双氢青蒿素原料药及其片剂中杂质diketo aldehyde的含量测定

双氢青蒿素与无水溴化亚铁在氮气保护的条件下合成双氢青蒿素中杂质diketo aldehyde (DKA),并建立HPLC测定双氢青蒿素原料药及其片剂中DKA含量的方法。该研究采用双氢青蒿素原料与无水溴化亚铁反应制得DKA,含量测定时采用的色谱柱为Agilent Eclise XDB-C18柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(37∶63),流速1. 0 mL·min-1,柱温15℃,检测波长216 nm,进样体积40μL。所建立的方法分离度良好,线性关系、稳定性、精密度、重复性、加样回收试验均符合《药品质量标准分析方法验证指导原则》要求。结果显示,13批双氢青蒿素原料药中DKA质量分数为0. 086 7%~2. 622 9%,10批双氢青蒿素片剂中DKA质量分数为0. 068 3%~0. 615 1%。     

新工艺双氢青蒿素片溶出度测定方法研究

改进处方制备新工艺双氢青蒿素片,并建立双氢青蒿素片溶出度测定新方法,为修订标准提供参考。采用2015年版《中国药典》四部通则0931第二法测定新工艺及原工艺双氢青蒿素片的溶出度,溶出介质为0.1 mol·L~(-1)盐酸溶液250mL,转速为100 r·min~(-1),30 min取样。采用高效液相色谱法测定:Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相乙腈-水(40∶60);流速1.0 mL·min~(-1);柱温30℃;检测波长216 nm;进样体积100μL。双氢青蒿素检测线性范围为1.234 5～79.003 ng(r=1.000 0);定量限为0.308 6 ng,检测限为0.154 3 ng;精密度的RSD1.0%;回收率98.09%～102.6%(RSD=1.8%,n=9)。在此条件下,3批新工艺双氢青蒿素片的溶出度分别为93.81%,92.61%,92.37%,1批原处方双氢青蒿素片的溶出度为32.67%。该方法重复性好、准确、可靠,能客观地反映双氢青蒿素片的溶出情况,为本品现行药品标准中溶出度项的修订提供了依据。另外,新工艺双氢青蒿素片的溶出度显著高于原处方双氢青蒿素片的溶出度,表明新的处方和工艺更合理。     

HPLC测定益母草软胶囊中盐酸水苏碱的含量

目的:应用高效液相色谱法测定益母草软胶囊中盐酸水苏碱的含量.方法:采用Kromasi C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(80∶20)为流动相,检测波长192 nm,流速1.0 mL· min-1进行含量测定.结果:盐酸水苏碱在2.456 ～12.280 μg线性关系良好(r=0.9998),平均加样回收率98.67％,RSD 1.39％.结论:方法简便、专属性强、重复性好.     

HPLC-ELSD法测定银杏叶软胶囊中萜类内酯的含量

目的:测定银杏叶软胶囊中萜类内酯的含量.方法:采用高效液相色谱法蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定银杏叶软胶囊中萜类内酯的含量.色谱条件为:汉邦Lichrosper C18柱,4.6mm×150mm;正丙醇-四氢呋喃-水(1:15:84)为流动相;蒸发光散射检测器检测参数:漂移管温度115℃;氮气流速3.5L·min-1.结果:该方法简便易行,银杏叶软胶囊中基质对萜类内酯的测定无干扰,线形关系良好;萜类内酯的重现性试验RSD为1.04%;平均加样回收率为97.1%.结论:本方法可作为银杏叶软胶囊中萜类内酯成分质量控制的一种有效方法.     

加校正因子的主成分对照品外标法测定双氢青蒿素原料药中Diketo Aldehyde含量

目的选择合适的液相条件建立加校正因子的主成分对照品外标法测定双氢青蒿素(DHA)中杂质DKA的方法。方法采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-水(37:63)为流动相,等度洗脱;流速为1 mL·min^-1;检测波长为216 nm;柱温为15℃;进样体积为20μL。结果DHAα峰与其杂质DKA分离度良好,3根不同色谱柱测定出校正因子均值为0.256。结论本方法测定DHA中杂质DKA准确、可靠加校正因子的主成分对照品外标法可用于DHA原料药中DKA的质量控制。     

大花红景天中草质素苷含量分析

目的:测定11个批次大花红景天样品中草质素苷的含量,为红景天质量标准的制订提供参考.方法:采用HPLC测定,Zorbax SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相乙腈-0.2％醋酸(22％∶78％);流速1.0 mL·min-1;检测波长332 nm;柱温40℃.结果:11个样品中草质素苷含量为0.033％～0.765％.结论:大花红景天中草质素苷含量测定方法方便、准确.     

