龙胆泻肝汤对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎的治疗作用

目的　探讨龙胆泻肝汤对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏ-ｉｍｍｕｎｅｕｖｅｉｔｉｓ,ＥＡＵ）的治疗作用。方法　Ｌｅｗｉｓ大鼠随机分为对照组６只、ＥＡＵ组１８只和ＬＸＴ组１８只,光感受器间维生素Ａ结合蛋白免疫ＥＡＵ组和ＬＸＴ组大鼠。观察大鼠生理特征及眼部炎症变化,出现葡萄膜炎症时给予ＬＸＴ组大鼠龙胆泻肝汤灌胃;免疫后１２ｄ比较各组大鼠眼组织病理学差异;免疫后每隔４ｄ检测房水蛋白及血清中白蛋白、球蛋白变化。结果　成功制备了ＥＡＵ大鼠模型;免疫后５ｄ大鼠开始出现葡萄膜炎症状,１２ｄ炎症最重。ＥＡＵ大鼠肛温在１ｄ、７ｄ、１０ｄ和１２ｄ高于对照组（Ｐ＝０．０２０、０．０００、０.０１５、０．００１）;免疫后１２ｄ,ＥＡＵ组房水蛋白浓度为（３６．０３±３．２３）ｇ?Ｌ－１,ＬＸＴ组为（２４．６７±２．６０）ｇ?Ｌ－１,差异有显著统计学意义（Ｐ＝０．０００）;组织病理学显示ＥＡＵ组视网膜结构破坏程度明显高于ＬＸＴ组（Ｐ＝０．０００）。ＥＡＵ组免疫后４ｄ、８ｄ及１２ｄ白蛋白均低于对照组（Ｐ＝０．０４５、０．０００、０.０３３）,ＬＸＴ组４ｄ和８ｄ白蛋白低于正常（Ｐ＝０.０４５、０．００５）,但１２ｄ时恢复至正常;１２ｄ时ＥＡＵ组球蛋白明显高于正常（Ｐ＝０．０４７）,ＬＸＴ组未见明显异常。结论　龙胆泻肝汤能有效减轻ＥＡＵ大鼠前房炎症,减少炎症细胞浸润,保护眼部组织结构,增强机体抗氧化能力,调节免疫状态,对ＥＡＵ发挥治疗作用。     

二氢睾酮对小鼠角膜上皮细胞Mucins表达的影响

目的　探讨不同浓度二氢睾酮（ＤＨＴ）对角膜上皮黏蛋白Ｍｕｃｉｎｓ表达的影响。方法　体外原代培养ＢＡＬＢ／ｃ小鼠角膜上皮细胞,分为空白对照组以及ＤＨＴ干预组,ＤＨＴ干预组给予不同浓度（０．０５ｇ?Ｌ－１、０．１０ｇ?Ｌ－１、０．２０ｇ?Ｌ－１、０．５０ｇ?Ｌ－１、１．００ｇ?Ｌ－１）ＤＨＴ干预２４ｈ;采用ＲＴ-ＰＣＲ方法与免疫荧光组织化学方法分别检测Ｍｕｃ１、Ｍｕｃ４ｍＲＮＡ以及蛋白水平的表达。结果　Ｍｕｃ１、Ｍｕｃ４ｍＲＮＡ检测结果显示:空白对照组,０．０５ｇ?Ｌ－１、０．１０ｇ?Ｌ－１、０．２０ｇ?Ｌ－１、０．５０ｇ?Ｌ－１ ＤＨＴ干预组Ｍｕｃ１ｍＲＮＡ相对表达量分别为１．００±０．００、０．１５±０．０１、１．４０±０．０９、０．０７±０．１１、０．０６±０．０２;Ｍｕｃ４ｍＲＮＡ相对表达量分别为１．００±０．００、０．３０±０．２８、１．３６±０．０５、０．４３±０．０１、０．４５±０．０１,０．１０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组Ｍｕｃ１、Ｍｕｃ４ｍＲＮＡ表达水平较空白对照组明显增加,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;０．０５ｇ?Ｌ－１、０．２０ｇ?Ｌ－１、０．５０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组表达均下降,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。免疫荧光化学检测结果示,以上各组Ｍｕｃ１ＯＤ值分别为１．８６±０．０１、１．８２±０．０１、２．０３±０．０４、１．８８±０．０１、１．８１±０．０２,０．１０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组Ｍｕｃ１表达较空白对照组明显增加,０．０５ｇ?Ｌ－１、０．５０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组表达均下调,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;Ｍｕｃ４ＯＤ值分别为１．８６±０．００、１．７７±０．０１、１．８４±０．０２、１．９２±０．００、１．６９±０．０５,０．１０ｇ?Ｌ－１与０．２０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组Ｍｕｃ４表达较空白对照组明显增加,０．０５ｇ?Ｌ－１、０．２０ｇ?Ｌ－１、０．５０ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ干预组表达均下调,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。０．５０ｇ?Ｌ－１与１．００ｇ?Ｌ－１ＤＨＴ可影响细胞体外生长。结论　一定浓度ＤＨＴ（如０．１０ｇ?Ｌ－１）可上调小鼠角膜上皮细胞Ｍｕｃ１与Ｍｕｃ４的表达水平;而高浓度（０．５０ｇ?Ｌ－１与１．００ｇ?Ｌ－１）ＤＨＴ对角膜上皮细胞存在毒性作用。     

