的表达明显减少。结论他莫昔芬通过与肝癌细胞膜上的雌激素受体结合,阻止雌激素作用的发挥,从而抑制肝癌细胞的增殖。     

白细胞介素-18对荷卵巢癌裸鼠的肿瘤生长抑制作用

目的:研究白细胞介素-18(IL-18)对荷卵巢癌裸鼠的肿瘤生长抑制作用,并探讨治疗前后肿瘤的病理改变。方法:采用人卵巢癌细胞株HO-8910建立24只裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型,种植后1周随机分4组,每组6只,分别用不同浓度的IL-18进行腹腔注射治疗,并于种植后第4周处死裸鼠,测量瘤重,计算抑瘤率,绘制肿瘤生长曲线,计算镜下肿瘤细胞平均坏死率。结果:IL-18剂量为0μg/100μL、0.25μg/100μL、0.5μg/100μL和1μg/100μL时,瘤体重量分别为:(0.600 8±0.189 5)g、(0.247 8±0.047 3)g、(0.223 0±0.112 0)g和(0.169 0±0.112 1)g,抑瘤率分别为58.76%、62.88%和71.87%,治疗后2周,平均相对体积分别为12.028 9±1.575 2、6.831 5±2.514 8、5.502 9±1.443 6和4.126 4±1.881 2,光镜下可见治疗组中肿瘤细胞呈片状、条带状坏死,肿瘤组织细胞核碎裂、溶解,部分坏死组织呈均质红染无结构区域,镜下肿瘤细胞的平均坏死率分别为0.120 0±0.059 8、0.385 3±0.137 1、0.435 6±0.121 1和0.554 8±0.117 8。与对照组相比,卵巢癌生长的抑制作用和肿瘤细胞坏死率有显著性差异(P<0.01),且随着IL-18剂量的增加,抑制作用越明显。结论:细胞因子IL-18能通过引起更多卵巢癌肿瘤细胞的坏死,从而有效地抑制卵巢癌的生长。     

NF-κB抑制剂对于人卵巢癌裸鼠移植瘤及其血管生成的影响

目的:初步探讨IκBα磷酸化抑制剂BAY 11-7082对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法:选用人卵巢癌细胞系COC 1建立裸鼠皮下移植瘤模型,腹腔注射BAY 11-7082,测量移植瘤的重量、体积,并用TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡情况。同时应用免疫组化染色,检测瘤组织内的NF-κB p 65、血管内皮生长因子(VEGF)和FⅧ蛋白表达,并计数微血管密度(MVD)。结果:BAY 11-7082组移植瘤重量显著低于阴性对照组(P<0.05),抑制率为47.60%;BAY 11-7082组AI值高于对照组(P<0.05);PI值小于对照组(P<0.05),BAY 11-7082组NF-κB p 65、VEGF与MVD均显著低于对照组(P<0.05)。结论:BAY 11-7082能明显抑制人卵巢癌细胞系COC 1裸鼠移植瘤的生长,通过影响VEGF表达对抗化疗药物。     

Development and Characterization of a Novel Congenic Rat Strain for Obesity and Cancer Research

The association between a Western Diet and colon cancer suggests that dietary factors and/or obesity may contribute to cancer progression. Our objective was to develop a new animal model of obesity and the associated pathophysiology to investigate human cancer independent of dietary components that induce obesity.

A novel congenic rat strain was established by introducing the fa allele from the Zucker rat into the Rowett Nude rat to generate a “fatty nude rat”. The obese phenotype was first characterized in the new model. To then examine the utility of this model, lean and obese rats were implanted with HT-29 human colon cancer xenografts and tumor growth monitored.

Fatty nude rats were visibly obese and did not develop fasting hyperglycemia. Compared to lean rats, fatty nude rats developed fasting hyperinsulinemia, glucose intolerance, and insulin resistance. Colon cancer tumor growth rate and final weight were increased (P < 0.05) in fatty nude compared to lean rats. Final tumor weight was associated with p38 kinase phosphorylation (P < 0.01) in fatty nude rats.

We have established a novel model of obesity and pre-type 2 diabetes that can be used to investigate human cancer and therapeutics in the context of obesity and its associated pathophysiology.     

转染人内皮抑素对卵巢癌细胞A2780体内外生长的影响

目的:探讨人内皮抑素(hum an endostatin,hES)对人卵巢癌细胞株A2780体内、外生长的影响及其可能机制。方法:高保真PCR从含有人内皮抑素基因的人肝脏组织中扩增出人内皮抑素编码区克隆入pcDNA3.1载体中,构建pcDNA3.1-ES重组质粒;将此重组质粒转染人卵巢癌细胞A2780中,观察A2780细胞生长。建立人卵巢癌裸鼠模型,随机将其分为两组:hES转染细胞组(A组,10只),对照组(B组,10只)。1月后,测量瘤体积、计算抑瘤率;标本行HE染色分析组织学形态;同时用W estern b lot检测hES、凋亡抑制蛋白bc l-2的表达;流式细胞仪检测转染对裸鼠移植瘤细胞凋亡率的影响。结果:hES转染A2780细胞后,细胞生长速率减慢。转染hES的裸鼠肿瘤生长较对照组明显减慢(P<0.001),抑瘤率为74%;HE染色及W estern b lot提示:转染后(A组)的组织学形态与转染前(B组)有显著差异;A组hES蛋白水平明显高于B组,而bc l-2蛋白水平明显低于B组;流式结果显示转染使肿瘤细胞的凋亡显著增加(P<0.05)。结论:转染hES体内、外均可抑制卵巢癌A2780细胞的生长,其机制与其促进了凋亡有关。     

