利用组织芯片技术研究PTEN和VEGF在胃癌中的表达及意义

目的研究PTEN和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在胃癌中的表达及临床意义。方法应用组织微阵列仪制作97孔胃癌组织芯片（tissue microarray）。用免疫组织化学S—P法检测PTEN、VEGF在72例胃癌和25例正常胃黏膜中的表达。结果胃癌组织中PTEN蛋白阳性表达率显著低于正常胃黏膜（45．8％ VS 100％，P〈0．01）；VEGF的阳性表达率显著高于正常胃黏膜（75％VSl2％，P〈0．01），PTEN在胃癌中的表达与VEGF呈负相关（P〈0．01）。PTEN、VEGF的表达在中高分化腺癌分别为68．8％、62．5％（P〉0．05），在低分化及未分化腺癌分别为27．5％、85．0％（P〈0．05）；伴淋巴结转移者分别为31．6％、86．9％（P〈0．05），无淋巴结转移者分别为61．8％、61。8％（P〉0．05）；临床病理分期Ⅰ＋Ⅱ期分别为57．1％、61．9％（P〉0．05），Ⅲ＋Ⅳ期分别为30．0％、93．3％（P〈0．05）；与性别、年龄、肿瘤大小和组织分型无显著差异（P〉0．05）。结论PTEN失活或蛋白表达降低、VEGF的高表达与胃癌临床病理特征和生物学行为有密切关系。PTEN在低分化或未分化以及伴淋巴结转移和临床Ⅲ＋Ⅳ期胃癌中的表达与VEGF呈负相关。联合检测PTEN、VEGF对胃癌的恶性程度及预后判断具有一定的临床参考意义。应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的，具有快速、准确、方便经济的特点。     

PTEN和P16基因蛋白在胆囊癌组织中的表达

[目的]探讨PTEN和P16基因蛋白在胆囊癌组织中表达的意义。[方法]应用免疫组织化学技术检测58例胆囊腺癌、20例胆囊腺瘤和20例慢性胆囊炎组织中PTEN和P16基因蛋白表达。[结果]胆囊癌患者PTEN和P16表达阳性率分别为43．1％（25／58）和37．9％（22／58），其表达阳性率均明显低于胆囊腺瘤和慢性胆囊炎（P〈0.05）。PTEN和P16表达与胆囊癌的分化程度、浆膜浸润和转移相关（P〈O．05）。[结论]检测PTEN和P16基因蛋白表达可作为评估胆囊癌生物学行为和预后的参考指标。     

抑癌基因PTEN在胃癌中的表达及其临床意义

应用免疫组织化学SP法检测68例胃癌组织及33例癌旁正常组织中张力蛋白同源物基因（PTEN）蛋白的表达水平。结果癌旁正常组织中第10号染色体缺失的磷酸酶和PTEN蛋白阳性表达率为100％，胃癌中PTEN表达阳性率为61．8％；PTEN表达与胃癌的分化程度高低、浸润深度、是否有淋巴结转移和临床分期关系密切（P〈0．01，〈0．05），与患者年龄、肿瘤部位无关（P〉0．05）。PTEN异常表达可为胃癌诊断和判断其生物学特性提供可靠的指标。     

胃癌组织中PTEN、Cx43及Skp2的表达及其相关性

采用免疫组化方法检测PTEN、Cx43及skp2蛋白在胃癌及正常胃组织中的表达。结果发现,胃癌组织中PTEN、Cx43、skv2蛋白的阳性表达率分别为51．81％（43183）、46．99％（39／83）和69．88％（58／83）,与正常胃黏膜组织比较,有统计学差异（P均〈0．05）。PTEN、Cx43、Skp2蛋白的表达均与为癌细胞的病理分期、组织分化类型和有无淋巴结转移显著相关（P〈0．05）。胃癌组织中PTEN、Cx43与Skp2蛋白的表达呈负相关（r别为-0．582和-0．382,P均〈0．001）,FIEN与Cx43的表达呈正相关（r=0．570,P〈0．1301）。认为胃癌组织中skp2蛋白水平的高表达和FTEN、Cx43蛋白的低表达可能与胃癌组织的浸润和转变有关,且联合监测可以用于判断胃癌的生物学行为。     

