癌基因c-erbB-2特异性核酶对胃癌细胞恶性表型的逆转

目的 探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２特异性核酶对胃癌细胞恶性表型的影响。方法 根据计算机设计的人癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２特异性核酶ＲＺ１,合成ＲＺ１基因并构建其真核表达载体ｐＤＯＲ－ＲＺ１,在Ｌｉｐｏｆｅｃｔ ＡＭＩＮＥ＾ＴＭ的介导下转染胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１。流式细胞仪分析转染的胃癌ｃ－ｅｒｂＢ－２产物Ｐ１８５的表达。     

c—erbB—2基因产物表达与膀胱移行细胞癌相关性研究

为探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２基因产物（简称产物）表达与膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）分级，分期的关系，以及肿瘤复发与肿瘤分级，分期及ｃ－ｅｒｂＢ－２产物表达间的关系，采用ＳＡＢＣ免疫组化法检测４８例膀胱ＴＣＣ中ｃ－ｅｒｂＢ－２产物的表达。实验结果显示：膀胱ＴＣＣ有较高的ｃ－ｅｒｂＢ－２产物表达水平（５４％），并与肿瘤的分级，分期有良好的相关性，ｃ－ｅｒｂＢ－２产物表达作为膀胱ＴＣＣ的预后指标，尚有待于大样本长     

乳腺癌原癌基因c—erbB—2扩增与过度表达

目的;探讨原癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２扩增与过表达在乳腺癌的临床意义。方法：应用原位杂交和免疫组化对８１例乳腺癌原癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２扩增与过表达进行检测。结果：在８１例乳腺癌中,３７例显示ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增,２４例显示ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白过表达,基因扩增与蛋白过度表达呈显著相关关系（Ｐ〈０．０５）。基因扩增与过表达均与乳腺癌病理分级,肿瘤大小,临床分期及淋巴结转移呈正相关。结论：ｃ－ｅｒｂＢ     

甲孕酮对人卵巢癌3AO细胞C—erb B—2表达和形态学的…

采用流式细胞和电镜技术，检测了甲孕酮处理前后人卵巢癌３ＡＯ细胞Ｃ－ｅｒｂ Ｂ－２表达和形态学改变情况。结果表明甲孕酮可使部分３ＡＯ细胞Ｃ－ｅｒｂ Ｂ－２表达下降；部分３ＡＯ细胞发生形态学改变，提示甲孕酮具有低调部分人卵巢癌３ＡＯ细胞Ｃ－ｅｒｂ Ｂ－２表达和诱导部分３ＡＯ细胞分化的作用。     

c—erbB—2和CEA在肺癌中的表达及意义

目的：检测ｃ－ｅｒｂＢ－２及ＣＥＡ在肺癌中表达，探讨其生物学行为与预后关系，方法：选７８例原发性肺癌标本，采用免疫组化方法标记。结果：ｃ－ｅｒｂＢ－２和ＣＥＡ阳性表达率分别为４４．８７％和６５．３８％，其表达与肺癌组织类型有关，小细胞肺癌表达明显高于鳞状细胞癌，与５年生存率呈负相关，结论：Ｃ－ｅｒｂＢ－２和ＣＥＡ表达者预后不良。     

ras,c—erbB—2,p53基因在卵巢浆液性肿瘤中的表达

采用链蛋白生物素标记（ＬＳＡＢ）免疫组化方法，检测了３９例卵巢浆液性囊腺癌中ｒａｓ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｐ５３基因的表达情况，并以７例交界性、１０例良好浆液性囊腺瘤作为对照。结果：良性、交界性、癌３组中３种基因的表达率依次增高，差异显著，表达强度与癌组织学分级有关，分化越差，表达越强；ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达与临床分期有关，临床期别越晚，表达率提高。提示：３种基因的激活在卵巢浆液性肿瘤的演进过程中起着     

