复方中药散血明目片对兔视网膜静脉阻塞ET-1表达的影响

目的:探讨活血通脉利水明目之复方中药散血明目片对兔视网膜静脉阻塞RVO模型ET-1表达的影响。方法:取健康有色家兔36只,每组9只,分为A组:健康空白组,B组:模型组,C组:血栓通组,D组:散血明目片组。采用波长532nm的Nd:YAG激光光凝法建立RVO模型,连续灌胃,实验后7,14,21d分别处死家兔取材,石蜡包埋切片,用免疫组化法检测视网膜组织中ET-1表达活性,计算机系统图像分析结果并进行统计分析。结果:D组7,14,21d与A,B,C3组比较:ET-1表达活性明显低于B组(P<0.05),与C组差异无显著性;21d时D组ET-1表达活性与A组差异无统计学意义。结论:活血通脉利水明目之复方中药散血明目片能够明显降低兔视网膜静脉阻塞RVO模型ET-1表达,抗血栓形成,改善RVO后视网膜局部微循环,减轻缺血缺氧对血管内皮细胞的损害。     

活血利水法对兔视网膜静脉阻塞后视网膜抗氧化能力影响的研究

目的:探讨活血利水之散血明目片对视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)后视网膜抗氧化能力的影响。方法:将40只家兔随机分为4组,每组10只兔10眼,采用光化学法建立RVO模型,4组分别给药,A组健康空白组,B,C,D组造模后分别以生理盐水、血塞通片混悬液、散血明目片混悬液灌胃。实验后7,21d处死家兔,取出视网膜检测视网膜中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。结果:成功建立了RVO模型30眼,D组SOD浓度明显高于B,C两组,且差异有显著性(P<0.01);D组MDA浓度明显低于B,C两组,有显著性差异(P<0.05)。结论:活血利水之散血明目片能有效的提高视网膜抗氧化的能力,减少并发症,保护视网膜。     

散血明目片对兔tPVR玻璃体中生长因子和细胞间粘附分子浓度的影响

目的探讨活血利水之散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变（traumatic proliferative vitmoretinopathy，tPVR）玻璃体中碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblasts growth factors，bFGF）、表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）和细胞间粘附分子-1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM—1）浓度的影响及防治PVR的作用机理。方法50只家免随机抽取40只，造成外伤性PVR模型．随机分成散血明目片组、桃红四物汤组、猪苓散组、模型组，另10只为空白组。连续灌胃1月后，检测玻璃体中bFGF、EGF和ICAM-1的含量，检眼镜眼底检查并取眼球壁标本作组织病理学观察。结果散血明目片组玻璃体中bFGF、EGF、ICAM—1含量低于模型组，2者有显著性差异（P〈0．01）．散血明目片组EGF含量与空白组比较差异无显著性（P〉0．05），bFGF含量高于空白组（P〈0．05），桃红四物汤组与猪苓散组bFGF、EGF、ICAM-1浓度均低于模型组，且均高于空白组，有显著性差异（P〈0．01），桃红四物汤组与猪苓散组bFGF、EGF、ICAM-1浓度高于散血明目片组，有显著差异（P〈0．01）。各治疗组ICAM-1含量高于空白组，有显著性差异（P〈0、01）。结论活血利水之散血明日片有可能通过降低玻璃体中bFGF、EGF和ICAM-1的浓度，抑制增殖细胞的过度增生从而防治PVR形成和发展。     

和血明目片联合氪激光治疗视网膜静脉阻塞的临床疗效

目的:观察和血明目片联合氪激光治疗视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)的疗效。方法:选择经眼底血管荧光造影(FFA)、光学相干断层扫描(OCT)确诊的57例60眼视网膜静脉阻塞患者,随机分为治疗组29例30眼采用和血明目片联合氪激光光凝治疗。对照组28例30眼采用单纯氪激光光凝治疗。观察两组治疗前后视力、眼底和FFA,全部病例随访6mo。结果:氪激光联合中成药和血明目片治疗视网膜静脉阻塞较对照组视力改善明显,出血吸收快(P<0.05)。结论:在视网膜静脉阻塞行氪激光光凝时联合中成药和血明目片治疗,能较好的促进视网膜出血的吸收,有效的改善患者视功能。     

