预防用药对激素性股骨头坏死骨细胞凋亡的影响

背景:由于临床长程使用糖皮质激素的情况日益增多,激素性股骨头坏死的发病率出现增高趋势。骨细胞凋亡在早期激素性股骨头坏死中起着重要作用。目的:应用类固醇激素诱导兔股骨头坏死模型,观察分析采取中西药物并用预防激素性股骨头骨细胞凋亡的效果。设计:随机对照动物实验。单位:韶关学院医学院药学教研室和解剖学教研室,广东省粤北人民医院病理科。材料:实验于2005-04/07在韶关学院医学院中心实验室完成。选取成年新西兰大白兔30只,随机分为空白对照组、激素组、预防用药组,10只/组。血塞通片(主要成分为三七总皂甙,玉溪市维和制药有限公司,生产批号200410290,25mg/片);脂必妥片(主要成分为山楂、白术、红曲,成都地奥九泓制药厂,产品批号0410063,350mg/片);阿仑膦酸钠片(主要成分为4-氨基-1-羟基亚丁基-1,海南曼克星制药厂生产,批号040501,5mg/片);地塞米松磷酸钠注射液(河南天康制药有限公司生产,生产批号040905,5g/L)。方法:①动物适应实验环境1周后,激素组和预防用药组动物均肌注地塞米松磷酸钠注射液1mL,2次/周,建立激素性股骨头坏死动物模型。空白对照组不造模,在相同时间点肌注等量生理盐水。②预防用药组注射地塞米松的同时,每天灌喂给予血塞通25mg、脂必妥350mg和阿仑膦酸钠5mg,连续给药8周。激素组和空白对照组不给药。各组动物均肌注青霉素预防感染,5万u/只,2次/周。③停药1周后采用原位末端标记法对各组动物进行股骨头细胞凋亡检测,每张玻片上随机选择10个区域,每个区域计数100个骨细胞,统计每100个细胞中的细胞凋亡数。采用醋酸铀及柠檬酸铅双染色观察股骨头细胞的超微病理结构变化。主要观察指标:①各组股骨头骨细胞凋亡检测结果。②各组股骨头骨细胞超微病理结构电子显微镜观察结果。结果:实验选取成年新西兰大白兔30只,预防用药组实验过程中死亡1只,共29只兔进入结果分析。①各组股骨头细胞凋亡检测结果:激素组的骨标本可见细胞核中出现棕黄色颗粒的阳性细胞,即凋亡细胞。激素组每100个骨细胞中的凋亡细胞数均明显多于空白对照组和预防用药组[(24.14±5.46),(2.47±0.76),(8.12±3.23)个,q=8.76,q=13.45,P均<0.01];空白对照组和预防用药组基本相似(P>0.05)。②各组股骨头骨细胞超微病理结构电子显微镜观察结果:激素组骨细胞核体积缩小,染色质呈边聚现象,部分染色质更浓密,电子密度增加,结构模糊不清,具有凋亡细胞特征。预防用药组骨细胞电镜下核膜完整,染色质均匀,核占细胞的1/3左右。结论:采取类固醇激素诱导免股骨头坏死后,血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠联合应用能够抑制兔激素性股骨头细胞的凋亡。     