乳腺癌HSV—1,HSV—2与c—erbB—2关系的免疫组化研究

采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法检测５２例手术切除乳腺癌组织ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白和ＨＳＶ－１、ＨＳＶ－２表达情况。结果发现癌组织中ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性３４例（６５．４％）；ＨＳＶ－１阳性３８例（７３．１％）；ＨＳＶ－２阳性１５例（２８．８％）。癌旁组织３２例，阳性分别为３例（９．４％）；１２例（３７．５％）；２例（６．３％）。乳腺癌中ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性率明显高于癌旁组织。乳腺癌及癌旁的ＨＳＶ－１阳性率明     

肺癌nm23,c—erbB—2基因表达及其临床意义

为探讨ｎｍ２３、ｃ－ｅｒｂＢ－２基因在评估肺癌生物学行为及预后中的作用，应用免疫组化ＡＢＣ法检测了４１例肺癌及３０例癌旁组织中ｎｍ２３及ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达。     

人膀胱移行细胞癌中c—erbB—2基因扩增的检测及意义

应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法对５１例石蜡包埋的膀胱移行细胞癌标本进行ｃ－ｅｒｎｂＢ－２基因扩增的检测。结果显示，３１．３７％的标本呈ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增。在不同分化程度的膀胱移行细胞癌中ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增率差异无统计学意义。     

原癌基因c—erbB—2研究进展

原癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２研究进展姜琨童坦君原癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２最早是由Ｓｈｉｈ从大鼠神经胶质瘤中分离到，它与编码表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的基因一样与病毒癌基因Ｖ－ｅｒｂＢ具有同源性，故称之为ｃ－ｅｒｂＢ－２／ｎｅｕ。人类的ｃ－ｅｒｂＢ－２又称...     

bcl—2,c—erbB—2在胃粘膜癌变过程中的表达及意义

目的：通过检测bcl-2,c-erbB-2基因在胃粘膜良恶生病变中的表达,探讨其对提高胃癌诊断率的作用。方法：采用免疫组化SABC法,检测bcl-2,c-erbB-2基因在98例胃癌,40例不典型增生和20例正常胃粘膜中的表达,结果a,bcl-2在正常胃粘膜中有弱阳性表达（10．0％）,在不典型增生中为50％,在胃癌中为44．9％,不典型增生与胃癌中的表达均显著高于正常胃粘膜（P＜0．05）,bcl-2表达与胃癌的分化程度有关（P＜0．05）,低分化者bcl-2表达率高,与淋巴结转移,浸润深度无关（P＞0．05）,b.c-erbB-2在胃癌中的阳性表达率为56．1％,其中中早期胃癌中的表达低（16．7％）,在重度不典型增生和进展期胃癌中的表达高,分别为80％,58．7％,二者与早期胃癌比较有统计学意义（P＜05）,c-erbB-2表达与浸润深度,淋巴结转移有关（P＜0．05）,与分化程度无关（P＞0．05）,结论： -2,－B-2c参与胃粘膜的癌变过程,联合检测bcl-2,c-erbB-2可能作为胃癌高危人群筛选的有效指标。     

端粒酶启动子肿瘤靶向TNF相关凋亡诱导配体基因抗大肠癌细胞HT-29的活性研究

目的：探讨在端粒酶（hTERT）启动子驱动下TRAIL基因在大肠癌细胞HT-29的表达及其杀细胞作用。方法：通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TNF相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因转入大肠癌细胞HT-29，流式细胞仪检测GFP／TRAIL的表达和HT-29细胞凋亡率。结果：端粒酶启动子驱动的GFP／TRAIL基因和CMV启动子驱动的GFP（绿色荧光蛋白）基因在HT-29内的表达率分别达31．4％和67．0％；GFP／TRAIL基因对HT-29细胞的生长抑制率和凋亡率分别达74．2％和25．8％，与PBS和Ad／CMV—GFP比差异都有显著性意义（P〈0．05）。结论：端粒酶启动子驱动的GFP／TRAIL融合基因能在大肠癌细胞中有效表达；TRAIL基因对大肠癌细胞HT-29有明显的抑制生长和促凋亡作用。     