兔视网膜静脉阻塞眼视网膜新生血管组织中 血管内皮生长因子mRNA的表达

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF )在视网膜新生血管组织的发生发展中的参与机制。方法 采用氩激光直接光凝法封闭兔眼视网膜静脉建立视网膜静脉阻塞(retinal vein occlusion,RVO)模型。利用组织原位杂交法观察缺血视网膜组织及新生血管组织中VEGF mRNA的表达。结果缺血视网膜及新生血管组 织中有不同程度的VEGF mRNA表达,表达的程度以视网膜新生血管组织中最强。 VEGFmRNA 的表达部位与视网膜组织缺血的分布具有一定的对应性。结论VEGF在视网膜血管增生性病变的发生中可能具有重要的参与机制。(中华眼底病杂志,2001,17:5-7)     

活血利水法对外伤性PVR兔眼玻璃体FNmRNA表达的影响

目的:探讨活血利水法对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)纤维连接蛋白信使核糖核酸(FNmRNA)的影响。方法:用兔眼后节穿通伤加注入血浆法制备PVR模型,利用免疫组化法对正常组、模型组、活血利水组、活血化瘀组、利水明目组PVR中的玻璃体腔增殖膜FNmRNA进行检测。结果:活血利水组增殖膜中FNmRNA的阳性表达低于模型组、活血化瘀组和利水明目组(P<0.05)。结论:活血利水法能够降低PVR增殖膜中FNmRNA的阳性表达,抑制PVR的发生发展。     

散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变兔眼血小板源性生长因子表达的影响

目的探讨散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy．PVR）增殖膜上血小板源性生长因子（platelet derived growth factor,PDGF）表达的影响以及防治PVR的作用机制。方法将40只成年青紫蓝兔兔眼造成外伤性PVR模型,随机分为空白组（A组）、模型组（B组）、利水明日组（C组）、活血化瘀组（D纽）、活血利水组（E组）,每组8眼。并利用改良免疫组织化学方法对PVR实验兔眼中增殖膜上PDGF的表达进行检测。结果给药后第7天．B、C、D、E组的PVR分级比较差异无统计学意义（P〉0．05）：给药后第28天．E组与其他各组比较,差异有统计学意义（P〈O．05）。各用药组玻璃体腔增生膜PDGF阳性细胞数明显少于B组,差异有统计学意义fP〈0．05）或非常显著的统计学意义（p〈0．01）;E组与C组、D组之间比较,差异有统计学意义fP〈0．051。结论散血明目片能通过抑制玻璃体腔中PDGF对视网膜色素上皮细胞的刺激作用．从而抑制增殖细胞的过度增生．防止PVR形成和发展。     

益气养阴活血利水法对兔视网膜脱离复位视网膜电图的影响

目的:观察益气养阴活血利水之中药复明片对兔视网膜脱离及复位后视网膜电图的影响。方法:采用视网膜下腔注射透明质酸钠造成视网膜脱离模型(10～14d后视网膜自动复位),并于造模后1wk(视网膜脱离未复位)及造模后3wk(视网膜复位早期)对正常组、模型组、西药组、益气养阴活血利水组行视网膜电图(ERG)检查。结果:益气养阴活血利水法能在视网膜脱离时及复位后提高ERGa,b波振幅,缩短其潜时,与模型组及西药组比较有极显著性差异。结论:益气养阴活血利水法(复明片)能保护视网膜脱离视功能,并促进视网膜复位后视功能恢复。     

活血利水法对兔外伤性PVR增殖膜上EGFmRNA表达的影响

目的:探讨活血利水之散血明目片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(traumatic proliferrative vitreoretinopathy,tPVR)增殖膜(epiretinal membrane,ERM)中EGFmRNA表达的影响及防治PVR的作用机制。方法:将40只成年有色家兔随机抽取32只,制作tPVR模型,随机分成模型组(B组)、活血利水组(C组)、活血化瘀(D组)、利水明目组(E组),另8只为空白组(A组)。连续灌胃30d后,观察眼底PVR分级情况,原位杂交法检测EGFmRNA在各组的表达,HE染色观察病理组织学改变。结果:给药7d后,B,D,E组PVR分级比较,差异无统计学意义(P>0.05),给药30d后,C组与各组比较,差异有统计学意义(P<0.05);在C组,ERM中EGFmRNA阳性程度低于B组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。D组与E组也能降低EGFmRNA表达的阳性程度,与B组相比有统计学差异(P<0.05)。C组中EGFmRNA阳性程度低于另两个治疗组,有统计学差异(P<0.05)。C组中EGFmRNA阳性程度略高于A组,有统计学差异(P<0.01)。结论:活血利水法是活血化瘀和利水明目两者作用的协同,能通过拮抗ERM中EGFmRNA表达的作用来抑制增殖细胞的过度增生,从而防治PVR形成和发展。     

