食管癌患者外周血自然杀伤T 细胞及其表面受体NKG2A与NKG2D检测的临床意义

 【摘要】　目的　研究外周血中自然杀伤（NK）T细胞及其CD+8 NKT细胞亚群在食管癌患者与健康人中的表达水平及NKT细胞活性改变,探讨NKT细胞受体与临床病理分期的相关性及其临床意义。方法　采用流式细胞术分析53例食管癌患者及39名健康对照者外周血中NKT细胞及CD+8 NKT亚群,检测NKT细胞受体NKG2A和NKG2D的表达并结合临床病理因素作比较分析。结果　与健康对照组相比,食管癌患者外周血NKT细胞表达增加[（4.32±0.73）%,（5.97±1.29）%]（t＝3.562,P＜0.01）,NKT细胞表面NKG2D的表达水平降低[（17.56±5.92）%,（15.12±1.56）%]（t＝3.892,P＜0.05）,而NKG2A的表达水平升高[（4.02±1.41）%,（5.99±4.59）%]（t＝4.015,P＜0.05）,且其变化与食管癌的病情进展有关。结论　NKT细胞及其CD+8 NKT亚群在食管癌患者中表达增加,提示患者机体抗肿瘤效应的免疫反馈增强;NKT细胞表面活化性受体NKG2D表达减少与其表面抑制性受体NKG2A表达增加可能是致使NKT细胞活性降低及食管癌患者免疫逃逸的机制之一,且这种NKT细胞表面受体的变化和食管癌病情的发展有一定的相关性。     

肺癌患者外周血CD+8 自然杀伤T细胞表面受体NKG2D和NKG2A表达的临床意义

 【摘要】　目的　检测肺癌患者外周血CD+8 自然杀伤（NK）T细胞表面受体NKG2D和NKG2A的表达,探讨二者表达失衡与肺癌免疫逃逸的关系。方法　选择95例原发未治疗的肺癌患者,采用流式细胞术检测CD+8 NKT细胞表面受体NKG2D和NKG2A的表达,以50名健康人为对照。结果　肺癌组CD+8 NKT细胞NKG2D+表达率[（77.07±5.77）%]明显低于对照组[（84.13±4.49）%],差异有统计学意义（t＝8.14,P＜0.05）;在TNM分期中,Ⅰ～ⅢA、ⅢB、Ⅳ期患者CD+8 NKT细胞NKG2D+表达率依次为（81.07±5.02）%、（76.95±4.70）%、（72.80±5.16）%,差异有统计学意义（F＝18.74,P＜0.05）。肺癌组CD+8 NKT细胞NKG2A+表达率[（33.58±8.82）%]明显高于对照组[（25.31±8.38）%],差异有统计学意义（t＝-5.46,P＜0.05）;在TNM分期中,Ⅰ～ⅢA、ⅢB、Ⅳ期患者CD+8 NKT细胞NKG2A+的表达率依次为（25.10±6.93）%、（33.24±3.76）%、（43.64±6.10）%,差异有统计学意义（F＝75.73,P＜0.05）。结论　肺癌患者CD+8 NKT细胞表面NKG2A和NKG2D表达失衡可能抑制该细胞的杀伤功能,而这可能是肿瘤免疫逃逸的机制之一。     

CD8~+NKT细胞表面活化性受体NKG2D在肺癌患者外周血中的表达及临床意义

背景与目的 NKT细胞活化性受体NKG2D及sMICA是近来肿瘤免疫研究领域的热点之一。本研究旨在观察肺癌患者外周血中CD8+NKT细胞受体NKG2D表达水平的变化,并对NKG2D及sMICA进行相关性分析,探讨它们在肺癌免疫监视中的作用及临床意义。方法选择82例初发未治疗的肺癌患者,采用流式细胞术检测外周血CD8+NKT细胞活化性受体NKG2D的表达,并以45例健康人作对照,采用酶联免疫吸附法检测肺癌患者血清中sMICA的表达,分析NKG2D与肺癌临床生物学特征的关系。结果肺癌患者外周血中CD8+NKT细胞表面活化性受体NKG2D水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。随TNM分期的增加,NKG2D的表达率逐渐降低。其中IV期肺癌患者NKG2D的表达明显低于I期-II期及III期患者该受体的表达,差异有统计学意义(P<0.001)。肺Ca患者中吸烟人群外周血中CD8+NKT细胞受体NKG2D的表达较非吸烟者低,差异有统计学意义(P<0.05)。CD8+NKT细胞受体NKG2D与sMICA呈负相关(r=-0.598,P<0.001)。结论肺癌患者CD8+NKT细胞表面受体NKG2D在外周血中低表...     