胃癌组织中PTEN与Survivin基因表达及临床意义

目的探讨PTEN、Survivin基因在胃癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化sP法检测80例胃癌患者癌组织（观察组）中PTEN及Survivin基因表达，并与20份正常胃组织（对照组）比较。结果观察组PTEN蛋白表达阳性率明显低于对照组，其中42例表达明显降低或缺失；PTEN表达与胃癌TNM分期、淋巴结转移相关（P〈0．05）；Survivin阳性率为70．0％（P〈0．05），与胃癌的分化程度、淋巴结转移、TNM分期显著相关（尸〈0．05）。结论抑癌基因PTEN与凋亡抑制基因Survivin可能存在相互作用，共同参与了胃癌的发展、转移及浸润。     

PTEN蛋白表达在非小细胞肺癌的临床意义研究

目的探讨PTEN蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及生物学和临床意义。方法应用免疫组织化学法检测60例NSCLC组织中PTEN基因蛋白的表达,20例肺良性病变组织中PTEN基因蛋白的表达。结果PTEN蛋白在NSCLC中的总阳性表达率高于肺良性病变组织,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）;PTEN蛋白表达随NSCLC临床分期增加呈下降趋势,但三组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）;PTEN蛋白阳性表达率在NSCLC高中分化组高于低分化组,两者之间比较差异有统计学意义（P〈0．01）,NSCLC无淋巴结转移组PTEN蛋白阳性表达率有淋巴结转移组,两者差异有统计学意义（P〈0．01）,PTEN和nm23-H1蛋白表达与NSCLC患者年龄、性别、组织学分型、肿瘤部位及肿瘤大小均无关（P〉0．05）。结论PTEN蛋白表达与NSCLC的组织分化程度及淋巴结转移有关,NSCLC中PTEN蛋白低表达易发生淋巴结转移,检测PTEN蛋白可在一定程度上评估NSCLC的预后。     

大肠癌组织中PTEN和COX-2的表达及其相关性研究

目的通过对PTEN和环氧合酶-2（COX-2）在大肠癌中表达的研究，探讨PTEN和COX-2的相关性。方法应用免疫组织化学S-P法检测58例大肠癌组织及20例正常大肠组织中PTEN和COX-2的表达。结果大肠癌组织中PTEN蛋白表达显著低于正常大肠组织中表达（P〈0．01）。且与淋巴结转移及Dukes分期相关（P〈0．05），而与大肠癌组织分化程度不相关（P〉0．05）。COX-2在大肠癌中的表达显著高于正常大肠黏膜的表达（P〈0．01），与淋巴结转移及Dukes分期相关（P〈0．05），而与大肠癌组织分化程度不相关（P〉0．05）。PTEN在大肠癌中的表达与COX-2呈负相关（P〈0．05）。结论PTEN失活或蛋白表达降低与大肠癌淋巴结转移及Dukes分期相关，且与COX-2呈负相关。抑癌基因PTEN和COX-2在大肠癌的发生发展过程中起着重要的作用。     

抑癌基因在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

应用免疫组化SP法检测35例肝细胞肝癌（HCC）患者癌组织及癌旁组织中抑癌基因PTEN蛋白的表达水平。结果显示，HCC组织中PTEN蛋白阳性率和阳性强度均明显低于癌旁组织（P〈0．01）；PTEN蛋白表达与HCC的分化程度密切相关（P〈0．05）．与癌栓形成有关（P〈0．01）。提示PTEN异常表达在HCC发生、发展过程中可能起重要作用．其表达水平可作为反映HCC进展和预后的生物学指标。     

