改良的紫外荧光光度计法检测小鼠血清中多巴胺β经化酶活性的方法

目的：介绍一种简便的检测小鼠血清中多巴胺β羟化酶(DβH)活性的方法。方法：用国产的强酸性苯乙烯阳离子交换树脂代替Dowex TP^ 进行一系列转型处理后检测DβH活性。结果：改良的紫外荧光光度法可有效检测小鼠血清中含量较低(nmol水平)的DβH活性。结论：改良的紫外荧光光度法检测血清中DβH结果准确、操作简便。     

人血浆DβH活性紫外分光光度计测定法

多巴胺β羟化酶(dopamine-β-hydroxyl-ase,简称 DβH)的作用是促使多巴胺β羟化成为去甲肾上腺素(NE)。因之,DβH 活性可作为交感神经功能状态的一种指标,用以研究临床神经系统及内分泌系统疾病及作为研究针刺机理的一种方法。本文介绍人血浆 DβH 活性紫外分光光度计测定法,现报道如下:     

重水对高岭土诱导小鼠脑积水发展的影响

目的:研究重水(D2O)对高岭土诱导小鼠脑积水发展的影响。方法:将枕大池中注射高岭土的小鼠分为两组:H组,术后一直喂养自来水;D组:在注射高岭土后喂养30%的重水。将枕大池中注射蒸馏水的小鼠组作为阴性对照(Sham)组。结果:注射高岭土后28d内重水对脑积水的发展和软脑膜纤维化和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达有抑制作用,D组的脑室扩张程度以及颅内软脑膜纤维化程度均比H组要小(P<0.05)。结论:应用D2O可以抑制高岭土诱导的小鼠脑积水的发展、颅内软脑膜纤维化以及TGF-β1的表达。     

中国正常儿童血清多巴胺-β-羟化酶(DβH)的测定

本文研究了175名1～12岁中国正常儿童的血清多巴胺-β-羟化酶(DβH)的活性。发现儿童血清DβH活性与性别无关。1～6岁儿童的血清DβH活性(27.27±1.63单位)与中国正常成人(36.42±1.54单位)比较,有显著差异(t=3.695,P<0.01),而7～12岁儿童的血清DβH活性(39.03±1.75单位)与中国正常成人间的差异不显著(t=1.124,P>0.05),提示中国正常儿童至7～12岁后,血清DβH活性达成人水平。     

橙皮苷对急性化学性肝损伤小鼠的保护作用及机制

目的 探讨橙皮苷(HDN)对D-氨基半乳糖胺(D-GalN)致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用及可能机制.方法 建立D-GalN诱导小鼠急性化学性肝损伤模型,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,放射免疫分析法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)活性、肝匀浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量.RT-PCR法检测小鼠肝脏白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达水平,并作肝组织切片病理观察.结果 病理学切片显示HDN能明显改善模型组小鼠肝脏组织病变范围与程度,使炎细胞浸润减少;并且HDN能降低D-GalN急性肝损伤小鼠血清ALT、AST、TNF-α水平;降低肝组织匀浆MDA含量;提高SOD、GSH-Px活性;抑制IL-1β mRNA表达.结论 HDN对D-GalN致小鼠急性化学性肝损伤具有保护作用,可能与其降低小鼠血清中TNF-α的水平、抑制IL-1β mRNA表达及抗脂质过氧化有关.     