晚期消化道恶性肿瘤NKG2A、NKG2D、sMICA的表达及其相关性研究

 目的　分析晚期消化道恶性肿瘤患者外周血NK细胞受体NKG2A、NKG2D及NKG2D配体sMICA的表达及其相关性,探讨其对恶性肿瘤患者免疫监视的意义。方法　选取263例晚期消化道恶性肿瘤患者为试验组,66例健康志愿者作为对照组,采用流式细胞术（FCM）检测两组NKG2A、NKG2D的表达,酶联免疫吸附法（ELISA）检测两组sMICA的表达。结果　试验组患者血清sMICA及NKG2A高于健康对照组[sMICA：（266.65±107.60） pg／ml比（148.01±94.11） pg／ml;NKG2A（37.17±20.54）％比（27.75±6.52）%,均P ＜0.01]。NKG2D低于健康对照组[（83.92±10.46）%比（88.21±6.26）%,均P ＜0.01]。Spearman相关性分析结果表明,试验组NKG2D与sMICA呈负相关r＝-0.149,P ＝0.016。NKG2D与NKG2A、NKG2A与sMICA之间均无明显的线性相关关系（均P ＞0.05）。结论　检测外周血NK细胞受体NKG2A、NKG2D及NKG2D配体sMICA的表达水平,可监测消化道恶性肿瘤患者免疫功能状态,为恶性肿瘤的免疫治疗提供理论依据。     

NK细胞活化受体NKG2D及sMICA在晚期肺癌免疫监视中的作用

背景与目的 NK细胞活化受体NKG2D及sMICA是近来肿瘤研究领域热点之一.本研究旨在观察晚期肺癌患者外周血中NK细胞受体NKG2D及sMICA表达水平的变化,并探讨它们在晚期肺癌免疫监控中的作用及其临床意义.方法 采用流式细胞术榆测115例肺癌患者外周血NK细胞受体NKG2D、T淋巴细胞哑群及NK细胞百分比,采用酶联免疫吸附反应检测肺癌患者外周血sMICA值,并以50例健康人作为对照.结果 晚期肺癌患者外周血sMICA、CD8+T细胞、NK细胞数量较对照组明显升高,而NK细胞受体NKG2D、CD3+T细胞、CD4+>T细胞、CD4+T/CD8+T值较对照组下降.NK细胞受体NKG2D和sMICA呈负相关(r=-0.319,P<0.05).NK细胞受体NKG2D与CD4+T细胞、CD4+T/CD8+T成正相关(P0.05),与CD8+T细胞成负相关(P<0.05);sMICA与CD4+T细胞、CD4+T/CD8+T成负相关(P<0.05),与CD8+T细胞成正相关(P<0.05);它们与CD3+T、NK细胞均无相关性(P>0.05).结论 外周血sMICA上调介导NK细胞活化受体NKG2D下调机制参与了晚期肺癌以肿瘤为中心抑制免疫网络的形成,它们可作为监视晚期肺癌患者免疫状态的参考指标,也可作为评估肺癌发生、发展的参考依据.     

食管癌、贲门癌患者外周血CD+8NKT细胞活化受体NKG2D及其分泌性配体sMICA检测的临床意义

Objective To evaluate the clinical diagnostic application and operative efficacy of the expression of NKG2D in peripheral blood CD+8 NKT cell and its ligand sMICA in patients with esophageal or cardiac carcinoma.Methods The peripheral blood NKG2D positive CD+8 NKT cell percentage was concomitantly determined by flow cytometry in 53 preoperative patients including 29 postoperative patients with esophageal or cardiac carcinoma and 30 healthy controls.The serum sMICA was determined by ELISA.Results The peripheral blood NKG2D positive CD+8 NKT cell percentage in patients was significantly lower than that in controls [(77.632±8.972) % vs (89.053±6.515) %] (t = -6.113,P ＜0.05); with stage Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,it decreased significantly in order (F = 99.251,P ＜0.01);with lymph node metastasis lower than that without lymph node metastasis (t = -10.384,P ＜0.01); squamous carcinoma was higher than adenocarcinoma (t =9.899,P ＜0.01); postoperative was significantly higher than preoperative (t =-4.319,P ＜0.01).The level of serum sMICA in patients was significantly higher than that in controls [(326.28±85.407) pg/ml vs (210.00±92.560) pg/ml](t =7.292,P ＜0.01); with stage Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,it increased significautly in order (F =63.355,P ＜0.01); with lymph node metastasis higher than that without lymph node metastasis (t =7.770,P ＜0.01); squamous carcinoma was lower than adenocarcinoma (t =-7.593,P＜0.01); postoperative was significantly lower than preoperative (t =7.027,P ＜0.01).Serum sMICA could inhibit peripheral blood CD+8 NKT cell activation receptor NKG2D (F =142.773,P ＜0.05),determination coefficient R2 = 0.7368.Conclusion The level of peripheral blood CD+8NKT cell activation receptor NKG2D and serum sMICA in patients could be an assistant indicator for     