差光谱双波长分光光度法测定复方双氢青蒿素片中双氢青蒿素的含量

目的:建立复方双氢青蒿素片中双氢青蒿素含量测定的方法。方法:采用紫外分光光度法的专属性试验、准确度试验、线性试验、精密度试验等方法学研究,建立紫外分光光度法测定双氢青蒿素含量的方法,测定波长为250 nm,参比波长为273.5 nm。结果:双氢青蒿素测定的线性方程为:C=-0.10721+56.3438△A,r2=0.99998,线性范围为4~12μg/mL;准确度试验(n=9)平均回收率为99.7%,RSD为1.47%。结论:双波长分光光度法可不经分离,能消除甲氧芐啶和磷酸哌喹的干扰,从而直接测定复方制剂中双氢青蒿素的含量,该操作简便、快捷、准确。     

HPLC测定柴芩软胶囊中葛根素的含量

目的:建立HPLC测定柴芩软胶囊中葛根素的含量的方法.方法:采用高效液相色谱法进行测定,色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水-磷酸(25∶75∶0.2)为流动相,检测波长250 nm.结果:葛根素在0.559 5～111.9 mg·L-1进样质量浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8,n=6),葛根素平均回收率为98.85％(n =6 RSD 0.83％);精密度试验(RSD 0.52％,重复性试验RSD 0.57％).结论:方法快速、简便、准确、专属性强、重复性好,可测定柴芩软胶囊中葛根素的含量.     

HPLC测定异黑成熟颗粒中田蓟苷和甘草酸的含量

目的:建立测定异黑成熟颗粒中2种有效成分田蓟苷和甘草酸含量的方法.方法:采用高效液相色谱法,Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,乙腈-0.5％甲酸(27∶ 73)为流动相,检测波长324 nm,柱温35℃,流速1.0 mL·min-1.Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.2 mol· L-1酸铵-冰醋酸(67∶33∶1)为流动相,检测波长250 nm,柱温30℃,流速1.0 mL· min-1.结果:田蓟苷和甘草酸分别在1.14～114 μg (r=0.9999)和20.6 ～ 206 μg(r=0.999 7)线性关系良好;平均回收率分别为98.26％(RSD 2.29％),99.39％ (RSD 1.86％).结论:该方法简便可行,重复性好,可用于异黑成熟颗粒中田蓟苷和甘草酸含量测定.     

HPLC法测定救必应药材中冬青素A的含量

目的 建立救必应药材中冬青素A的含量测定方法.方法 采用反相高效液相色谱法.色谱柱:Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)与0.4％磷酸(B),梯度洗脱;体积流量:1mL·min-1;检测波长:210 nm;柱温:25℃;进样量:20 μL.结果 冬青素A在12.5～500 μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为99.22％,RSD=1.85％(n=6).结论 该方法简便、准确、可靠且分离度好,可用于救必应药材中冬青素A的含量测定.     

HPLC法测定疏肝利胆胶囊中大黄素和大黄酚的含量

目的：建立疏肝利胆胶囊的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱：SHIMADZU VP-ODS（250mm×4．6mm，5um），流动相：甲醇：0．1％磷酸溶液（80：20，V／V），流速：1．0ml·min^-1，检测渡长：254nm，柱温：30℃。结果：大黄素在10．13～250．8μg·ml^-1范围内线性关系良好（r=0．9996）；平均加样回收率为96．2％，RSD=1．2％（n=6）；大黄酚在10．00—250．0μg·ml^-1范围内线性关系良好（r=0．9998）；平均加样回收率为96．7％。KSD=1．3％（n=6）.结论：该方法简便易行，结果准确可靠，可适用于连翘败毒丸的质量控制。     

尖叶假龙胆中norswertianolin的含量测定

目的:利用反相高效液相色谱法对尖叶假龙胆中norswertianolin成分进行含量测定。方法:采用Shim-pack VP-ODS-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相0.1%磷酸水溶液(A)-乙腈(B)(80:20),流速1.0 mL.min-1,柱温25℃,紫外检测波长254 nm。结果:尖叶假龙胆中norswertianolin在9.6～192 mg.L-1线性关系良好(r=0.999 5);仪器精密度RSD0.67%(n=6);方法重复性RSD 1.88%(n=6);样品在12 h内稳定;平均回收率为99.8%(RSD 1.31%)。结论:本法快速、准确、重复性好,可用于蒙药尖叶假龙胆中norswertianolin成分的含量测定。     