氯替泼诺联合环孢素滴眼液治疗干燥综合征型干眼的疗效观察

目的　观察局部使用５ｇ?Ｌ－１氯替泼诺滴眼液联合１０ｇ?Ｌ－１环孢素滴眼液治疗中重度干眼的安全性与疗效。方法　２０１３年１月至２０１４年１月,于我院门诊收集中重度干眼患者３２例（６４）眼,１ｇ?Ｌ－１玻璃酸钠滴眼液每天４～８次作为基础用药,随机分为两组:试验组１７例（３４眼）,予以５ｇ?Ｌ－１氯替泼诺滴眼液滴眼,２周后改为５ｇ?Ｌ－１氯替泼诺滴眼液联合１０ｇ?Ｌ－１环孢素滴眼液滴眼;对照组１５例（３０眼）,予以５ｇ?Ｌ－１氯替泼诺滴眼液滴眼。在治疗前及治疗后２、４、６、８周进行干眼症状问卷调查,行裂隙灯、泪膜破裂时间（ｂｒｅａｋ-ｕｐｔｉｍｅ,ＢＵＴ）、角膜荧光素染色（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｓｔａｉｎｉｎｇ,ＦＬ）、ＳｃｈｉｒｍｅｒＩ试验（ＳｃｈｉｒｍｅｒＩｔｅｓｔ,ＳＩＴ）及非接触式眼压检查（ｎｏｎ-ｃｏｎｔａｃｔｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒｐｒｅｓｓｕｒｅｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ,ＮＣＴ）等。并对数据进行统计学分析。结果　两组患者治疗后２周、４周、６周、８周主观症状评分及ＦＬ评分均较治疗前明显降低,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜００５）。治疗后４周、６周,对照组主观症状评分明显低于试验组,差异均有统计学意义（Ｐ＝０．０００、０．０２１）,但治疗后８周,两组间差异无统计学意义（Ｐ＝０．６１１）。治疗后６周对照组ＢＵＴ较治疗前延长（Ｐ＜０．０５）,治疗后８周两组ＢＵＴ均较治疗前延长（Ｐ＜０．０５）,各时间点两组间ＢＵＴ差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。两组各时间点的ＳＩＴ和ＮＣＴ值较治疗前均无明显变化（均为Ｐ＞０．０５）,各时间点组间差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。结论　对于中重度干燥综合征型干眼等慢性干眼患者采用局部５ｇ?Ｌ－１氯替泼诺滴眼液预处理有助于减轻１０ｇ?Ｌ－１环孢素滴眼液所产生的刺痛,安全有效,又可避免长期应用其他类激素可能产生的不良反应。     

普拉洛芬滴眼液不同用药时间对干眼症疗效的影响

目的　探讨普拉洛芬滴眼液不同用药时间对干眼症疗效的影响。方法　选取我院眼科门诊诊断为双眼干眼症的患者１１７例,按照随机数字表法将患者分成普拉洛芬１４ｄ组（３９例）、普拉洛芬３０ｄ组（４０例）和对照组（３８例）。普拉洛芬１４ｄ组给予１ｇ·Ｌ－１普拉洛芬滴眼液（１４ｄ）联合１ｇ·Ｌ－１玻璃酸钠滴眼液（３０ｄ）;普拉洛芬３０ｄ组给予１ｇ·Ｌ－１普拉洛芬滴眼液（３０ｄ）联合１ｇ·Ｌ－１玻璃酸钠滴眼液（３０ｄ）,对照组仅给予１ｇ·Ｌ－１玻璃酸钠滴眼液（３０ｄ）。给药方法均为局部滴双眼,每次１滴,每天４次。分别于治疗前后检测３组患者的泪液分泌试验Ｉ（ＳｃｈｉｒｍｅｒＩｔｅｓｔ,ＳＩｔ）、泪膜破裂时间（ｔｅａｒｂｒｅａｋ-ｕｐｔｉｍｅ,ＢＵＴ）和角膜荧光素染色（ｃｏｒｎｅａｌｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｓｔａｉｎｉｎｇ,ＦＬ）评分。结果　治疗前３组患者人口基线特征比较差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。治疗后普拉洛芬１４ｄ组ＳＩｔ（７．１１±１．３６）ｍｍ和ＢＵＴ（８．４２±０．７９）ｓ均高于对照组ＳＩｔ（５．１９±０．８５）ｍｍ和ＢＵＴ（５．９２±１．２４）ｓ;ＦＬ评分（０．７３±０．７２）显著低于对照组（１．８８±０．７１）,差异均有统计学意义（ｔＳＩｔ＝８．０００,Ｐ＜０．００１;ｔＢＵＴ ＝１０．８７０,Ｐ＜０．００１;ｔＦＬ＝－７．６６７,Ｐ＜０．００１）;治疗后普拉洛芬３０ｄ组ＳＩｔ（７．３８±１．０１）ｍｍ和ＢＵＴ（８．１２±１．００）ｓ均高于对照组,ＦＬ评分（０．８８±０．６８）显著低于对照组,差异均有统计学意义（ｔＳＩｔ＝９．１２５,Ｐ＜０．００１;ｔＢＵＴ＝９．５６５,Ｐ＜０．００１;ｔＦＬ ＝－６．６６７,Ｐ＜０．００１）;但治疗后普拉洛芬１４ｄ组与普拉洛芬３０ｄ组的ＳＩｔ、ＢＵＴ和ＦＬ评分差异均无统计学意义（ｔＳＩｔ＝－１．１２５,０．４＞Ｐ＞０．２;ｔＢＵＴ＝１．３０４,０．２＞Ｐ＞０．１;ｔＦＬ＝－１．０００,０．４＞Ｐ＞０．２）。结论　短期应用１ｇ·Ｌ－１普拉洛芬滴眼液治疗干眼症即可达到较好的疗效,它是辅助治疗干眼症的有效药物。     

