CpG ODN对卡铂治疗Lewis肺癌小鼠移植瘤的增敏效应

目的：探讨含胞嘧啶-磷酸盐-鸟嘌呤基序的寡脱氧核苷酸（cytosine-phosphate-guanine oligodeoxynucleotide,CpGODN）对卡铂治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠的化疗增敏作用。方法：在小鼠右前肢腋窝接种Lewis肺癌细胞,制备荷瘤小鼠模型,将32只荷瘤小鼠随机分为4组：对照组,不做任何处理;卡铂治疗组,第1~5天每天腹腔注射卡铂注射液0.32mg;CpG组,第1~5天每次腹腔注射CpGODN（1826）0.05mg;CpG＋卡铂组,每次卡铂注射前6h腹腔注射CpGODN（1826）。观察各组移植瘤生长速度和重量,HE染色法观察移植瘤组织病理变化,TUNEL法检测细胞凋亡。结果：成功建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型。各治疗组小鼠肿瘤体积都较对照组明显减小（P〈0.01）,其中CpG＋卡铂组移植瘤体积最小;卡铂组、CpG组、CpG＋卡铂组的抑瘤率分别为23.35%、21.47%、48.43%;HE染色法观察到各治疗组移植瘤的坏死均较对照组明显,其中CpG＋卡铂组最明显。TUNEL法检测对照组瘤组织细胞凋亡率为2.75%±0.89%,卡铂组为4.87%±1.13%,CpG组为7.63%±1.41%,CpG＋卡铂组为32.63%±4.66%,各治疗组瘤细胞凋亡率均明显高于对照组（P均〈0.01）,其中CpG＋卡铂组显著高于单独卡铂组和单独CpG组（P均〈0.01）。结论：CpGODN（1826）能明显提高Lewis肺癌移植瘤对卡铂治疗的化疗敏感性,促进肿瘤细胞凋亡。     

siRNA沉默ATM增强CpG ODN 7909对肺癌A549细胞的放射增敏作用

目的： 研究siRNA沉默毛细血管扩张—共济失调突变（atxia-telangiectasia mutated,ATM）基因的表达增强胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸寡脱氧核苷酸(cytosine-phophate-guanine oligodeoxynucleotide,CpG ODN) 7909对人非小细胞肺癌A549细胞的放射增敏作用。 方法: 将ATM-siRNA转染至A549细胞中,Western blotting检测A549细胞中ATM蛋白的表达。A549细胞随机分为6组：对照组、CpG组、X射线（IR）组、CpG+IR组、ATM-siRNA+CpG+IR组和NC-siRNA+CpG+IR组,克隆形成分析法检测各组细胞克隆形成率,Graphpad prism 5.0软件进行单击多靶模型和L-Q 线性模型拟合辐射后A549细胞的生存曲线,以D0、Dq、N、α/β及SF2等参数分析A549细胞辐射损伤修复能力,流式细胞术检测A549细胞的凋亡。 结果: ATM-siRNA转染可明显抑制A549细胞中ATM蛋白的表达（P<0.01）。X射线可剂量依赖性抑制A549细胞的克隆形成能力（P<0.05）;且CpG+IR组A549细胞的克隆形成能力进一步降低（P<0.01）;ATM-siRNA转染后,CpG处理的A549细胞克隆形成能力再度降低\[10 Gy时,（0.05±0.00）% vs （0.71±000）%,P<0.01\]。辐射损伤剂量生存曲线结果显示,ATM-siRNA转染后,ATM-siRNA+CpG+IR组较CpG+IR组A549细胞的α/β值明显增大（1.48 vs 0.97,P<0.05）,对放射损伤修复能力明显减弱。CpG+IR组较IR组细胞凋亡率显著升高\[（9.18±0.16）% vs （6.56±0.33）%,P<0.01\]; ATM-siRNA+CpG+IR组A549细胞凋亡率进一步升高\[（10.45±0.40）% vs （9.18±0.16）%,P<0.05\]。 结论： siRNA 沉默ATM 的表达可增强CpG ODN 7909对A549细胞的放射增敏作用,ATM可作为肺癌治疗的潜在靶点。     