葫芦巴改善瘦素缺陷型ob/ob小鼠炎症及胰岛素抵抗的机制研究

目的 探讨葫芦巴改善瘦素缺陷型ob/ob小鼠炎症及胰岛素抵抗的机制。方法 小鼠分为正常饮食组(NC组)、高脂饮食组(HFD 组)、葫芦巴低剂量治疗组(Fenu/L组)、葫芦巴高剂量治疗组(Fenu/H 组)。葫芦巴干预12周后,测量各组小鼠体重;全自动生化仪检测小鼠血脂水平;手持血糖仪检测小鼠空腹血糖水平;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠空腹血清胰岛素、血清白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6及单核细胞趋化蛋白(monocyte chemoattractant protein,MCP)-1 水平,计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance,HOMA-IR);实时荧光定量聚合酶链式反应(rea ltime-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测皮下脂肪组织中IL-1β、IL-6、MCP-1的mRNA 表达水平;蛋白质印迹法(western blot,WB)检测皮下脂肪组织胰岛素受体和c-Jun氨基末端激酶(c-JunN-terminal kinase,JNK)炎症信号通路的相关蛋白磷酸化水平。结果 Fenu/L 组、Fenu/H 组小鼠的体重、空腹血糖、空腹血清胰岛素、HOMA-IR水平显著低于HFD组(P<0.05)。Fenu/L组、Fenu/H 组小鼠的血清IL-1β、IL-6和MCP-1蛋白水平及皮下脂肪组织IL-1β、IL-6和MCP-1的mRNA 表达水平显著低于HFD 组(P<0.05)。Fenu/L组、Fenu/H 组小鼠皮下脂肪组织中p-IRS-1、p-PI3K、p-Akt、GLUT4蛋白表达水平高于HFD组。Fenu/L组、Fenu/H 组小鼠皮下脂肪组织中c-JUN、p-c-JUN、JNK 和p-JNK 蛋白表达水平低于HFD组。结论 葫芦巴可通过抑制炎症因子(IL-1β、IL-6)及趋化因子(MCP-1)表达、限制JNK炎症信号通路的激活而表现出抗炎特性,也可通过降低空腹血糖、空腹血清胰岛素、HOMA-IR 水平并诱导胰岛素受体信号通路的激活而表现出明显的改善胰岛素抵抗效应。     

诺氟沙星与Me-β-CD的包合能力的研究

目的:本文利用紫外可见分光光度法、荧光光谱法、核磁共振法研究了β-CD的衍生物Me-β-CD对诺氟沙星的分子识别作用。对在不同pH溶液中的包合效果进行研究。方法:用紫外、荧光的方法进行包合常数(K)的计算,并进一步用NMR表征了包合物的结构及机制。结果:随着Me-β-CD的浓度增加,包合物的紫外、荧光均增强,而且Me-β-CD易于包合中性型体的诺氟沙星。结论:诺氟沙星与Me-β-CD在溶液中形成了稳定的包合物。     

乐果对大鼠纹状体和血清中多巴胺-β-羟化酶活性的影响

 目的 观察乐果染毒对大鼠大脑纹状体和血清中多巴胺-β-羟化酶(dopamine-β hydroxylases,DβH) 活性变化的影响,对乐果中毒机制作进一步的探讨。方法 56只雄性SD大鼠随机分为对照组(生理盐水,n=8)和乐果染毒低(38.9 mg/kg,n=8)、中(83.7 mg/kg,n=8)和高(180 mg/kg,n=32)3个剂量组,腹腔一次注射染毒。高剂量组大鼠分别在给药后0.5、2、8、24 h断头处死取血制备血清待测,并分离脑组织纹状体,生理盐水匀浆待测。其他组动物在给药后2 h断头处死,同样方式取样供分析。利用DβH将酪胺代谢为真蛸胺原理检测DβH活性。另取正常大鼠血清和纹状体匀浆,体外乐果染毒,观察其对DβH抑制状况。结果 给予不同剂量乐果对大鼠纹状体和血清DβH活性均有抑制作用,并随剂量增加而加深,存在剂量 效应关系(r=-0.996 7, P<0.05)。乐果高剂量(180 mg/kg)染毒后大鼠大脑纹状体和血清中DβH活性与对照组相比,在不同时程观察点差异均有统计学意义(P<0.05),随时程增加抑制也加深,24 h内时程效应关系(P<0.05)明确。体外乐果对纹状体和血清DβH活性均有抑制作用,并随剂量增加而加深,有剂量 效应关系(r=-0.891 2, P<0.05),但在高浓度有饱和现象。结论 大鼠大脑纹状体和血清中DβH水平有随染毒剂量和时程的增加而抑制加深的趋势,存在剂量效应和时程效应关系。     

小鼠脑外伤后内源性硫化氢体系的变化

目的 :探讨小鼠脑外伤(traumatic brain injury,TBI)后内源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)体系的变化。方法:利用改良的自由落体装置建立小鼠TBI模型,使用亚甲基蓝法检测血浆及脑组织中内源性H2S浓度。Western Blot技术观察内源性H2S合成酶胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-beta-synthase,CBS)在小鼠TBI后不同时间(1 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、7 d)的表达变化。结果 :脑组织内源性H2S浓度在小鼠TBI血清、脑皮质及海马组织中变化趋势一致,呈先降低后升高。TBI后大脑皮质和海马组织CBS表达随着外伤时程的延长逐渐降低。结论:内源性H2S在TBI的病理生理过程中起着重要的作用。     