Avastin对翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响

目的　评价Ａｖａｓｔｉｎ（贝伐单抗）在体外对翼状胬肉成纤维细胞的增殖抑制作用以及细胞毒性。方法　通过不同浓度Ａｖａｓｔｉｎ（０．２５ｇ?Ｌ－１、０．５０ｇ?Ｌ－１、１．００ｇ?Ｌ－１、１．５０ｇ?Ｌ－１、２．５０ｇ?Ｌ－１）处理人翼状胬肉成纤维细胞１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ,观察成纤维细胞的增殖抑制、药物细胞毒性以及凋亡蛋白的表达。ＷＳＴ-１试剂检测细胞增殖,ＬＤＨ试剂盒检测细胞毒性,Ｗｅｓｔ-ｅｒｎｂｌｏｔ方法检测增殖蛋白以及凋亡蛋白的表达。结果　４８ｈ及７２ｈＡｖａｓｔｉｎ组与正常组相比光密度（ＯＤ）值差异有统计学意义（Ｐ＝０．０３４、Ｐ＝０．０１６）。与１２ｈ相比,０．２５ｇ?Ｌ－１Ａｖａｓｔｉｎ组及０．５０ｇ?Ｌ－１Ａｖａｓｔｉｎ组作用２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ后细胞增殖抑制率均无明显提高（均为Ｐ＞０．０５）,１．５０ｇ?Ｌ－１Ａｖａｓｔｉｎ组及２．５０ｇ?Ｌ－１Ａｖａｓｔｉｎ组作用４８ｈ、７２ｈ后细胞增殖抑制率均明显提高（均为Ｐ＜０．０５）。与０．２５ｇ?Ｌ－１Ａｖａｓｔｉｎ组相比,０．５０ｇ?Ｌ－１Ａｖａｓｔｉｎ组在各个时间点（除１２ｈ外）细胞增殖抑制率均无明显提高（均为Ｐ＞０．０５）,１．５０ｇ?Ｌ－１Ａｖａｓｔｉｎ组、２．５０ｇ?Ｌ－１Ａｖａｓｔｉｎ组在各个时间点抑制率均明显提高（均为Ｐ＜０．０５）。Ａｖａｓｔｉｎ各浓度组与ＬＤＨ最大释放组（加入裂解酶）对翼状胬肉成纤维细胞ＬＤＨ释放率差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）,各浓度组之间差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。Ａｖａｓｔｉｎ可抑制ｐ-ＣｙｃｌｉｎＤ１表达,促进Ｃａｓｐａｓｅ３的表达,与细胞对照组相比差异均具有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　Ａｖａｓｔｉｎ可以通过抑制ｐ-ＣｙｃｌｉｎＤ１以及促进Ｃａｓｐａｓｅ３的表达抑制翼状胬肉成纤维细胞的增殖,但无细胞毒性,进一步证实了该药物的安全有效性。     

转化生长因子-β2（TGF-β2）诱导人视网膜色素上皮层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达及意义