激素性股骨头坏死早期细胞凋亡相关基因表达及阿仑磷酸钠的干预

背景：近年研究发现激素性股骨头坏死病例中凋产的骨细胞增多，因此认为激素性股骨头坏死是骨细胞凋亡所致，而并非缺血性坏死。目的：观察大鼠激素性股骨头坏死早期bcl-2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cysteinyl aspartate specific protease3，caspase-3）的表达，以及阿仑磷酸钠的干预效果。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2006—03／200702在吉林大学基础医学院病理实验室完成。材料：健康Wister大鼠100只，随机分为正常对照组、激素模型组、藻酸双酯钠组、阿仑磷酸钠组、联合用药组，20只，组。藻酸双酯钠片为吉林东丰制药厂产品，阿仑磷酸钠为杭州默沙东制药有限公司产品。方法：除正常对照组外，其余4组大鼠均给予醋酸泼尼松龙臀肌注射建立激素性股骨头坏死模型。藻酸双酯钠组、阿仑磷酸钠组分别灌服对应药物，联合用药组灌服藻酸双酯钠＋阿仑磷酸钠。各组肌注用药1次／周，灌服药1次，d，实验持续6周。所有大鼠均强迫间断站立，4h／d。主要观察指标：光镜观察股骨头病理变化。S．P免疫组织化学染色法检测股骨头组织bcl-2、caspase．3的表达。结果：给药第4周与正常对照组比较，激素模型组股骨头坏死现象明显，骨小梁变细甚至断裂，空骨陷窝数量明显增多（t=-2．629，P〈0．01）；藻酸双酯钠组骨小梁和空骨陷窝数量介于前2组之间（t-=1．713，P〈O．01）；阿仑磷酸钠组、联合用药组骨小梁和空骨陷窝数量接近正常对照组忙1．462，t=-1．657，P〉0．05）。与激素模型组比较，藻酸双酯钠组、阿仑磷酸钠组、联合用药组股骨头组织bcl-2阳性细胞率均明显升高（t=-2．146，P〈0．05；t=-2．815，P〈0．01；t=-2．947，P〈0．01），caspase、3阳性细胞率均明显降低（t=-2．97，P〈0．叭；t=-2．462，P〈0．01；t=-I．854，P〈0．05），其中阿仑磷酸钠组圾联合用药组升高尤为明显（t=2．503，t=-1．959，P〈0．051。结论：大剂量激素可能通过抑制bcl-2表达和促进caspase-3表达引起股骨头坏死。阿仑磷酸钠可能通过与其相反的途径来防止骨细胞凋亡，从而预防早期激素性股骨头坏死。     

预防用药对激素性股骨头坏死组织结构和血流量的影响

背景：目前关于激素性股骨头缺血性坏死的研究多集中在治疗已形成的坏死，对在使用激素过程中如何预防股骨头坏死，报道较少。 目的：观察激素性股骨头坏死预防性给药对股骨头组织结构和血流量的影响。 设计：随机对照实验。 单位：韶关学院医学院药学教研室和解剖学教研室；广东省粤北人民医院核医学科。 材料：成年新西兰大白兔30只，雌雄不拘，体质量（2．5&;#177;0．5）kg。 方法：实验于2005—04／07在韶关学院医学院中心实验室、广东省粤北人民医院核医学科和中山大学北校区电镜室完成。①30只兔随机分为3组，每组10只。对照组肌注生理盐水1mL／kg，2次／周，生理盐水10mL/d灌胃；激素组肌注地塞米松磷酸钠注射液1mL／kg，2次／周，生理盐水10mL／d灌胃；治疗组肌注地塞米松磷酸钠注射液1mL／kg，2次／周，从注射地塞米松第1天开始每天灌喂血塞通25mg／kg、脂必妥350mg／kg和阿仑膦酸钠5mg／kg。连续用药8周。②停药1周后3组动物同时采用放射性微球技术测量股骨头血流量；光镜及电镜观察组织学改变。 主要观察指标：①各组兔股骨头血流量。②各组兔股骨头软骨组织形态及超微结构。 结果：①治疗组血流量显著多于激素组[（0．261&;#177;0．042），（0．197&;#177;0．053）mL／（min&;#183;g），q=6．10,P〈0．01]，与对照组[（0．243&;#177;0．039）mL／（min&;#183;g）]比较差异无显著性意义。②治疗组空骨陷窝显著少于激素组[（15．22&;#177;5．49）。（24．78&;#177;7．87）个，q=6．35，P〈0．01]，与对照组[（10．38&;#177;3．78）个]比．较差异无显著性意义。③治疗组细胞正常，内质网丰富，细胞核呈正常形态；激素组骨细胞体积缩小，核固缩，染色质边聚，骨陷窝扩大。 结论：在长程使用类固醇激素同时应用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠可提高股骨头血流量，改善骨组织结构，预防或减缓激素性股骨头坏死。     

激素性股骨头坏死动物模型的诱导与观察

目的：探索使用大剂量激素建立兔激素性股骨头坏死模型。方法：成年日本大耳白兔32只，随机分为模型组与对照组。模型组每周2次肌肉注射醋酸泼尼松龙10mg／kg．对照组每周2次肌肉注射生理盐水2ml／只，共6周。观察实验后第2周、4周、6周两组动物股骨头光镜及透射电镜组织病理学变化。结果：模型组股骨头骨质疏松，光镜下空骨陷窝数增多，脂肪细胞数增多，透射电镜股骨头部分骨细胞体积缩小，核固缩，较多骨细胞已坏死溶解成碎片。结论：大剂世激素可导致免股骨头缺血性坏死。     