食管癌、贲门癌患者外周血CD+8NKT细胞活化受体NKG2D及其分泌性配体sMICA检测的临床意义

Objective To evaluate the clinical diagnostic application and operative efficacy of the expression of NKG2D in peripheral blood CD+8 NKT cell and its ligand sMICA in patients with esophageal or cardiac carcinoma.Methods The peripheral blood NKG2D positive CD+8 NKT cell percentage was concomitantly determined by flow cytometry in 53 preoperative patients including 29 postoperative patients with esophageal or cardiac carcinoma and 30 healthy controls.The serum sMICA was determined by ELISA.Results The peripheral blood NKG2D positive CD+8 NKT cell percentage in patients was significantly lower than that in controls [(77.632±8.972) % vs (89.053±6.515) %] (t = -6.113,P ＜0.05); with stage Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,it decreased significantly in order (F = 99.251,P ＜0.01);with lymph node metastasis lower than that without lymph node metastasis (t = -10.384,P ＜0.01); squamous carcinoma was higher than adenocarcinoma (t =9.899,P ＜0.01); postoperative was significantly higher than preoperative (t =-4.319,P ＜0.01).The level of serum sMICA in patients was significantly higher than that in controls [(326.28±85.407) pg/ml vs (210.00±92.560) pg/ml](t =7.292,P ＜0.01); with stage Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,it increased significautly in order (F =63.355,P ＜0.01); with lymph node metastasis higher than that without lymph node metastasis (t =7.770,P ＜0.01); squamous carcinoma was lower than adenocarcinoma (t =-7.593,P＜0.01); postoperative was significantly lower than preoperative (t =7.027,P ＜0.01).Serum sMICA could inhibit peripheral blood CD+8 NKT cell activation receptor NKG2D (F =142.773,P ＜0.05),determination coefficient R2 = 0.7368.Conclusion The level of peripheral blood CD+8NKT cell activation receptor NKG2D and serum sMICA in patients could be an assistant indicator for     

食管癌患者自然杀伤细胞活化性受体NKG2D及其分泌性配体sMICA的检测

目的探讨宿主自然杀伤（NK）细胞受体NKG2D在抗食管癌中的作用及其与肿瘤免疫逃逸的关系。方法用流式细胞术检测50例食管癌、26名健康对照外周血NK细胞NKG2D的表达状况,用酶联免疫吸附（ELISA）法检测外周血中可溶性MHC-1类链相关分子A（sMICA）的含量表达。结果食管癌患者手术前后及健康对照外周血NK细胞NKG2D的表达水平分别为（87．25±3．06）％、（88．38±4．24）％、（92．46±1．46）％,两组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。相应配体sMICA在食管癌患者血清中的表达较健康人中增高,但差异无统计学意义（P〉0．05）;在食管癌患者中不同肿瘤大小、分化程度、手术分期及是否有淋巴结转移等中表达差异无统计学意义（P〉0．05）;但在晚期患者（Ⅲ、Ⅳ期）和有淋巴结转移者中较健康对照明显增高,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论食管癌患者外周血NK细胞活性降低,其活化性受体NKG2D表达的下降是NK细胞活性下降的原因之一。食管癌患者免疫逃逸可能与NKG2D表达下调及其配体sMICA的表达升高有关。     