Paxillin和PTEN在胃腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究正常胃黏膜和胃腺癌组织中桩蛋白（Paxillin）及张力蛋白同源的磷酸酶基因（PTEN）的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学sP法分别检测Paxillin和VrEN在40例正常胃黏膜组织、88例胃腺癌组织中的表达,并探讨其与胃腺癌临床病理特征的关系以及二者之间表达的相关性。结果胃腺癌组织中Paxillin阳性表达率（72．5％）明显高于正常胃黏膜（32．5％）（P〈0．05）;PTEN阳性表达率（47．7％）明显低于正常胃黏膜（100％）（P〈0．05）。胃腺癌组织中PaxiUin和PTEN的表达与胃腺癌浸润深度、分化程度、淋巴结转移及临床分期有关（P〈0．05）,与年龄和性别无关（P〉0．05）。经Spearman相关分析,胃腺癌组织中Paxillin与PTEN的表达呈显著负相关（r=-0．369,P〈0．05）。结论胃腺癌组织中Paxillin蛋白水平的高表达与PTEN蛋白水平的低表达可能与胃腺癌的浸润和淋巴结转移等恶性生物学行为相关,二者联合检测可能成为一组能够有效判断胃癌恶性程度和患者预后的指标。     

TGF-β1在胃癌中的表达及意义

应用SABC免疫组化法检测48例胃癌组织及20例正常胃组织中转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白表达情况，发现TGF-β1在胃癌组织中表达明显高于正常胃组织（P〈0．01）；TGF-β1表达与胃癌的TNM分期、分化程度、浸润深度及淋巴结转移显著相关（P〈0．05）。TGF-β1的表达可作为评价胃癌生物学行为的参考指标。     

p73、PTEN 在胃癌中的表达

目的 检测肿瘤相关基因p73、肿瘤抑制基因PTEN（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosometen）在胃癌组织中的表达，并研究其临床病理意义。方法 采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测p73、PTEN在40例胃癌中的表达。结果 ①PTNM（pathological tumor-node-metastasis）分期Ⅰ、Ⅱ期胃癌与对照组正常胃黏膜组织间p73、PTEN的表达均有非常显著性差异（P〈0．01）；PTNM分期Ⅲ、Ⅳ期和Ⅰ、Ⅱ期胃癌p73、PTEN的表达均有非常显著性差异（P〈0．05）；②p73在高、中分化胃腺癌组与低分化腺癌组阳性率表达无显著性差异（P〉0．05）；而PTEN在高、中分化腺癌和低分化腺癌阳性率表达差异具有显著性（P〈0．05）。③p73、PTEN在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组检出阳性率差异具有显著性（P〈0．05）。结论 p73、PTEN的表达与胃癌临床病理特征和生物学行为存在密切关系，p73、PTEN基因是胃癌细胞增生活跃的重要影响因素。     

PTEN、survivin蛋白在食管癌中的表达及其相关性

应用免疫组织化学sP法检测60例食管癌组织及20例癌旁正常黏膜的survivin和PTEN的表达水平。结果：survivin在食管癌组织的阳性表达率为70．0％，癌旁正常黏膜为40．0％（P〈0．05）；低、高分化癌的阳性表达率差异显著（P〈0．05）；有、无淋巴结转移者的阳性表达率分别为88．9％、61．9％（P〈0、05）；其表达与肿瘤的浸润深度显著相关（P〈0．05），与患者的性别、年龄无关（P〉0．05）。PTEN在癌旁正常黏膜阳性表达率为90．0％。食管癌组织为36．7％（P〈0．05）。低、高分化癌的阳性表达率差异显著（P〈0．05）；有、无淋巴结转移者的阳性表达率分别为16．7％、45．2％（P〈0．05）；与患者的性别、年龄及浸润深度无关（P〉0．05）。survivin和PTEN在食管癌中的表达呈负相关。认为PTEN低表达及survivin的过表达与食管癌的发生及其生物学行为密切相关，可作为食管癌早期诊断及评估预后的客观指标。     

