骨髓间充质干细胞支持脐血造血干／祖细胞体外扩增的研究

目的体外分离培养人新鲜脐血（UCB）造血干细胞（HSC），利用骨髓间充质干细胞作为滋养层联合细胞因子组合以扩增脐血造血干／祖细胞。方法采用Ficoll淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离UCBHSC，加入骨髓间充质干细胞和细胞因子，检测脐血造血干／祖细胞总有核细胞（NC）总数和CD34^＋细胞数。结果有核细胞总数扩增（75．2±15．0）倍，CD34^＋细胞数扩增（18．7±12．3）倍。结论体外HSC培养，加入骨髓间充质干细胞和细胞因子对造血干／祖细胞增殖有明显的作用。     

NK细胞高选择性扩增及其对移植瘤生长抑制作用

[目的]建立一种NK细胞体外选择性高效扩增的实验体系,观察其体内的抗肿瘤活性.[方法]以干细胞培养基(SCGM)为培养基,在低剂量IL-2(100 U/m1)联合14 mer肽TKD(TKDNNLLGRFELSG,aa450-463)(2μg/ml)的培养条件下,从人外周血PBMC中高效扩增获得CD3-CD56+NK细胞,并建立肝癌裸鼠移植瘤模型,观察NK细胞在体内的抗肿瘤活性.[结果]建立了一种高效的从人外周血PBMC中选择性扩增NK细胞的体系,该NK细胞对表面表达HSP70的肝癌移植瘤模型具有显著的抗肿瘤作用.[结论]经过14 mer肽TKD激活的NK细胞对表面表达HSP70的肿瘤具有很强的溶解活性.     

外周血造血干细胞动员采集138例临床分析

[目的]研究影响外周血干细胞动员以及采集因素.[方法]30例血液病患者予以化疗+粒细胞集落刺激园子(G-CSF)动员,12例健康供者以及96例糖尿病周围血管病患者予以G-CSF动员.使用Cobe Spectra血细胞分离机(美国Cobe公司)进行外周造血干细胞采集,对不同疾病、一般特征及供者的动员采集效果进行分析.[结果]所有患者均成功动员采集,健康供者采集所获得CD34+细胞数优于糖尿病周围血管病患者,具有统计学差异.供者性别,年龄对MNC数以及CD34+细胞数无影响,BMI、G-CSF的剂量与MNC数成正相关,TG、HbAIC以及LDL-C与CD34+细胞数呈负相关.无论是健康供者、糖尿病周围血管病患者以及恶性血液病患者.动员采集过程中不良反应较小.[结论]根据不同的疾病、性别、年龄、采用不同的动员采集方案,一般可以成功采集.     

TTNPB对体外培养的脐血T淋巴细胞分化的影响

[目的]研究视黄酸受体特异性激动剂TTNPB对体外培养的脐血T淋巴细胞表型分化的影响.[方法]采用体外人脐血淋巴细胞培养体系,以视黄酸受体(RARs)特异性激动剂TYNPB刺激细胞,TTNPB设立阴性对照组及10-4 mol/L、10-5 mol/L、10-6 mol/L、10-7 mol/L、10-8 mol/L 5个剂量组,培养72 h后收集淋巴细胞,采用流式细胞术分析T淋巴细胞表型分化情况.[结果]体外人脐血淋巴细胞培养体系能支持脐血T淋巴细胞的分化成熟.TTNPB剂量在10-4mol/L时,CDS+细胞比例为21.10%±0.10%(P=0.024),CD4+/CD8+比值为2.01±0.01(P=0.004).[结论]在体外TTNPB能抑制脐血CD4+CD8+胸腺细胞向CD8+细胞转化,TTNPB能升高CD4+/CD8+比值.视黄酸受体途径可能是维生素A调节免疫功能的机制之一.     

CIK细胞的诱导及其对肝癌细胞毒作用的体外研究

目的体外诱导细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK),并研究其生物学活性。方法从外周血和脐血分离单个核细胞(PBMC),经过细胞因子诱导、培养并扩增CIK细胞,以LAK作比较,流式细胞仪检测CIK细胞表面标志CD3、CD56。3H-TdR释放法检测CIK的增殖能力,MTT法检测对肝癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402,正常胎肝细胞L-02的杀伤活性。结果CIK细胞第二周进入快速增殖期,到第31d扩增倍数超过60倍,CD3+CD56+细胞扩增倍数达800倍以上;CIK对肝癌细胞的杀伤能力明显优于LAK细胞(65%～81%);对正常胎肝细胞的细胞毒作用(<5%)。结论CIK细胞是一种具有很强杀瘤活性的免疫活性细胞,具有临床应用前景。     