参附注射液对再灌注期间肠黏膜上皮细胞凋亡的抑制

背景：肠上皮细胞异常凋亡是缺血再灌注期间肠黏膜损伤的主要原因，参附注射液对小肠黏膜损伤有良好的防治作用。目的：建立大鼠肠缺血再灌注模型，观察缺血再灌注时给予参附注射液对肠上皮细胞凋亡数目、凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2的表达及肿瘤坏死因子水平的影响。设计：随机对照实验。单位：武汉大学人民医院麻醉科。材料：实验于2002-12／2003-06在武汉大学人民医院麻醉科实验室完成。选取健康清洁级SD大鼠24只，随机分为空白对照组、肠缺血再灌注组、参附注射液组，8只／组。方法：各组大鼠给予氨基甲酸乙酯1mg／kg腹腔注射麻醉，肠缺血再灌注组和参附注射液组用血管钳夹闭肠系膜上动脉1h然后再灌注2h．空白对照组不用血管钳夹闭肠系膜上动脉。参附注射液组于阻断前30min静注参附注射液0．02mL／g，空白对照组和肠缺血再灌注组静脉输注等量生理盐水。制备切片进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2蛋白的表达及细胞凋亡检测。主要观察指标：①各组大鼠细胞凋亡指数的比较。②各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达。③各组肠粘膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较。结果：实验选用24只大鼠，全部进人结果分析。①各组大鼠细胞凋亡指数的比较：参附注射液组的凋亡指数明显低于肠缺血再灌注组．但比空白对照组高【（7．75&;#177;1．89）％，（28．25＋8．50）％，（4．25＋2．63）％．P均〈0．01]。（（2）各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达：参附注射液组组半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达低于肠缺血再灌注组，但高于空白对照组[（0.2116&;#177;0．0875），（0．3547＋0．0778）．（0．1941&;#177;0.0574），P〈0．01，P〉0．051；Bcl-2的表达在肠缺血再灌注组比空白对照组显著增高（P〈0．05），参附注射液组的表达比肠缺血再灌注组明显降低（P〈0．01）。（2）各组肠黏膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较：肠缺血再灌注组肿瘤坏死因子的表达显著高于空白对照组和参附注射液组[（189．7＋56．3），（38．6＋10．4），（47．5&;#177;18．7）mg／L，P均〈0．011，参附注射液组和空白对照组基本相似（P〉0．05）。结论：参附注射液通过抑制肿瘤坏死因子的含量、降低半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达、上调Bcl-2基因而抑制缺血再灌注期间肠黏膜上皮细胞的凋亡，从而减轻肠黏膜缺血再灌注损伤。     

预防用药对激素性股骨头坏死组织结构和血流量的影响

背景:目前关于激素性股骨头缺血性坏死的研究多集中在治疗已形成的坏死,对在使用激素过程中如何预防股骨头坏死,报道较少。目的:观察激素性股骨头坏死预防性给药对股骨头组织结构和血流量的影响。设计:随机对照实验。单位:韶关学院医学院药学教研室和解剖学教研室;广东省粤北人民医院核医学科。材料:成年新西兰大白兔30只,雌雄不拘,体质量(2.5±0.5)kg。方法:实验于2005-04/07在韶关学院医学院中心实验室、广东省粤北人民医院核医学科和中山大学北校区电镜室完成。①30只兔随机分为3组,每组10只。对照组肌注生理盐水1mL/kg,2次/周,生理盐水10mL/d灌胃;激素组肌注地塞米松磷酸钠注射液1mL/kg,2次/周,生理盐水10mL/d灌胃;治疗组肌注地塞米松磷酸钠注射液1mL/kg,2次/周,从注射地塞米松第1天开始每天灌喂血塞通25mg/kg、脂必妥350mg/kg和阿仑膦酸钠5mg/kg。连续用药8周。②停药1周后3组动物同时采用放射性微球技术测量股骨头血流量;光镜及电镜观察组织学改变。主要观察指标:①各组兔股骨头血流量。②各组兔股骨头软骨组织形态及超微结构。结果:①治疗组血流量显著多于激素组(0.261±0.042),(0.197±0.053)mL/(min·g),q=6.10,P<0.01,与对照组(0.243±0.039)mL/(min·g)比较差异无显著性意义。②治疗组空骨陷窝显著少于激素组(15.22±5.49),(24.78±7.87)个,q=6.35,P<0.01,与对照组(10.38±3.78)个比较差异无显著性意义。③治疗组细胞正常,内质网丰富,细胞核呈正常形态;激素组骨细胞体积缩小,核固缩,染色质边聚,骨陷窝扩大。结论:在长程使用类固醇激素同时应用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠可提高股骨头血流量,改善骨组织结构,预防或减缓激素性股骨头坏死。     