和血明目片治疗视网膜静脉阻塞的临床观察

目的:探究和血明目片治疗视网膜静脉阻塞的疗效。方法:将92例93眼患者随机分为两组,治疗组50例51眼给予和血明目片治疗,对照组42例42眼给予血塞通片治疗。根据视力恢复情况、荧光血管造影、自觉症状有无改善进行观察。结果:治疗组治愈17眼,有效27眼,无效7眼,总有效率86%。对照组治愈8眼,有效17眼,无效17眼,总有效率60%。结论:和血明目片能促进视网膜出血渗出吸收,恢复视网膜功能,提高视网膜静脉阻塞患者的视功能。经比较,和血明目片在提高视力,改善眼底方面的疗效优于血塞通片(P<0.05)。     

Effect of a novel tyrosine kinase inhibitor nintedanib on bFGF and VEGF concentrations in a rabbit retinal vein occlusion model

AIM: To evaluate whether a novel tyrosine kinase inhibitor nintedanib could inhibit basic fibroblast growth factor (bFGF) and vascular endothelial growth factor (VEGF) simultaneously for retinal vascular disease in vivo. METHODS: After a laser induced rabbit retinal vein occlusion (RVO) model was made, 0.5 mg of nintedanib was injected intravitreally in the left eye on the third day while the right eye was as a control. Intracameral samples were taken on the day before laser treatment and days 1, 3, 7, 14, 21, and 28 after treatment. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was used to test the bFGF and VEGF-A concentrations in the aqueous humor. RESULTS: Both bFGF and VEGF-A rose significantly on the third day after laser treatment in both eyes. In the control eye the bFGF concentration peaked on the 14th day while the VEGF-A concentration dropped rapidly soon after the third day. After nintadanib injection in the study eye, both bFGF and VEGF-A showed a significant reduction on the 4th day (7th day after laser treatment) when compared to the control eye, and kept on low level in the following several weeks. CONCLUSION: Intravitreal injection of nintedanib can inhibit the expression of bFGF and VEGF in the process of RVO model to a certain extent, which is expected to become a new method for the treatment of retinal vascular diseases or fibrotic diseases.     

Alterations in protein tyrosine kinase pathways following retinal vein occlusion in the rat.

PURPOSE: To determine whether an experimental retinal vein occlusion in the rat activates protein tyrosine kinase pathways and increases angiogenic growth factors in the retina. METHODS: Retinal vein occlusion (RVO) was induced in the rat retina with argon laser photocoagulation. Retinas were collected at 2 days, 1, 2, and 4 weeks after RVO and divided into halves: one half represented an area within the distribution of the occluded vein [RVO(IN)] and the other half represented an area outside the distribution of the occluded vein [RVO(OUT)]. RVO(IN) and (OUT) were examined by western blot analysis of tyrosine-phosphorylated proteins, vascular endothelial growth factor (VEGF), basic fibroblast growth factor (bFGF), and 3 signal proteins in the tyrosine kinase pathways: phospholipase Cgamma (PLCgamma), phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K), and mitogen-activated protein kinase (MAPK). RESULTS: RVO caused a severe capillary nonperfusion in RVO(IN). Overall tyrosine-phosphorylated proteins were increased after RVO, especially in RVO(IN) at 2 days and 1 week. VEGF and bFGF were markedly increased in RVO(IN) at 2 days and 1 week. Tyrosine-phosphorylated PLCgamma, PI3K, and MAPK were also increased in RVO(IN) at these time points. CONCLUSIONS: RVO caused an increase in overall protein tyrosine phosphorylation in the rat retina. This increase was associated with an increase in angiogenic growth factors (VEGF and bFGF). These results suggest that protein tyrosine kinase pathways are activated during retinal ischemia and may play a role in mitogenesis of vascular endothelial cells and other responses in the retina after RVO.     