人脐血CD34^＋细胞体外诱导分化为树突状细胞及其扩增

目的采用脐血CD34^＋细胞在rhGM—CSF、rhTNF—α诱导下体外分化扩增为成熟树突状细胞。方法应用CD34^＋干细胞分选试剂盒以及免疫磁珠法从脐血中分离CD34^＋细胞,用rhGM—CSF、rhTNF—α联合诱导分化发育14d,成为成熟DC,观察细胞形态及检测CD83分子表达。结果50ml脐带血可分离出CD34^＋细胞约1．1×10^6,在rhGM—CSF、rhTNF-α诱导下CD34^＋干细胞培养2周,约扩增10～20倍。CD34^＋干细胞培养第3d开始出现集落,第8～9天集落最大,CD34^＋千细胞分化发育为有树突状突起的成熟DC,表面分子CD83阳性率为81．7％。结论体外联合运用rhGM—CSF、rhTNF—α,能够成功诱导脐血CD34^＋细胞分化为大量成熟的DCs。     

外周血造血干细胞采集效果及影响因素分析

目的观察外周血造血干细胞采集效果, 并探讨其影响因素。方法采用费森尤斯血细胞分离机、迈瑞血细胞分析仪及BD流式细胞仪, 对采集过程的参数、血常规指标及产品的单个核细胞(MNC)和CD34+计数进行检测。回顾性分析陆军军医大学西南医院2013年1月至2021年1月共72例行自体外周血造血干细胞移植患者的性别、年龄、血常规指标、采集循环量与采集物MNC和CD34+计数相关性以及各因素对外周血干细胞采集效果的影响。结果不同年龄、性别和疾病类型的患者外周血干细胞采集效果差异无统计学意义(P>0.05)。所有患者采集物的MNC与采集循环量(r = 0.33, P<0.001)、动员后白细胞计数(r = 0.41, P<0.001)呈正相关, CD34+计数与动员后MNC计数(r = 0.38, P<0.001)和收集白膜量(r = 0.48, P<0.001)呈正相关。多元回归分析结果显示, 动员后MNC计数[P<0.001, 95%CI 0.07(0.05 ～ 0.09)]、采集循环量[(P<0.001, 95%CI 0.00(0.00 ～ 0.00)...     

早产儿脐血中血小板生成调控因子的测定及意义

目的:探讨血小板生成调控因子对早产儿血小板计数的影响。方法:我们测定了33例早产儿脐血血小板计数,并用放射免疫法(ELISA)检测了早产儿脐血中血小板生成调控因子,包括血小板生成素(TPO)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素3(IL-3)、白细胞介素1β(IL-1β)的水平,并与33例正常新生儿比较。结果:与正常新生儿比较,早产儿脐血血小板计数显著低于足月组(早产儿对足月儿:167.4±55.6×109/L对366.7±49.1×109/L,P<0.01;);早产儿脐血TPO、IL-6、IL-1β水平均显著性高于足月组,分别为(早产儿对足月儿,TPO:118.9±78.4pg/ml对63.9±42.8pg/ml,P=0.04;IL-6∶55.5±49.3pg/ml对2.2±2.4pg/ml,P=0.001;IL-1β∶4.4±3.7pg/ml对1.6±2.7pg/ml,P=0.04);而两组血浆IL-3水平无显著性差异(早产儿对足月儿:25.1±10.5mg/ml对22.7±13.4pg/ml,P>0.05)。结论:早产儿娩出时同样存在血小板-细胞因子的反馈调节机制,血小板计数降低反馈性引起脐血中TPO、IL-6、IL-1β水平升高。     

自体CIK细胞过继性免疫疗法治疗中晚期恶性实体瘤的临床研究

[目的]观察自体CIK细胞免疫疗法治疗97例中晚期恶性实体瘤的临床疗效.[方法]抽取患者外周血约50 ml,分离单个核细胞(PBMC),加入抗CD3单抗、IFN-γ、IL-2等细胞因子,经过12～15 d细胞培养,诱导扩增CIK细胞,经严格质控检测合格后,分3次回输患者体内.观察患者临床症状改善及毒副反应,并用流式细胞仪检测回输前后患者免疫学指标改变.[结果]97例接受自体CIK细胞治疗患者中,CR+PR+MR为80例,总缓解率为82.47%.患者治疗前后临床症状改善明显,毒副反应轻微,差异有统计学意义(P＜0.01).CIK细胞经培养后细胞总数平均达到2-5×109,CD3、CD56 T效应细胞均获得大量增殖,经1～2个疗程细胞回输治疗后,患者外周血中CD3、CD4 T细胞和NK细胞比例均显著提高(P＜0.01).[结论]自体CIK细胞过继性免疫疗法能显著提高患者免疫功能,改善患者临床症状,提高生存质量,延长生存期.     