目的　探究转化生长因子-β２（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ-β２,ＴＧＦ-β２）诱导人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ,ＲＰＥ）层细胞上皮-间质转分化中ｍｉＲＮＡ-２９ｂ的表达变化及意义。方法　使用不同浓度ＴＧＦ-β２刺激ＲＰＥ细胞上皮-间质转分化后,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ、ＲＴ-ＰＣＲ检测成纤维化相关分子纤维连接蛋白（ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｏｎ,ＦＮ）、神经钙粘连蛋白（ｎｅｒｖｅｃａｌｃｉｕｍａｄｈｅｓｉｏｎｐｒｏ-ｔｅｉｎ,Ｎ-Ｃａｄｈｅｒｉｎ）的表达。采用ＲＴ-ＰＣＲ检测不同浓度ＴＧＦ-β２及不同时间ＴＧＦ-β２（５μｇ·Ｌ－１）刺激ＲＰＥ细胞后ｍｉＲＮＡ-２９ｂ的表达。结果　ＴＧＦ-β２刺激后的ＲＰＥ细胞形态呈纤维化改变。在一定浓度范围内（１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１、１０μｇ·Ｌ－１）,随着ＴＧＦ-β２浓度的增加ＦＮ、Ｎ-Ｃａｄｈｅｒｉｎ及相应ｍＲＮＡ随之增加,１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１、１０μｇ·Ｌ－１组与对照组（０μｇ·Ｌ－１）相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。ＴＧＦ-β２在一定浓度范围内（０μｇ·Ｌ－１、１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１）以剂量依赖的方式诱导ＲＰＥ细胞ｍｉＲＮＡ-２９ｂ表达的降低,１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１、１０μｇ·Ｌ－１组与对照组（０μｇ·Ｌ－１）相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）,在ＴＧＦ-β２浓度为５μｇ·Ｌ－１时ｍｉＲＮＡ-２９ｂ表达量最低。ＴＧＦ-β２在一定时间范围内（０ｈ、３ｈ、６ｈ、１２ｈ）以时间依赖的方式诱导ＲＰＥ细胞ｍｉＲＮＡ-２９ｂ表达的降低,３ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ组与０ｈ相比差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　一定范围内ＴＧＦ-β２以剂量和时间依赖的方式诱导ＲＰＥ细胞ｍｉＲＮＡ-２９ｂ的表达,为进一步研究ｍｉＲＮＡ-２９ｂ与ＴＧＦ-β２在ＲＰＥ细胞上皮-间质转分化过程中的相互作用提供理论基础。     

过氧亚硝酸根联合碱性成纤维细胞生长因子对人晶状体上皮细胞细胞外信号调节激酶（ERK）磷酸化水平的影响

目的　探讨过氧亚硝酸根（ｐｅｒｏｘｙｎｉｔｒｉｔｅ,ＯＮＯＯ－）和重组人碱性成纤维细胞生长因子（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）共同作用对人晶状体上皮细胞细胞外信号调节激酶（ＥＲＫ）磷酸化水平的影响。初步探讨ＯＮＯＯ－导致白内障发生的可能机制。方法　将培养的ＨＬＥＣ细胞分为４组,对照组（未经ＯＮＯＯ－和ｂＦＧＦ处理）、ｂＦＧＦ单独处理组、ｂＦＧＦ＋ＯＮＯＯ－处理组［ｂＦＧＦ预处理１ｈ后加入不同浓度ＯＮＯＯ－（５０μｍｏｌ·Ｌ－１、１００μｍｏｌ·Ｌ－１、２００μｍｏｌ·Ｌ－１）处理１ｈ］和ＯＮＯＯ－ ＋ｂＦＧＦ处理组［不同浓度ＯＮＯＯ－（５０μｍｏｌ·Ｌ－１、１００μｍｏｌ·Ｌ－１、２００μｍｏｌ·Ｌ－１）预处理１ｈ后加入ｂＦＧＦ处理１ｈ］。检测各组细胞内ＥＲＫ磷酸化水平的变化。结果　ｂＦＧＦ单独处理组和ｂＦＧＦ ＋ＯＮＯＯ－（５０μｍｏｌ·Ｌ－１、１００μｍｏｌ·Ｌ－１、２００μｍｏｌ·Ｌ－１）处理组中磷酸化ＥＲＫ相对表达值分别为５．１７±０．３５、４．４２±０．１２、３．９１±０．１５和０．４９±０．０８,与对照组（１．００±０．０５）相比差异有统计学意义（Ｆ＝４０２．８３,Ｐ＜０．００１）,结果显示ＯＮＯＯ－可以抑制由ｂＦＧＦ诱导的ＥＲＫ磷酸化水平的增加（Ｆ＝３１０．３４,Ｐ＜０．０５）。ＯＮＯＯ－（５０μｍｏｌ·Ｌ－１、１００μｍｏｌ·Ｌ－１、２００μｍｏｌ·Ｌ－１）＋ｂＦＧＦ处理组中磷酸化ＥＲＫ相对表达值分别为３．３６±０．０４、３．３２±０．０６和２．９２±０．０８,与对照组（１．００±０．０２）相比,所有处理组的ＥＲＫ磷酸化水平均显著增加（Ｆ＝５１８．９４,Ｐ＜０．００１）;５０μｍｏｌ·Ｌ－１和１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理细胞后经ｂＦＧＦ处理,ＥＲＫ磷酸化水平较ｂＦＧＦ单独处理组（３．０４±０．０５）显著增加（Ｆ＝３５．５３,Ｐ＜０．０５）,而２００μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＮＯＯ－处理组与ｂＦＧＦ单独处理组相比差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论　ＯＮＯＯ－诱导的白内障的发生可能与ＥＲＫ磷酸化的紊乱有关。     

