肺鳞癌患者胸水免疫复合物抗原及抗体组份的免疫学特异性分析

本文利用Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析法纯化肺鳞癌患者胸水免疫复合物(IC);并在解离的条件下(8mol/L尿素),用QAE-Sephadex A-50离子交换柱层析法分离胸水免疫复合物中的抗原、抗体组份。IC抗体组份经间接免疫荧光法鉴定具有相对肺癌的反应特异性;用IC抗原组份制备的特异性抗血清经正常人组织、血浆等免疫吸附剂充分吸附后,仍保留与原胸水IC中分离所得抗体组份相似的抗肿瘤相关抗原反应特异性。该法为研究肿瘤宿主体内免疫调节反应提供了较直接的途径。分离所得抗原组份制备的抗血清可作为研究、检测宿主体内肿瘤相关抗原的特异探针。     

应用微量固相放射免疫测定法检测乙型肝炎核心抗原及其抗体

固相放射免疫测定法(Solid-Phaso Radioimmunoassay)是用表面能吸附抗体的塑料或其他材料作为固相载体,用同位素标记抗体或抗原,以测定相应抗原或抗体的一种微量检测技术。其灵敏度和特异性高,操作简便,节省材料,标记抗体对抗原纯度要求不高,可广泛应用于微量可溶性抗原、抗体的检测。1979年国外已将这一技术用于乙型肝炎表面抗原(HBsAs)的检测,1973年Purcell等进一步发展了微量固相放射免疫测定法(Micro-SPRIA),1974年又将该法     

四种ELISA试剂盒质量验证分析

ELISA是指以酶作为标记物、以抗原和抗体之间免疫结合反应为基础的固相吸附测定方法,由于其试剂制备容易掌握、实验操作简便、结果判断较客观,易记录,试剂对环境污染小,无需特殊的仪器设备,并且测定的特异性和灵敏度均     

在肝炎科研中建立微量固相放射免疫测定法

今年4月,上海市传染病医院免疫病毒研究室与我院微生物学教研组病毒室协作,在肝炎科研中应用国产聚苯乙烯微量板,~(125)Ⅰ或~(131)Ⅰ标记抗体成功地建立了微量固相放射免疫测定法(Micro-solid phase radioimmunoaggay)。这一新技术具有灵敏度高、特异性强、应用范围广和微量快速等优点。其基本原理为将特异抗体吸附于固相载体(聚苯乙烯     

液相酶免疫分析的研究现状

酶联免疫吸附试验(简称 ELISA),又名酶免疫分析(简称 EIA),是 Engvall 等及 VanWeeman 等分别于1971年提出的一种将可溶性抗原或抗体吸附在固相上,利用酶标抗体或抗原定量检测相应的抗原或抗体的方法。本法已应用到免疫学、内分泌学、生物化学、微生物学和寄生虫学等方面。1972年 Ruben-stein 等建立了不需固相载体,可直接从溶液中测定反应结果的均相 EIA。1974年 Voller等以聚苯乙烯微量滴定板为载体,建立了微板法,是当前应用最广的一类 EIA 法。1976年 Belanger 等运用连续双抗体饱和法的原     

噬菌体抗体库几种筛选方法的比较

目的：对多种不同的噬菌体抗体库筛选方法进行比较研究。方法：应用抗原固相化吸附筛选法,生物素化抗原液相筛选法和解离速率筛选法对半合成噬菌体抗体库或轻链替换库进行抗角蛋白噬菌体抗体的筛选,比较各自的筛选效率和优缺点。结果：3种方法筛选抗角蛋白抗体均获成功,抗原固相化吸附筛选法效果可靠,所获抗体特异性高但抗原消耗量大,生物素化抗原液相筛选法方法敏感且节省抗原,可以根据实验目的和抗体库性质灵活调节筛选体系,其不足是筛选获得的克隆中容易出现非特异性结合的克隆,而解离速率选是选择性获得高亲和力抗体的有效手段,结论：不同的筛选策略各具优势,在实际应用中可根据不同的实验目的选择相应的筛选方法。     

用日本血吸虫成虫冰冻切片免疫酶染色法检测血吸虫病抗体的初步报告

<正> 自 Engvall 和 Perlmann(1972)创用塑料为固相载体吸附抗原进行酶标记免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbeat assay ELSA)以后,1974年,Voller等改良了固相载体的模型,使这种技术不断改进和提高,从而免疫酶技术应用日广。近几年来,国内外许多学者应用这种技术测定血吸虫病的特异抗体,已证实具有一定的特异性和敏感性。鉴于目前国内酶生产供应还很困难,塑料聚苯乙烯载体尚不能大量供     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法(GICA)用于检测血清中乙型肝炎病表面抗原(HBsAg)。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体(抗HBs),制成免疫层析测试条。血清中HBsAg与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动。与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果GICA试条只与HBsAg有特异性反应,与乙型肝炎病毒核心抗原、e抗原等无交叉反应,检测中国药品生物制品检定所HBsAg标准品,灵敏度可达1ng/ml。用GICA与酶免疫法比较检测了395份不同血清标本中HBsAg,两法符合率为99%,结论GICA检测血清中的HBsAg特异性强、灵敏度高、简便快速、无需特殊仪器设备,有广泛应用价值。     

多西环素多克隆抗体的制备及鉴定

目的:采用人工偶联方法构建多西环素完全抗原,制备多克隆抗体。方法:分别采用直接偶联法、甲醛一步法、重氮法+混合酸酐法和重氮法+碳二亚胺法等4种方法将多西环素与牛血清白蛋白(bull serum albumin,BSA)或鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)分别偶联,构建人工完全抗原。选择最好偶联效果制备的抗原免疫BALB/c小鼠,通过直接ELISA法检测多克隆抗体效价,竞争抑制ELISA法分析其灵敏性及特异性。结果:重氮法+碳二亚胺法偶联的多西环素人工完全抗原效果最好,其与BSA的偶联比为8.37∶1,与OVA的偶联比为4.92∶1。采用该方法偶联的抗原免疫小鼠获得的多克隆抗体效价在1∶8 000以上;该抗体对多西环素的半数抑制浓度(IC50)为98.89~120.32μg/L,与其他四环素类药物的交叉反应性较低。结论:重氮法+碳二亚胺法的偶联效率最高,获得的多西环素多克隆抗体效价较高,特异性和灵敏度均较理想。     

甲型肝炎抗原的提取和血清学鉴定

从10例典型甲型肝炎患儿的粪便提取到病毒抗原,从甲肝患儿恢复期血清提取到IgG,并使用直接电镜(DEM)、免疫电镜(IEM)、微量补体结合(MCF)、免疫粘连(IAHA)和固相放射免疫测定(SPRIA)等方法对提取到的抗原和抗体进行了全面交叉鉴定,证实为甲肝病毒抗HAv IgG。在提取抗原的方法上,除用差速离心、聚乙二醇沉淀外,还用氯仿去脂,排除了粪便中其它物质的干扰,保证提取到的抗原为特异性甲肝抗原。本文还讨论了IEM、MCF、IAHA和SPRIA方法的优缺点。