小儿急性淋巴细胞白血病血清CD+3 CD-4 CD-8 T细胞和T细胞亚群的变化及其临床意义

 目的　探讨小儿急性淋巴细胞白血病（ALL）外周血CD+3 CD-4 CD-8 T细胞（DNT细胞）及T淋巴细胞亚群的变化及意义。方法　采用免疫荧光流式细胞术检测30例ALL患儿及24例健康小儿外周血DNT细胞及T淋巴细胞亚群CD+3 T细胞、CD+3 CD+4 T细胞及CD+3 CD+8 T细胞水平。结果　DNT细胞、CD+3 T细胞、CD+3 CD+4 T细胞百分比均明显低于对照组，分别为（4.93±3.75）％比 （8.19±3.21）％（t＝3.4，P＜0.01）；（49.99±11.70）％比（64.13±11.39）％（t＝4.1，P＜0.01）；（28.30±7.56）％比 （34.61±6.43）％（t＝3.2，P＜0.01）；而CD+3 CD+8 T细胞百分比明显高于对照组，为（31.19±9.89）％比（24.33±4.24）％（t＝3.1，P＜0.01）。结论　ALL患儿外周血DNT细胞及T亚群的变化提示患儿体内存在免疫功能紊乱，这可能与ALL的发病机制有关。     

乳腺癌患者可溶性MICA对自然杀伤细胞受体的影响

目的观察乳腺癌患者外周血自然杀伤（NK）细胞杀伤活性及受体的变化,探讨可溶性MICA（sMICA）对NK细胞受体及杀伤活性的影响。方法ELISA法检测外周血血清sMICA的含量。流式细胞术（FCM）检测NK细胞百分比、NK细胞活化性受体NKG2D、抑制性受体KIR（CD158b）表达。MTT法检测NK细胞对乳腺癌细胞株MCF-7的杀伤活性。结果与健康人比较,乳腺癌患者中81．6％表达sMICA,含量为（205．36±71．27）ng／L,且sMICA含量与TNM分期呈正相关。乳腺癌患者外周血NK细胞所占百分比无明显差异,但血清sMICA阳性的乳腺癌患者中NK细胞杀伤活性明显降低,NKG2D表达下降,CD158b表达增高。当NK细胞培养体系中加入sMICA阳性的乳腺癌血清时,其杀瘤活性明显降低【（76．2±6．7）％与（48．4±4．1）％】,NKG2D的表达明显下调[（92．5±7．1）％与（62．5±6．4）％],而CD158b的表达明显上升【（10．6±3．2）％与（43．6±3．4）％】。sMICA阳性的乳腺癌患者NK细胞与细胞因子IL-15共培养,NK细胞的杀瘤活性、NKG2D的表达明显升高,KIR（CD158b）的表达明显下降。结论乳腺癌外周血血清中sMICA可通过下调NK细胞NKG2D表达以及上调KIR表达,降低NK细胞杀瘤活性。IL-15可逆转sMICA对NK细胞的免疫下调作用。     

食管癌患者自然杀伤细胞活化性受体NKG2D及其分泌性配体sMICA的检测

目的 探讨宿主自然杀伤(NK)细胞受体NKG2D在抗食管癌中的作用及其与肿瘤免疫逃逸的关系.方法 用流式细胞术检测50例食管癌、26名健康对照外周血NK细胞NKG2D的表达状况,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测外周血中可溶性MHC-1类链相关分子A(sMICA)的含量表达.结果 食管癌患者手术前后及健康对照外周血NK细胞NKG2D的表达水平分别为(87.25±3.06)%、(88.38±4.24)%、(92.46±1.46)%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).相应配体sMICA在食管癌患者血清中的表达较健康人中增高,但差异无统计学意义(P0.05);在食管癌患者中不同肿瘤大小、分化程度、手术分期及是否有淋巴结转移等中表达差异无统计学意义(P0.05);但在晚期患者(Ⅲ、Ⅳ期)和有淋巴结转移者中较健康对照明显增高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 食管癌患者外周血NK细胞活性降低,其活化性受体NKG2D表达的下降是NK细胞活性下降的原因之一.食管癌患者免疫逃逸可能与NKG2D表达下凋及其配体sMICA的表达升高有关.     