双氢青蒿素对AA大鼠外周血T淋巴细胞的调节作用

目的:探讨双氢青蒿素对佐剂性关节炎(AA)大鼠外周血T细胞的调节作用.方法:采用佐剂性关节炎动物模型,将体重160～ 180 g的SD大鼠随机设为6组:正常对照组、模型对照组、甲氨蝶呤对照组(1mg·kg-1)、双氢青蒿素高、中、低剂量(11.2,5.6,2.8 mg·kg-1)组,造模2周后灌胃给药,连续给药28 d,并采用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群、酶联免疫法检测血清白介素-4 (IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)的水平.结果:相较于正常组,模型组外周血CD4+T,CD4+ T/ CD8+T和血清IFN-γ水平显著升高(P＜0.01),血清IL-4水平显著降低(P＜0.01),CD3+T,CD8+T则无明显变化;高、中剂量双氢青蒿素组CD4+T所占百分比分别是(34.81±3.80)％,(34.92±5.14)％,CD4+ T/ CD8+T分别是2.21±0.43,2.27±0.48,与模型组相比显著降低(P＜0.05,P＜0.01);双氢青蒿素高、中、低剂量组血清INF-γ水平分别是(15.90±2.05),(16.27 ±2.11),( 18.15±2.15) ng·L-1,与模型组相比显著降低(P＜0.01);IL-4水平分别是(40.21±4.89),(40.04±4.56),(34.81±4.02)ng·L-1,与模型组相比显著升高(P＜0.01),其调节作用在2.8 ～5.6 mg·kg-1范围呈剂量依赖性(P＜0.05).结论:双氢青蒿素能有效改善AA大鼠T细胞功能紊乱状况,为其应用于类风湿关节炎治疗奠定实验基础.     

HPLC测定呈味核苷酸二钠中IMP和GMP的含量

目的:建立呈味核苷酸二钠的含量测定方法.方法:采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5 μm),流动相乙腈-水(含0.005 mol?L -1四丁基溴化铵及0.05 mol?L -磷酸二氢钾)(2∶98),流速1.0 mL? min-1,检测波长250 nm,柱温常温.结果:5’-肌苷酸二钠(IMP)的线性范围为0.50 ～4.00 μg(r =0.999 9),平均加样回收率为99.12％ (n =6),RSD 0.56％;5’-鸟苷酸二钠(GMP)的线性范围为0.50～4.00 μg(r =0.999 9),平均加样回收率99.18％ (n=6),RSD 0.45％.结论:该方法灵敏度高、重复性好,可用于呈味核苷酸二钠的含量检测.     

青蒿素和二氢青蒿素的抗炎作用及机制

目的:研究并比较青蒿素和二氢青蒿素的抗炎作用及其分子机制.方法:用LPS刺激小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7释放TNF-α,IL-6,NO等炎症介质,评价药物对巨噬细胞释放以上炎症介质的抑制作用.以ELISA法检测TNF-α,IL-6的含量,以Griess法检测NO的含量,同时以MTF法评价细胞毒性.Western blot法检测iNOS,COX-2及内参蛋白β-actin水平.比色法检测COX-2酶活性.结果:二氢青蒿素在12.5～100μnol·L-1可明显抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7释放TNF-α,IL-6及NO,并呈现良好的剂量依赖关系.青蒿素仅对IL-6具有一定程度的抑制作用.结论:二氢青蒿素通过下调iNOS蛋白表达,抑制巨噬细胞释放炎症因子TNF-α,IL-6和炎症介质NO发挥抗炎活性,青蒿素可能通过代谢为二氢青蒿素发挥抗炎作用.     