HOXB7基因对卵巢透明细胞癌ES-2细胞系侵袭的影响

目的研究人类同源异型盒基因HOXB7小分子干扰RNA（siRNA）对卵巢透明细胞癌ES-2细胞侵袭的影响。方法采用半定量RT-PCR,Western blot印迹方法分别检测卵巢透明细胞癌细胞株ES-2,卵巢浆液性囊腺癌细胞株SKOV3的HOXB7基因mRNA及蛋白质表达水平。将ES-2细胞分为3组：空白组、阴性对照组（转染阴性质粒pRNAT-neg）、HOXB7 siRNA组（转染干扰质粒pRNAT-hoxb7）。荧光显微镜观察转染效率、RT-PCR、Western blot检测干扰效应。Transwell小室检测3组细胞侵袭、运动能力的变化;明胶酶谱实验检测3组细胞上清中基质金属蛋白酶活性;Western blot检测细胞内基质金属蛋白酶-2（MMP-2）变化。结果RT- PCR、Western blot结果显示：HOXB7在卵巢癌SKOV3,ES-2细胞中均阳性表达。转染质粒pRNAT-hoxb7到ES-2细胞后,HOXB7基因的表达受到高效且特异的抑制（P〈0．01）;细胞侵袭力及趋向运动能力均下降。明胶酶谱、Western blot结果显示HOXB7干扰后,ES-2细胞MMP-2表达下降。结论HOXB7 siRNA可有效抑制卵巢透明细胞癌ES-2细胞HOXB7基因的表达与MMP-2表达,同时可抑制其迁移、侵袭能力,提示HOXB7可能在卵巢癌转移中发挥作用。     

The effect of anastrozole on mRNA expression of oestrogen related gene in MCF-7 breast cancer cells

Objective： To look for additional markers of molecular biology response to anastrozole, a new aromatase inhibitor, on the growth and mRNA expression level of MCF-7 cell. Methods： We investigated the effect of anastrzole on growth and gene expression in the human breast cancer cell line MCF-7 and compared with the most widely used antiestrogen tamoxifen. We chose 4 genes to examine regulation of gene expression of estrogen regulated genes ： PR A, PR B, ErbB-2 and cyclin D1. Results： Compared with the tamoxifen, a statistically significant growth inhibition was observed with anastrozole. The PR A, PR B and cyclin D1 mRNA level in anastrozole treated cells was sigificantly below the level in tamoxifen treated cells （P〈0. 05）. They had agonistic effect on ErbB gene （P〉0. 05）. Conclusion： The third generation of aromatase inhibitors anastrozole exert more inhibit function in some expression of estrogen regulated genes than tomoxifen in MCF-7 cell line.     

野生型K-RAS2基因对人结肠癌细胞生长的抑制作用

目的:研究野生型K-ras2基因对人结肠癌细胞株Caco-2的生长影响作用。方法:将野生型K-ras2基因转染结肠癌细胞株Caco-2并筛选稳定表达的克隆;用四甲基偶氮唑(MTT)法观察细胞的生长情况,用流式细胞仪观察细胞周期及凋亡的情况。结果:野生型K-ras2基因可使结肠癌细胞株Caco-2的生长明显受到抑制,使细胞受阻于G0/G1期。结论:野生型K-ras2基因能有效抑制结肠癌细胞Caco-2的生长。     