地塞米松对玻璃体积血兔视网膜病理变化的影响

目的:观察地塞米松(dexamethasone,Dxm)对兔玻璃体积血后视网膜病理变化的影响。方法:白兔24只,随机分为实验对照组(A),积血组(B)和Dxm干预组(C),每组8只。A组玻璃体内注入生理盐水0.2mL,B组、C组玻璃体内注入自体血0.2mL;注入后1,24,48h,A和B组给予生理盐水3mL/kg,C组给予Dxm3mg/kg。分别于造模后3,7,14,21d随机处死每组中的2兔4眼观察视网膜病理变化。结果:A组所有时间点,B组3,7d,C组3,7,14d视网膜形态正常。B组14d神经节细胞、内丛状层水样变性;21d视网膜内界膜不完整,内、外核层细胞和光感受器内、外节水样变性。C组21d神经节细胞染色变淡,内丛状层、内核层水样变性。结论:玻璃体积血可引起视网膜细胞水样变性,Dxm可缓解玻璃体积血后视网膜水样变性。     

蛴螬提取物对兔脉络膜新生血管VEGF和bFGF表达的影响

目的:评价蛴螬提取物对有色家兔脉络膜新生血管(cho-roidal neovascularization,CNV)血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的抑制作用。方法:有色家兔40只,实验组32只,空白对照组8只。实验组兔通过倍频Nd:YAG激光(波长为532nm)眼底光凝方式建立CNV模型。光凝后立即随机分为4组,每组8只(16眼),分别为实验对照组、维生素E治疗组、驻景丸加减方治疗组、蛴螬提取物治疗组。激光光凝后7,14,21,28d各组兔均行眼底照相观察、荧光素眼底血管造影(FFA)和光学相干断层扫描(OCT)检查。分别于光凝后14、28d两次处死,每次随机选取动物4只(8眼),检查完后空气注射处死动物摘取眼球后节行组织病理学检查,行VEGF和bFGF免疫组织化学分析,并行透射电镜观察,以评估蛴螬提取物对CNV的抑制效果。结果:光凝后14d,实验组CNV的生成率分别为47.9%、41.7%、43.3%和28.6%,经χ2检验,CNV生成率治疗组较对照组均降低(P<0.05),且蛴螬提取物组最低,与另外3组比较有统计学意义(P<0.05)。光凝后28d,光凝区纤维血管组织增生(FVP)厚度治疗组较对照组显著变薄(P<0.05)。且视网膜脉络膜巩膜切片新生血管定量分析及组织学切片,透射电镜观察结果显示实验治疗组CNV的生成与对照组相比均减少,差异有统计学意义(P<0.05);且蛴螬提取物治疗组表达低于其他组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:蛴螬提取物可以抑制实验性CNV中VEGF和bFGF的表达,从而可以抑制实验性CNV的形成。     

糖尿病大鼠视网膜早期病变组织中生长因子作用的实验研究

目的研究糖尿病大鼠视网膜早期病变组织中生长因子的作用机制.方法腹腔注射四氧嘧啶,制备糖尿病模型,成模后3个月活体取跟球,制备视网膜病理切片及视网膜单分散细胞悬液.应用ABC法和酶联免疫吸附法对视网膜组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)进行定性和定量分析.结果Wistar大鼠糖尿病视网膜组织中bFGF和VEGF含量分别为1 3.50±1.80ng/ml,14.25±0.70ng/ml,同对照组3.06±1.40ng/ml,4.50±0.85ng/ml比较有显著差异(P<0.01).实验组bFGF和VEGF在视网膜胞浆内呈阳性表达.病理切片观察,视网膜内层细胞及微血管出现阳性病理改变.结论bFGF和VEGF在糖尿病大鼠视网膜早期病变组织中起重要的介导作用,并反映了视网膜病变的严重程度.     

缺氧、bFGF和VEGF对牛视网膜血管内皮细胞和周细胞增殖的影响

目的　探讨缺氧和细胞生长因子对视网膜血管内皮细胞和周细胞增殖的影响。方法　 ( 1)采用细胞克隆、机械除杂法培养视网膜血管内皮细胞和周细胞。 ( 2 )四唑盐比色试验 (MTT)和细胞计数法描绘正常和缺氧状态下牛视网膜血管内皮细胞和周细胞的增殖生长曲线。 ( 3 )加入碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)后用MTT法观察它们对内皮细胞增殖的影响。结果　 ( 1)缺氧组牛视网膜血管内皮细胞在第 4、5d数目较正常组显著增加 (P <0 0 5 ) ,周细胞则在 4～ 7d数目明显增多。 ( 2 )加入VEGF可使四甲基偶氮唑盐 [3 ( 4 ,5 dimethylthia zolzyl) 2 ,5 diphenyltetrazo diumbromide ,MTT]值达到 2 1786,加入bFGF可使MTT值达到 2 9897,加入VEGF和bFGF使MTT值达到 2 943 1,而对照组仅为 1 0 13。结论　 ( 1)缺氧环境能刺激培养的牛视网膜血管内皮细胞和周细胞的增殖。( 2 )VEGF和bFGF能促进视网膜血管内皮细胞增殖 ,且bFGF促增殖的能力更强 ,但两者相加并不能增加促增殖作用。     