CpG ODN107增强人鼻咽癌CNE 2细胞对β射线照射的敏感性

目的: 筛选能提高鼻咽癌CNE2细胞对β射线放射敏感性的CpG ODN序列，观察筛选获得的CpG ODN序列放射增敏的作用特点，为寻找新的鼻咽癌放疗增敏剂提供实验依据方法：应用MTT实验筛选21种CpG ODN序列中对人鼻咽癌CNE2细胞放射增敏作用最强的序列，以MTT实验、集落形成实验、划痕实验和流式细胞术检测该最强作用序列与β射线联合作用对CNE2细胞的增殖、集落形成、细胞迁移、细胞周期与凋亡的影响。结果：筛选实验显示CpG ODN107对 CNE2细胞具有最高的增敏比（1.59±0.06），CpG ODN107和β射线联合作用能以剂量依赖方式显著抑制CNE2细胞的增殖，抑制效应显著高于单纯照射（P<0.05, P<0.01）；联合作用显著抑制CNE2细胞集落形成和迁移能力，显著诱导细胞周期阻滞于G0/G1期，显著增加细胞凋亡（P<0.01），上述作用效应均明显强于单纯β射线照射（P<0.05或P<0.01）。结论： CpG ODN 107可显著增强人鼻咽癌CNE2细胞对β射线的照射敏感性，其放射增敏作用可能与诱导细胞周期阻滞和凋亡有关。     

红景天提取物对Lewis肺癌小鼠移植瘤中CD4+CD25+Treg的抑制作用

目的： 观察红景天提取物（sachalin rhodiola rhizome extract,SRR）对Lewis肺癌小鼠移植瘤中CD4+CD25+调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）的抑制作用,初步探讨其抑制肿瘤生长的机制。 方法： 建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,随机分为3组：SRR组,紫杉醇（paclitaxel,PTX）阳性对照组和PBS组,记录各组小鼠移植瘤体积变化,计算抑瘤率并观察小鼠生存期。流式细胞术检测移植瘤组织中CD4+CD25+Foxp3+Treg的比例,荧光定量PCR 检测移植瘤组织中 Foxp3 和TGF-β mRNA的表达水平。 结果： 在建模第20天,SRR组小鼠移植瘤体积明显小于PBS组\[（719.6±2.4） vs （1030.5±3.1）mm3,P<005\],但与阳性对照PTX组无显著差异（P>0.05）。SRR组小鼠生存期较PBS组显著延长\[（36.0±1.0） vs （22.0± 2.0）d,P<0.01\],而与PTX组无显著差异（P>0.05）。SRR治疗组小鼠移植瘤组织中CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞的比例显著低于PBS组\[（8.5±0.3）% vs （11.2±0.2）%,P<0.01\],但与PTX组无显著差异（P>0.05）。SRR组小鼠移植瘤组织中 Foxp3 mRNA \[（1.2±0.2) vs (2.1±0.2),P<0.05\]、TGF-β mRNA \[（1.2±0.1) vs (2.1±0.2),P<0.05\]表达均明显低于PBS组,而与PTX组无显著差异（P>0.05）。 结论： SRR可能通过下调肿瘤组织中CD4+CD25+Treg比例、 Foxp3 和TGF-β mRNA的表达,增强机体的抗肿瘤免疫应答。     

趋化因子SLC和免疫佐剂CpG-ODN联合应用对小鼠移植黑素瘤的疗效

目的：探讨次级淋巴组织趋化因子（seccondary lymphoid tissue chemokine, SLC）和CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG oligodeoxynucleotide, CpGODN）联合应用对小鼠移植黑素瘤的治疗效果及其可能机制。方法：制备SLCFc融合蛋白,体外检测SLCFc对小鼠淋巴细胞的趋化效应。建立小鼠黑素瘤移植模型,随机分生理盐水对照组、CpGODN组、SLCFc组以及SLCFc+CpGODN组共4组。观察治疗后各组小鼠肿瘤的生长情况,流式细胞术检测移植瘤组织中淋巴细胞的种类和浸润情况。结果：成功制备SLCFc蛋白,SLCFc对小鼠淋巴细胞具有剂量依赖性（0.03、0.3和3 μg/L）趋化作用。瘤内注射SLCFc和(或)CpGODN明显抑制肿瘤的生长,联合治疗组瘤体明显小于对照组（P<0.01）,并且小鼠存活时间也明显延长。联合治疗组瘤体内CD4+、CD8+T淋巴细胞和CD11c+树突状细胞较对照组显著增多（P<0.05,P<0.01）,并且其肿瘤引流淋巴结也明显增大。结论：SLC和CpGODN联合应用对小鼠移植黑素瘤有抑制作用,其机制与趋化CD4+T、CD8+T细胞和促进DCs增殖有关。     