Tim-3在恶性黑色素瘤患者外周血CD8+T细胞上的表达及临床意义

目的:本研究应用流式细胞术检测恶性黑色素瘤患者外周血CD8+T细胞中T细胞免疫球蛋白及黏蛋白-3(Tim-3)的表达情况,探讨Tim-3在恶性黑色素瘤进展中的作用.方法:应用流式细胞仪检测42例恶性黑色素瘤患者及38例健康体检者外周血CD8+T细胞上Tim-3的表达,同时分析其与恶性黑色素瘤患者临床病理特征的关系.结果:Tim-3在恶性黑色素瘤患者及健康体检者外周血CD8+T细胞中均有不同程度的表达,恶性黑色素瘤组Tim-3表达量为(15.89±6.49)％,健康对照组的表达量为(3.27±2.16)％,差异具有统计学意义(P＜0.01).Tim-3在CD8+T细胞中的表达水平与恶性黑色素瘤患者有无溃疡、淋巴结转移、临床分期、远处转移有关(P＜0.01),而与性别、年龄、Breslow分度无关(P＞0.05).结论:Tim-3在恶性黑色素瘤患者外周血CD8+T细胞上高水平表达,其表达水平与临床分期呈正相关,并有望成为恶性黑色素瘤早期预测及治疗的重要靶标.     

食管贲门癌患者血清sMICA检测的临床意义

目的评价可溶性人类MHC-1类分子链相关基因A蛋白（sMICA）检测对食管贲门癌患者的临床诊断价值。方法应用酶联免疫法对50例术前食管贲门癌患者和其中27例术后患者及20名健康人血清sMICA含量进行测定，并对血清sMICA含量的差异进行分析。结果食管癌患者血清sMICA含量为（322．42±9．09）pg／ml，明显高于健康人的（176．00±11．69）pg／ml，差异有统计学意义（P〈0．01）；在TNM分期中，sMICA含量Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期依次增高（P〈0．05）；有淋巴结转移患者的sMICA含量均高于无淋巴结转移的患者（P〈0．01）；在组织病理分型中，腺癌患者血清sMICA含量高于鳞状细胞癌患者（P〈0．01）；Ⅲ期患者术前血清sMICA含量均高于术后，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论血清sMICA的检测有助于食管贲门癌的临床辅助诊断，对判断食管贲门癌生物学行为及预后有一定临床意义，sMICA可能成为新的肿瘤标志物指标之一。     

NKG2D可溶性配体水平在胃癌不同分期的表达及其与预后的关系

目的分析不同病理分化程度、不同TNM分期及不同转移程度的胃癌患者血清NKG2D可溶性配体（sMICA）水平的特点,探讨sMICA与预后的关系。方法胃癌患者200例,健康对照组60例,ELISA法检测血清sMICA的水平。结果健康对照组血清sMICA的水平为（210．07±31．01）Pg／ml,胃癌患者血清sMICA的水平为（359．45±114．15）pg／ml,差异有统计学意义（t=16．58,P〈0．05）。胃癌患者高、中、低分化各组间血清sMICA水平的比较差异无统计学意义（P〉0．05）。随TNM分期的增加,胃癌患者血清sMICA的水平逐渐升高,其中Ⅱ期与Ⅲ期、Ⅱ期与Ⅳ期、Ⅲ期与Ⅳ期间的差异均有统计学意义（P〈0．05）。胃癌患者随转移程度的加重,血清sMICA的水平逐渐升高,其中无转移与单部位转移、无转移与多部位转移、单部位转移与多部位转移患者间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论患者血清sMICA异常升高,这可能是自然杀伤（NK）细胞杀伤活性下降的重要原因之一。胃癌患者血清sMICA水平的高低与胃癌发展阶段和转移程度密切相关,但与细胞分化程度无关。     

肺癌患者自然杀伤细胞活性受体NKG2D与可溶性MICA的表达及其相关性分析

目的探讨肺癌患者自然杀伤细胞活性受体（NKG2D）与可溶性MICA（sMICA）的表达及其二者的相关性。方法选取30例肺癌患者作为试验组,30例健康志愿者作为对照组,采用流式细胞术（FCM）与酶联免疫吸附（ELISA）法分别测定两组NKG2D与sMICA分子的表达。结果肺癌患者和健康人群NKG2D分子表达分别为（81．56±8．78）％、（85．63±6．62）％,二者差异有统计学意义（P〈0．05）。肺癌患者和健康对照血清中sMICA分子表达分别为（354．13±80．575）pg／ml、（216．53±48．175）pg／ml,二者差异有统计学意义（P〈0．01）。NKG2D和血清中sMICA分子两个变量之间具有明显相关性（r=-0．349,P=0．006）,呈负相关关系。结论NKG2D的表达和血清中sMICA的水平可能成为预测肺癌患者免疫功能状态及肿瘤恶性转移的指标之一。sMICA表达及对NKG2D的负调节机制可能是导致肿瘤细胞发生免疫逃逸的原因之一。该机制可能会为肿瘤生物免疫治疗提供患者适应证指标。