增生性玻璃体视网膜疾病眼内液血管内皮生长因子的表达

目的 观察增生性玻璃体视网膜疾病患者眼内液（房水、玻璃体）中血管内皮生长因子（VEGF）含量的变化规律，探讨VEGF在增生性玻璃体视网膜疾病发展变化中的作用。 方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测增生性玻璃体视网膜病变（PVR）、视网膜静脉阻塞（RVO）、增生性糖尿病视网膜病变（PDR）、新生血管性青光眼（NVG）患者组及正常对照组房水、玻璃体VEGF含量。 结果 PVR、RVO、PDR、NVG患者组房水及玻璃体VEGF含量均高于正常对照组，其差异均有统计学意义(P<0.05)；NVG、PDR、RVO、PVR患者组房水及玻璃体VEGF含量依次降低 ，其差异有统计学意义(P<0.05)；PVR、RVO、PDR、NVG患者组和正常对照组玻璃体VEGF含量均高于房水VEGF含量，其差异有统计学意义(P<0.05)；PVR患者病史与房水、玻璃体VEGF含量呈负相关（r分别为－0.819、－0.823，P＜0.05）；RVO患者病史与房水、玻璃体VEGF含量呈正相关（r分别为0.913、0.929，P＜0.05）；PDR患者玻璃体积血时间与房水、玻璃体VEGF含量呈正相关（r分别为0.905、0.920，P＜0.05）。 结论 增生性玻璃体视网膜疾病患者房水及玻璃体VEGF含量明显增高，VEGF可能在增生性玻璃体视网膜疾病发展变化中起着重要的作用。 (中华眼底病杂志， 2006， 22：313-316）     

视网膜缺血再灌注损伤中WTp53蛋白、CyclinD1表达的研究及bFGF对其的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)中的治疗作用及机制。方法将28只Wistar大鼠随机分为正常组、缺血组和bFGF治疗组,其中后两组又按再灌注时间不同分为再灌注后1、6、12、24、48和72h6个时间段。通过前房穿刺加压法制作成RIRI动物模型,并在以bFGF(治疗组)或平衡盐溶液(缺血组)玻璃体腔注射后按不同时段处死动物,通过免疫组织化学链酶卵白素-生物素复合体(SABC)法检测各时段视网膜组织中野生型p53蛋白(WTp53)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达变化。结果缺血组视网膜在再灌注后6h可发现有WTp53蛋白及CyclinD1的表达,24h达到高峰,48h仍持续强表达,72h表达已明显下降;bFGF治疗组各观察指标变化规律基本与缺血组相似,但表达量相对明显减弱,两组比较,在再灌注6-48h时段差别P值均<0.05,具有统计学意义。结论bFGF可抑制RIRI时WTp53蛋白和CyclinD1在视网膜表达的增高。     

玻璃体腔注射康柏西普联合PPV治疗增殖型糖尿病视网膜病变

目的：研究玻璃体切割术联合玻璃体腔注射康柏西普治疗增殖型糖尿病视网膜病变(PDR)的价值。

方法：前瞻性研究。选取2016-01/2019-10我院收治的PDR患者64例75眼,按照随机数字表法分为观察组32例38眼采用玻璃体切割术联合玻璃体腔注射康柏西普治疗与对照组32例37眼采用单纯玻璃体切割术治疗。比较两组患者手术前后最佳矫正视力(BCVA)、黄斑中心凹厚度(CMT); 手术前后均采集患者房水标本,酶联免疫吸附法测定血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子(PIGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)浓度; 记录两组患者手术时间、术中出血量及各症状(视网膜水肿、眼底出血、渗出)改善时间及并发症。

结果：术后1wk,1、3mo观察组患者BCVA优于对照组(P<0.05),术后3mo观察组患者CMT低于对照组(P<0.001); 观察组患者房水中VEGF、PIGF、bFGF浓度低于对照组(P<0.001); 观察组手术时间、视网膜水肿、眼底出血、渗出吸收时间短于对照组,术中出血量少于对照组(P<0.05),并发症发生率低于对照组(P<0.05)。

结论：玻璃体切割术前采用玻璃体腔注射康柏西普可消退新生血管,缩短手术时间,有助于改善患者视力,减轻黄斑水肿,减少手术并发症,促进术后恢复。