激素性股骨头坏死模型：不同构建技术分析

背景：良好的股骨头坏死动物模型的建立,有助于研究股骨头坏死的发病机制,为股骨头坏死的预防和治疗提供理论依据。目的：研究内毒素脂多糖联合地塞米松注射液诱导兔股骨头坏死的实验效果。方法：新西兰大白兔36只随机分为模型组21只和对照组15只。模型组连续2d每日经耳缘静脉注射内毒素脂多糖10pg／kg,再连续3d,每日肌肉注射地塞米松注射液25mg／kg对照组注射同等剂量的生理盐水。结果与结论：模型组4周后×射线显示兔关节间隙增宽,密度增大,关节软骨下骨密度增高,股骨头变平,骨小梁模糊,软骨下骨与骨松质界限不清,在股骨头内出现斑块状高密度区域,股骨颈变短粗。双能量X射线骨密度测量仪进行股骨头局部骨密度测量,兔股骨头骨密度检测发现模型组股骨头骨密度、骨矿物质含量均显著低于对照组（P〈0．05）。组织学切片见模型组骨细胞陷窝空疏,脂肪细胞增多,部分血管栓塞,其中存活动物的骨坏死率和骨陷窝率均明显高于对照组。证实地塞米松联合脂多糖可有效建立激素性股骨头坏死模犁。     

早期激素性股骨头缺血性坏死模型的建立及半胱天冬酶3活性测定

背景:有研究表明骨细胞凋亡与激素性股骨头缺血性坏死的发病机制密切相关,而活化的半胱天冬酶3可作用于其他半胱天冬酶家族成员,使蛋白酶级联反应放大,最终导致细胞凋亡.但半胱天冬酶3参与的骨细胞凋亡与早期激素性股骨头缺血性坏死的相关研究则罕见报道.目的:采用大剂量激素联合强迫兔直立负重的方法建立早期激素性股骨头缺血性坏死模型并测定骨细胞半胱天冬酶3活性.方法:将4月龄新西兰大白兔随机分成模型组和对照组.模型组每周3次臀肌注射地塞米松,每日强迫兔直立1 h,对照组注射等量生理盐水.分别于3,6,9和12周处死动物,取其双侧股骨头,光镜及电镜下观察组织病理学改变,应用对硝基酰苯胺比色法测定骨细胞半胱天冬酶3活性.结果与结论:给药3周后,模型组光镜下可见脂肪细胞肥大和增多,骨髓间充质干细胞及造血干细胞数量相对减少;给药6周后,模型组空骨陷凹率均大于对照组(P<0.05);给药9周后,模型组出现骨小梁变细、断裂,电镜下见模型组部分骨细胞体积缩小,染色质浓集,核固缩和碎裂等凋亡特征.给药6周后,模型组骨细胞半胱天冬酶3活性高于对照组(P<0.05).实验以此推论采用大剂量激素联合强迫兔直立负重可以诱导建立早期激素性股骨头缺血性坏死模型,半胱天冬酶3参与的骨细胞凋亡可能与早期激素性股骨头缺血性坏死发病过程有关.     