胃癌组织中ILK、PTEN蛋白表达的意义

目的探讨整合素连接激酶（ILK）在胃癌发生发展过程中的作用及与抑癌基因PTEN的关系。方法采用免疫组化法和原位杂交法对112例胃癌及76例正常胃黏膜组织ILK和PTEN蛋白、PTENmRNA进行检测。结果胃癌组与正常胃黏膜组、胃癌浸润超过肌层组和未超过肌层组、胃癌有淋巴结转移组和无淋巴结转移组之间ILK、PTEN蛋白表达强度比较差异均有统计学意义（P〈0．05或〈0．01）。胃癌组PTENmRNA表达明显低于正常胃黏膜组（P〈0．01）。ILK与PTEN蛋白表达强度呈负相关（r=-0．347，P〈0．01）。结论胃癌的发生发展过程中伴随着ILK蛋白表达的增强及PTEN蛋白表达的减弱或消失，控制ILK和PTEN蛋白有望成为胃癌治疗的新靶点。     

蛋白激酶B在胃癌中的表达及其生物学意义

目的研究丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶（Akt）在胃癌中的表达、活化情况及其与血管内皮生长因子C（VEGF—C）的关系，以初探Akt表达和活化的生物学意义及其可能的机制。方法采用RT—PCR法检测20例新鲜胃癌及癌旁正常组织标本中Akt1、Akt2和Akt3 mRNA的表达；Western印迹法检测Akt和磷酸化Akt（pAkt）蛋白的表达；免疫组化检测pAkt蛋白和VEGF-C在55例胃癌配对组织中的原位表达。结果20例胃癌及相应癌旁正常组织中Akt1、2、3mRNA的表达阳性率皆为100％，且三者在癌和正常组织中的表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。Western印迹显示Akt蛋白在胃癌组织中的表达水平为正常组织的2．7倍（P〈0．001），而pAkt蛋白的表达水平为癌旁正常组织的4．1倍（P％0．01）。免疫组化分析表明，pAkt表达于67．3％（37／55）的胃癌组织，且较高表达于组织分化较差（X^2=9．751，P％0．01）和TNM分期较晚（X^2=7．684，P〈0．05）者；VEGF—C在胃癌组织中的表达阳性率为61．8％（34／55），其表达与肿瘤的TNM分期（X^2=9．298，P〈0．01）及淋巴结转移（X^2=7．605，P〈0．05）密切相关，统计分析表明，pAkt与VEGF—C的表达呈显著性正相关（Pearson r=0．524，P〈0．05，Spearman，rho=0．747，P〈0．01）。结论Akt及pAkt蛋白特异性过表达于胃癌组织，可能是蛋白翻译水平和（或）代谢水平改变的结果。Akt蛋白的磷酸化可能促进胃癌细胞的恶性转化和淋巴结转移，VEGFC可能在其中发挥重要的介导作用。     

胃癌组织中PTEN、p53的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中p53、FTEN的表达变化,探讨其意义。方法采用免疫组化法检测60例胃癌组织中的p53、PIEN。结果胃癌组织中PTEN、p53的阳性率分别为46．7％、75．0％,PTEN、p53表达均与胃癌患者肿瘤的大小、Borrmman分型、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有关（P均〈0．05）,PTEN、p53表达呈明显负相关（r=-0．513,P〈O．05）;PTEN、p53表达分别与胃癌患者术后生存率呈正相关（r=0．556,P〈0．05）和负相关（r=-0．493,P〈0．05）。结论p53、PTEN表达在胃癌发生发展中有重要作用。     

萎缩性胃炎及胃癌中垂体肿瘤转化基因和c-myc蛋白的表达及其二者的相关性

目的研究垂体肿瘤转化基因（PTTG）基因和c-myc蛋白在胃癌发生发展中的作用及二者的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测90例正常胃组织、慢性萎缩性胃炎及胃癌组织中PTTG基因和c-myc蛋白的表达。结果PTTG基因和c-myc蛋白在正常胃组织中表达均为阴性,在慢性萎缩性胃炎、胃癌组织中表达明显高于正常胃组织（P〈0．05）,二者的表达强度在慢性萎缩性胃炎组与胃癌组间比较均有显著性差异（P〈0．05）。二者的表达均与胃癌的病理组织学分级、临床分期及淋巴结转移有关（P〈0．05）,而与组织学类型无关（P〉0．05）。PTTG基因和c-myc蛋白表达强度呈显著正相关（P〈0．05）。结论PTTG基因和c-myc蛋白在胃癌的发生发展中有协同作用,可作为反映胃癌生物学行为的指标。     