^60Coγ射线诱发Lewis肺癌细胞Fas基因蛋白表达及其与细胞凋亡的关系

目的：研究^60Coγ射线对Lewis肺癌细胞Fas基因蛋白表达的影响及其诱发细胞凋亡的分子机制，方法：采用免疫电镜技术，对受照Lewis细胞的小鼠移植瘤组织进行Fas基因蛋白的超微结构定位观察。结果：受照Lewis肺癌细胞的小鼠移植瘤组织，癌细胞呈Fas基因蛋白阳性表达，阳性产物分布于细胞膜表面；而未受照射的对照组Lewis细胞的移植组织，癌细胞Fas蛋白全部阴性。结论：γ射线诱发Lewis肺癌细胞发生凋亡主要依赖于Fas蛋白表达的上调及Fas介导的凋亡信号传导途径的激活。     

四碘酸卟啉镁对小鼠Lewis肺癌的放射增敏效应

目的 探讨四磺酸卟啉镁的放射增敏效应。材料与方法 将菏Lewis肺癌的C57BL/6小鼠随机分为4组；对照组、单药组、单放组及用药加放射组，其中单药组和用药加放射组小鼠腹腔单次注射四磺酸卟啉镁13.75mg/kg体重，单放组和用药加放射组各分10、15、20Gy3个剂量小组进行单次放射，每组各8只鼠。结果 （1）当肿瘤体积极达原照射体积4倍时，测得四磺酸卟啉镁的增敏比为1.45-1.70，平均1.58,(2)各组小鼠生存时间无显著差异。结论 四磺酸卟淋镁对Lewis肺癌具有放射增敏效应。     

白细胞介素-18对Lewis肺癌小鼠移植瘤生长及移植瘤细胞凋亡的作用

 目的 探讨IL-18对Lewis肺癌小鼠移植瘤生长及移植瘤细胞凋亡的作用。 方法 复制Lewis肺癌小鼠模型16只,随机分为IL-18治疗组与荷瘤模型组,每组8只,分别予IL-18、生理盐水于接种第7日起每日1次腹腔注射,连续7次。观察IL-18对小鼠健康状况、移植瘤变化的影响,并用TUNEL方法检测其对移植瘤细胞凋亡的作用。 结果 IL-18对小鼠健康状况无明显影响, 对移植瘤的生长有抑制作用,肿瘤抑制率为75%,对移植瘤细胞的凋亡有促进作用。 结论 IL-18可通过促进肿瘤细胞凋亡等途径对Lewis肺癌产生抑制作用,有望成为肺癌治疗的新策略。     

甲基莲心碱增强环磷酰胺诱导小鼠Lewis肺癌细胞凋亡的作用

目的评价甲基莲心碱(Nef)对环磷酰胺(CTX)诱导小鼠Lewis肺癌细胞凋亡作用的影响。方法Lewis肺癌移植瘤小鼠40只,雄性,体重18～22g,随机分成CTX+Nef、CTX、Nef、NS4个组,每组10只。通过检测瘤重抑制率及瘤细胞凋亡率,观察Nef联合CTX对小鼠Lewis肺癌的疗效和诱导癌细胞凋亡的影响。结果CTX+Nef、CTX组的瘤重抑制率分别为80.08%、58.95%,明显高于Nef组(6.78%),P<0.01;而CTX+Nef组较CTX组也有增高(P<0.05);流式细胞术检测CTX+Nef、CTX组的癌细胞凋亡率分别为53.50%、25.92%,明显高于Nef、NS组(7.09%,5.63%),P<0.01;CTX+Nef组也高于CTX组(P<0.05);TUNEL法检测CTX+Nef、CTX组的癌细胞凋亡指数分别为(10.24%±11.08%),(5.36%±6.24%),较Nef、NS组明显增加(1.45%±1.98%,1.03%±1.65%),P<0.05;CTX+Nef组的凋亡指数较CTX组也有明显增加(P<0.05)。结论甲基莲心碱能增强环磷酰胺诱导的小鼠Lewis肺癌细胞凋亡作用,且两者具有协同效应。     