UL48基因反义寡聚核苷酸对实验性单疱病毒角膜炎的治疗作用

为了观察硫修饰和未修饰的反义寡聚核苷酸对小鼠实验性单疱病毒角膜炎的治疗作用，将ＴＣＤ５０为１０－６．５的ＨＳＶ－１病毒稀释１０倍，种植于小鼠角膜上，用０．１％硫代反义寡聚核苷酸、０．１％反义寡聚核苷酸和０．１％无环鸟苷进行治疗，以生理盐水为对照，观察角膜上皮和实质病变。小鼠角膜上皮病变：硫代反义寡聚核苷酸组在第３、４、５天，反义寡聚核苷酸组在第４、５天，无环鸟苷组在第３、４、５、６天显著轻于对照组。角膜实质病变：硫代反义寡聚核苷酸组在第５天，无环鸟苷组在第３、４、５天显著轻于对照组。硫代反义寡聚核苷酸对小鼠实验性单疱病毒性角膜炎有一定的治疗作用     

人眼玻璃体内CXC配体16与2型糖尿病视网膜病变的关系

目的　探讨人眼玻璃体内ＣＸＣ配体１６（ＣＸＣｌｉｇａｎｄ１６,ＣＸＣＬ１６）与２型糖尿病视网膜病变（ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＤＲ）的关系。方法　选取２０１３年１月至２０１４年２月在安阳市眼科医院行玻璃体切割术的患者６０例６０眼为研究对象,根据疾病情况分为３组,对照组为无糖尿病的特发性黄斑前膜患者,ＮＤＲ组为合并２型糖尿病但无ＤＲ的特发性黄斑前膜患者,ＤＲ组为２型糖尿病合并ＤＲ及玻璃体积血或牵拉性视网膜脱离患者,每组各２０例２０眼。所有患者均于玻璃体切割术中收集中央及周边皮质玻璃体,经酶联免疫吸附检测试剂盒定量测定各组不同部位玻璃体内ＣＸＣＬ１６的含量并进行对比。结果　对照组、ＮＤＲ组、ＤＲ组患者中央玻璃体内ＣＸＣＬ１６浓度分别为（２．５０±０．２３）μｇ?Ｌ－１、（４．１７±０.２６）μｇ?Ｌ－１和（４.２２±０．３５）μｇ?Ｌ－１,周边皮质玻璃体内的ＣＸＣＬ１６浓度分别为（４．４３±０．２１）μｇ?Ｌ－１、（６．３５±０．２４）μｇ?Ｌ－１和（６．７３±０．３４）μｇ?Ｌ－１,３组中央与周边皮质玻璃体中的ＣＸＣＬ１６浓度比较差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。ＮＤＲ组、ＤＲ组中央及周边皮质玻璃体内ＣＸＣＬ１６的浓度均高于对照组（均为Ｐ＜０．０５）,ＮＤＲ组周边皮质玻璃体ＣＸＣＬ１６浓度低于ＤＲ组（Ｐ＜０．０５）。结论　ＣＸＣＬ１６可能与ＤＲ的发生有关,并有可能参与了ＤＲ的进展。     

miRNA-184在TGF-β2诱导人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化中的表达

目的　研究ｍｉＲＮＡ-１８４（ｍｉＲ-１８４）在转化生长因子β２（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ２,ＴＧＦ-β２）诱导人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化过程中的表达及意义。方法　应用不同浓度（０μｇ·Ｌ－１、１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１、１０μｇ·Ｌ－１、１５μｇ·Ｌ－１）ＴＧＦ-β２ 诱导人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化,细胞免疫荧光和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法观察转分化相关分子波形蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ）、钙黏附蛋白Ｅ（Ｅ-Ｃａｄｈｅｒｉｎ）的表达;应用ｑＲＴ-ＰＣＲ检测ｍｉＲ-１８４在不同浓度（０μｇ·Ｌ－１、１μｇ·Ｌ－１、５μｇ·Ｌ－１、１０μｇ·Ｌ－１、１５μｇ·Ｌ－１）ＴＧＦ-β２、不同作用时间（０ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ）ＴＧＦ-β２（１０μｇ·Ｌ－１）诱导人晶状体上皮细胞转分化中的表达变化。结果　随着ＴＧＦ-β２浓度的增加,细胞胞浆中Ｖｉｍｅｎｔｉｎ荧光强度增强;Ｅ-Ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白表达逐渐减少,各组细胞间Ｅ-Ｃａｄｈｅｒｉｎ表达量差异有统计学意义（Ｆ＝８７．６１７,Ｐ＜０．０１）;Ｖｉｍｅｎｔｉｎ蛋白表达逐渐增加,各组细胞间Ｖｉｍｅｎｔｉｎ表达量差异有统计学意义（Ｆ＝６８．９２３,Ｐ＜０．０１）。随着ＴＧＦ-β２浓度的增加,细胞中ｍｉＲ-１８４相对表达量增多,在１０μｇ·Ｌ－１ＴＧＦ-β２诱导组达到峰值;随着ＴＧＦ-β２诱导时间的延长,细胞中ｍｉＲ-１８４相对表达量增加,在２４ｈ表达达到峰值。结论　ＴＧＦ-β２诱导人晶状体上皮细胞发生上皮-间质转分化时细胞内ｍｉＲ-１８４表达增加,并与诱导浓度和时间有关,为进一步研究ｍｉＲ-１８４在人晶状体上皮细胞上皮-间质转分化中的作用及机制提供实验基础。     