双光谱法研究β-榄香烯甘氨酸与牛血清白蛋白的相互作用

目的:研究莪术抗肿瘤有效成分β-榄香烯甘氨酸衍生物与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)相互作用,揭示β-榄香烯甘氨酸在体内的贮存、转运及作用机制,为阐明中药药效物质基础提供实验依据。方法:对β-榄香烯进行结构修饰得到β-榄香烯甘氨酸。利用紫外-可见分光光度法、荧光光谱法及同步荧光光谱法,研究β-榄香烯甘氨酸与BSA的相互作用。结果:β-榄香烯甘氨酸与BSA作用后引起BSA的紫外-可见吸收光谱及内源性荧光光谱变化,二者之间作用力类型为疏水作用。结论:β-榄香烯甘氨酸与BSA之间具有较强的相互作用,形成荧光较弱的复合物,血清白蛋白作为载体可以将β-榄香烯甘氨酸运输到特定部位,发挥药效。     

川芎含药血清对小鼠胚胎干细胞增殖和分化的影响

【目的】观察川芎含药血清对小鼠胚胎干细胞(ES细胞)增殖及分化的影响。【方法】川芎含药血清与ES细胞共培养,采用CCK-8法检测细胞活性,逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测心肌细胞特异基因肌球蛋白重链(β-MHC)m RNA的表达水平。【结果】与大鼠血清组和胎牛血清组比较,川芎含药血清组的ES细胞活性差异无统计学意义(P0.05),川芎含药血清组心肌细胞特异基因β-MHC表达水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。【结论】川芎含药血清对ES细胞向心肌细胞分化有促进作用。     

抗衰I号方对亚急性衰老小鼠血清MAO—B活性及脑蛋白含量的影响

目的观察抗衰I号方对亚急性衰老小鼠血清MAO—B活性及脑蛋白含量的影响。方法采用D－半乳糖致亚急性衰老小鼠模型。分离脑组织称重计算脑指数;采用紫外分光光度法测定小鼠血清MAO—B活性;考马斯亮蓝测定小鼠脑组织中蛋白含量。结果与模型组比较,抗衰1号方各给药组均能不同程度降低血清中MAO—B活性（P〈0．05）,增加脑蛋白含量（P〈0．05）,对脑指数无显著性影响。结论抗衰I号方抗衰老作用机理可能与其降低血清MAO—B活性,提高脑蛋白含量有关。     

咖啡因对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的 研究咖啡因对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用.方法 采用酒精灌胃制备急性酒精性肝损伤小鼠模型,每天1次,连续10 d.给药组同时灌服相应药物.于末次灌胃后12 h采血,并处死动物,剖腹取肝,制备肝匀浆.检测血清谷丙转氨酶(AIT)、谷草转氨酶(AST)的含量、肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量及血清中白介素-1β(1L-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,并行肝脏病理学检查.结果 咖啡因(5、15、30 mg/kg)组能显著降低急性酒精性肝损伤小鼠血清中ALT、AST含量的升高;咖啡因(15、30 mg/kg)能显著增强急性酒精性肝损伤小鼠肝组织中SOD活性;咖啡因(30 mg/kg)组能显著降低急性酒精性肝损伤小鼠肝组织中的MDA含量;咖啡因(5、15、30 mg/kg)组显著降低急性酒精性肝损伤小鼠血清中IL-1β和TNF-α水平的升高.病理组织学显示咖啡因能显著改善肝细胞脂肪变性.结论 咖啡因对小鼠急性酒精性肝损伤有较好的保护作用,其机制可能与抗氧化及对IL-1β和TNF-α水平的抑制有关.     

双光谱法研究β-榄香烯甘氨酸与牛血清白蛋白的相互作用

目的:研究莪术抗肿瘤有效成分β-榄香烯甘氨酸衍生物与牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)相互作用,揭示β-榄香烯甘氨酸在体内的贮存、转运及作用机制,为阐明中药药效物质基础提供实验依据。方法:对β-榄香烯进行结构修饰得到β-榄香烯甘氨酸。利用紫外-可见分光光度法、荧光光谱法及同步荧光光谱法,研究β-榄香烯甘氨酸与BSA的相互作用。结果:β-榄香烯甘氨酸与BSA作用后引起BSA的紫外-可见吸收光谱及内源性荧光光谱变化,二者之间作用力类型为疏水作用。结论:β-榄香烯甘氨酸与BSA之间具有较强的相互作用,形成荧光较弱的复合物,血清白蛋白作为载体可以将β-榄香烯甘氨酸运输到特定部位,发挥药效。     