来曲唑治疗子宫内膜癌的实验研究

目的:利用ER+、PR+的人子宫内膜癌细胞株RL-952种植于BALB/c雌性裸鼠形成移植瘤模型后,通过观察移植瘤生长体积的变化、PTEN以及Ki-67的变化来研究来曲唑对子宫内膜癌的治疗效果。方法:将对数生长期的人子宫内膜癌RL-952细胞接种于裸鼠身上形成移植瘤模型,分别给予来曲唑、甲地孕酮、来曲唑+甲地孕酮及生理盐水来对比药物对移植瘤生长的影响。结果:来曲唑组给药后瘤体体积明显小于甲地孕酮组和空白对照组,但与来曲唑+甲地孕酮组差异无统计学意义。PTEN的表达率在来曲唑组、甲地孕酮组、来曲唑+甲地孕酮组均高于空白对照组,Ki-67在各组中的表达无差异。结论:来曲唑对子宫内膜癌移植瘤的抑制作用明显,且与甲地孕酮相比较,优于甲地孕酮。     

Cytomegalovirus in human brain tumors:Role in pathogenesis and potential treatment options

During the last years increasing evidence implies that human cytomegalovirus(CMV) can be attributed to human malignancies arising from numerous tissues. In this perspective, we will review and discuss the potential mechanisms through which CMV infection may contribute to brain tumors by affecting tumor cell initiation, progression and metastasis formation. Recent evidence also suggests that anti-CMV treatment results in impaired tumor growth of CMV positive xenografts in animal models and potentially increased survival in CMV positive glioblastoma patients. Based on these observations and the high tumor promoting capacity of this virus, the classical and novel antiviral therapies against CMV should be revisited as they may represent a great promise for halting tumor progression and lower cancer deaths.     

SCID (severe combined immunodeficiency) mice as a new system to investigate metastasis of human tumors

In severe combined immunodeficiency (scid) mice which are deficient in T and B cell functions, human yolk sac tumor (YST-2) grew rapidly to enormous sizes in all of the animals after both subcutaneous and intraperitoneal transplantation, while only half of the subcutaneous and none of the intraperitoneal transplants were accepted in usual athymic nude mice. Furthermore, transplanted tumors metastasized spontaneously to distant organs such as lung, liver, kidney, pancreas, and spleen in scid mice, while metastases were not found in athymic nude mice. Similar results were observed in scid mice and scid-nude (streaker) double mutant mice with human classic (typical) seminoma which has been neither transplantable nor metastatic in athymic nude mice. Thus, scid mice provide an invaluable experimental system to investigate the mechanism of metastasis which is the most important and life-threatening problem in cancer patients.     

AG490单用或联合顺铂对人宫颈癌裸鼠移植瘤STAT3/Survivin信号转导通路的影响

目的:探讨STAT3信号转导通路对人宫颈癌裸鼠移植瘤生长、凋亡的影响以及与Survivin表达之间的关系。方法:建立宫颈癌裸鼠移植瘤模型并分组,AG490单用或联合顺铂(DDP)处理各组裸鼠,治疗期间观察并记录各组裸鼠皮下移植瘤的生长情况,计算肿瘤体积、肿瘤生长抑制率,绘制肿瘤生长曲线,观察用药后裸鼠体重变化;免疫组化、Western blot分别检测移植瘤P-STAT3、Survivin表达,流式细胞技术检测细胞凋亡。结果:AG490与DDP可以抑制宫颈癌移植瘤生长,促进宫颈癌细胞凋亡,同时使宫颈癌细胞P-STAT3、Survivin表达与活性明显下降;联合应用AG490与DDP,可以起协同作用,AG490可以增强DDP的药物敏感性并且减轻药物副作用。结论:JAK激酶抑制剂AG490与DDP联合应用可能为治疗宫颈癌提供了新的理论基础。     

家兔卵巢组织异体皮下移植的形态与功能研究

目的:研究家兔卵巢组织玻璃化冷冻、异体皮下移植后激素水平和卵泡的生长发育情况。方法:将36只裸鼠随机分为4组,分别为正常对照组、新鲜移植组、冻存移植组、去势组。将新鲜和冻融卵巢组织分别异体异位移植到裸鼠颈部皮下,于移植术后第5天开始观察裸鼠的动情周期,术后35天左右动情期测鼠血清雌激素水平,并对各组子宫进行湿重及组织形态学观察比较。结果:新鲜及冻存卵巢组织移植后均可观察到存活组织块,移植卵巢内可见不同阶段的发育卵泡,并可见间质腺和黄体。两种移植组于动情期雌激素水平与正常对照组差异无统计学意义(P0.05),均明显高于去势组。结论:玻璃化法冷冻可以有效保存卵巢组织的结构和功能。冻存复苏后与新鲜卵巢皮质组织具有相同的生理活性。冻存卵巢皮质异体异位无血管皮下移植后能够存活、生长发育,并维持生殖内分泌功能。