E-cadherin基因转染对膀胱癌细胞生长及浸润能力的影响

目的　利用转基因技术 ,观察E cadherin(ECD)对膀胱癌生长和浸润转移能力的影响。方法　将细胞间粘附分子ECD真核表达载体转染具有高浸润转移能力的膀胱癌细胞系Ts3L ,测定细胞的生长曲线、克隆形成能力、体外浸润能力及细胞的周期分布。结果　ECD基因转染后的膀胱癌细胞生长速度明显减慢 ,达 3 5 7%;凋亡细胞比例明显增加 ,超高倍体细胞比例明显减少 ;Ts3L/ECD细胞克隆形成能力显著降低 (P <0 0 1) ;Ts3L/ECD细胞的浸润能力明显低于其母代及对照细胞。结论　ECD对肿瘤的生长和浸润转移都有显著的抑制作用 ,是一个重要的肿瘤生长和浸润转移的抑制因子     

siRNA干扰沉默bFGF基因对肺腺癌A549增殖和凋亡的影响

目的利用小分子RNA干扰沉默碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因的表达,探讨其对肺腺癌A549细胞Oct-4表达、细胞增殖和凋亡的影响。方法将A549细胞分为转染干扰质粒组(干扰质粒组)、转染阴性对照质粒组(阴性对照组)和未转染质粒组(空白对照组)。采用Real-Time PCR检测质粒干扰后A549细胞bFGF基因mRNA表达的变化;Western Blot检测Oct-4蛋白表达的变化;CCK-8比色分析法绘制生长曲线观察细胞增殖能力变化及Annexin-V-PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果 Real-Time PCR结果显示质粒干扰后A549细胞中bFGFmRNA表达下降(P<0.01);Western Blot显示干扰组A549细胞Oct-4蛋白表达下降(P<0.01);生长曲线结果显示干扰质粒组细胞增殖活力下降明显(第2～4天P<0.0 5,第6～7天P<0.01);流式细胞仪检测凋亡结果显示细胞凋亡增加(P<0.0 5)。结论靶向bFGF基因的小分子RNA可以抑制bFGF表达;bFGF基因被抑制后下调Oct-4表达,细胞凋亡增加,增殖能力下降。     

DOC2抑制对宫颈癌SiHa细胞系的生长

目的:探讨卵巢癌缺失2(DOC2)基因对宫颈癌SiHa细胞系生长的抑制作用. 方法: 采用基因转染技术,将含有全长DOC2cDNA的真核重组表达质粒和空载体质粒(pcDNA3.1)转染到人宫颈癌SiHa细胞系(无DOC2基因的表达)中,了解其对细胞增殖能力及细胞周期的影响. 结果: 转染DOC2基因的宫颈癌细胞生长受到抑制(P《0.05),其在软琼脂克隆形成能力明显降低(P《0.05). DOC2有使G1期细胞比例增高、S期细胞比例下降的趋势,但SiHa细胞和SiHa-pcDNA3.1细胞之间无显著差异. 结论: DOC2基因能抑制宫颈癌细胞系的增殖.     

Induction of apoptosis and inhibition of proliferation in Hep-2 by antisense survivin RNA in vitro

Objective.. To study induction of apoptosis and inhibition of proliferation in Hep-2 by antisense survivin RNA. Methods： Antisense survivin RNA expression vector was constructed and then was transfected to human laryngeal carcinoma cell line Hep-2 by lipofectamine. HpEGFP/survivin cells （transfected with the combinant of antisense survivin RNA） were obstained by using G418. The levels of survivin protein before and after transfection were determined by Western-blot. Proliferation activity was measured by MTT assay. The experiment of colony formation in soft agar was carried out for assessing ability of proliferation of Hep-2 cell. Apoptosis was assessed by flow cytometry and acrdine orange（AO）. Results： After antisense survivin RNA plasmids were transfected, the level of survivin protein was inhibited in Hep-2. Compared with control, proliferation of HpEGFP/survivin cells were suppressed significantly. The experiment of colony formation in soft agar showed the ability of colony formation decreased in HpEGFP/survivin cells compared to control （P〈0.05）. Apoptosis rate increased about 1.81-folds compared with control. Conclusion.. The antisense survivin RNA can partly inhibit the level of surviivin protein expression in Hep-2 and can induce apoptosis and inhibit the proliferation of Hep-2 by down-regulating the expression of endogenous survivin in vitro.