抗衰Ⅰ号方对亚急性衰老小鼠血清MAO-B活性及脑蛋白含量的影响

目的 观察抗衰Ⅰ号方对亚急性衰老小鼠血清MAO-B活性及脑蛋白含量的影响。方法 采用D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型。分离脑组织称重计算脑指数;采用紫外分光光度法测定小鼠血清MAO-B活性;考马斯亮蓝测定小鼠脑组织中蛋白含量。结果 与模型组比较,抗衰1号方各给药组均能不同程度降低血清中MAO-B活性(P＜0.05),增加脑蛋白含量(P＜0.05),对脑指数无显著性影响。结论 抗衰Ⅰ号方抗衰老作用机理可能与其降低血清MAO-B活性,提高脑蛋白含量有关。     

灵芝多糖对阿尔茨海默病大鼠学习记忆和氧化应激的影响

目的:探讨灵芝多糖对阿尔茨海默病(AD)大鼠的学习记忆能力和氧化应激的影响。方法:将40只大鼠随即分为正常组、假手术组、模型组和灵芝多糖(GLP)治疗组。采用双侧海马注射Aβ1~40的方法建立大鼠AD动物模型,灵芝多糖灌胃治疗21d,M orris水迷宫测试各组大鼠学习记忆能力,分光光度法测定大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:与对照组相比,模型组大鼠的逃避潜伏期延长(P<0.01),血清MDA含量明显增高,SOD活性明显降低。与模型组相比,GLP治疗组大鼠的逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),血清MDA含量明显降低,SOD活性明显升高。结论:灵芝多糖能增强Aβ诱导的AD模型大鼠的学习记忆能力和抗氧化能力。     

白藜芦醇对哮喘小鼠磷脂酶A2活性和气道炎症的影响

目的 探讨白藜芦醇对哮喘小鼠磷脂酶A2活性和气道炎症的影响.方法 采用卵清蛋白(OVA)刺激,建立小鼠哮喘模型,测定哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸粒细胞(EOS)计数;紫外分光光度法测定肺组织中前列腺素E2(PGE2)的含量;盐酸滴定法测定肺组织和血清中磷脂酶A2活性.结果 白藜芦醇能显著减少哮喘模型小鼠BALF中白细胞总数及EOS计数,减少肺组织中PGE2含量,降低磷脂酶A2活性.结论 白藜芦醇对哮喘小鼠有保护作用,可能与其降低磷脂酶A2活性、减轻炎性细胞浸润、减少炎症介质PGE2的产生有关.     

慢性丙型肝炎患者血液微量元素、氧应激水平及与病毒载量的关系

目的 检测慢性丙型肝炎患者血液微量元素和氧应激水平以及评估它们与丙型肝炎病毒(HCV)载量的关系.方法 采用实时荧光定量PCR检测42例未经治疗的丙型肝炎患者血清中HCV-RNA水平.原子吸收分光光度法测定其血清微量元素(铜、铁、锌、硒)浓度.分光光度法测定其血清中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽氧化物酶(GPX)活性.结果 慢性丙肝患者血清锌、硒水平明显低于对照组,相反铜的水平明显高于对照组.与对照组比较,慢性丙肝患者血清MDA水平显著增加,SOD和GPX活性显著下降.血液锌、硒、铜以及MDA、SOD、GPX与HCV载量相关.结论 血液锌、硒、铜以及MDA、抗氧化酶SOD和GPX对慢性丙肝感染者有重要影响,这些参数有可能作为HCV感染的生物学标志物.     

酮替芬对感染伯氏疟原虫小鼠血清维生素A,C,E含量的影响

采用荧光分光光度法和紫外分光光度法测定感染伯氏疟原虫(P.b,ANKA株)小鼠血清中维生素A,C,E含量。感染未治组小鼠血清V.A,V.C含量明显低于酮替芬组、酮替芬+氯喹组及正常组,与氯喹组无显著差异,酮替芬及酮替芬+氯喹组的小鼠血清中V.A,V.C含量与正常组无显著差异。各组V.E无显著差异。     

莴苣黄酮类化合物的抗氧化性研究

目的 探讨莴苣黄酮(TFEL)的体外抗氧化作用.方法 以紫外分光光度法测定TFEL对脱氧核糖-铁体系产生的羟自由基(·OH)的清除作用,以硫代巴比妥酸法测定TFEL对过氧化氢(H2 O2)诱导的小鼠肝脏组织脂质过氧化影响,以分光光度法测定TFEL对H2O2诱导的红细胞氧化溶血的抑制作用.结果 莴苣黄酮能有效清除·OH,抑制肝脏组织中丙二醛的产生,对H2O2所致的红细胞氧化溶血有明显的抑制作用.结论 莴苣黄酮具有较强的体外抗氧化活性.