虚寒胃痛胶囊的质量标准研究

目的：建立HPLC法检测虚寒胃痛胶囊中芍药苷和黄芪甲苷的含量测定方法。方法：1芍药苷采用Diamonsil C18（4.6 mm×200 mm,5μm）色谱柱,流动相为甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液（28∶72）;流速1.0mL/min。2黄芪甲苷采用VP-ODS（4.6 mm×150 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水（35∶65）为流动相,流速1.0 mL/min。结果：1芍药苷进样量在0.05109~2.5545μg范围内呈良好线性关系,平均回收率为96.5%（n=6,RSD=0.88%）。2黄芪甲苷进样量在0.4892~12.23μg范围内呈良好线性关系,平均回收率为94.5%（n=6,RSD=3.0%）。结论：该方法准确可靠,无干扰,可用于虚寒胃痛胶囊的质量控制。     

HPLC法测定伤风停胶囊中欧前胡素的含量

目的:建立采用高效液相色谱法测定伤风停胶囊中欧前胡素含量的方法。方法:色谱柱为Thermo Hypersil Gold-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(50:50),流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长为300 nm。结果:欧前胡素在0.87~10.46μg·mL^-1范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为102.42%(RSD=1.11%)。结论:所建立的方法结果准确,专属强,重现性好,可用于测定伤风停胶囊中欧前胡素的含量。     

HPLC同时测定附子理中丸中3种单酯型生物碱含量

目的:建立附子理中丸中3种单酯型生物碱(苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)的含量测定方法.方法:色谱柱Alltimate C18(4.6 mm ×250 mm,5μm);保护柱Alltimate C18(4.6 mm ×7.5 mm,5μm);流动相40 mmol·L-1乙酸铵(加氨水调pH 10.00 ±0.5)-乙腈梯度洗脱;流速1.0 mL· min-1,检测波长240 nm,柱温35℃.结果:苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱分别在进样量0.212 ～1.272 μg,0.0116～0.0696 μg,1.035 ～6.210 μg线性关系良好,r分别为0.9996,0.9997,0.9996,在8h内稳定性良好.同时,针对苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱,附子理中丸(河南宛西)平均加样回收率依次为97.59％ (RSD 1.90％)、98.81％(RSD 2.00％)、98.37％(RSD 1.72％),附子理中丸(安徽东芝堂)平均加样回收率依次为98.18％ (RSD 2.39％)、103.06％(RSD 1.77％)、98.23％(RSD 2.05％),而附子理中丸(北京同仁堂)仅含苯甲酰新乌头原碱的平均加样回收率100.17％(RSD 2.29％).结论:方法结果准确可靠、快速,适用于构建附子理中丸成方制剂的多指标质量评价模式.     

HPLC法测定金菊感冒胶囊中氨基比林的含量

目的：建立高效液相色谱法测定金菊感冒胶囊中氨基比林的含量。方法：色谱柱为Hypersil ODS2C18柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相：1％醋酸溶液（用二乙胺调节pH=3．7）：甲醇（38：62）；流速：0．8ml·min^-1；检测波长：272nm；结果：氨基比林的浓度在0．4035-2．4211μg·ml。范围内，线性关系良好（r=1．0000，n=6），平均回收率100．3％，RSD为0．41％。结论：本法准确、快速，简便可靠，结果稳定，可用于金菊感冒胶囊的含量测定。     

高效液相色谱法同时测定黄芪赤风胶囊中芍药苷、升麻素苷等9种成分的含量

 目的 建立HPLC同时测定黄芪赤风胶囊中9种成分的含量。方法 采用Waters Symmetry Shield RP₁₈（4.6 mm×150 mm,5 μm）色谱柱;以甲醇（A）-水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱（0～15 min,5%A→20%A;15～55 min,20%A→35%A;55～100 min,35%A→85%A）,流速1.0 mL·min^-1;检测波长：230 nm（0～25 min,芍药苷）,254 nm（25～100 min,毛蕊异黄酮苷等）;柱温35 ℃。结果 芍药苷、升麻素苷、毛蕊异黄酮苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、芒柄花苷、亥茅酚苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素的线性范围分别为1.51～15.10,0.047～0.94,2.192～10.960,0.052 2～1.044,0.041 4～0.828,1.56～7.80,0.042 2～0.844,0.149～0.744和0.110～0.552 μg（r≥0.999 0）;平均回收率（n=6）分别为99.48%（RSD=2.59%）,103.15%（RSD=1.69%）,102.77%（RSD=1.56%）,99.27%（RSD=2.72%）,101.99%（RSD=2.36%）,102.25%（RSD=2.10%）,101.49%（RSD=3.00%）,100.45%（RSD=1.76%）和97.49%（RSD=2.03%）。结论 所建立的方法快速、准确、专属性强、精密度好,可用于黄芪赤风胶囊的质量控制。