SnoN蛋白及TGF-β在早期糖尿病大鼠视网膜组织中表达及意义

目的　观察ＳｎｏＮ蛋白及ＴＧＦ-β在糖尿病大鼠视网膜上的表达,探讨ＳｎｏＮ蛋白及ＴＧＦ-β与糖尿病视网膜病变（ｄｉａ-ｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＤＲ）的关系,为ＤＲ发病机制的研究提供新的理论依据。方法　选择健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠２０只,随机分为正常对照组与糖尿病（ＤＭ）组,每组各１０只。采用一次性腹腔注射５０ｍｇ?ｋｇ－１链脲佐菌素（ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ,ＳＴＺ）的方法建立ＤＭ大鼠模型,正常对照组一次性给予等体积柠檬酸三钠-柠檬酸缓冲液腹腔注射。分别于造模后８周和１２周处死各组大鼠,均完整摘除各组大鼠的左眼球制成眼杯,采用免疫组织化学方法检测各组大鼠视网膜上ＳｎｏＮ蛋白及ＴＧＦ-β蛋白的表达。结果　造模后８周和１２周,ＤＭ组大鼠血糖值分别为（２２．６４±３．５７）ｍｍｏｌ?Ｌ－１、（２４．０８±１．６０）ｍｍｏｌ?Ｌ－１,均明显高于正常对照组的（４．６４±０．９１）ｍｍｏｌ?Ｌ－１、（４．５０±０．６６）ｍｍｏｌ?Ｌ－１,差异均有显著统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）。正常对照组大鼠视网膜上ＴＧＦ-β无表达或弱表达,在造模后８周和１２周时,ＤＭ组大鼠视网膜上ＴＧＦ-β的ＯＤ值分别为０．１２１０±０．００５６、０．１５５０±０．００７０,均较正常对照组（０．０２２０±０．００７９、０．０２５０±０．００７０）明显增加（均为Ｐ＜０．０１）。正常对照组大鼠视网膜上ＳｎｏＮ蛋白高表达,在造模后８周和１２周时,ＤＭ组大鼠视网膜上ＳｎｏＮ的ＯＤ值分别为０．４１２０±０．０１１３、０．２１４０±０．００６９,均较正常对照组（０．９４５０±０．００７０、０．９４４０±０．００５１）明显降低（均为Ｐ＜０．０１）,且随着病程的延长,降低更明显。结论　ＳｎｏＮ蛋白对ＴＧＦ-β信号通路起负反馈抑制作用,能降低ＴＧＦ-β信号的强度和持续时间,因此对ＤＲ的防治具有重要意义。     

LY294002联合奥曲肽对bFGF诱导的兔晶状体上皮细胞增殖的影响

目的　探讨ＬＹ２９４００２联合奥曲肽对碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）诱导的兔晶状体上皮细胞（ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ,ＬＥＣｓ）增殖的影响。方法　兔眼ＬＥＣｓ经原代和传代培养后,共分为４组:空白对照组、增殖对照组、实验药物组、增殖药物组。空白对照组使用仅含无血清ＤＭＥＭ培养;增殖对照组使用加ｂＦＧＦ（１０ｍｇ·Ｌ－１）的无血清ＤＭＥＭ;实验药物组培养时在不加ｂＦＧＦ增殖的情况下分别单独应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２、单独应用１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽和联合应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２与１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽来培养;增殖药物组在加ｂＦＧＦ增殖的情况下分别单独应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２、单独应用１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽和联合应用１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１ＬＹ２９４００２和１０－９ｍｏｌ·Ｌ－１奥曲肽进行细胞培养,每组重复５次。各组分别培养４８ｈ。ＭＴＴ比色法测定吸光度（Ａ值）分析各组细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测各周期细胞的百分率。结果　增殖对照组与空白对照组相比,吸光度Ａ值升高（Ｐ＜０．０５）;实验药物组中各组分别与空白对照组相比,吸光度Ａ值均有不同程度下降（均为Ｐ＜０．０５）;增殖药物组中各组分别与增殖对照组相比,吸光度Ａ值明显下降（均为Ｐ＜０．０５）;生长抑制率与吸光度Ａ值趋势相同。经流式细胞仪分析,实验药物组中联合用药组与两个单独用药组相比Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增高,Ｓ期细胞比例降低（均为Ｐ＜０．０５）;增殖药物组中,联合用药组与两个单独用药组相比也出现Ｇ０／Ｇ１期细胞比例增高,Ｓ期细胞比例降低（均为Ｐ＜０．０５）。结论　ＬＹ２９４００２联合奥曲肽较单独用药对ＬＥＣｓ的增殖抑制作用更强。这为临床筛选药物防治后发性白内障提供依据。     