rmh-TNF协同顺铂抗小鼠Lewis肺癌血管生成的作用

目的: 观察重组改构人肿瘤坏死因子（recombinant mutant human tumor necrosis factor,rmhTNF）协同顺铂（cisplatin,又称DDP）抗小鼠Lewis肺癌血管生成的作用。方法: 建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,随机分为4个治疗组：生理盐水对照组、rmhTNF（150万U/kg）组、DDP（6.15 mg/kg）组、联合用药组（DDP+ rmhTNF）。接种肿瘤细胞后12 d开始瘤内注射药物3 d,RTPCR法测定瘤组织中HIF1α的表达,免疫组化法检测肿瘤组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、激酶结构域受体（kinase domain region receptor,KDR）、微血管密度（microvascular density receptor,MVD）的表达,流式细胞术测定基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase2, MMP2）的表达。〖HT5W〗结果: 〖HT5"SS〗对照组、rmhTNF组、DDP组和联合用药组小鼠肿瘤组织中的MVD数分别为（24.76±1.28）、（18.95±1.22）、（19.53±1.15）、（10.43±1.05）,两单药组的MVD数明显低于对照组（P<0.05）;联合用药组低于两单药组（P<0.05）。HIF－1α mRNA相对表达水平分别为（0.171±0.004）、（0.138±0.006）、（0.134±0.006）、（0.095±0.006）,两单药组较对照组明显下降（P<0.05）,联合用药组明显低于两单药组（P<0.05）。肿瘤组织中MMP2蛋白的荧光指数FI值依次为（1.000±0.000）、（0.875±0.020）、（0.848±0.127）、（0.545±0.107）,单药组的MMP2蛋白的(FI)值较对照组明显下降（P<0.05）,联合用药组明显低于两单药组（P<0.05）。单药组VEGF、KDR表达均明显低于对照组（P<0.05）,联合用药组的表达均低于各单药组（P<0.05）。结论: rmhTNF能够增强DDP抗小鼠Lewis肺癌血管生成的作用。     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

胰头癌手术切除可能性的术前评价

目的通过总结胰头癌病人的临床表现和影象学检查结果来评价手术切除的可能性。方法总结32例胰头癌病人的临床表现和CT、磁共振（MRI）检查结果,判断肿瘤是否已发生邻近浸润或远处转移,以此来评价其手术切除的可能性。结果在22例作CT检查的病例中,判断正确的为17例,准确率为77．3%。作MR检查9例,全部判断正确,准确率为100%。结论某些特殊的临床表现和CT、MR检查对判断肿瘤是否发生邻近浸润或转移有较大价值,为术前评价手术切除的可能性提供依据。     

胆囊癌29例分析

目的探索胆囊癌的防治方法。方法分析29例胆囊癌病人临床资料、治疗方法及结果。结果术前诊断明确者21例，剖腹探查发现已属晚期，9例为Ⅳ期行根治术，12例为Ⅴ期未行根治术，均于术后1年内死亡。术前怀疑胆囊癌者5例，剖腹探查冰冻切片证实为Ⅴ期及Ⅳ期者各1例，Ⅴ期未行根治术，Ⅳ期行根治术，均于术后1年内死亡；Ⅲ期者3例，行胆囊癌根治术分别于术后10月、13月、17月死亡。2例术中冰冻切片发现的Ⅱ期胆囊癌，行胆囊癌根治术，分别于术后23月、26月死亡。1例意外胆囊癌属Ⅰ期胆囊癌，术后5年半死亡。结论要减少胆囊癌危害，重在及时治疗胆囊结石。     

中晚期贲门癌148例的外科治疗

目的　总结贲门癌手术治疗影响生存率的因素 ,提供今后工作参考。方法　对 14 8例经手术治疗的贲门癌患者进行术后并发症、绝对生存率的X2 检验。结果　本组切除率为 94.5 9% ,近半胃切除占 72 .14 % ,1、3、5年生存率分别为 67.9%、45 %和 2 4.3 %。病期、外侵程度和淋巴结转移等因素对 5年生存率有显著影响 (P <0 .0 1)。术后并发症以吻合口瘘及肺癌并发症为多见 ,其发生率为 3 .6% ,手术死亡率 1.4%。结论　提高生存率的关键在于早期诊断 ,根治手术和术后积极综合治疗。