胃癌组织中树突状细胞和VEGF的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中树突状细胞（DC）和血管内皮生长因子（VEGF）的表达变化,探讨二者之间的关系及其在胃癌转移中的作用。方法采用免疫组化SP法检测20例胃炎组织及50例胃癌组织中的DC和VEGF。结果胃炎组织中的DC数明显高于胃癌组织（P〈0．05）,肠型胃癌中DC数高于弥漫型胃癌（P〈0．05）,且与胃癌淋巴结转移有关。VEGF的阳性表达率在胃炎组织低于胃癌组织（P〈0．01）,肠型胃癌中VEGF的阳性表达率低于弥漫型胃癌（P〈0．05）,有淋巴结转移的胃癌组织中VEGF的阳性表达率高于无淋巴结转移者（P〈0．05）。胃癌组织中DC与VEGF的表达呈负相关（r=-0．385,P〈0．05）。结论胃癌组织中DC数减少、VEGF表达增多,二者相互作用,促进胃癌的发生及转移。     

p16基因表达与胃癌生物学行为的关系

目的探讨P16蛋白表达与胃癌生物行为的关系．方法采取S－P免疫组织化学方法，检测51例胃癌组织中P16蛋白的表达，并与正常胃组织进行对比．结果正常胃组织和胃癌组织中P16蛋白的阳性表达率分别为100．0％（12／12）和39．2％（20／51），两组比较有非常显著性差异（P＜0．001）．P16蛋白的阳性表达与胃癌分化程度，浸润深度无明显关系（P＞0．05），但在有淋巴结转移的胃癌中，P16蛋白的阳性表达率仅25．8％（8／31），而无淋巴结转移组P16蛋白的阳性表达率为60．0％（12／20），两组间有显著性差异（P＜0．05）．结论P16蛋白表达缺失与胃癌的发生及淋巴结转移有密切关系．检测P16蛋白表达可作为诊断胃癌及判断患者预后的参考指标．     

胃癌细胞PTEN基因启动子区甲基化与蛋白表达的关系及意义

目的探讨胃癌细胞中抑癌基因PTEN5’启动子区CpG岛甲基化状态与其蛋白表达的关系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）方法检测不同分化程度的胃癌细胞（HGC-27，MGC-803，BGC-823，SGC-7901）中PTEN基因启动子区域甲基化状态。并通过Western blot法检测该4种细胞中PTEN蛋白的表达。结果除SGC-7901外，其他三种胃癌细胞PTEN基因都有不同程度的甲基化，并随着胃癌细胞分化程度的降低。PTEN启动子区甲基化逐渐增强（P〈0．01）；PTEN蛋白表达逐渐减弱（P〈0．01）。PTEN蛋白表达与其启动子区高甲基化之间呈负相关。结论PTEN基因启动子区异常甲基化可能导致该基因失活，使其蛋白表达减少甚至缺失，这可能是导致胃癌发生、发展的重要机制之一。     

p16和VEGF在老年肺癌组织中的表达及临床意义

目的研究抑癌基因p16和血管内皮生长因子（VEGF）在肺癌组织中的表达及与临床病理学参数之间的关系。方法采用链霉素抗生物索蛋白-过氧化物酶（streptaridin pemxidase，SP）免疫组织化学法检测80例肺癌石蜡包埋组织中VEGF和p16的表达情况。结果①p16主要表达于肿瘤细胞胞核。VEGF主要表达于肿瘤细胞胞浆或胞膜，二者的表达都与肺癌淋巴结转移、临床分期有关（P〈0．05）；②p16和VEGF的表达都与患者的性别，年龄，组织类型，组织分化级别和肿瘤大小无关（P〉0．05）；③p16表达与VEGF呈负相关（P〈0．05）。结论VEGF促进肿瘤血管生成，VEGF表达上调或p16表达下调对肺癌发生、发展及转移起霞要作用．为判宦肿瘤的牛物学行为和转耨潜能棍世了雷霉括标．