激素性股骨头坏死的细胞学变化

目的：观察长期大剂量使用糖皮质激素后兔股骨头组织细胞超微结构的变化，以及激素性股骨头缺血坏死的原因。方法：实验于2002-03／2003-06在西安交通大学第二医院骨病研究所完成。健康雄性日本白兔18只，随机分为两组，实验组为12只，皮下注射醋酸氢化泼尼松8mg／kg，1次／周。对照组6只，皮下注射生理盐水0．32mL/kg，1次／周。取股骨头组织苏木精-伊红染色，苏丹Ⅲ染色，光镜下计量空缺骨陷窝数和脂肪分布。用透射电子显微镜观察股骨头各系细胞超微结构的改变。结果：实验纳入兔18只，实验过程中，实验组死亡2只，进入结果分析16只。①光镜下两组兔股骨头空缺骨陷窝量的改变：实验组第4，8，12周股骨头软骨下区的皮质下骨小梁内空缺骨陷窝较对照组增多[（21．0&;#177;2．6）％比（12．0&;#177;1．8）％，（24．0&;#177;1．8）％比（12．0&;#177;1．3）％．（36．0&;#177;1．5）％比（13．0&;#177;2．1）％，P〈0．01]；第8周和12周即可见到小片块状缺失骨细胞的区域。②光镜下两组之间股骨头脂肪细胞的改变：实验第8．12周实验组兔股骨头内脂肪细胞明显增大，骨陷窝内有被苏丹Ⅲ染成桔黄色的脂肪沉积，两组间均未见有脂肪栓子。两组间股骨头脂肪细胞大小变化统计学上有显著性意义。③电子显微镜观察两组股骨头超微结构变化：股骨头各系细胞早期（轻者）胞浆和胞核内出现脂质堆积，晚期成骨细胞核膜碎裂染色质溶解，血管内皮细胞胞浆肿胀出现脂滴，毛细血管壁肿胀，质膜结构不完整，可见到明显的裂隙。脂肪细胞核内可见脂滴。小静脉常被异常肥大的脂肪细胞压迫，使管腔骤然变窄。结论：长期大剂量使用糖皮质激素可导致股骨头各系细胞慢性缺血缺氧引起脂肪变性，晚期发生细胞坏死。     

预防用药对激素性股骨头血流量和血液流变学的影响

目的探讨应用药物预防激素性股骨头坏死。方法给予类固醇激素,诱导出兔股骨头坏死动物模型,同时使用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠治疗,观察血液流变学指标和股骨头血流量。结果该方法可增加模型动物股骨头血流量,改善血液流变学指标,其增加或改善幅度与激素组相比有显著差异(P<0．05)。结论在长程使用类固醇激素同时应用血塞通、脂必妥和阿仑膦酸钠可提高股骨头血流量,改善血液流变学指标预防或减缓激素性股骨头坏死。     

The characteristics of interpretation of results of analysis of protein amount in urine of pregnant women

The adequacy of implementation of present proteinuria diagnostic thresholds under examination of pregnant women was examined. The analysis was applied to all urine samples of pregnant women from December 2009 to March 20010. The amount of protein in urine was concurrently evaluated by turbidimetric analysis with sulfosalicylic acid, colorimetric analysis with pyrogallol red, "dry chemistry" technology (the diagnostic strips). It is established that the mentioned techniques of analysis of protein in urine provide independent results. The results of colorimetric analysis are characterized by better precision and adequacy. However, in case of pregnant women the diagnostic threshold of protein concentration should be shifted from 0.120 to 0.150 g/l.     

超声评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响

目的 探讨超声在评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响的价值。方法 回顾性收集经病理学证实为头颈部肿瘤、放疗前后的颈动脉超声资料以及其他基线资料完整的患者93例,比较放疗前后放疗侧颈动脉和非放疗侧颈动脉粥样硬化斑块和溃疡斑块的总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积。结果 放疗前后颈动脉超声检查的平均间隔时间为（6.1±1.9）年;放疗前放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积与非放疗侧比较差异均无统计学意义（P均>0.05）;放疗后放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积均较非放疗侧加重,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 放疗可导致头颈部肿瘤患者颈动脉粥样硬化斑块的形成和进展,且斑块具有易损性特点。     

《中国内镜杂志》主编雷光华教授简介

雷光华男,1970年12月生,骨科学博士,一级主任医师,二级教授,博士生/后导师。国家"万人计划"领军人才,教育部"长江学者"特聘教授,科技部"中青年科技创新领军人才",国家卫生计生突出贡献中青年专家,享受国务院政府特殊津贴专家,国家临床重点专科骨科和运动医学学科带头人,全国青年岗位能手,湖南省"芙蓉学者"特聘教授,湖南省科技领军人才和骨科学科领军人才,湖南省普通高校学科带头人,湖南省首届"优秀科技工作者",中南大学"湘雅名医"。     

超声诊断主动脉窦瘤

本文报告31例主动脉窦瘤患者,全部用二维超声(2DE)和多普勒超声检查。其中手术治疗24例,超声符合22例,符合率为92％。误诊2例,误诊率为8％。故超声实际诊断主动脉窦瘤29例中右冠窦瘤18例(62％),无冠窦瘤7例(24％),二叶瓣型主动脉窦瘤4例(14％)。窦瘤破入/膨入右室和右房内的例数分别为16例和13例。本病主要的合并症为主动脉瓣关闭不全和室缺。通过分析我们认为二维加多普勒超声是诊断主动脉窦瘤最有价值的无创技术。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。