大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及鉴定

[目的]建立分离纯化、培养、扩增骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cell,MSCs)鉴定的方法.[方法]采用密度梯度离心及贴壁培养相结合的方法分离、培养、扩增MSCs,并用流式细胞仪检测其表面标志CD34、CD44、CD105. [结果]培养48 h后即可见呈集落生长的细胞,72 h后可见少量贴壁MSCs细胞,7 d后贴壁细胞明显增多,梭形栅栏样分布,融合度达70%以上.第3代原代培养细胞表面标志CD44+、CD105+在95%左右,CD34的表达率甚低.[结论]联合应用密度梯度离心法及贴壁筛选法,可以获得纯度较高的骨髓MSCs     

THE USE OF THE UNEMPLOYED IN THE FIELD OF SANITATION

Unemployment and under employment are topics that the average health officer pays little attention to. No one will deny the significance of unemployment when considered solely from the public health point of view. Men and women who are out of work or who are only working part time necessarily are unable to buy proper food and shelter which are so essential for their physical well being. Mr. McCrudden, in this paper, tells in an interesting manner how a number of unemployed men were given work through the Health Department of the City of Philadelphia. Not only did they benefit themselves but the work they did was a direct benefit to the entire community. This is a subject that health officials generally might well give more attention to.     

THE USE OF THE UNEMPLOYED IN THE FIELD OF SANITATION

Unemployment and under employment are topics that the average health officer pays little attention to. No one will deny the significance of unemployment when considered solely from the public health point of view. Men and women who are out of work or who are only working part time necessarily are unable to buy proper food and shelter which are so essential for their physical well being. Mr. McCrudden, in this paper, tells in an interesting manner how a number of unemployed men were given work through the Health Department of the City of Philadelphia. Not only did they benefit themselves but the work they did was a direct benefit to the entire community. This is a subject that health officials generally might well give more attention to.     

多水平模型在调查员变异评价中的应用

[目的]结合实例探索评价调查员变异的方法,并探讨当存在调查员变异时,如何分析产生调查员变异的原因以及进一步的数据分析。[方法]以2008年四川地震灾区居民的生命质量及其影响因素相关研究为例,采用多水平模型评价灾区居民SF-12量表的MCS和PCS得分测量中是否存在调查员变异,并比较存在调查员变异时,考虑和不考虑调查员变异对结果的影响。[结果]SF-12量表心理方面的测量存在调查员变异,但SF-12量表生理方面的测量不存在调查员变异;将调查员变异在MCS得分中分离后,模型3中汶川与北川居民MCS得分差异无统计学意义,模型3中房屋垮塌的居民MCS得分比没有房屋垮塌的居民低,均比模型4的结果解释合理,且模型3拟合效果更好。[结论]多水平模型适用于评价调查员变异和探索产生调查员变异的原因,为今后改进调查员培训,提高调查质量提供参考。     

深圳市某区居民摄入水分来源的分析

目的分析深圳某区成年居民水分的来源情况。方法采用方便抽样的方法选取深圳市某区18~60岁居民共16名,饮水来源调查由调查对象利用定量用具对连续3d每天每次的饮水量进行估计,并记录每次饮水量和种类,饮水总量为白水、茶水、饮料和酒的饮用量之和;食物水来源调查采用双份饭法进行样品收集,用国标方法(GB/T 5009.3-2003)测定食品中的水分。结果调查对象水分摄入总量中位数为2 676ml/d,其中饮水总量中位数为1 567ml/d(占68.6%),食物来源水量中位数为816ml/d(占31.4%)。调查对象白水、茶水、饮料的饮用量中位数分别为908ml/d、80ml/d、161ml/d,男性茶水及饮料饮用量有高于女性的趋势,而白水饮用量有低于女性的趋势,但差异无统计学意义。食物水为主食、菜类、零食和清汤来源之和,其中位数分别为340ml/d(占食物水的44.5%)、320ml/d(占39.0%)、0(占3.4%)和78ml/d(占13.2%)。男性从主食和汤中摄入的水分比例有高于女性的趋势,而从菜和零食中摄入的水分比例有低于女性的趋势,但差异无统计学意义。结论深圳某区成年居民水分摄入以饮水为主约占2/3;食物水约占1/3,食物来源水以主食和菜为主。     

THE ROLE OF THE ADRENAL CORTEX IN THE DEVELOPMENT OF MARASMUS

Rats maintained on low-protein diets and given injections of cortisone showed a great deficit in body weight. The protein concentration in muscle was low, but it was normal in the liver. Similar changes are also characteristic of marasmus. It is suggested that a high adrenocortical activity may be necessary for the development of the marasmic state.     

THE LABORATORY IN THE SERVICE OF THE STATE

Professor Winslow has collected in this paper some very interesting comparative statistics with regard to state health laboratories. The progress of public health laboratories in the United States has indeed been remarkable in the last few years. While we may congratulate ourselves on our advance, it is obvious that in many instances much may yet be done to make laboratory of greater value to the citizens of the state.