非甾体类药物预防飞秒激光辅助白内障术中瞳孔缩小的观察与分析

目的　探讨飞秒激光术后眼内前列腺素Ｅ２（ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎＥ２）浓度的变化与瞳孔缩小的关系,同时比较术前应用两种非甾体类药物（ｎｏｎｓｔｅｒｏｉｄａｌｄｒｕｇｓ,ＮＳＡＩＤｓ）预防飞秒激光辅助白内障术中瞳孔缩小的效果。方法　前瞻性队列研究。研究对象为２０１４年６月至２０１５年３月于天津医科大学眼科医院白内障科行白内障手术的老年性白内障患者１２０例（１２０眼）,根据手术方式及用药分为４组,其中拟行传统超声乳化手术３０例（３０眼）为Ａ组;拟行飞秒激光辅助白内障手术９０例（９０眼）随机分为３组,其中空白对照组为Ｂ组,术前应用１ｇ·Ｌ－１普拉洛芬滴眼液为Ｃ组,术前应用１ｇ·Ｌ－１双氯芬酸钠滴眼液为Ｄ组。收集包括患者年龄、性别、晶状体核分级、术前充分散瞳后以及完成飞秒激光或手工透明角膜切口后瞳孔直径等临床资料,测量所有样本中ＰＧＥ２浓度。结果　Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四组中ＰＧＥ２浓度分别为（４８．２５±１０．５２）ｐｇ·ｍＬ－１、（１２４．１４±８．９７）ｐｇ·ｍＬ－１、（１８．２８±３．４９）ｐｇ·ｍＬ－１、（１９．０５±３．１３）ｐｇ·ｍＬ－１;Ｂ组与Ａ、Ｃ、Ｄ组差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０００１）,Ｃ组与Ｄ组差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四组术中瞳孔缩小的发生率分别为６．６７％（２／３０）、２０．００％（６／３０）、３．３３％（１／３０）、３．３３％（１／３０）;Ｂ组与Ａ、Ｃ、Ｄ组差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）,Ｃ组与Ｄ组差异无统计学意义（χ２＝０．００１,Ｐ＞０．０５）。瞳孔缩小与年龄、性别及晶状体核分级均无相关性（均为Ｐ＞０．０５）。发生瞳孔缩小者与未发生瞳孔缩小者ＰＧＥ２浓度分别为（１３０．７４±８．７６）ｐｇ·ｍＬ－１、（１２０．８６±７．２７）ｐｇ·ｍＬ－１,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）,瞳孔缩小程度与ＰＧＥ２浓度无相关性（Ｐ＞０．０５）。结论　飞秒激光术后瞳孔缩小可能与房水中ＰＧＥ２浓度升高有关,术前局部应用ＮＳＡＩＤｓ能降低眼内ＰＧＥ２浓度,减少飞秒激光术后瞳孔缩小的发生。     

原发性青光眼合并2型糖尿病患者房水及血液中MMP-2及TIMP-2的表达

目的　探讨基质金属蛋白酶２（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ-２,ＭＭＰ-２）及金属蛋白酶２组织抑制因子（ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ-２,ＴＩＭＰ-２）与原发性青光眼合并２型糖尿病的关系。方法　研究对象分Ａ组、Ｂ组、Ｃ组、Ｄ组、Ｅ组、Ｆ组６组,每组３０眼。Ａ组为原发性开角型青光眼（ｐｒｉｍａｒｙｏｐｅｎａｎｇｌｅｇｌａｕｃｏｍａ,ＰＯＡＧ）组,Ｂ组为原发性闭角型青光眼（ｐｒｉｍａｒｙａｎｇｌｅｃｌｏ-ｓｕｒｅｇｌａｕｃｏｍａ,ＰＡＣＧ）组,Ｃ组为ＰＯＡＧ合并２型糖尿病组,Ｄ组为ＰＡＣＧ合并２型糖尿病组,Ｅ组为糖尿病性白内障组,Ｆ组为年龄相关性白内障组。采用酶联免疫吸附试验检测各组房水及血清中ＴＩＭＰ-２及ＭＭＰ-２的含量,并计算ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值。结果　在６组研究对象的房水中,ＭＭＰ-２浓度在Ａ组为（２４．９２±６．６２）μｇ?Ｌ－１、Ｂ组为（３６．８０±１５．０７）μｇ?Ｌ－１、Ｄ组为（２８.４４±５．７８）μｇ?Ｌ－１,均较Ｆ组的（２２．８７±３.５４）μｇ?Ｌ－１显著升高（均为Ｐ＜０．０５）;同时房水中ＴＩＭＰ-２浓度在Ａ组为（４３.９２±１９．５７）μｇ?Ｌ－１、Ｂ组为（７６．１３±２７．６７）μｇ?Ｌ－１、Ｄ组为（６１．９２±６．５１）μｇ?Ｌ－１,也均较Ｆ组的（２２.４８±３．５６）μｇ?Ｌ－１显著升高（均为Ｐ＜０．０５）。Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组房水中ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值较Ｅ组和Ｆ组显著提高,约为其２倍,但Ａ组、Ｂ组、Ｃ组、Ｄ组间ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值无显著性差异。在６组研究对象的血清中,Ａ组ＭＭＰ-２和ＴＩＭＰ-２浓度最高,分别为（３９６．７５±４９．３０）μｇ?Ｌ－１和（３３７．６７±６２．７８）μｇ?Ｌ－１,其余各组间ＭＭＰ-２和ＴＩＭＰ-２浓度无显著性差异。６组研究对象血清中ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值无明显差异。结论　原发性青光眼患者中ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值均存在失衡,说明ＭＭＰ-２的活性变化及ＴＩＭＰ-２／ＭＭＰ-２值与ＰＯＡＧ和ＰＡＣＧ的发病密切相关,但２型糖尿病对原发性青光眼的病程进展无明显影响。     

趋化素、肿瘤坏死因子-α与2型糖尿病视网膜病变的相关性

目的　探讨２型糖尿病视网膜病变（ｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,Ｔ２ＤＲ）患者血清中趋化素（ｃｈｅｍｅｒｉｎ）、肿瘤坏死因子-α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ-α,ＴＮＦ-α）水平及其临床意义。方法　将１６０例研究对象分为增殖性糖尿病视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａ-ｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＰＤＲ）组４０例,非增殖性糖尿病视网膜病变（ｎｏｎ-ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＮＰＤＲ）组４０例,单纯糖尿病（ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ,ＤＭ）组患者４０例以及健康对照（ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｓ,ＮＣ）组４０例。观察４组研究对象的体检指标,并检测空腹胰岛素、血糖、血脂、糖化血红蛋白及血清中ｃｈｅｍｅｒｉｎ、ＴＮＦ-α等含量。计算稳态模型评估的胰岛素抵抗指数（ｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎ-ｄｅｘ,ＨＯＭＡ-ＩＲ）。结果　ＤＭ组［ｃｈｅｍｅｒｉｎ为（３．８３±０．４６）ｍｇ?Ｌ－１、ＴＮＦ-α为（３７．６９±５．０７）ｎｇ?Ｌ－１］、ＮＰＤＲ组［ｃｈｅｍｅｒｉｎ为（４．６８±０．７４）ｍｇ?Ｌ－１、ＴＮＦ-α为（４０．６９±５．９０）ｎｇ?Ｌ－１］、ＰＤＲ组［ｃｈｅｍｅｒｉｎ为（５．８６±１．２９）ｍｇ?Ｌ－１、ＴＮＦ-α为（４４．１７±６．６３）ｎｇ?Ｌ－１］血清中ｃｈｅｍｅｒｉｎ、ＴＮＦ-α水平均较ＮＣ组［ｃｈｅｍｅｒｉｎ为（２．０１±０．５４）ｍｇ?Ｌ－１、ＴＮＦ-α为（２２．６０±９．７８）ｎｇ?Ｌ－１］升高,且随着ＤＲ病情的进展逐渐升高,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。相关分析显示血清中ｃｈｅｍｅｒｉｎ水平与收缩压、空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数均呈正相关（ｒ＝０．３３１、０．３６１、０．２５１、０．３４８、０．３０６、０．５２３、０．６４４,均为Ｐ＜０．０５）;血清中ＴＮＦ-α水平与收缩压、舒张压、空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数均呈正相关（ｒ＝０．２９９、０．１５９、０．６０５、０．２６２、０．４０７、０．２８２、０．６１９、０．８０９,均为Ｐ＜０．０５）;血清中ｃｈｅｍｅｒｉｎ与ＴＮＦ-α水平呈正相关（ｒ＝０．７３８,Ｐ＜０．０５）。结论　血清中ｃｈｅｍｅｒｉｎ和ＴＮＦ-α水平的升高是Ｔ２ＤＲ的危险因子,可能共同参与了Ｔ２ＤＲ的发生发展。